学术投稿

蛇足石杉HsCAS1基因克隆及序列分析

罗红梅;张鑫;牛云云;宋经元;陈士林;殷秀梅;何顺志

关键词:环阿屯醇合成酶, 蛇足石杉, 甾醇, 次生代谢
摘要:本研究对蛇足石杉(Huperzia serrata)环阿屯醇合成酶(Cycloartenol synthase,CAS)基因HsCAS1编码区进行克隆及序列分析.根据本实验室已获得的蛇足石杉转录组数据,从中获得1条具有环氧角鲨烯环化酶保守结构域的编码CAS的转录本,采用RT-PCR方法获得该基因的编码区序列,并对HsCAS1蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三维结构预测分析.利用实时荧光定量PCR方法检测HsCAS1基因在蛇足石杉的根、茎、叶中的表达情况.序列分析表明,所克隆的HsCAS1基因编码区长为2,271 bp,编码756个氨基酸残基,HsCAS1与紫果冷杉(Abiesmagnifica)的CAS具有61%的序列相似性.生物信息学预测HsCAS1蛋白含有3个跨膜区,具有萜类环化酶等保守结构域,不合信号肽.HsCAS1在蛇足石杉的根中表达丰度高于茎和叶.本研究在国内外首次获得蛇足石杉HsCAS1基因的编码区序列,为进一步研究HsCAS1在石杉科植物甾醇合成途径中的功能及鉴定酶活性位点奠定基础.
世界科学技术-中医药现代化杂志相关文献
  • 若尔盖白河牧场地上生物量与遥感植被指数关系研究

    目的:为探讨利用遥感影像进行草原地上生物量估测,更好服务于保护区内的植被生态建设.方法:本文采用TM影像研究若尔盖地区白河牧场地上生物量与遥感植被指数的关系,分别建立了7种植被指数( NDVI、RVI、DVI、SAVI、MSAVI、PVI、GVI)与地上生物量的线性和6种非线性(对数、反函数、二次多项式、三次多项式、复合、幂函数)回归模型.结果:植被指数MSAVI、NDVI、SAVI、RVI、GVI、DVI、PVI与白河牧场地上生物量模型表现出三次多项式回归模型优,其次是二次多项式、反函数曲线模型、对数曲线模型、线性模型、幂函数曲线模型、复合曲线模型.结论:基于MSAVI的地上生物量的三次多项式模型的模拟效果好,复相关系数R2=0.823005,精度检验结果表明该模型的平均误差为38.7%,拟合精度达到61.3%,能够满足中尺度地上生物量的估测.

    作者:温美佳;贾光林;宋经元;谢彩香;刘美子;郑司浩;辛天怡 刊期: 2012年第01期

  • 基于ITS2条形码序列的山豆根基原植物及其混伪品的DNA分子鉴定

    山豆根是我国常用中药材,对山豆根基原植物及其易混伪品进行DNA分子鉴定研究具有重要意义.本文对5科9属38个物种84份山豆根基原植物及其混伪品样品的ITS2序列进行序列变异分析、K-2p遗传距离比较及NJ系统发育聚类树构建.结果表明所研究山豆根基原植物样品种内ITS2序列无变异,与其同属密切相关物种的ITS2序列变异位点为102个,平均K-2p遗传距离为0.072,与其他混伪品的ITS2序列变异位点为200个,平均K-2p遗传距离为0.594.山豆根基原植物在NJ系统发育聚类树上聚为一支,支持率为98.因此,ITS2作为DNA条形码序列能够有效的区分山豆根基原植物及其混伪品,为山豆根药材及其混伪品的鉴定提供基础.

    作者:徐晓兰;石林春;宋经元;韩建萍;姚辉;陈士林;何顺志 刊期: 2012年第01期

  • 众生丸生产过程影响因素探讨(一)

    目的:探讨众生丸生产工艺过程中所存在的问题及解决方法.方法:采用HPLC法测定众生丸提取工艺过程中芍药苷、虎杖苷、黄芩苷的转移率,分析众生丸生产过程中提取工艺的影响因素.结果:动态提取是保证实际生产、还原实验室工艺研究结果的重要条件.结论:有针对性地分析研究实际生产所产生的影响因素可保证有效成分的提取率,为众生丸实际生产提供了参考.

