王凯；范晓鹏；李新文；林亚杰
用原位杂交技术检测组织细胞中mRNA的表达,实验条件要求较高,同时原位杂交实验也受到组织取材难的限制,因此检测组织细胞mRNA的原位杂交实验很难广泛应用于临床研究.外周血是了解疾病的窗口,取材容易,我们针对特定信息分子mRNA的表达,进行了外周血白细胞原位杂交实验方法的探索.通过反复实验,改良了原位杂交流程,使检测方法取得了成功.
作者：李瑞峰；魏树珍；陈融；郭成浩；陈福琴；李莉；邴鲁军 刊期： 2002年第03期
目的:研究HBV X基因区关键区段的反义寡核苷酸(asON)对人肝癌裸小鼠模型的抑瘤生长及体内抗HBV作用.方法:PCR法分别合成了互补于HBV X基因的翻译起始区Xp、DR2、ENⅡ区的反义寡核苷酸及无关对照序列,进行硫代化修饰,以HBV DNA转染的HepG2.2.15细胞接种裸小鼠,24 h内同部位一次性用药100 μg,观察并比较3种反义硫代寡核苷酸的体内抑瘤作用.ELLSA法检测反义核酸作用裸小鼠血清中HBsAg和HBeAg含量的变化.结果:3种药物作用裸小鼠组均表现为出瘤潜伏期延长,出瘤率明显低于未用药瘤细胞对照组(P<0.05),且瘤体生长缓慢.互补于Xp、DR2、ENⅡ区的反义寡核苷酸一次性给药方式对荷瘤鼠HBsAg和HBeAg的表达无明显抑制作用;无关序列不影响荷瘤鼠瘤体生长及HBV抗原表达.结论:针对HBV X基因区关键部位的反义寡核苷酸可抑制荷瘤裸小鼠人肝癌的生长,为HBV相关肝细胞癌的基因治疗提供实验依据.
作者：曹英林；刘素侠；张利宁；马春红；丁培芳；孙汶生；丁红转 刊期： 2002年第03期
目的:观察针对乙型肝炎病毒(HBV)PreS2基因特异性反义寡核苷酸(asON)对转基因细胞HepG2.2.15表面的人类白细胞I类抗原(HLA-I)基因表达的影响.方法:设计合成互补于HBV PreS2翻译起始区的反义寡核苷酸即序列I ,并设非互补序列作对照即序列II,免疫细胞化学染色观察asON对HepG2.2.15表面表达的HLA-I类抗原的影响,用ELISA法动态检测细胞上清液中HBsAg和HBeAg的变化, 放射免疫测定法检测asON对宿主细胞自身分泌蛋白-血清铁蛋白的影响.结果:HepG2.2.15细胞表面HLA-I类抗原表达降低 ,用药组和对照组相比有统计学意义(P<0.05).asON能够抑制HBV表达HBsAg和HBeAg ,对HBsAg和HBeAg的抑制率分别为66%和91% ,而序列II对HBsAg和HBeAg的抑制率均为11% .asON对宿主细胞自身分泌蛋白无影响,即对宿主细胞无毒性作用.结论:asON以序列特异性方式抑制HBV基因表达而对宿主细胞无毒性作用,HLA-I类抗原表达降低,这对减轻过度炎症反应,阻止慢性肝炎至重症肝炎的发生具有重要意义.
作者：丁培芳；孙汶生；王勤友；马春红；蒋保云；曹英林 刊期： 2002年第03期
隐孢子虫(cryptosporidium)是一种新发现的引起婴幼儿腹泻的重要病原体,在免疫功能低下或缺陷者更易致严重腹泻.近年来发现的病例日趋增多[1] ,国内试用大蒜素治疗该病效果较好[2].为了解大蒜素对隐孢子虫的作用机制,我们观察大蒜素对小白鼠巨噬细胞免疫吞噬功能的影响.
