学术投稿

DHA-1型质粒AmpC酶临床回顾研究

李卿;蒋燕群;李轶;汤瑾;王坚镪;庄亦辉

关键词:质粒头孢菌素β-内酰胺酶, DHA-1, 临床回顾研究
摘要:目的 调查我院分离DHA群质粒头孢菌素β-内酰胺酶(AmpC酶)菌株感染患者的临床资料,分析其耐药性和分子流行病学.方法 收集2003年至2005年间34株产DHA型质粒AmpC酶的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌感染者的临床资料,采用多重聚合酶链反应(PCR)扩增DHA结构基因,用随机扩增DNA多态性(RAPD)分析同源性,测定其对药物的敏感性.结果 高龄、使用免疫抑制剂、外伤手术史等均为风险因素;三代头孢治疗失败率为86.9%(头孢他啶88.9%,头孢噻肟60%和头孢哌酮100%);复方制剂(β-内酰胺类/β-内酰胺酶抑制剂)为71.4%;碳氧酶烯类为10%;喹诺酮类为70%.DHA群测序确定为DHA-1型;RAPD显示科室内及科室间存在克隆传播.结论 我院DHA-1型质粒AmpC酶菌株感染患者抗生素治疗失败率较高;不同科室分离的菌株存在一定的同源性.
检验医学杂志相关文献
  • 血脂测定在非酒精性肝脂肪变性诊断中的应用

    目的 探讨血清脂质测定在非酒精性肝脏脂肪变性(NAFLD)诊断中的应用价值.方法 测定169例NAFLD患者和123名健康者对照血清脂质、载脂蛋白水平,用受试者工作特征(ROC)曲线分析各参数的诊断价值.结果 NAFLD患者的三酰甘油(TG)、载脂蛋白C3(apo C3)、载脂蛋白E(apo E)、apo C3/apo E、非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-C)及胆碱酯酶(ChE)明显高于对照组(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白A-Ⅰ(apo A-Ⅰ)明显低于对照组(P<0.05),ChE、apo C3、apo C3/apo E及apo C3/apo E+ChE+HDL-CROC曲线下的面积分别为0.603、0.654、0.743和0.760.结论 apo C3/apo E比值及其与ChE和HDL-C联合检测可提高对NAFLD的诊断效率.

    作者:白萍;陆元善;仇梅琼 刊期: 2008年第03期

  • 应用新鲜全血对多台血液分析仪比对的临床应用

    目的 应用正常人新鲜全血对多台血液分析仪进行比对,使血液分析仪各参数之间具有可比性.方法 用Sysmex XT-1800i血液分析仪作为规范操作检测系统,对正常人新鲜全血进行定值,分别对2台SysmexKX-21和1台KX-21N血液分析仪进行比对.结果 3台血液分析仪比对前偏倚超过允许范围的参数占53.3%(8/15),比对后偏倚超过允许范围的参数占13.3%(2/15).结论 比对后各参数之间可比性增加,同时提高了检测结果的一致性.

    作者:高原;郑岚;杨剑敏;倪桂英;张泓 刊期: 2008年第03期

  • 采用原位杂交法检测移植患者外周血白细胞中HCMV DNA

    目的 建立DNA原位杂交方法(ISH)检测移植患者外周血白细胞中的人巨细胞病毒(HCMV),并与HCMV-pp65抗原血症(免疫组织化学法,IHC)结果比较.方法 选取本院肾移植患者标本60例,移植前后采集外周血标本250例,分离获得白细胞经涂片固定后分别采用ISH和IHC检测HCMV.结果 ISH检测阳性率高于IHC,ISH检测的HCMV DNA阳性细胞见于外周血单个核细胞,IHC检测的HCMV抗原阳性细胞主要见于中性粒细胞,ISH检出的阳性细胞数明显高于IHC,且显然早于IHC.结论 原位杂交检测HCMV DNA,敏感性高、特异性强,有利于早期、快速监测HCMV的激活.

