顾春瑜；郑磊；王前
为了进一步研究实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)动物模型,采用从新鲜牛脊髓中提取的MBP免疫诱导非敏感品系BALB/c小鼠和C57BL/6小鼠,通过对实验动物的症状、中枢神经系统的病理改变及细胞因子水平变化的检测,较成功地建立了C57BL/6、BALBL/c小鼠的EAE模型,实验方法稳定可靠.
作者：贾怡；陈文捷；李虹；张林；李明远；官鹏；蒋中华；吕梅励；梁伟波；周斌 刊期： 2005年第03期
为了检测HL-60细胞经过全反式维甲酸(ATRA)诱导后基质金属蛋白酶(MMP-9、MMP-2)及金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)表达变化,并探讨其变化的意义.采用瑞氏染色观察细胞形态,WST1实验测定细胞增殖变化,NBT还原实验测定细胞分化状态,RT-PCR方法检测MMP-9、MMP-2、TIMP-1、VEGF的mRNA的表达.结果显示,HL-60细胞经ATRA作用24 h后,随着细胞增殖降低与分化的发生,MMP-9 mRNA表达增加,TIMP-1 mRNA和VEGF表达降低,MMP-2 mRNA未见明显表达.ATRA诱导HL-60细胞分化后MMP-9表达增加,而TIMP-1表达降低,MMP-9不促进HL-60细胞表达VEGF.
作者：王俊伟；张玉昆；唐天华；任海全；张伟；姜国胜 刊期： 2005年第03期
T细胞在胸腺发育过程中,TCR通过VDJC基因重排(rearrangement)和选择(细胞水平选择或克隆选择,cell or clonal selection),而组成了外周多样性的T细胞库.现证实外周的T细胞存在着TCR的第二次重排(编辑/修正,editing/revision)与选择(受体水平或分子水平的选择,receptor or molecular selection),即外周的T细胞能重新开放RAG酶等进行VDJC基因的重新编排,修正原来的TCR或产生全新的TCR,再一次选择成为产生耐受或特异应答的新的T细胞,这种机制在外周T细胞库的扩展、自身免疫病、T细胞的外周耐受、肿瘤和感染、免疫缺陷和移植等免疫应答机制中发挥重要作用.
作者：姚新生；王小宁 刊期： 2005年第03期
为了研究细胞因子和凋亡分子在类风湿性关节炎(RA)发病中的作用,用ELISA法分析了26例RA患者滑膜液和血清中IL-12、IL-10和可溶性FasL(sFasL)的含量.结果表明RA患者滑膜液中IL-12、IL-10含量分别为(419.9±89.2)pg/ml和(187.7±34.5)pg/ml,外周血中这两种细胞因子的含量均较低,分别为(65.3±34.2)pg/ml(IL-12)和(85.0±12.7)pg/ml(IL-10).滑膜液中sFasL的含量为266 pg/ml,明显高于血清含量(36 pg/ml).这一结果提示,RA患者滑膜液中IL-12含量和sFasL增高,这些炎性细胞因子增高可能参与了关节滑膜中的自身反应性T细胞的活化,继而造成免疫损伤.
作者：邱潮林；徐莉敏；谢秋华；费新娣 刊期： 2005年第03期
抗MIP-1α抗体可以阻断P.acnes对DC前体细胞的动员作用.对C57BL/6J(B6)小鼠静脉直接注射MIP-1α,24 h后在B6小鼠外周血中F4/80-B220-CD11c+细胞明显增多,占外周血单个核细胞(PBMC)13.47%±1.4%.新鲜分离的F4/80-B220-CD11c+细胞不具有成熟DC的特征,经过细胞因子GM-CSF、IL-4和mTNF-α体外培养7 d后的F4/80-B220-CD11c+细胞呈现树突状突起并形成细胞团簇,高度表达Ia、CD11c、DEC205、CD80、CD86,中度表达CD40,不表达CD8α、F4/80表面标志,并具有极强的刺激异源性T细胞增殖的能力.总之,研究表明趋化性细胞因子MIP-1α参与调节DC前体细胞的动员,并且注射MIP-1α可以直接迅速动员F4/80-B220-CD11c+DC前体细胞进入小鼠外周血.实验首次提出了用趋化性细胞因子MIP-1α动员DC前体细胞进人外周血的思路和实践,为体外获取大量功能正常的DC开辟了新的便捷途径.