作者：刘锦华；陈秀春；周世昌 刊期： 2002年第03期
目的:研究盐酸异丙嗪对小鼠胚植入的影响.方法:取孕3～7 d小鼠,每天上午10时腹腔注射盐酸异丙嗪溶液;另取孕4 d小鼠,于上午10时子宫角注入盐酸异丙嗪溶液,对照组同时用同法注射生理盐水0.2 ml.于孕8d检查胚胎植入数,同时,取子宫观察内膜的组织学及免疫组织化学变化.结果:腹腔2 mg药物注射组抗植入率达100%,腹腔1mg药物组的抗植入率为75%,子宫角药物注入组抗植入率达75%,均明显少于对照组.组织学及免疫组化结果表明,盐酸异丙嗪可引起蜕膜细胞退化、解体,使蜕膜细胞不能正常形成纤维粘连蛋白(FN)和层粘连蛋白(LN).结论:盐酸异丙嗪对小鼠有明显的抗植入作用.
作者：武玉玲；邴鲁军；王富武；卢桂兰；宋卫华 刊期： 2002年第03期
1970年9月～1991年12月,我科共收治腮腺低度分化粘液表皮样癌67例,所有病例均有病理诊断,进行回顾性分析,着重分析讨论了影响其预后的各种因素,现将该组病例的临床治疗情况和远期疗效报道如下.
作者：王靖虓；李文峰 刊期： 2002年第03期
原发性颅底凹陷症是指枕骨大孔周围骨向颅内陷入的畸形,多表现为枕骨髁和斜坡向颅内陷入[1], 探讨该症的影像学特征和适宜的检查手段,对提高诊断和指导治疗很有价值.
作者：胡令安；陈颉；卢春山；巩若箴 刊期： 2002年第03期
目的:探讨凝血因子V 基因G1691A突变(Leiden 突变)和凝血酶原基因G20210A突变与下肢深静脉血栓形成的关系.方法:采用PCR---RFLP技术对86例下肢深静脉血栓形成患者和100例正常对照的健康人群进行凝血因子 V 基因G1691A突变和凝血酶原基因G20210A突变检测.结果:86例下肢深静脉血栓形成患者和100例正常对照组中均未检出凝血因子V基因 G1691A突变和凝血酶原基因G20210A突变.结论:凝血因子V基因G1691A突变和凝血酶原基因G20210A突变可能不是中国汉族人群下肢深静脉血栓形成的主要风险因子.
作者：郭辰虹；郭琼行；龚瑶琴；陈丙玺；常宏；周海斌 刊期： 2002年第03期
目的:探讨大蒜素对恶性肿瘤患者淋巴细胞免疫功能的影响.方法:恶性肿瘤患者每人每次口服大蒜素30 mg,每日3次,连续服用,半年取其他化、放疗,用硷性磷酸酶-抗硷性磷酸酶(APAAP)法检测30例恶性肿瘤患者服用大蒜素前、后1、2、3月及30例正常对照组的淋巴细胞免疫功能.结果:恶性肿瘤患者淋巴细胞免疫功能显著低于对照组(P<0.05),服用大蒜素后淋巴细胞免疫功能接近或高于对照组.结论:大蒜素能提高恶性肿瘤患者的淋巴细胞免疫功能.
作者：张志勉；高海青；王德斌；时庆 刊期： 2002年第03期
目的:检测血管内皮生长因子C(VEGF-C) mRNA在人乳腺癌细胞株MDA-MB-231及MCF-7中的定位、定量表达. 方法: 根据VEGF-C 基因序列,设计合成地高辛标记的特异性寡核苷酸探针,运用原位杂交方法检测培养的细胞株MDA-MB-231及 MCF-7中VEGF-C mRNA 的定位表达;并运用半定量RT-PCR方法检测了两种细胞中VEGF-C相对于看家基因β-肌动蛋白(β-actin)的表达水平. 结果: 原位杂交检测到MDA-MB-231及 MCF-7细胞的胞浆中有阳性蓝色颗粒,而阴性对照细胞的胞浆中则均无阳性颗粒;半定量RT-PCR检测到两种细胞中VEGF-C基因均以较高水平表达,相对β-actin的表达水平分别为0.89和0.68. 结论: 人乳腺癌细胞株MDA-MB-231及 MCF-7细胞能够以较高水平转录VEGF-C mRNA.
作者：高杰；刘执玉；毕玉顺；田铧 刊期： 2002年第03期
自Porstmann等应用Ivalon海绵塞子堵闭动脉导管未闭(PDA)获得成功以来,应用介入疗法堵闭PDA技术已在国内外广泛开展,如Rashkind等型堵闭器、Sideris纽扣式补片、弹簧圈、Amplatazer蘑菇伞等.治疗效果良好,术后残余分流也多在1～3个月后消失,但术后可发生急性溶血常需紧急外科手术或第2次行介入弹簧圈堵闭术[1].我们于2001年5～7月,对采用Amplatzer房间隔堵闭器堵闭巨大PDA术后急性溶血的 2例患者,进行积极的内科处理,取得了良好的治疗效果,现报告如下.
