吴永贵；林善锬；周江华；顾勇
目的应用基因工程技术表达甲状腺激素反应蛋白1(TRP-1).方法应用RT-PCR方法,从新生大鼠脑组织RNA中扩增编码TRP-1的cDNA片段,构建表达型重组质粒,经DNA序列分析确证后,在大肠杆菌中表达,以Western印迹来初步鉴定是否表达了目的融合蛋白,用亲和层析纯化融合目的蛋白,并以SDS-PAGE电泳测定其相对分子质量.结果所获特异PCR产物正确地重组入Pinpoint Xa-1表达载体中.Western印迹表明经异丙基硫代半乳糖苷诱导的原核细胞表达产生了目的融合蛋白,亲和层析得到了纯度较高、相对分子质量约23 400的融合目的蛋白.结论应用原核细胞表达体系成功地表达了TRP-1融合蛋白,为进一步研究其在脑发育中的所起的作用以及该蛋白的其它功能提供了可能.
作者：许光武；贾秀娟；谢超；周文中；张迪；谢晓雁；罗敏 刊期： 2003年第05期
目的研究华东地区汉族人群中磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK1)基因的单核苷酸多态性(SNP)与2型糖尿病的相关性.方法采用直接测序法对PCK1基因作SNP筛查,并按病例-对照研究选用直接测序法对改变氨基酸编码的cSNP作进一步的基因分型.结果共检出11个SNPs,其中出现在启动子区3个(P/-1099G→A,P/-969G→A,P/-234G→C),内含子区2个(I3/379A→T,I5/85C→G),外显子区6个SNP(E2/69C→T,E4/47C→T,E4/56C→T,E4/83C→T,E4/144G→C,E7/179G→A),而改变氨基酸编码的cSNP只有E4/144G→C,即Leu184Val.进一步基因分型后显示,2型糖尿病组中GG:106,GC:77,CC:8,而正常对照组中GG:130,GC:58,CC:3,这两组间的基因型频率差异有显著性(P＜0.05),而且两组间等位基因频率差异也有显著性(P＜0.01).结论 PCK1基因的Leu184Val多态性与华东地区汉族人群2型糖尿病的发生可能存在一定相关性.
作者：董艳；李果；骆天红；吴刚；黄薇；罗敏 刊期： 2003年第05期
目的探讨中国南方人群2型糖尿病(DM)的发生与磺脲类药物受体1(SUR1)基因多态性的关系.方法抽提正常人51名及2型DM患者105例外周血白细胞基因组DNA,PCR扩增SUR1基因4个多态性位点的区域,用限制性酶切片段长度多态性分析其基因型,并用测序证实不同酶切图形基因型的准确性.结果 SUR1基因16号外显子-3t→c的多态性在2型DM和正常人群之间差异无显著性.研究人群未发现SUR1基因18号外显子(ACC→ACT,T761T)和31号外显子(R1273R,AGA→AGG)的多态性变化.SUR1基因33号外显子1370位(TCC→GCC,S1370A)的多态性变化,在2型DM和正常人群之间差异有显著性(P＜0.05).结论 SUR1基因可能是中国南方2型糖尿病发生的易感基因.
作者：陈凤玲；史文静；张晓梅；李荣英；宋怀东；胡仁明；陈家伦 刊期： 2003年第05期
目的克隆新的大鼠脑甲状腺激素反应基因,研究其表达特征并初步预测其功能.方法建立先天性甲状腺功能减退(甲减)新生大鼠模型,用荧光标记的差异显示PCR(DD-PCR)技术、亚克隆、测序及相似性检索获得未知的大鼠脑甲状腺激素反应基因的cDNA片段.采用电子克隆、RT-PCR、测序并克隆其cDNA全长.经Northern印迹法证实其表达受到甲状腺激素的调节,并用半定量RT-PCR方法和生物信息学技术观察其分布转录水平和预测其功能.结果克隆了甲状腺激素反应蛋白1(thyroid hormone-response protein-1,TRP-1)基因全长cDNA,共973 bp(基因登录号为AF348365),在甲减新生大鼠的脑中,该基因的转录增强.该基因表达广泛,以脑组织中的表达水平高;其在大鼠不同脑区的表达含量亦不同,以嗅脑高.该基因的编码产物具有一些重要的结构域和功能基序.结论 TRP-1基因是新发现的甲状腺激素反应基因,它在正常的脑发育中可能具有重要的作用,其异常表达可能是甲减性脑发育障碍发生的分子机制之一.
