吴永贵;林善锬;周江华;顾勇
目的应用基因工程技术表达甲状腺激素反应蛋白1(TRP-1).方法应用RT-PCR方法,从新生大鼠脑组织RNA中扩增编码TRP-1的cDNA片段,构建表达型重组质粒,经DNA序列分析确证后,在大肠杆菌中表达,以Western印迹来初步鉴定是否表达了目的融合蛋白,用亲和层析纯化融合目的蛋白,并以SDS-PAGE电泳测定其相对分子质量.结果所获特异PCR产物正确地重组入Pinpoint Xa-1表达载体中.Western印迹表明经异丙基硫代半乳糖苷诱导的原核细胞表达产生了目的融合蛋白,亲和层析得到了纯度较高、相对分子质量约23 400的融合目的蛋白.结论应用原核细胞表达体系成功地表达了TRP-1融合蛋白,为进一步研究其在脑发育中的所起的作用以及该蛋白的其它功能提供了可能.
作者:许光武;贾秀娟;谢超;周文中;张迪;谢晓雁;罗敏 刊期: 2003年第05期
目的研究华东地区汉族人群中磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK1)基因的单核苷酸多态性(SNP)与2型糖尿病的相关性.方法采用直接测序法对PCK1基因作SNP筛查,并按病例-对照研究选用直接测序法对改变氨基酸编码的cSNP作进一步的基因分型.结果共检出11个SNPs,其中出现在启动子区3个(P/-1099G→A,P/-969G→A,P/-234G→C),内含子区2个(I3/379A→T,I5/85C→G),外显子区6个SNP(E2/69C→T,E4/47C→T,E4/56C→T,E4/83C→T,E4/144G→C,E7/179G→A),而改变氨基酸编码的cSNP只有E4/144G→C,即Leu184Val.进一步基因分型后显示,2型糖尿病组中GG:106,GC:77,CC:8,而正常对照组中GG:130,GC:58,CC:3,这两组间的基因型频率差异有显著性(P<0.05),而且两组间等位基因频率差异也有显著性(P<0.01).结论 PCK1基因的Leu184Val多态性与华东地区汉族人群2型糖尿病的发生可能存在一定相关性.
作者:董艳;李果;骆天红;吴刚;黄薇;罗敏 刊期: 2003年第05期
采用指动脉血压监测系统和心血管频谱分析系统测定糖尿病患者动脉收缩压和心搏间距的变异性以及压力反射敏感性.糖尿病性心自主神经病变患者存在明显的动脉收缩压和心搏间距变异性的改变和压力反射敏感性下降,而后者是较早出现改变的指标.
作者:冯波;倪亚芳 刊期: 2003年第05期
用Western印迹技术检测2型糖尿病患者腹部皮下脂肪组织内胰岛素受体底物1与2(IRS-1和IRS-2)的蛋白表达.结果提示2型糖尿病患者脂肪组织IRS-1蛋白表达减少和IRS-2蛋白表达未变.IRS-2可能是主要的docking蛋白,并可能是引起2型糖尿病高胰岛素血症及胰岛素抵抗的因素之一.
作者:彭定琼;陈宇;高妍;郭晓蕙 刊期: 2003年第05期
25例甲状腺功能亢进(甲亢)伴腹泻和14例甲状腺功能减退(甲减)伴便秘患者的直肠肛门生理功能测定显示,甲亢患者肛管静息压和收缩压,排便初始感觉阈值和大直肠耐受容量明显低于21例正常对照组者.甲减患者这些测定值与对照组差异无显著性.
作者:邢惠莉;刘清华;周惠清 刊期: 2003年第05期
目的探讨非ACTH依赖性双侧肾上腺皮质大结节增生症(AIMAH)的临床特点.方法分析4例AIMAH临床和实验室资料,结合有关文献进行讨论.结果 4例AIMAH均有库欣综合征的临床表现及生化异常,实验检查显示血浆ACTH水平低下,皮质醇分泌节律紊乱,小剂量、大剂量地塞米松抑制试验均不被抑制,CT检查示双侧肾上腺明显增大呈结节样改变.结论 AIMAH是库欣综合征中病因独特的临床亚型,有其特有的临床特点及病理改变.