作者：王一彪；郝芳之；张兆华；王振先 刊期： 2002年第03期
目的:观察关节腔内注射透明质酸钠( HA)对滑膜切除术所致兔膝关节软骨退行性病变的抑制作用.方法:行兔双侧膝关节滑膜切除术后,左膝关节腔内注射1% HA溶液0.4 ml, 每周1次,对侧注入同体积生理盐水为对照.分别于术后3周(组Ⅰ)和6周(组Ⅱ)处死动物,取股骨下端和胫骨上端关节面软骨进行组织学检查,对软骨的结构、细胞、基质的着色性、潮线的完整以及血管翳生成等指标进行观察并按分级进行评价.结果:Ⅰ组HA处理膝股骨下端和胫骨上端的病变发生率较对照组均明显低(50% vs 83.3%,33.3% vs 83.3%,P<0.05),病变程度也较对照组明显轻,组织学评分(4.1 vs 8.4, 5.3 vs 10.9, P<0.01);Ⅱ组的结果也表明HA处理膝的病变发生率和病变程度,股骨下端(58.3% vs 100%,5.3 vs 10.9)、胫骨上端(41.7% vs 91.7% 3.1 vs 7.5 ),股骨下端,胫骨上端明显低于对照组.结论:1%HA溶液关节腔内注射可抑制滑膜切除术导致的软骨退行性病变,对关节软骨具有保护作用.
作者：王韶进；戴国锋；王永成；贺艳丽；汤继文 刊期： 2002年第03期
我们采用4种磁共振成像(magnetic resonance imaging, MRI)方法对30例子宫腺肌病患者进行术前检查,分别将4种方法的MRI与病理结果相对照,分析子宫腺肌病在不同技术MRI中的表现特点,探讨4种MRI方法在子宫腺肌病诊断中的价值.
作者：侯金文；程华；孟祥水；李传福 刊期： 2002年第03期
目的:探讨小气道病变与病理关系.方法:86例肺部局限性病变患者,依据术前的病史和肺功能分为3组.正常组30例,小气道病变组34例,慢性阻塞性肺疾病(COPD)组22例.利用手术的肺标本HE染色探讨其病理学特点并与临床资料比较.结果:小气道病变组炎性细胞浸润、平滑肌肥厚积分明显高于正常组;小气道病变组及COPD组气道粘膜层淋巴细胞数明显高于对照组;小气道病变组结缔组织增生、平滑肌肥厚积分与 50 、 25 显著负相关;COPD组炎性细胞浸润与FEV1.0及 50 显著负相关.结论:小气道病变病理改变主要为炎性细胞浸润及平滑肌肥厚,而炎性细胞以淋巴细胞为主;小气道病变功能异常与气道重建有关.
作者：李玉；姜明；薛玉文；王玲；许仁和 刊期： 2002年第03期
目的:研究叶绿素衍生物(CPD4)光动力学疗法(PDT)对人卵巢癌细胞、肝癌细胞、胆囊癌细胞的体外杀伤效应.方法:应用MTT比色分析法研究PDT-CPD4对人卵巢癌细胞(3AO)、肝癌细胞(HCC)、胆囊癌细胞(GBC-SD)的光动力杀伤效应.结果:PDT对人卵巢癌细胞、肝癌细胞、胆囊癌细胞杀伤效应明显,CPD4的光动力学杀伤效应与药物浓度呈正相关,并与激光能量有关.结论:光动力学疗法对人卵巢癌细胞、肝癌细胞、胆囊癌细胞有明显杀伤效应,且与激光能量、药物浓度有关.