作者：谢超；罗敏；杨义生；蔡东升；李连喜；陈刚；丁伟；刘优萍；李果；苏青；张芳林 刊期： 2003年第05期
目的检测人外周血淋巴细胞和粒细胞的褪黑素受体(MR)亚型mt1和其细胞内定位.方法分离出健康成年人外周血淋巴细胞和粒细胞,应用RT-PCR技术分别检测其亚型mt1的mRNA,阳性产物用自动测序仪测序;同时将所分离的淋巴细胞和粒细胞制成细胞涂片,应用免疫组化染色检测mt1在淋巴细胞和粒细胞上的分布.结果 RT-PCR产物电泳显示:人外周血淋巴细胞和粒细胞均存在mt1阳性条带,片段长度约370 bp,测序结果显示扩增产物与GenBank的人mt1受体亚型的基因序列相吻合;免疫组化结果显示:人外周血淋巴细胞和粒细胞均存在mt1受体蛋白,分布于细胞膜、细胞浆和细胞核,以细胞膜和细胞浆为主.结论人外周血淋巴细胞和粒细胞中均存在MR的亚型mt1,外周血淋巴细胞和粒细胞为褪黑素作用的外周靶器官,提示褪黑素在生理及病理情况下可能对免疫系统有调节作用.
作者：陈向芳；刘志民；邓安梅；仲人前；赵瑛；林炜栋；彭树勋 刊期： 2003年第05期
目的探讨三碘甲状腺原氨酸(T3)在神经干细胞(NSC)分化中的作用以及甲状腺激素受体(TR)mRNA在NSC分化过程中的表达变化.方法在体外成功诱导扩增NSC,用T3对NSC进行诱导分化,半定量RT-PCR法检测NSC在分化前后TRs mRNA的表达变化,免疫细胞化学方法鉴定分化后的细胞类型.结果 T3可诱导NSC分化为神经元、少突和星形胶质细胞,其中髓鞘碱性蛋白(MBP)阳性细胞约占80%.当NSC分化时存在不同的TRs mRNA的时间顺序表达.结论 T3能诱导NSC向胶质细胞分化,是少突胶质细胞分化的重要调控因子,并通过TRs的时间顺序表达来发挥其重要生理作用.
作者：李兰英；刘春蓉；刘奔；臧晓怡；陈祖培 刊期： 2003年第05期
目的用RT-PCR方法,定量研究垂体转录活化物(Pit)-1 mRNA在不同类型的垂体腺瘤中的表达.方法 35例垂体腺瘤患者根据血清激素水平和临床表现确定腺瘤类型,根据影像学和术中所见对肿瘤分级和分期.用RT-PCR方法检测垂体腺瘤组织中Pit-1 mRNA的表达.结果 35例垂体腺瘤患者有PRL腺瘤13例,GH腺瘤6例,GH/PRL腺瘤2例,无功能瘤11例以及ACTH腺瘤3例.Pit-1 mRNA在所有PRL瘤、GH/PRL瘤、GH瘤和81.8%(9/11)无功能腺瘤中有表达.在ACTH腺瘤组中无表达.Pit-1 mRNA在PRL、GH和GH/PRL 3组腺瘤中的表达量差异无显著性,均显著高于无功能瘤组(均P＜0.05).Pit-1表达量与肿瘤分级分期无明显相关性.PRL瘤术前血清PRL值与腺瘤组织Pit-1表达量呈显著的正相关(r=0.92,P＜0.01),GH腺瘤术前血清GH值与腺瘤组织Pit-1表达量呈显著的正相关(r=0.98,P＜0.01).结论 Pit-1 mRNA在PRL、GH、GH/PRL瘤以及大部分无功能腺瘤中有表达,其中在PRL、GH以及GH/PRL瘤的表达量较高,Pit-1对垂体GH和PRL腺瘤的细胞特异分化以及分泌功能是否具有作用,尚待进一步研究.
作者：徐春；李江源 刊期： 2003年第05期
目的探讨非ACTH依赖性双侧肾上腺皮质大结节增生症(AIMAH)的临床特点.方法分析4例AIMAH临床和实验室资料,结合有关文献进行讨论.结果 4例AIMAH均有库欣综合征的临床表现及生化异常,实验检查显示血浆ACTH水平低下,皮质醇分泌节律紊乱,小剂量、大剂量地塞米松抑制试验均不被抑制,CT检查示双侧肾上腺明显增大呈结节样改变.结论 AIMAH是库欣综合征中病因独特的临床亚型,有其特有的临床特点及病理改变.