作者：吴雨岗；汪良；丘凌；何宋兵；杨桂林；万兵；张雁云 刊期： 2005年第03期
人类免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的免疫病理机制中,细胞因子的作用及细胞因子网络失衡是其中的一个重要方面.为研究HIV感染者血清细胞因子水平的异常变化,进一步探讨有针对性的艾滋病(AIDS)治疗方案,对30例HIV感染者血清TNF-α、IL-2、IL-6和IL-10水平进行了测定.
作者：杨兰泽；高静；付朝宏；谢顺清 刊期： 2005年第03期
为探讨雌二醇(E2)对正常和致敏淋巴细胞活化的调节作用,并分析了E2对ConA活化的小鼠正常和致敏淋巴细胞增值、抗体产生及TGF-β生成的影响.结果显示生理水平尤其是相当于小鼠动情间期水平的E2对致敏脾淋巴细胞增殖具有明显促进作用;对初始脾淋巴细胞增殖没有影响.较高水平E2诱导活化的脾细胞生成TGF-β,促进免疫鼠脾细胞生成特异性抗体;较低水平E2抑制特异性抗体生成,且抑制程度与脾细胞活化状态相关.
作者：李霞；王世婷；侯芸；刘奔；王金龙 刊期： 2005年第03期
探讨脑梗塞患者血液中GMP-140、sICMA-1及VEGF水平变化关系.采用酶联免疫吸附试验检测80例脑梗塞患者及30例正常对照的血液水平变化的相关性.结果发现脑梗塞组GMP-140 (36.7±5.9)ng/ml,明显高于正常对照组(17.2±3.1)ng/ml(P＜0.05);脑梗塞组sICAM水平为(670.2±206.8)ng/ml,明显高于正常对照组(290±80.5)ng/ml(P＜0.05);脑梗塞组VEGF水平为(317.3±105.2)pg/ml,明显高于正常对照组(81.6±10.6)pg/ml(P＜0.05).此三个变量与正常对照比较均有明显的相关性.据此上述三项水平的测定有助于评价脑梗塞患者的病理状态及转归.
作者：黄红宇；魏云玉；徐默玲；许静 刊期： 2005年第03期
通过研究卵巢癌及良性卵巢肿瘤患者外周血NK细胞表面受体的表达情况及NK活性的变化,分析探讨宿主NK细胞受体与肿瘤免疫逃逸的关系及其临床价值.分离受检者外周血单个核细胞,应用MTT法检测NK细胞的细胞毒活性,流式细胞术检测NK细胞受体NKG2D和NKG2A的表达,并结合临床病理因素作比较分析.结果显示,与良性卵巢肿瘤组和正常组相比,卵巢癌患者外周血NK细胞的细胞毒活性降低,NK细胞表面NKG2D的表达水平降低,而NKG2A的表达水平明显升高,其变化与卵巢癌的病情进展有关.此结果表明,卵巢癌患者机体NK细胞杀伤活性下降,NKG2D与NKG2A二者之间的平衡表达可能对NK细胞的功能状态起着重要的调节作用.
作者：刘敏；孔北华；曲迅 刊期： 2005年第03期
探索RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术在抑制血管内皮细胞激活中的应用前景.利用阳离子脂质体LipofectamineTM000作为转染试剂将化学合成的小鼠NF-κB p65的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染人小鼠EOMA细胞,RT-PCR测定细胞内NF-κB p65 mRNA表达,Westem blot检测细胞内NF-κB p65蛋白水平.同时观察siRNA对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的NF-κB激活的抑制作用.结果显示:在转染siRNA后的第24小时,细胞内NF-κB p65mRNA水平降低,蛋白表达量明显减少,而在第48小时、72小时细胞内NF-κB p65蛋白已经无法测出;在TNF-α刺激后,转染siRNA的细胞组内NF-κB p65的表达也明显受到抑制.说明RNAi技术可以抑制NF-κB p65的表达,为进一步研究血管内皮细胞的保护提供了有效的方法.
