周玲玲;魏伟;司峻峰;沈玉先;徐叔云
原发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenicpurpura,ITP)是因免疫机制使血小板破坏增多而致的临床常见出血性疾病,又称免疫性血小板减少性紫癜.本文以血小板膜表面纤维蛋白原受体(FIB-R)、P-选择素(CD62P)的表达反映血小板的活化状态,分析比较血小板数量与血小板活化状态的关系,探讨血小板活化状态的改变在ITP病理生理机制中的意义.
作者:杨晓静;王传新;王谦 刊期: 2004年第04期
为获得纯化的重组SARS病毒S1蛋白C端,研究其刺激机体产生针对SARS病毒免疫应答的规律和机制,将编码SARS病毒S1蛋白C端311个氨基酸残基的基因克隆,并在原核表达系统中表达,纯化获得了的重组蛋白.利用SARS患者恢复期的血清,对纯化的重组S1蛋白进行血清学分析.结果表明,本研究中克隆表达的重组蛋白序列与公布的SARS病毒S1蛋白C端的序列相同,其编码的重组蛋白相对分子质量约为59 000 Mr.SARS患者恢复期的血清均与重组蛋白反应,在59 000 Mr处形成特异性的反应条带,而来自SARS流行前的正常人对照血清则不能与重组蛋白反应.在本研究中获得的重组蛋白可以为研究SARS病毒识别宿主细胞受体的过程及其机制提供条件.
作者:王月丹;李燕;杨小昂;董学员;冯珍如;Sin Wan Yee;徐国宾;谢雍;陈慰峰 刊期: 2004年第04期
CpG寡核苷酸(CpG oligodeoxynucleotides,CpG ODN)的免疫活性具有多态性,表现为种属特异性、细胞特异性以及不同类型的CpG ODN之间的相互拮抗性.对CpG ODN免疫活性多态性进行分析有助于如下实验研究:①根据细胞种类的不同,选择合适的CpG ODN及检测指标,以获得理想的实验结果;②选择适当的CpG ODN以达到治疗目的.
作者:王良喜;周红 刊期: 2004年第04期
为观察异种胸腺修饰对大鼠抗豚鼠天然抗体产生的影响,将供体豚鼠和受体SD大鼠随机分成对照组(a组)、全身照射组(b组)、照射+胸腺注射组(c组),a组大鼠腹腔内注射经处理的豚鼠脾淋巴细胞(5×106个),7 d后流式细胞仪法检测抗豚鼠IgM及IgG类天然抗体水平的变化,b、c组在腹腔注射异种抗原前17 d接受全身照射,c组大鼠另在全身照射后3 d接受胸腺内豚鼠脾淋巴细胞注射.结果表明:a组和b组中,腹腔注射后两类天然抗体的水平均明显上升(P<0.01),c组中,腹腔注射后IgM类的水平亦明显上升(P<0.01),而IgG类上升受抑.提示异种胸腺修饰能抑制IgG类天然抗体的生成,但对IgM类天然抗体的产生无明显影响.
作者:沈振亚;倪斌;何建明;张治;瞿冀琛;余云生;叶文学;焦鹏;孟自力;滕小梅 刊期: 2004年第04期
过敏原表位的确认和定位是开展过敏症免疫干预治疗的基础,噬菌体展示技术已广泛应用于过敏原的研究及模拟表位肽筛选.近年来,利用这一技术已确认多种主要过敏原模拟表位,包括桦树花粉过敏原Bet v1的模拟位、尘螨过敏原Derp1的IgE构象模拟位、牛奶过敏原β-乳球蛋白(BLG)的线性表位及一种泛过敏原肌动抑制蛋白(profilin)的环9肽模拟位等.噬菌体展示模拟位的结构与功能分析显示一定的应用前景,将为过敏症诊断和免疫治疗提供新途径.