    作者:张玥;钱春艳;叶廷军;季育华 刊期: 2008年第03期

  • DHA-1型质粒AmpC酶临床回顾研究

    目的 调查我院分离DHA群质粒头孢菌素β-内酰胺酶(AmpC酶)菌株感染患者的临床资料,分析其耐药性和分子流行病学.方法 收集2003年至2005年间34株产DHA型质粒AmpC酶的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌感染者的临床资料,采用多重聚合酶链反应(PCR)扩增DHA结构基因,用随机扩增DNA多态性(RAPD)分析同源性,测定其对药物的敏感性.结果 高龄、使用免疫抑制剂、外伤手术史等均为风险因素;三代头孢治疗失败率为86.9%(头孢他啶88.9%,头孢噻肟60%和头孢哌酮100%);复方制剂(β-内酰胺类/β-内酰胺酶抑制剂)为71.4%;碳氧酶烯类为10%;喹诺酮类为70%.DHA群测序确定为DHA-1型;RAPD显示科室内及科室间存在克隆传播.结论 我院DHA-1型质粒AmpC酶菌株感染患者抗生素治疗失败率较高;不同科室分离的菌株存在一定的同源性.

    作者:李卿;蒋燕群;李轶;汤瑾;王坚镪;庄亦辉 刊期: 2008年第03期

  • 非发酵菌致泌尿系统感染的菌种分布及耐药性

    目的 探讨泌尿系统感染中非发酵菌的种类及耐药性.方法 按标准要求留取清洁中段尿,每份标本做定量细菌培养和菌落计数;药敏试验采用纸片扩散法.结果 在泌尿系统感染中,非发酵菌感染比例较高,占19.8%;构成比中前3位非发酵菌依次是铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和栖稻黄色单胞菌;非发酵菌对不同抗生素表现为多重耐药.结论 监测泌尿系统感染中非发酵菌种类及耐药性变化对指导临床合理应用抗生素十分有益.

    作者:孙阳;张友玲;丁莉莉 刊期: 2008年第03期

  • 国产抗环瓜氨酸肽抗体试剂盒的应用评估

    目的 评估自行研制的抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体试剂盒的临床应用价值.方法 评估自行研制的抗CCP抗体试剂盒的精密度、稳定性、诊断敏感性、特异性及其与国外同类试剂盒的相关性;检测455例老年人的抗CCP抗体,以探讨抗CCP抗体在老年人中的应用价值.结果 自行研制的抗CCP抗体试剂盒的批内、批间变异系数分别为6.7%~9.1%、6.5%~9.4%;在4℃可贮存半年以上;对类风湿性关节炎(RA)的诊断敏感性和特异性分别为72.0%和98.7%;与国外同类试剂的一致性达90.0%.成年组与老年组抗CCP抗体的标本吸光度(A)值/弱阳性对照A值(S/CO值)分别是0.51±0.10、0.64±0.32(P<0.05).结论 自行研制的抗CCP抗体试剂盒重复性好,稳定性高,敏感性和特异性较高,能满足临床诊断和研究的要求.

    作者:刘华;王蕾;高锋 刊期: 2008年第03期

  • 血浆B型钠尿肽和心钠素在小儿慢性充血性心力衰竭诊断中的价值

    目的 探讨血浆B型钠尿肽(BNP)、心钠素(ANP)在小儿慢性充血性心力衰竭(cHF)中的诊断价值.方法 分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和放射免疫法检测41例CHF患儿及35名健康体检儿童的血浆BNP和ANP浓度.结果 CHF组的血浆BNP、ANP水平均较对照组显著升高(P<0.01).纽约心脏学会(NY-HA)Ⅲ、Ⅳ级的cHF患儿血浆BNP、ANP水平显著高于NYHAⅡ级患儿(P<0.05),NYHAⅣ级患儿的BNP也显著高于Ⅲ级患儿(P<0.05).CHF组血浆BNP、ANP均与左心室舒张末期内径(LVEDD)呈正相关,与左心室射血分数(LVEF)呈负相关,且血浆BNP与LVEDD、LVEF的相关性显著优于ANP(P<0.01).结论 CHF患儿的血浆BNP及ANP水平升高显著,且与心力衰竭程度关系密切,可以作为临床诊断和心力衰竭分级的一个有效指标.

    作者:章英宏 刊期: 2008年第03期

  • 老年患者泌尿系统感染致病菌及其耐药性分析

    目的 调查老年患者泌尿系统感染致病菌及其耐药性,为临床合理使用抗生素提供依据.方法 对428例老年患者中段尿标本进行细菌培养及耐药性监测.结果 共检测出病原菌435株,其中革兰阴性杆菌占61.8%,革兰阳性球菌占25.1%,真菌占10.3%;老年女性革兰阴性杆菌的感染率显著高于男性(P<0.01);革兰阴性及阳性细菌中分别以大肠埃希菌(39.1%)和肠球菌属(16.3%)多.产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌对亚胺培南、哌拉西林-他唑巴坦、呋喃妥因、氨卞西林-舒巴坦、阿米卡星的耐药率低;肠球菌属细菌对万古霉素、利奈唑烷均100%敏感;葡萄球菌属细菌耐甲氧西林株达90.6%.结论 老年患者泌尿系统感染以革兰阴性菌为优势菌株,细菌耐药性监测对指导临床合理用药具有重要意义.