作者：魏薇；张友忠；孔北华；江森 刊期： 2002年第03期
目的:构建一种廉价高效的防治宫颈癌的人乳头瘤病毒新型双启动子DNA疫苗.方法:设计合成细菌厌氧诱导启动子Nir,含有FNR顺式反应元件、RBS和真核基因Kozak元件,插入pTriEx真核启动子CMV IE 下游,构建pCMVnir双启动子载体.将人乳头瘤病毒16型L1L7,融合基因,插入pCMVnir,制备pCMVnirL1E7,转化减毒沙门氏细菌SL3261,厌氧诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析检测Nir启动子的活性.结果:经DNA序列和限制性内切酶鉴定分析,成功构建了HPV双启动子DNA疫苗载体pCMVnirL1E7,转化沙门氏细菌SL3261,厌氧条件下可诱导表达HPVL1E7蛋白质.结论:成功构建了一种与胞内寄生细菌(减毒沙门氏细菌)匹配的双启动子DNA疫苗新型载体,并构建了HPV16pCMVnirL1E7新型DNA疫苗.
作者：卞继峰；于修平；赵蔚明；耿昭；杨海宁；于瑾；李静；胡海燕；卢翌；张茂修；姜广水 刊期： 2002年第03期
目的:构建含B7-2基因片段的克隆载体pGEM-B7-2和表达载体pLSN-B7-2.方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法从人类慢性淋巴细胞白血病Raji细胞株中扩增到人B7-2cDNA基因片段,并经回收纯化酶切后,分别连接到质粒pGEM-Teasy 和pLXSN上.结果:琼脂糖凝胶电泳及序列测定证实,扩增的B7-2cDNA片段的碱基组成与Genebank提供的人B7-2cDNA的基因组成相同.结论:酶切证实成功构建得了克隆载体pGEM-B7-2和表达载体pLSN-B7-2,为将B7-2基因转导到肿瘤细胞制备肿瘤疫苗以及研究免疫细胞间相互作用、肿瘤细胞逃避免疫监视的机制奠定了基础.
作者：秦雪梅；徐从高；张茂宏；刘春生 刊期： 2002年第03期
利巴韦林(ribavirin)为广谱抗病毒药物,在临床上有广泛应用.利巴韦林喷雾剂是以新型喷雾瓶为包装材料的灭菌水溶液.利巴韦林含量测定有比色法[1]、高效液相色谱法[2,3]等,本文采用紫外分光光计的多成分测定功能,可同时测定制剂中利巴韦林及抑菌剂尼泊金乙酯的含量(本文仅报告利巴韦林的含量测定结果),该法简便、快速、结果准确.
作者：程秀民；高彦慧；任建 刊期： 2002年第03期
目的: 观察3种人工角膜支架材料在动物体内的生物学反应.方法: 将多孔材料、Polyester材料和膨体聚四氟乙烯三种材料切成直径6 mm的圆盘状.分为处理组和对照组.处理组的材料经氩等离子体处理.把42只新西兰大白兔分为7组, 每组6只兔, 3组为实验组,3组为对照组,1组为手术对照组.将盘状支架材料手术植入角膜板层囊袋内.术后第42、84天取角膜进行角膜组织学及生物化学分析.结果: 材料处理组角膜水肿明显减轻,8周后3种材料中角膜水肿均消失.多孔材料和polyester材料植入后新生血管出现延迟, 范围较小,炎细胞浸润也明显减少.术后6周纤维细胞迁徙材料内, 术后12周空腔填充大量纤维细胞,材料的厚度明显增加.同时葡萄糖氨基聚糖分析发现,Keratin Sulfate (KS)含量降低,Dermatin Sulfate(DS)含量增高,并有大分子葡萄糖氨基聚糖出现.材料处理与否不影响胶原蛋白及葡萄糖氨基聚糖的沉积.结论: 支架材料经氩等离子体处理可明显减轻角膜炎症反应,增加材料内间质蛋白的沉积,增加材料的组织相容性.
作者：吴欣怡；乔智；李淑卿 刊期： 2002年第03期
目的:研究以羟丙甲基纤维素(HPMC)为骨架材料制备羟甲基烟酰胺(Ⅰ)缓释片及其体外释药特性.方法:湿法制粒法制备缓释片,以正交实验设计考察HPMC用量、粘度及粘合剂种类对药物体外释放速率的影响.结果:该缓释片药物的体外释放行为符合Higuchi方程;粘合剂种类和HPMC用量对该缓释片的释药速率有显著性影响.结论:HPMC Ⅰ缓释片体外释药符合设计要求.
作者：臧恒昌；翟光喜；任冉 刊期： 2002年第03期
山东大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：山东大学