作者：李雅静；陆菊明；李明；邵迎红 刊期： 2003年第05期
在182例2型糖尿病患者测定尿液转化生长因子β1(TGF-β1)、层粘连蛋白(LN)和Ⅳ型胶原排泄量,糖尿病患者的尿液TGF-β1、LN和Ⅳ型胶原排泄量增加,并与糖尿病肾病(DN)的严重程度有较好的相关性.尿TGF-β1可能为早期DN的指标、尿LN、Ⅳ型胶原可能为DN严重程度的指标.
作者：冯文焕；高鑫；叶真；汪大望；郑景晨；陶志华；吴建波；沈飞霞 刊期： 2003年第05期
大鼠均进行单侧肾切除,部分大鼠再以链脲佐菌素制备糖尿病模型.这些大鼠分成单侧肾切除组、糖尿病组和糖尿病苯那普利治疗组,4周后观察肾小管-间质形态学变化及Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白和转化生长因子β1(TGF-β1)及其mRNA表达,结果提示苯那普利对糖尿病大鼠肾小管-间质损害有明显保护作用,部分机制是抑制TGF-β1基因与蛋白表达.
作者：吴永贵；林善锬；周江华；顾勇 刊期： 2003年第05期
目的评价胰岛素口腔喷雾剂(华中科技大学药物研究所制备)治疗糖尿病的有效性及安全性.方法采用开放、多中心、随机、自身交叉、阳性对照研究,共入选61例糖尿病患者,随机分为两组,分别先用试验药胰岛素口腔喷雾剂或对照药短效胰岛素皮下注射剂,经4周观察(2周剂量调整期,2周维持期)后交换药物种类,分别于试验前、交叉改用试验或对照药前、试验结束时测空腹和餐后1 h、2 h血糖及安全性指标.结果经一个月的胰岛素口腔喷雾剂治疗,能有效地降低空腹血糖、餐后1、2 h血糖、固定餐试验血糖曲线下面积,治疗前、后值分别为(10.7±3.2到8.7±2.4,15.0±4.3到12.5±3.2、15.7±5.1到11.9±3.5)mmol/L及(28.24±7.91到22.74±5.74)mmol*L-1*h,其差异均有显著性(P=0.001);而与胰岛素皮下注射剂相比,治疗后空腹血糖差异无显著性[(8.66±2.42对8.55±2.36)mmol/L],而餐后1 h、2 h血糖差异有显著性[分别为(12.48±3.15对10.93±3.03)mmol/L,P＜0.05;(11.87±3.48对9.87±3.28)mmol/L,P＜0.01],口腔喷雾剂降糖效果不如皮下注射,胰岛素口腔喷雾剂和胰岛素皮下注射剂的药量比约为5.46:1.安全性指标治疗前后差异无显著性.两种药物治疗的低血糖反应发生率差异无显著性.结论胰岛素口腔喷雾剂治疗糖尿病安全有效,但餐后1 h、2 h血糖下降程度略低于皮下注射胰岛素.
作者：赵维纲；王姮；李玉秀；赵咏桔；郁忠勤；杨明功；王长江；何勇 刊期： 2003年第05期
采用指动脉血压监测系统和心血管频谱分析系统测定糖尿病患者动脉收缩压和心搏间距的变异性以及压力反射敏感性.糖尿病性心自主神经病变患者存在明显的动脉收缩压和心搏间距变异性的改变和压力反射敏感性下降,而后者是较早出现改变的指标.
作者：冯波；倪亚芳 刊期： 2003年第05期
用Western印迹技术检测2型糖尿病患者腹部皮下脂肪组织内胰岛素受体底物1与2(IRS-1和IRS-2)的蛋白表达.结果提示2型糖尿病患者脂肪组织IRS-1蛋白表达减少和IRS-2蛋白表达未变.IRS-2可能是主要的docking蛋白,并可能是引起2型糖尿病高胰岛素血症及胰岛素抵抗的因素之一.