作者:黄峙;杨红宇;向军俭 刊期: 2004年第04期
研究CD4+CD25+调节性T细胞在重症肌无力(MG)发病中的作用.本文采用三色流式细胞术对29例MG患者和23例健康对照者外周血中CD4+CD25+T细胞(CD3+CD4+CD25+)的百分率进行测定.结果显示病情未能很好控制的MG患者外周血CD4+CD25+T细胞比率略低于健康对照组(分别为3.79%±1.40%、4.53%±0.96%,P=0.12),病情稳定或缓解的MC患者CD4+CD25+T细胞比率(8.45%±1.96%)显著高于健康对照组(P=0.0001);胸腺切除的MC患者CD4+CD25+T细胞比率(8.44%±2.39%)显著高于非胸腺切除的MG患者(5.88%±2.89%,P=0.038)和健康对照组(4.53%±0.96%,P=0.003).提示MG患者外周血中存在异常比例的CD4+CD25+调节性T细胞,可能参与疾病的发生与发展.
作者:孙怡;乔健;吕传真;赵重波;朱新梅 刊期: 2004年第04期
构建腺病毒相关病毒增强型mIL-10质粒,并在心肌细胞内进行表达.利用分子克隆技术,将腺病毒相关病毒(AAV)中的末端重复序列(ITR)插在pORF5-mIL-10质粒启动子的上游,构建pORF-AAV-mIL-10质粒.在阳离子脂质体Lipofectin介导下,pORF5-mIL-10和pORF-AAV-mIL-10分别转染次代培养心肌细胞,TRIzol一步法提取总RNA,RT-PCR检测mIL-10的mRNA;ELISA检测培养细胞上清中mIL-10的表达.结果是用双酶切证实成功构建质粒,分别在转染24 h、48 h、72 h、96h、120 h后,用RT-PCR在心肌细胞中检测到相应的目的条带,ELISA检测各组mIL-10的表达量.证实在阳离子脂质体Lipo-fectin介导下,pORF-AAV-mlL-10能在一定时间内稳定的增加mIL-10在心肌细胞内的表达.
作者:何志锋;倪一鸣;邹煜;冯强 刊期: 2004年第04期
为了观察褪黑素(MT)对CJ-S131所致的SLE样小鼠改变的影响并探讨其作用机制.采用空肠弯曲菌CJ-S131和CFA混合免疫动物,诱导SLE样小鼠改变.结果表明MT 0.01、0.10、1.0 mg/kg/d×28 d,ig能部分或完全拮抗血清抗ssDNA和组蛋白IgG型自身抗体水平的升高,抑制ConA及LPS诱导的淋巴细胞增殖反应的增强,降低动物尿蛋白水平,减轻肾组织病变程度.提示一定剂量的MT对SLE样小鼠改变具有一定的保护作用.
作者:周玲玲;魏伟;司峻峰;沈玉先;徐叔云 刊期: 2004年第04期
研究Toll样受体4(TLR4)在MRL/MpJ小鼠脾细胞的表达状况和革兰阴性菌脂多糖(LPS)刺激后TLR4的表达变化以及对TNF-α产生的影响.MRL/MpJ小鼠经腹腔注射LPS后在不同时间取脾细胞,用三色荧光标记流式细胞仪技术检测小鼠脾T细胞TLR4的表达情况,并与BALB/c小鼠作对照;通过RT-PCR观察LPS刺激前后脾T细胞TNF-α mRNA的表达变化.结果表明TLR4在MRL/MpJ小鼠CD3+CD4+T细胞和CD3+CD8+T细胞中均有表达;但TLR4+/CD4+细胞表达仅BALB/c小鼠的33%,在受LPS刺激后,MRL/MpJ鼠CD4+T细胞TLR4升高时间较BALB/c小鼠延迟;CD8+T细胞TLR4在LPS刺激前后无明显变化;脾细胞TNF-α mRNA水平升高亦延迟.通过对干燥综合征样自身免疫病鼠模型MRL/MpJ小鼠脾T细胞TLR4的表达及功能研究,将有助于认识天然免疫和获得性免疫间的联系和感染在自身免疫病发病中的作用.
作者:沈小雁;薛峰;陈晓鸿;郑捷 刊期: 2004年第04期
DcR3是近新发现的能与LIGHT、FasL竞争性结合并抑制其活性的可溶性的TNF家族成员之一,它在某些肿瘤、自身免疫病等疾病中高度表达.对DcR3的基因表达、调节机制以及其与某些疾病关系的探讨,必将会为疾病的进一步深入研究提供一条新的思路.