    作者:金立钢;方芳;陈允硕;何银华;缪亚兰 刊期: 2008年第03期

  • 蛋白质组技术研究人血清功能蛋白质的新进展

    在人血清蛋白质组的组成、结构与功能研究领域中,目前已拓展一种较为完善的非在线双向凝胶电泳分离与质谱鉴定联用分析技术,可同时鉴定人血清中490种蛋白质[1],使医学科学家从当初对人血清单个蛋白质结构与功能的研究模式跨入对人血清蛋白质组研究的新阶段.

    作者:金宏伟;曾新华;黄河清 刊期: 2008年第03期

  • 免疫层析法检测结核抗体对肺结核病诊断的临床价值

    结核病在全球范围内仍然是一个重要的社会问题,其实验室辅助诊断目前主要包括:涂片染色镜检、结核分枝杆菌培养、酶联免疫吸附试验(ELISA)、聚合酶链反应(PCR)、核酸探针、结核菌素试验等方法,各种方法皆有利弊.用特异性抗原的血清学检验方法特异而敏感,对活动性结核具有较高的诊断价值,且因其操作简便,敏感性和特异性不断提高而被基层医院实验室所采用[1].

    作者:俞锡灿;张筱蓉;孙爱莉 刊期: 2008年第03期

  • 慢性乙型肝炎患者外周血CD80、CD86及其受体CD28的表达

    目的 研究慢性乙型肝炎患者外周血CD80、CD86及其受体CD28与其病情状态、乙型肝炎病毒复制的关系.方法 用流式细胞术检测了24名健康体检者和92例慢性乙型肝炎患者外周血CD80、CD86、CD28的表达和CD8+CD28+、CD8+CD28-亚群淋巴细胞,并与病毒载量和乙型肝炎e抗原(HBeAg)进行相关分析.结果 慢性乙型肝炎CD80和CD86表达明显高于正常对照组和乙型肝炎病毒携带组(P<0.01);肝炎后肝硬化组明显高于慢性乙型肝炎组(P<0.05);慢性乙型肝炎轻、中、重度3组间差异也有统计学意义.慢性乙型肝炎组CD28的表达明显低于正常对照组和乙型肝炎病毒携带组(P<0.05).病毒载量高低和HBeAg是否阳性与外周血CD80、CD86、CD28及CD8+CD28+和CD8+CD28-亚群淋巴细胞差异无统计学意义.结论 CD80、CD86及受体CD28可能在慢性乙型肝炎免疫损伤过程中起重要作用,但与血清中病毒载量的变化和HBeAg阳性与否无关.

    作者:周永列;邱莲女;陈永健;李洪波;林惠君;刘建栋 刊期: 2008年第03期

  • 妊娠高血压综合征患者脂蛋白(a)及半胱氨酸蛋白酶抑制剂 C 水平变化的研究

    目的 探讨妊娠高血压综合征(简称妊高征)患者血中脂蛋白(a)[Lp(a)]、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)水平变化在妊高征发生、发展中的作用.方法 用免疫增强透射比浊法检测52例妊高征患者(轻度12例,中度22例,重度18例)及28名正常足月妊娠妇女(对照组)血清Lp(a)和Cys C水平.结果 中、重度妊高征患者血中Lp(a)及Cys C水平均明显高于对照组(P<0.01).重度妊高征患者Lp(a)及Cys C水平高于中度妊高征患者(P<0.05).轻度妊高征患者Lp(a)及Cys C水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 血清中Lp(a)水平升高可能参与了妊高征的血管内皮损伤,观测Lp(a)、Cys C可以预测妊高征的严重程度及预后.