    作者:蒋东旭;王德杭;侯雁;谢有良;赖小平 刊期: 2012年第01期

  • 剪切作用对甘草皂苷胶束聚集形态影响的介观模拟研究

    目的:探讨剪切对甘草皂苷胶束聚集形态的影响.方法:运用介观分子动力学方法( MesoDyn)对具有表面活性的中药常见成分甘草皂苷的胶束性质进行研究.结果:剪切的加入增大了甘草皂苷自身的临界胶束浓度,并且随着剪切的增大,甘草皂苷胶束逐渐从球状过渡为柱状.进一步研究发现,甘草皂苷所形成的球状胶束在剪切变化过程中发生聚集形态变化,胶束沿剪切方向产生不可完全恢复的拉伸效果.结论:从介观层次上为难溶性药物的增溶提供了科学依据,并为高效率的实验研究提供了指导.

    作者:王宇光;史新元;乔延江 刊期: 2012年第01期

  • 刘力教授治疗溃疡性结肠炎病例经验介绍

    刘力教授是国家中医药管理局重点学科—陕西中医学院附属医院脾胃病学科学术带头人,对溃疡性结肠炎有独到的见解和丰富的临床经验,本文主要从论溃疡与肠道茵群失调有关、大便性状判断病性特征、便稀与排便不畅相兼、审时度势把握病势寒热转化等4个方面对其临床经验进行介绍.

    作者:杜晓泉;袁敏慧;刘争辉;刘力 刊期: 2012年第01期

  • 利用文本挖掘技术探索中西医治疗骨质疏松症的用药规律

    目的:利用文本挖掘技术,探索中、西医治疗骨质疏松症的用药规律,以及中成药与西药联合应用情况.方法:在中国生物医学文献数据库(CBM)中收集治疗骨质疏松症的相关文献,建立Microsoft Access(R)数据库,运用Microsoft SQL Server(R)对数据进行处理,结合人工降噪后,分析中西医对骨质疏松症的治疗用药规律.结果:左归丸、六味地黄丸、骨松宝颗粒、右归丸、肾骨胶囊等为治疗骨质疏松文献中出现的高频中成药.中草药淫羊藿、熟地黄、黄芪、骨碎补、丹参、补骨脂、葛根、当归、杜仲等是治疗骨质疏松文献中出现的高频药物;淫羊藿、熟地黄为中药配伍的核心药物,具有补肾健脾、活血养血的功效,是中医治疗骨质疏松的主要药物.雌激素、维生素D、钙剂、降钙素等西药是治疗骨质疏松文献中出现的高频药物.雌激素与左归丸、六味地黄丸联用是常用的中西药组合.结论:从文献报告频数方面提示了中西医治疗骨质疏松的用药规律,为临床应用和基础研究提供参考.

    作者:周奇;陈威妮;姜淼;郑光;郭洪涛;吕爱平 刊期: 2012年第01期

  • 海南芳香药物的超临界萃取工艺及GC-MS分析研究

    目的:研究3种海南芳香药物油—海南砂仁叶油、海南肉豆蔻叶油和海南降香油的SFE-CO2工艺及化学成分.方法:用正交试验以及单因素分析确定SFE-CO2提取工艺,采用气质联用技术对其化学成分进行分析.结果:确定了3种海南芳香药物精油的SFE-CO2工艺;并从海南砂仁叶油中分析确认了α-蒎烯等12个化合物,从海南降香油中分析确认了反式橙花叔醇等5个主要成分,从海南肉豆蔻叶油中分析确认了榄香脂素等24种成分.结论:确定了SFE-CO2提取海南砂仁叶精油、肉豆蔻叶精油、降香油新工艺.