作者：周晓彤；沈振亚；于曙东；余云生；叶文学；黄浩岳；焦鹏；滕小梅 刊期： 2005年第03期
白介素18(IL-18)具有强烈的诱导IFN-γ的能力,能促进NK细胞的活化和杀伤能力以及CTL的细胞毒活性.现已研究IL-18水平与肿瘤临床的关系,并将IL-18应用于肿瘤的免疫治疗.在许多小鼠的肿瘤模型中,IL-18表现出显著的抑制肿瘤和治疗效应,并由此探索出多种IL-18应用方式.文章着重介绍了IL-18的三种主要应用方式、效果和IL-18可能的抗肿瘤机制.
作者：杨永杰；葛锡锐 刊期： 2005年第03期
B细胞激活因子BAFF是新近发现的TNF超家族成员,因其在B细胞发育及自身免疫病中起注.BAFF对外周B细胞发育及功能十分重要.BAFF信号的缺失导致外周B细胞大量减少,B细胞发育在T1 B向T2 B转换阶段被阻断.BAFF介导TD及TI抗原诱导的抗体应答.BAFF转基因小鼠发生系统性红斑狼疮样表型.在天然狼疮小鼠及部分红斑狼疮患者血清中可溶性BAFF蛋白水平增高.老年的BAFF转基因小鼠还出现干燥综合征样表型.这些研究结果提示,BAFF是参与某些自身免疫病发病的重要致病因子.
作者：居忠亮；臧敬五 刊期： 2005年第03期
柘树[Cudrania tricuspidata(Carr)Bur]属桑科植物,在<本草纲目>等资料中记载可治疗关节疼痛、黄疸等.研究了提取的三种柘树根多糖直接及协同有丝分裂原ConA或LPS对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响和三种多糖对腹腔巨噬细胞(MФ)吞噬功能的影响.
作者：董国霞；陈靠山；石磊；宋锦平；李莹辉；徐誉泰 刊期： 2005年第03期
应用RT-PCR法,从由LPS刺激的人的DC细胞中抽提mRNA,扩增获得编码人B7.2分子的cDNA,并将其克隆到PMD18-T载体,经PCR、酶切及测序进行鉴定确证,进而构建PEGZ-term-B7.2的真核表达载体.脂质体法共转染包装细胞293T,用含有完整病毒颗粒的293T细胞的上清感染L929细胞,经Zeocin筛选,建立稳定表达人B7.2分子的L929基因转染细胞株.并证实了B7.2基因转染细胞能有效地促进T细胞的体外增殖和促进IL-10的分泌.
作者：陈洁；邱玉华；王勤；孙中文；陶怡；毛一香；陈永井；张学光 刊期： 2005年第03期
分析中国新疆维吾尔族、云南彝族健康人群的KIR基因多态性及单倍型特点.采用序列特异性引物PCR方法(PCR-sequence specific primer,PCR-SSP)对维吾尔族、彝族人群基因多态性进行低分辨率检测和单倍型分析.维吾尔族中共检出15种基因型,以AH(5,2)型常见,频率为22.7%,其次为AF(1,2)和M(2,8),频率分别为13.7%,9.09%.在彝族中共检出19种基因型,以AJ(2,2)型常见,频率为33.3%,其次为AF(1,2),频率为17.5%.此外,在维吾尔族、彝族中共发现8种新基因型,提示中国少数民族有着自己独特的KIR基因分布频率、单倍型频率和基因型频率.
作者：池永斌；张磊；杨珏琴；姚芳娟；许玲娣；范丽安 刊期： 2005年第03期
为了研究SARS-CoV病毒N蛋白基因的原核表达及其免疫原性,为进一步的研究奠定基础,我们以PCR方法在全病毒基因组文库中获得全长N基因,分别克隆到pcDNA3和pET32a载体中获得重组质粒pcDNA3-N和pET32a-N.以亲和层析方法分离纯化pET32a-N转化的BL21细菌裂解液中的重组N融合蛋白,并以ELISA方法检测pcDNA3-N质粒基因免疫小鼠诱导后血清中的特异性抗体.结果pET32a-N转化BL21细菌后可检测到重组SARS-CoV N融合蛋白表达并分离纯化,pcDNA3-N基因免疫能够诱导产生N特异的体液免疫应答.研究的结果表明,SARS-CoV N蛋白可以在原核细胞中有效表达并有良好免疫原性,可以为进一步的功能研究和血清学诊断提供条件.