    作者:晏峰 刊期: 2008年第03期

  • 社区及院内感染产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药及耐消毒剂基因分析

    目的 了解本地区社区获得性和医院内感染大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率,分析和研究其耐药基因和耐消毒剂基因的携带情况.方法 收集从临床标本分离的大肠埃希菌95株,经ESBLs确证试验将其中38株阳性菌株分为医院与社区获得性感染2组,用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因TEM、SHV、CTX-M-1以及耐消毒剂基因qacE△1-sull.结果 社区获得性大肠埃希菌ESBLs的检出率为30%,医院内感染大肠埃希菌ESBLs的检出率为55%.17株社区获得性感染产ESBLs大肠埃希菌耐药基因TEM的检出率为71%,CTX-M-1的检出率为35%,SHV的检出率为6%,耐消毒剂基因qacE△1-sull的检出率为53%.21株医院内感染产ESBLs大肠埃希菌耐药基因TEM的检出率为71%,CTX-M-1的检出率为43%,SHV的检出率为14%,耐消毒剂基因qacE△1-sull的检出率为62%.结论 本地区医院内感染大肠埃希菌ESBLs的检出率明显高于社区获得性感染大肠埃希菌ESBLs的检出率.社区获得性和医院内感染ESBLs大肠埃希菌耐药基因均以TEM型为主,耐消毒剂基因的携带率2组没有组间差异.

    作者:乔昀;张珏;迟令侃;范瑾 刊期: 2008年第03期

  • 上海地区自身抗体检测质量现状调查分析

    目的 了解上海地区自身抗体检测的质量现状,以便对其检测技术进行规范.方法 分2次共发放8个调查样本,要求各临床实验室在规定的时间内检测抗核抗体(ANA)和抗可提取核抗原(ENA)抗体,并按时回报结果.结果 开展ANA检测项目的 32家实验室均采用间接免疫荧光法,结果总符合率为98.1%,其中阳性结果符合率为96.9%,阴性结果符合率为100.0%.混合核型类样本的次要核型检出率偏低.阳性样本各实验室回报的滴度结果差异较大.开展抗ENA抗体检测项目的 38家实验室均采用免疫印迹法,结果符合率为76.3%,抗核糖核蛋白(RNP)抗体、抗干燥综合征抗原A(SS-A)抗体、抗干燥综合征抗原B(SS-B)抗体检测结果总符合率低于其他抗体,试剂质量参差不齐.结论 自身抗体检测的质量有待提高,其检测技术有待规范.

    作者:肖艳群;陈慧英;叶萍;简敏华;蒋玲丽;陆银华;邵维杰;陈晓翔 刊期: 2008年第03期

  • 胃癌患者血清胸苷激酶检测的临床意义

    目的 探讨血清细胞质胸苷激酶(TK1)检测在胃癌诊治中的临床价值.方法 利用增强化学发光法(ECLA)检测102例胃癌患者血清TK1的含量,同时检测35例胃良性疾病和38名健康人血清中的TK1含量.结果 胃癌患者TKI水平[2.35(1.28~3.75)pm/L]显著高于胃良性疾病组[(1.21(0.75~1.43)pm/L]和正常对照组[1.14(0.72~1.39)pm/L](P<0.01);而胃良性疾病组和正常对照组之间差异无统计学意义(P>0.05).28例胃癌患者手术后血清TK1水平明显下降.胃癌患者血清TK1阳性率(57.8%)远远高于其他消化道肿瘤标志物[癌胚抗原(CEA)(14.7%)、糖抗原(CA)199(13.7%)、CA50(17.7%)].结论 血清TK1检测在胃癌诊断、判断预后、监测疗效等方面具有一定的临床应用价值.

    作者:郭林;卢仁泉 刊期: 2008年第03期

  • 血管活性肠肽抑制实验性类风湿性关节炎自身抗体表达的研究

    目的 研究血管活性肠肽(VIP)足否对类风湿性关节炎(RA)具有抑制作用以及其作用机制.方法 通过利用建立的胶原诱导的实验性RA大鼠模型(CIA),注射VIP,观测大鼠的发病率和严重程度,并检测大鼠血清中的抗胶原抗体水平.结果 VIP对CIA有显著的抑制作用,明显降低了CIA的发病率和关节损伤程度,显著降低大鼠抗胶原抗体水平.结论 本研究成功建立了CIA,VIP对CIA的抑制作用与抑制抗胶原抗体水平有关.

    作者:蔡志昌 刊期: 2008年第03期

  • 钒酸氧化法测定血清胆红素的实验评价

    目的 对钒酸氧化法测定血清胆红素进行方法学评价.方法 收集40例高、中、低浓度的血清样本进行钒酸氧化法与重氮法的比对,分析钒酸氧化法的精密度、灵敏度、稳定性并做干扰实验.结果 钒酸氧化法测定血清总胆红素(TBil)批内变异系数(CV)为1.58%,批间CV为2.94%;血清直接胆红素(DBil)批内CV为1.23%,批间CV为2.7%;平均回收率TBil为101.1%,DBil为100.1%.维生素C(Vit C)≤0.5 g/L时对钒酸氧化法和重氮法均无干扰,三酰甘油≤6 mmol/L时对钒酸氧化法无干扰,对重氮法有明显干扰.血红蛋白浓度≤8 g/L时对钒酸氧化法无干扰,对重氮法有较大干扰.结论 钒酸氧化法测定TBil和DBil是较理想的方法.