    作者:南垚;张清华;周立东 刊期: 2012年第01期

  • 冬虫夏草菌寄主小金蝠蛾人工饲养成虫生物学特性

    小金蝠蛾是冬虫夏草茵的优良寄主之一,人工培育成虫能否正常交尾及产卵直接关系到种源的持续利用,是目前冬虫夏草人工培育产业的制约因子之一.本文通过对人工饲养小金蝠蛾两个世代(R1、R2)成虫的形态、羽化、交尾、产卵、寿命等生物学特征与其野生亲本进行比较,研究人工培育条件下小金蝠蛾成虫的交尾、产卵能力,为人工培育种源及种群的可持续利用提供依据.研究结果表明,人工饲养条件下小金蝠蛾成虫的平均体长、体重、含卵量、产卵量、寿命均为野生亲本>R1>R2,但在羽化、交尾、产卵等行为上野生亲本与R1、R2不存在明显差异;人工饲养两个世代幼虫的种群增长率分别为177.27%和117.56%,表明人工饲养条件下小金蝠蛾种群可实现持续利用.

    作者:向丽;陈士林;代勇;韩开华;王强;陈学平;周祖基;叶萌;周宇爝 刊期: 2012年第01期

  • 从“毒瘀交阻”理论辨治胃癌前病变的思路与方法

    胃癌是全球高发的恶性肿瘤之一,及早识别和控制胃癌前病变(PLGC)向胃癌发展是防治胃癌的重要途径.课题组在此前的研究中,认为毒瘀交阻是发生PLGC的主要病机,采用具有解毒化瘀作用的金果胃康胶囊治疗本病,取得了良好的疗效,故本文从“毒瘀交阻”理论探讨辨治胃癌前病变的思路与方法.

    作者:惠建萍;沈舒文;刘力;杜晓泉;王捷虹 刊期: 2012年第01期

  • 高血压病弦脉和非高血压病弦脉脉图参数的比较

    目的:运用时域分析方法分析比较高血压病弦脉和非高血压病弦脉的脉象参数信息,初步推断两类弦脉的血流动力学改变及形成机理.方法:应用ZBOX-1型中医脉象仪采集224例原发性高血压病患者的压力脉图和300例非高血压病弦脉压力脉图,比较高血压病弦脉与非高血压病弦脉脉图对应的时域参数( h3/h1、h4/h1、w/t)的特点.结果:高血压病弦脉组、非高血压病弦脉组脉图h3/h1值均显著高于健康对照组(P<0.01),而高血压病弦脉组h3/h1值又显著高于非高血压病弦脉组(P<0.01);高血压病弦脉组脉图h4/h1值显著高于正常组及非高血压病弦脉组(P<0.01);高血压病弦脉组和非高血压病弦脉组脉图w/t值显著高于健康对照组(P<0.01).结论:高血压病弦脉组外周阻力高、血管弹性差、大动脉的张力增高;而非高血压病弦脉组外周阻力无明显变化,但动脉顺应性减退、大动脉处于高压力、高张力的状态,两者具有不同的血流动力学基础.

    作者:张叶青;董耀荣;王忆勤;燕海霞;许文杰;许朝霞;郭睿;刘国萍;郝一鸣;钱鹏 刊期: 2012年第01期

  • 国家知识产权战略需要启动一个试点性的实战项目——我国部署和实施知识产权试点项目“351工程”的紧迫性

    我国传统医学和以中药为基础的天然产物是现代药物重要的研究对象和一系列成果的来源,从参与国际知识产权竞争的角度看,保护中医药公有知识是一项艰巨且极富挑战的任务.本文通过分析国际天然药物市场的竞争局势和印、日、韩、欧美专利战略对中医药发展所形成的围剿态势,提出应该建立一个国家知识产权战略层面的防御与攻击密切结合的实战性试点项目—“351工程”.其中“3”是指建立3个数据库,“5”是指做5件事,“1”是指建立1个工作团队.本文就其紧迫性进行了讨论,认为天然药物行业是我们在国际市场上必须打赢、能够打赢的领域.抛砖而引玉,本文如能对我国中医药现代化的发展有点滴参考,将是作者莫大的荣幸!