作者:孙艳;兰小鹏 刊期: 2004年第04期
为探讨S-100b蛋白与多发性硬化(MS)临床的关系,采用ELISA方法检测60例急性活动期MS,26例对照组血清及脑脊液中S-100b含量,并进行比较分析.结果发现,血清及脑脊液中S-100b水平,急性活动期MS高于对照组(P均<0.01).MS组血清和脑脊液中S-100b含量异常增高者分别为20%和96.6%;脑脊液S-100b水平MS急性活动7 d内高于急性活动7 d以上者(P<0.05),两者又均高于对照组(P均<0.01);血清S-100b水平MS急性活动7 d内高于急性活动7 d以上者及对照组(P均<0.01),急性活动7 d后与对照组比较无差异(P>0.05);脑脊液S-100b水平不同病残程度之间比较无显著性差异(P>0.05),血清S-100b水平在中、重度病残者高于轻度病残者(P均<0.01),重度病残者虽高于中度病残者,但差异无显著性意义(P>0.05).提示S-100b蛋白可作为判断MS疾病活动性及病情严重程度的重要生化标志物之一.
作者:夏君慧;乔健 刊期: 2004年第04期
为寻找与异种移植细胞性排斥反应相关的新基因,在抑制消减杂交(SSH)基础上,对一个与人氧化应激反应1(OSR1)基因同源的猪内皮细胞上调表达基因片段CS3作进一步研究.半定量RT-PCR结果证实,在人PBMC作用后,该基因表达的确上调.应用快速cDNA末端扩增(RACE)方法,获得了猪OSR1(pOSR1)的全长cDNA序列.pOSR1 cDNA序列全长4 333个碱基,开读框架长1 590个碱基,编码529个氨基酸.与人OSR1(hOSR1)相比,编码区核酸一致性为92.8%,氨基酸一致性为95,5%.GenBank登录号为AY271356.其功能研究正在进行中.
作者:胡为民;李幼平;卢晓风;廖顺尧;曾令宇;李胜富;程惊秋 刊期: 2004年第04期
吲哚胺2,3双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)是肝脏以外唯一可催化色氨酸沿犬尿酸途径分解代谢的限速酶,在哺乳动物的组织与细胞,尤其是淋巴组织和胎盘中广泛表达.它通过降解局部组织中的色氨酸,在诱发宿主免疫防御、抑制T细胞免疫和抗肿瘤免疫、诱导母胎免疫耐受和移植物免疫耐受中均发挥重要的代谢性免疫调节作用.
作者:朱晓勇;李大金 刊期: 2004年第04期
支气管哮喘是一种气道慢性炎症性疾病,其发病机制之一是在致病原的作用下,Th1/Th2失衡,其分泌的细胞因子激活B淋巴细胞,合成和分泌大量的IgE.而CD23为IgE低亲合力受体,是B淋巴细胞激活的表面标志.故研究哮喘患者CD23的表达具有意义.
作者:张峻梅;郭华;唐方;李玲 刊期: 2004年第04期
为了解外源性给予新生雌性BALB/c小鼠已烯雌酚(diethylstilbestrol,DES)对小鼠胸腺生长发育的影响,并对其作用机制进行初步探讨.给新生雌性BALB/c小鼠,在生后24 h内颈背部皮下注射DES,每隔24 h注射一次,共连续注射5次.分别在生后7 d、14 d、21 d、35 d和49 d将小鼠处死,称体重和胸腺重量,并计算胸腺系数重量;在生后7 d、14 d和42 d用流式细胞仪对小鼠胸腺细胞的细胞周期进行分析.结果是从生后7 d到35 d,对照组小鼠的胸腺系数重量显著大于DES组,而在生后49 d,DES组胸腺系数重量则显著大于对照组;在生后7 d,对照组小鼠胸腺细胞的S期细胞百分比显著大于DES组,而在生后14 d和42 d,对照组和DES组无显著性差异.表明外源性给予新生雌性BALB/c小鼠已烯雌酚对小鼠胸腺的生长发育具有持续性影响,这种影响与DES抑制了胸腺细胞的增殖有关.