作者:李雅静;陆菊明;李明;邵迎红 刊期: 2003年第05期
运用PCR-RFLP方法分析膜糖蛋白PC-1基因K121Q多态性,观察Q、K等位基因和KQ、KK基因型在正常对照组和2型糖尿病组中的分布,同时测定多种生化及临床指标.结果显示,Q等位基因与2型糖尿病有相关性,且与2型糖尿病伴肥胖、高血压、高脂血症有关.
作者:徐梅;王德全;许玲;唐宽晓;司元国 刊期: 2003年第05期
目的利用基因表达谱芯片研究T淋巴细胞株(HUT78)在褪黑素作用后免疫相关基因表达的差异性.方法用Cy5和Cy3两种不同的荧光染料通过逆转录反应将干预组和对照组的HUT78细胞的mRNA分别标记成两种探针,并与载有一组靶基因的基因表达谱芯片进行杂交,通过扫描荧光强度,计算机软件分析,寻找经褪黑素作用后表达有差异的基因.结果 T淋巴细胞株受褪黑素作用24 h后,共筛选出42条差异表达基因,其中35条基因上调,7条基因下调.结论褪黑素激活的人淋巴细胞,是通过对一些基因的调控而发挥免疫调节作用.
作者:陈向芳;刘志民;赵瑛;邓安梅;林炜栋;阮晔;彭树勋 刊期: 2003年第05期
目的克隆新的大鼠脑甲状腺激素反应基因,研究其表达特征并初步预测其功能.方法建立先天性甲状腺功能减退(甲减)新生大鼠模型,用荧光标记的差异显示PCR(DD-PCR)技术、亚克隆、测序及相似性检索获得未知的大鼠脑甲状腺激素反应基因的cDNA片段.采用电子克隆、RT-PCR、测序并克隆其cDNA全长.经Northern印迹法证实其表达受到甲状腺激素的调节,并用半定量RT-PCR方法和生物信息学技术观察其分布转录水平和预测其功能.结果克隆了甲状腺激素反应蛋白1(thyroid hormone-response protein-1,TRP-1)基因全长cDNA,共973 bp(基因登录号为AF348365),在甲减新生大鼠的脑中,该基因的转录增强.该基因表达广泛,以脑组织中的表达水平高;其在大鼠不同脑区的表达含量亦不同,以嗅脑高.该基因的编码产物具有一些重要的结构域和功能基序.结论 TRP-1基因是新发现的甲状腺激素反应基因,它在正常的脑发育中可能具有重要的作用,其异常表达可能是甲减性脑发育障碍发生的分子机制之一.
作者:谢超;罗敏;杨义生;蔡东升;李连喜;陈刚;丁伟;刘优萍;李果;苏青;张芳林 刊期: 2003年第05期
目的检测人外周血淋巴细胞和粒细胞的褪黑素受体(MR)亚型mt1和其细胞内定位.方法分离出健康成年人外周血淋巴细胞和粒细胞,应用RT-PCR技术分别检测其亚型mt1的mRNA,阳性产物用自动测序仪测序;同时将所分离的淋巴细胞和粒细胞制成细胞涂片,应用免疫组化染色检测mt1在淋巴细胞和粒细胞上的分布.结果 RT-PCR产物电泳显示:人外周血淋巴细胞和粒细胞均存在mt1阳性条带,片段长度约370 bp,测序结果显示扩增产物与GenBank的人mt1受体亚型的基因序列相吻合;免疫组化结果显示:人外周血淋巴细胞和粒细胞均存在mt1受体蛋白,分布于细胞膜、细胞浆和细胞核,以细胞膜和细胞浆为主.结论人外周血淋巴细胞和粒细胞中均存在MR的亚型mt1,外周血淋巴细胞和粒细胞为褪黑素作用的外周靶器官,提示褪黑素在生理及病理情况下可能对免疫系统有调节作用.