作者：高海峰；熊凌云；汪晓华；储以微；王缨；熊思东 刊期： 2005年第03期
为探索并比较人类外周血单个核细胞(PBMC)IL-23、IL-12亚基表达的诱导剂和调控模式,分离正常人PBMC、单核细胞、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群,检测各种细菌、细菌产物、细胞因子、丝裂原对上述细胞IL-23和IL-12亚基表达的诱导作用,半定量RT-PCR方法测定各亚基的mRNA表达水平.结果显示,未经刺激的PBMC可表达IL-23 p19和IL-12 p35mRNA;脂多糖(LPS)和金黄色葡萄球菌(SAC)可上调PBMC IL-23和IL-12各亚基的表达;γ干扰素(IFN-γ)预处理后予LPS刺激可使单核细胞IL-23 p19、IL-12 p35和IL-12p40表达高于LPS直接作用的表达水平.植物血凝素(PHA)可促进CD4+、CD8+T细胞IL-23 p19表达,而对IL-12 p35、p40表达无调节作用.本文结果提示,IL-23的两个亚基的表达都处于紧密调控之下,易受各类诱导剂调节;人类外周血细胞IL-23 p19的表达和调控模式与IL-12 p35既有相似之处又存在不同点.
作者：马小彤；葛薇；张秀军；徐玢；林永敏；李戈；宋玉华；吴克复 刊期： 2005年第03期
利用RT-PCR技术,从稳定分泌抗人Lipocalin型前列腺素D合酶(Lipocalin-type prostaglandin D synthase,L-PGDS)单克隆抗体的鼠杂交瘤细胞中获得抗体可变区基因;通过一柔性连接短肽[(Gly)4Ser]3,SOE PCR法将此重、轻链可变区拼接成完整的抗人L-PGDS单链抗体基因,并装入表达载体pET-28a(+),在BL21宿主菌中进行表达.经SDS-PAGE检测显示,在低剂量0.02 mmol/LIPTG诱导和较低温度25℃或28℃条件下培养,重组菌表达了一定量的可溶性单链抗体.后经Ni-NTA亲和层析柱纯化,得率为2 mg/100ml,纯度达92%;双夹心ELISA和免疫荧光竞争抑制实验证实,纯化后的单链抗体具有较好的亲和力和特异性.
作者：朱国华；陈德宇；黄宇烽；宛传丹；许晓风 刊期： 2005年第03期
采用RNA干涉(RNA interference,RNAi)技术将合成的两段有回文结构的c-Jun互补cDNA序列插人PAVU6 siRNA表达载体,构建PAVU6-cJun siRNA干涉质粒,电转化U937细胞,观察沉默c-Jun的基因表达对GR蛋白表达和转录激活能力的影响,探讨c-Jun与GR功能的相互关系.PAVU6-cJun siRNA转化U937细胞后GR的表达和转录激活活性均有所增强.提示抑制U937细胞c-Jun蛋白表达,在一定程度上可促进GR表达及增强其转录激活功能.
作者：程晓刚；粟永萍；罗成基；刘晓宏 刊期： 2005年第03期
本实验旨在研究熊果酸对正常人外周血淋巴细胞Th1型细胞因子的影响,并对机制作初步探讨.采用半定量RT-PCR和夹心法ELISA分别检测不同浓度熊果酸对PHA和PMA活化的外周血淋巴细胞的Th1型细胞因子(IFN-γ和IL-2)mRNA的表达及分泌的影响.结果显示Th1型细胞因子mRNA和蛋白的表达水平均随熊果酸浓度的增加而下降(P＜0.05),表明熊果酸可能对IFN-γ和IL-2在转录和(或)转录后水平发挥抑制作用,有可能用于自身免疫性疾病和超敏反应性疾病的防治.而熊果酸和地塞米松分子结构相似,可能通过类似机制下调糖皮质激素受体发挥作用.
作者：董兴高；邓涛；谢珞琨；陈会敏；胡志芳；江华；谭锦泉；张秋萍 刊期： 2005年第03期
现代免疫学杂志
主管:上海市教育委员会
主办：上海市免疫学研究所,上海市免疫学会