    作者:张志华;白剑;宋晓亭;张秀梅;单晓光;刘延淮 刊期: 2012年第01期

  • 从三泻心汤谈仲景重视调理脾胃气机的思想

    在《伤寒论》、《金匮要略》著作中,张仲景将《内经》脾胃气机升降理论创造性地应用于临床实践,对后世脾胃气机升降理论的形成与发展奠定了重要的基础.笔者通过分析张仲景的三泻心汤,运用其辛开苦降法治疗脾胃病,体现了张仲景重视脾胃气机升降的学术思想,将其治法特点运用于临床,皆取得了满意的疗效.

    作者:王捷虹;沈舒文;刘力;殷群 刊期: 2012年第01期

  • 肝硬化的中医辨证分型分析

    目的:探讨肝硬化中医辨证分型的客观规律.方法:统计分析近30年来国内公开报道的肝硬化辨证分型文献,运用多组间x2检验对总结出的各组病例数据进行两两比较.结果:明确提出肝硬化辨证分型的有78篇,病例共5283例,肝硬化常见中医证型依次为:气滞血瘀证、血瘀证、湿热内蕴证、肝肾阴虚证、脾虚湿盛证、脾肾阳虚证.结论:肝硬化病例的统计结果对确立该病中医辨证分型标准具有一定意义.

    作者:李毅;刘艳;汶明琦;刘力;许永攀 刊期: 2012年第01期

  • 菖芩Ⅰ号对重型颅脑外伤昏迷患者促醒的疗效观察

    目的:观察菖芩Ⅰ号对重型颅脑外伤昏迷患者的促醒效果.方法:将格拉斯评分(GCS)≤8分的重型颅脑损伤昏迷患者47例随机分成治疗组(24例)和对照组(23例),两组均予以常规西医治疗,治疗组在对照组的基础上加用菖芩Ⅰ号治疗.结果:治疗组患者治疗1个月的苏醒时间、苏醒率及3个月的苏醒时间和预后与对照组相比差异显著(P<0.05).结论:菖芩Ⅰ号治疗对重型颅脑损伤昏迷患者的神智恢复有较好疗效.

    作者:罗杰坤;王杨;张海男;范荣;邢之华;梁清华;陈泽奇;黄熙 刊期: 2012年第01期

  • 蜘蛛抱蛋属药用植物分子鉴定研究

    通过比较各分子标记的PCR扩增成功率、测序效率、种内与种间变异和鉴定成功率等指标,考察6个分子标记(rbcL、matK、psbA -trnH、psbK-psbI、核ITS和ITS2)及其组合对蜘蛛抱蛋属药用植物的鉴定结果,评价不同标记在蜘蛛抱蛋属药用植物中的鉴定能力,确定适合该属鉴定的DNA分子标记.结果显示,对蜘蛛抱蛋属11个种20个样本进行分析,rbcL、matK、psbA -trnH、psbK-psbI序列获得率较高,matK鉴定成功率在获得的单一序列中高(85%),多序列组合在鉴定效率方面比单一序列有所提高,其中matK +psb K-psbI的鉴定成功率为100%.因此,matK+psbK-psbI可用于蜘蛛抱蛋属药用植物的鉴定.

    作者:刘安莉;何顺志;姚辉;陈士林;宋经元 刊期: 2012年第01期

  • 溃疡性结肠炎的中医证候与肠道微生态关系的研究及思考

    本文从溃疡性结肠炎与肠道微生态之间的关系为切入点,进而探讨溃疡性结肠炎的中医证候与肠道微生态之间的相关性,为终证实“溃疡性结肠炎的中医辨证分型与肠道微生态存在相关性”的理论假设提供依据.