作者:陈向芳;刘志民;邓安梅;仲人前;赵瑛;林炜栋;彭树勋 刊期: 2003年第05期
目的探讨三碘甲状腺原氨酸(T3)在神经干细胞(NSC)分化中的作用以及甲状腺激素受体(TR)mRNA在NSC分化过程中的表达变化.方法在体外成功诱导扩增NSC,用T3对NSC进行诱导分化,半定量RT-PCR法检测NSC在分化前后TRs mRNA的表达变化,免疫细胞化学方法鉴定分化后的细胞类型.结果 T3可诱导NSC分化为神经元、少突和星形胶质细胞,其中髓鞘碱性蛋白(MBP)阳性细胞约占80%.当NSC分化时存在不同的TRs mRNA的时间顺序表达.结论 T3能诱导NSC向胶质细胞分化,是少突胶质细胞分化的重要调控因子,并通过TRs的时间顺序表达来发挥其重要生理作用.
作者:李兰英;刘春蓉;刘奔;臧晓怡;陈祖培 刊期: 2003年第05期
患者男性,44岁,因血压剧烈波动伴恶心、呕吐、腹泻1天,晕厥1次入院.患者在外院以肠炎予抗炎支持治疗中出现头晕,出汗,测血压250/195 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),予硝酸甘油静脉点滴,血压突降至50/30 mm Hg,此后动态观察血压,发现血压自行波动于50~270/30~230 mm Hg,急转来诊.既往体健,否认高血压病史及家族史.体检:体温37.5℃,脉搏100次/min,呼吸24次/min,血压50~270/30~230 mm Hg,精神差,皮肤潮湿,肢端皮温低,脉搏细速,双肺未闻及干湿性罗音,心界不大,律齐,无杂音,腹部平软,下腹略压痛,未及明显包块,肠鸣音略活跃,血常规白细胞19.0×109/L,中性0.84,血生化及尿常规未见异常,肾上腺CT未见异常.
作者:杨军;钟伟;程文伟 刊期: 2003年第05期
1例患者因输注大剂量维生素C引起实验室假性低血糖症.
作者:谢可瓦;孙莎莎;谢可呐;张永生;赵丽丽;吴小雪;王宁 刊期: 2003年第05期
在去卵巢大鼠,以雷洛昔芬,利维爱和依扑拉芬处理60天后结果显示,3种药物均有减少骨丢失和改善血脂的作用.
作者:黄德芳;陈高翔;高玉芬;朱明月;吴志兰;华文进;胡玲卿;张中军;何戎华 刊期: 2003年第05期
目的用RT-PCR方法,定量研究垂体转录活化物(Pit)-1 mRNA在不同类型的垂体腺瘤中的表达.方法 35例垂体腺瘤患者根据血清激素水平和临床表现确定腺瘤类型,根据影像学和术中所见对肿瘤分级和分期.用RT-PCR方法检测垂体腺瘤组织中Pit-1 mRNA的表达.结果 35例垂体腺瘤患者有PRL腺瘤13例,GH腺瘤6例,GH/PRL腺瘤2例,无功能瘤11例以及ACTH腺瘤3例.Pit-1 mRNA在所有PRL瘤、GH/PRL瘤、GH瘤和81.8%(9/11)无功能腺瘤中有表达.在ACTH腺瘤组中无表达.Pit-1 mRNA在PRL、GH和GH/PRL 3组腺瘤中的表达量差异无显著性,均显著高于无功能瘤组(均P<0.05).Pit-1表达量与肿瘤分级分期无明显相关性.PRL瘤术前血清PRL值与腺瘤组织Pit-1表达量呈显著的正相关(r=0.92,P<0.01),GH腺瘤术前血清GH值与腺瘤组织Pit-1表达量呈显著的正相关(r=0.98,P<0.01).结论 Pit-1 mRNA在PRL、GH、GH/PRL瘤以及大部分无功能腺瘤中有表达,其中在PRL、GH以及GH/PRL瘤的表达量较高,Pit-1对垂体GH和PRL腺瘤的细胞特异分化以及分泌功能是否具有作用,尚待进一步研究.