作者：彭定琼；陈宇；高妍；郭晓蕙 刊期： 2003年第05期
运用PCR-RFLP方法分析膜糖蛋白PC-1基因K121Q多态性,观察Q、K等位基因和KQ、KK基因型在正常对照组和2型糖尿病组中的分布,同时测定多种生化及临床指标.结果显示,Q等位基因与2型糖尿病有相关性,且与2型糖尿病伴肥胖、高血压、高脂血症有关.
作者：徐梅；王德全；许玲；唐宽晓；司元国 刊期： 2003年第05期
目的观察达那唑对雌性大鼠下丘脑-垂体-靶腺轴及下丘脑GnRH mRNA和垂体GnRH受体mRNA表达的影响.方法 5天龄雌性大鼠皮下一次注射300 μg达那唑以诱导真性性早熟.从25日龄起观察和记录阴门开启鼠龄和从阴门开启日起进行阴道涂片以确定第一个动情周期.检查阴道涂片和体重及垂体、肾上腺、子宫、卵巢器官重量,观察雌激素依赖的阴道脱落细胞的周期性变化和主要器官的发育情况.RT-PCR法观察雌性大鼠下丘脑GnRH mRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达.结果 5日龄雌性大鼠给予皮下注射达那唑,可诱导大鼠阴门提前开启和建立性周期的时间提前,子宫和卵巢的重量明显增加,下丘脑GnRH mRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达升高.结论达那唑对雌性大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴有多层次的作用,可诱导雌性大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的功能提前启动.
作者：田占庄；赵宏；陈伯英 刊期： 2003年第05期
作者： 刊期： 2003年第05期
探讨去卵巢(OVX)、去松果体(PX)对大鼠扣带回细胞凋亡的影响.结果提示OVX、PX可诱发扣带回细胞凋亡,OVX、PX和OVX+PX 3组细胞凋亡依次显著增高;这种影响与胶质细胞无关.
作者：李岩；陈俊抛；沈君；孙荣；孔庆胜 刊期： 2003年第05期
在去卵巢大鼠,以雷洛昔芬,利维爱和依扑拉芬处理60天后结果显示,3种药物均有减少骨丢失和改善血脂的作用.
作者：黄德芳；陈高翔；高玉芬；朱明月；吴志兰；华文进；胡玲卿；张中军；何戎华 刊期： 2003年第05期
目的了解女性腰椎骨骼大小对峰值骨密度(BMD)的影响.方法采用QDR-4500A型扇形束DXA骨密度仪,测量527例年龄25～39岁健康女性前后位(正位AP)腰椎1～4椎体和侧位(Lat)腰椎2～4椎体的投射骨面积(BA)、骨矿含量(BMC)和面积BMD(aBMD)及AP/Lat相伴扫描测量腰椎的体积BMD(vBMD).用直线和多元线性回归分析骨量与BA、身高和体重之间的关系.按不同BA分组,了解各组之间骨量的差异.结果 BA与BMC(r=0.79和0.78,均P＜0.01)和aBMD(r=0.40和0.38,均P＜0.001)呈正相关,Lat-BA与vBMD相关有显著意义(r=0.14,P＜0.01).AP-BA每变化1个标准差,AP-BMC和AP-aBMD在平均值的基础上分别相应变化13.1%和4.47%;Lat-BA每变化1个标准差,Lat-BMC、Lat-aBMD和vBMD在平均值的基础上分别相应变化13.3%、4.4%和1.5%;AP-BA的全距变化所致AP-BMC和AP-aBMD的变化分别约为78.6%和26.8%,Lat-BA的全距变化所致Lat-BMC、Lat-aBMD和vBMD的变化分别约为79.8%、26.3%和8.94%.不同BA组之间的身高、体重、BMC和aBMD均具有非常显著性意义(均P＜0.001).影响BA、BMC和Lat-aBMD的主要因素为身高,影响AP-aBMD的主要因素为体重.结论 BMC除以BA不能完全消除骨骼大小对aBMD的影响,aBMD明显地随骨骼大小而变化.
作者：伍贤平；廖二元；黄干；戴如春；张红；彭健 刊期： 2003年第05期
25例甲状腺功能亢进(甲亢)伴腹泻和14例甲状腺功能减退(甲减)伴便秘患者的直肠肛门生理功能测定显示,甲亢患者肛管静息压和收缩压,排便初始感觉阈值和大直肠耐受容量明显低于21例正常对照组者.甲减患者这些测定值与对照组差异无显著性.
作者：邢惠莉；刘清华；周惠清 刊期： 2003年第05期
中华内分泌代谢杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