    作者:刘力;张欢;杜晓泉;吴晓康;杨晓航 刊期: 2012年第01期

  • 从黄芩苷对TLRs-NOD2的调控探讨肺、脑相关炎性反应的共同机制

    目的:通过研究黄芩苷对脑缺血和肺炎模型中TLRs-NOD2受体的影响,探讨肺、脑相关炎性病变的共同机制.方法:分别建立小鼠脑缺血再灌和急性肺炎模型,造模后对小鼠腹腔注射黄芩苷,检测小鼠脑和肺组织中TLR2/4、NOD2和TNFα蛋白的表达.结果:脑损伤模型小鼠脑组织和肺组织中,TLR2/4、NOD2和TNFα显著高表达,黄芩苷能够不同程度的下调这些因子;肺炎模型小鼠脑组织和肺组织中,TLR2/4、NOD2和TNFα不同程度的高表达,黄芩苷可以在不同程度上抑制这些因子.结论:黄芩苷对TLR2/4、NOD2受体及下游炎性因子TNFα存在着显著的调控作用,这种调控作用及时炎性反应的影响可能是其对肺、脑病变作用的共同基础.

    作者:李慧颖;袁梽漪;柴玉爽;王玉刚;赵爽;陈勃杭;雷帆;邢东明;杜力军 刊期: 2012年第01期

  • 胃食管反流病当重脾虚

    目的:阐明脾虚气陷、贲门失固是胃食管反流病的重要发病机制,治疗应以脾虚论治、补脾论治、补脾升提和固摄贲门为基本治则.方法:通过现代医学对该病发病机理与中医脾虚病机的关联性及现代医学的治疗原则与中医补脾气治疗的关联性论述,阐明脾虚在该病发病中的重要性.结果:补脾固贲汤为治疗该病的有效方剂.结论:补脾固贲汤具有补脾固贲和胃降逆的功效,治疗胃食管反流病疗效显著,无明显不良反应,是一种安全有效的治疗方法.

    作者:汶明琦;刘争辉;李毅 刊期: 2012年第01期

  • 基于微透析-UPLC技术的异嗪皮啶大鼠脑纹状体细胞外液药动学研究

    目的:考察大鼠口服给药异嗪皮啶(Isofraxidin)之后的脑纹状体细胞外液药动学特性.方法:大鼠单次灌胃给予异嗪皮啶10 mg·kg-1和20 mg·kg-1后,采用脑微透析活体取样技术和超高效液相色谱质谱联用技术( UPLC-MS),测定给药后60 min内各时间点大鼠脑纹状体细胞外液中透析液异嗪皮啶的浓度,经回收率校正后,采用WINONLIN 6.1程序以非房室模型法拟合药动学参数.结果:大鼠单次灌胃给予异嗪皮啶10 mg·kg-1和20 mg· kg-1后,其主要药动学参数分别为AUC0-∞( 13973.88±1582.984)、(28059.76±4207.66 )ng· min· mL-1;t1/2(16.68±0.49)、(17.41±2.88)min;Cmax(498.87±64.36)、(899.81±133.22) ng· mL-1;tmax均为15 min,其中Cmax和tmax均为实测值.结论:异嗪皮啶经大鼠口服给药后能够迅速透过血脑屏障,到达纹状体部位,15 min浓度达到大值,之后药物以较快速率消除,纹状体细胞外液异嗪皮啶浓度具有明显的剂量依赖性.

    作者:刘树民;唐波;卢芳;范振群;周世慧 刊期: 2012年第01期

  • 细胞色素P450在人参皂苷生物合成途径中的研究进展

    细胞色素P450(CYP450)是一类超基因家族编码的单加氧酶,参与萜类、生物碱和甾醇类等多种次生代谢产物的合成与代谢.CYP450对人参皂苷三萜碳环骨架进行羟基化和氧化等一系列复杂修饰作用,是人参皂苷生物合成途径中的关键酶.近年来利用新一代测序技术及生物信息学分析等方法,从CYP450家族中筛选出参与人参皂苷生物合成的相关CYP450s,并对候选基因(CYP716A47)进行了生物功能验证,进一步阐明了人参皂苷合成途径.本文对人参皂苷生物合成途径做简要介绍,并对近年来CYP450在人参皂苷生物合成途径中的研究进行综述,为阐明人参皂苷合成途径及通过基因工程手段合成人参皂苷提供理论依据.

    作者:牛云云;罗红梅;黄林芳;陈士林;何顺志 刊期: 2012年第01期

世界科学技术-中医药现代化杂志

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主管:世界科学技术-中药现代化

主办:中国科学院