作者:马强;卫兰;张京 刊期: 2004年第04期
检测HLA-Cw在广东汉族人群中的基因频率,与其他人群进行比较,分析该人群HLA-Cw等位基因多态性及其特点.骨髓移植供者158例,抗凝血提取DNA,半量全自动PCR-RSSO分型检测Cw.结果显示,广东汉族人群HLA-Cw基因频率分布由高至低依次为:Cw*03(0.2580 > Cw*07(0.1887) > Cw*01(0.1732)>Cw*08(0.1070)>Cw*14(0.0654 )> Cw*04(0.0587 )> Cw*15(0.0453 )> Cw*12(0.0387 )> Cw*06(0.0322)> Cw*05(0.0127 )> Cw*16(0.0032).Hardy-Weinberg平衡检验x2=60.35,υ=54,P>0.1.表明广东汉族群体Cw*03、07、01、08出现频率较高,该人群Cw等位基因处于遗传平衡状态,具有较为丰富的多态性及特点.
作者:马红京;肖露露;郭坤元;尹晓林;叶欣 刊期: 2004年第04期
作者: 刊期: 2004年第04期
隐窝素(cryptdins)是由小肠上皮细胞合成、分泌的一组小分子抗菌肽(3~4 kD),在宿主与微生物相互作用的大区域-胃肠道中.隐窝素具有广谱、高效的抗微生物活性,为小肠对抗微生物感染提供第一线的先天性免疫防御[1].
作者:俞瑜;周联;王培训 刊期: 2004年第04期
为了构建猪IL-10真核表达载体并在猪软骨细胞中表达.将目的基因酶切连入真核表达载体pcDNA3.1,以FuGENE 6介导转入猪软骨细胞中表达,RT-PCR检测IL-10在软骨细胞中mRNA表达水平,ELISA检测细胞培养上清中IL-10蛋白含量.观察其对效应细胞PBMC分泌IFN-γ和软骨细胞MHC Ⅱ类分子表达的影响.结果显示,成功构建了猪IL-10真核表达载体,并转入软骨细胞,检测到细胞内IL-10 mRNA转录,细胞培养24、48和72 h后,经ELISA检测上清中IL-10蛋白含量分别为1 961.9、2 925.9和2 953.4 pg/ml,能明显抑制经PHA刺激的PBMC分泌IFN-γ(抑制率达68.1%)和软骨细胞MHC Ⅱ类分子的表达.猪IL-10真核表达载体的成功构建并在软骨细胞中表达,发挥其免疫调节功能,为研究IL-10诱导软骨细胞体内同种异体移植耐受奠定了基础.
作者:王树军;赵阳;王颖;张惠珍;葛海良 刊期: 2004年第04期
为观察rhIL-11联合rhG-CSF动员小鼠外周造血干细胞时,外周血T细胞亚群的变化,使用rhIL-11联合rhG-CSF动员C57BL/6小鼠外周造血干细胞,观察用药不同时间小鼠外周血白细胞变化,同时通过流式细胞仪测定外周血T细胞亚群的变化.结果发现,小鼠注射rhIL-11后,外周血WBC明显升高(P=0.003);单独注射rhG-CSF或联用rhIL-11后,外周血WBC于第5天达峰值,分别由用药前的(7.53±1.65)×109/L、(7.27±1.48)×109/L上升至(27.12±1.84)×109/L、(28.98±3.13)× 109/L,均显著高于对照组(P值均为0.001),而rhC-CSF组与联合组之间无显著性差异(P>0.05).CD3+细胞比例在用药组均高于正常对照组(P值均<0.05),rhIL-11组CD3+细胞及CD4+细胞比例逐渐增高,于动员的第5天达峰值(P值均为0.001),CD8+细胞的比例没有明显变化(P>0.05);在rhG-CSF组CD3+细胞也有明显增高,并于动员第五天达峰值(P=0.001),CD4+细胞的比例没有明显变化(P值均>0.05),但CD8+细胞的比例明显升高(P=0.001);在联合组中CD3+、CD4+、CD8+细胞的比例变化均有明显升高.结果证明,rhIL-11联合rhG-CSF能明显提高外周血WBC,增加CD3+细胞比例,同时rhIL-11引起CD3+CD4+细胞比例明显增加,而rhG-CSF明显提高了CD3+CD8+细胞比例.两种细胞因子联合使用对T细胞的数量和功能均有一定的影响.
作者:蒋祖军;孟凡义 刊期: 2004年第04期