    作者:柏晓松;金立钢 刊期: 2008年第03期

  • 基因重组降钙素原蛋白在大肠杆菌中的克隆表达及纯化

    目的 构建降钙素原(PCT)基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达,以获取高产量、低成本、高纯度的PCT蛋白.方法 按人的全长PCT cDNA序列,设计引物用标准的聚合酶链反应(PCR)法全基因合成步骤合成扣除信号肽外PCT的片段,应用基因重组技术将该片段克隆到质粒pET21a(+)中,进行限制性内切酶酶切分析和DNA测序鉴定.将重组质粒转化大肠杆菌E. coli(DH5αt),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,用镍.氮三乙酸(Ni-NTA)亲和层析纯化获取蛋白,用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western blot)的方法鉴定.结果 扩增出的人PCT片段于原核表达载体中克隆,经酶切和核酸测序鉴定,得到正确的重组质粒pET-PCT,并在大肠杆菌中得以表达.纯化后的蛋白经考马氏亮蓝染色呈单一条带;用抗PCT的抗体进行Western blot分析证明目的 蛋白有反应性.结论 本研究成功构建了表达基因重组人PCT的原核表达载体,基因重组人PCT蛋白在大肠杆菌中获得了表达和纯化,为进一步获取高纯度、高效价的单克隆抗体和开展临床检测提供了必要的条件.

    作者:陈洁;张志萍;谢惠芳 刊期: 2008年第03期

  • 应用实时荧光聚合酶链反应技术与第二代杂交捕获法检测高危亚型人乳头瘤病毒

    目的 比较实时荧光聚合酶链反应(PCR)与第2代杂交捕获法(HC-Ⅱ)2种人乳头瘤病毒(HPV)检测方法.方法 采用实时PCR与HC-Ⅱ分别检测223例宫颈脱落细胞标本中的高危亚型HPV,对结果不一致的标本进行测序分析.结果 实时PCR和HC-Ⅱ2种方法检测高危亚型HPV的一致性较好,总符合率为77%,总一致性指数(Kappa指数)为0.538.其中,高度鳞状上皮细胞内病变(HSIL)组二者的符合率为82%,Kappa指数为0.410,一致性比其他组好.结论 实时PCR与HC-Ⅱ检测结果一致性较好,尤其对于HSIL患者,可作为临床上HPV高危亚型检测的有效手段.

    作者:唐振华;李柱南;胡伟平 刊期: 2008年第03期

  • 原发性胆汁性肝硬化患者外周血CD4+CD25+T细胞的定量及其功能分析

    目的 检测原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血CD4+CD25+免疫调节性T细胞(Tregs)数量及其对T效应细胞(Treps)增殖的抑制作用.方法 流式细胞仪定量检测PBC患者及对照组外周血中Tregs细胞百分比.统计无症状期、症状期、肝硬化期3组患者Tregs细胞百分比.免疫磁珠分离Tregs,检测CD62L、T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)的表达.体外细胞培养,3H-胸腺嘧啶掺入法测定Tregs对Treps的免疫抑制功能.结果 PBC患者外周血CD4+T细胞中的Tregs[3.63 s0.92)%]明显低于健康对照组[(7.42±1.09)%,P<0.01)].无症状期、症状期、肝硬化期各组Tregs细胞分别为(3.93±0.71)%、(3.64±0.83)%、(3.52±0.95)%,均明显低于健康对照组,但3组之间差异无统计学意义.Tregs细胞高表达CD62L、CTLA-4、GITR分子.PBC患者Treps的体外增殖可以被自身Tregs所抑制,1:1、1:2、1:4、0:1的比例平均抑制率分别为(78.2±4.9)%、(51.6±7.1)%、(21.7±5.6)%、0,健康对照分别为(75.1±5.3)%、(54.5±6.4)%、(27.6±6.3)%、0,两组相比差异无统计学意义.结论 PBC患者Tregs数量的降低可能是PBC的致病机制之一.

    作者:张健;刘海英;张玲珍;周琳;耿红莲;仲人前 刊期: 2008年第03期

检验医学杂志

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主管:上海市卫生局

主办:上海市临床检验中心