作者:徐春;李江源 刊期: 2003年第05期
用ELISA法测定正常人、Graves病粒细胞正常者及因抗甲状腺药物(ATD)治疗所致粒细胞减少者血清粒细胞集落刺激因子(G-CSF)水平,结果提示ATD致粒细胞减少并不是G-CSF缺少所致.
作者:顾丽群;赵咏桔;李凤英;荣蓉;赵红燕;张连珍;宁光;罗邦尧 刊期: 2003年第05期
在182例2型糖尿病患者测定尿液转化生长因子β1(TGF-β1)、层粘连蛋白(LN)和Ⅳ型胶原排泄量,糖尿病患者的尿液TGF-β1、LN和Ⅳ型胶原排泄量增加,并与糖尿病肾病(DN)的严重程度有较好的相关性.尿TGF-β1可能为早期DN的指标、尿LN、Ⅳ型胶原可能为DN严重程度的指标.
作者:冯文焕;高鑫;叶真;汪大望;郑景晨;陶志华;吴建波;沈飞霞 刊期: 2003年第05期
大鼠均进行单侧肾切除,部分大鼠再以链脲佐菌素制备糖尿病模型.这些大鼠分成单侧肾切除组、糖尿病组和糖尿病苯那普利治疗组,4周后观察肾小管-间质形态学变化及Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白和转化生长因子β1(TGF-β1)及其mRNA表达,结果提示苯那普利对糖尿病大鼠肾小管-间质损害有明显保护作用,部分机制是抑制TGF-β1基因与蛋白表达.
作者:吴永贵;林善锬;周江华;顾勇 刊期: 2003年第05期
目的观察促性腺素释放激素类似物(GnRHa)曲普瑞林(达菲林)治疗女孩特发性中枢性性早熟(ICPP)的作用.方法在多个中心(6所医院)采用曲普瑞林治疗28例ICPP女童6个月(4例)和12个月(24例),观察乳房及其他第二性征和生长速率变化,观察治疗前后B超子宫、卵巢、X线片骨龄(BA)、血清E2、LHRH激发试验,部分病人随访GH激发试验及血清IGF-Ⅰ变化.用国际统一标准Greulich-Pyle图谱方法评估骨龄,Bayley-Pinneau方法预测成人终身高.结果经治疗乳房、子宫、卵巢容积均缩小,LHRH激发试验显示LH、FSH峰值显著降低,骨龄成熟延缓,BA/CA(生活年龄)比值随疗程而下降.治疗6个月、12个月按BA的身高标准差分值(HtSDSBA)从治疗前-1.46±0.16分别增加至-1.30±0.15和-1.02±0.17(P<0.001).按CA的身高标准差分值(HtSDSCA)亦随疗程下降,治疗前、治疗后6个月、12个月分别为1.05±0.20、0.99±0.18和0.95±0.20(P<0.001).预测成人终身高,治疗前为(153.8±1.1)cm,治疗后6个月、12个月各为(155.0±1.1)cm和(157.0±1.2)cm.结论曲普瑞林治疗ICPP可有效抑制性腺轴及性征发育,延缓BA成熟和改善预测成人终身高.
作者:倪继红;王德芬;杜敏联;沈永年;姚国英;金意华;刘丽;卫巧贤;蔡德培 刊期: 2003年第05期
甲状腺激素(TH)在哺乳类动物脑发育中具有重要的作用.孕母亚临床甲状腺功能减退症(甲减)可造成胎儿神经发育受损,对孕妇作甲减筛查是值得推荐的做法.脑TH反应基因的鉴定及功能研究有助于阐明TH调节脑发育的分子机制.
作者:苏青;罗敏 刊期: 2003年第05期