马向东;隋延仿;王文亮;王春梅
目的:研究建立稳定高表达绿色荧光蛋白(GFP)并能连续传代培养的肝癌细胞株.方法:将携带GFP cDM的重组逆转录病毒载体转染肝癌细胞株7721,经过G418筛选和克隆化培养,用荧光显微镜检测癌细胞荧光表达.结果:转染GFPcDNA的癌细胞5d后大部分死亡,荧光显微镜下有散在或小团状的点状荧光.继续用G418筛选及克隆化培养65d后第28培养孔的癌细胞几乎均见荧光表达并可连续稳定传至15代以上的培养.结论:GFP 是较好的细胞报告基团,肝癌7721-GFP细胞株的建立有助于观察和了解肿瘤侵袭和转移发生及其规律.
作者:王一;宝建中;杨秀疆;张秀忠;丛文铭 刊期: 2000年第01期
目的:研究吉西他滨(健择,GEM)与顺铂(DDP)联合化疗方案治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的临床疗效、生存期及毒副反应.方法:入选病人均为Ⅲ、Ⅳ期非小细胞肺癌.GEM1000mg/m2 d1,8,15,顺铂100mg/m2 d1,28d为1个疗程.结果:16例可评价病人,总有效率56.25%(均为部分缓解).主要毒副反应为血液学毒性,Ⅲ-Ⅳ度血色素降低周期数占26.0%,粒细胞减少周期数占25.4%,血小板减少周期数占32.7%.非血液学毒性轻微均可耐受.因毒性反应而延期化疗者仅10.9%,生存质量改善,Kamofsky计分增加者占43.7%(7例/16例),中位缓解期8月,中位生存期因时间尚短未能统计出.结论:GEM与DDP联合化疗方案治疗NSCLC有较好疗效,耐受性较好,值得进一步研究推广.
作者:方健;刘叙仪 刊期: 2000年第01期
支气管动脉灌注术(bronchial artery infusion,BAI)是指经皮股动脉穿刺,将导管插入支气管动脉,直接向病变部位选择性灌注化疗药物而治疗肺癌的新技术[1].近年来,该技术在国内逐渐受到重视并应用于临床[2].我院1990年12月-1998年3月对30例患者进行90次BAI,疗效满意.
作者:郭莲香;任淑芳;许秀玲;杨永国;安宏 刊期: 2000年第01期
目的:研究48例Ⅰ期非小细胞肺癌(NSCLC)p53蛋白的表达,试图为早期肺癌找到灵敏、特异的指标,以指导术后治疗.方法:收集手术后原发灶的石腊标本及其临床、随访资料,以p53单抗为探针,采用免疫组化S-P(streptavidin-peroxidase)法检测原发灶p53蛋白的表达.结果:48例Ⅰ期NSCLC患者中23例(47.9%)阳性,p53(+)组五年生存率为30.4%(7/23),p53(-)组为72.0%(18/25),χ2检验P<0.01,生存分析log-rank检验P<0.01;无病生存期明确的37例患者中p53(+)组无病生存率为40.0%(6/15),p53(-)组无病生存率为77.3%(17/22),χ2检验P<0.05,生存分析log-rank检验P<0.05.结论:p53(+)组的生存期及无病生存期均明显短于p53(-)组.免疫组化法检测Ⅰ期NSCLC患者原发灶p53蛋白表达具有临床实用价值.
作者:申戈;鲍云华;李国民;吴进冬 刊期: 2000年第01期
目的:研究端粒酶与肾细胞癌发生发展的关系.方法:应用TRAP(telomeric repeat amplification protocol)方法,对20例肾细胞癌病人术后标本中的肾病组织及癌旁正常肾组织进行研究.结果:20例肾癌组织中有14例癌组织(70.0%)端粒酶表达阳性,20例癌旁正常组织无一例组织端粒酶表达阳性.20例肾癌样本中,9例T1期中有4例(44.4%)端粒酶表达阳性;11例T2、T3期中10例(90.9%)端粒酶表达阳性.20例肾癌样本中Ⅰ、Ⅱ级共10例,其中4例(40.0%)端粒酶表达阳性;Ⅲ、Ⅳ级有10例,都表达为端粒酶阳性(100%).肾细胞癌组织端粒酶活性的阳性率明显高于癌旁正常组织,且端粒酶的活性与肾细胞癌的病理分级与临床分期具有正相关关系.结论:端粒酶的活性与肾细胞癌的恶性程度及浸润能力具有相关关系,是判断肾细胞癌预后的有价值的指标.
作者:胡震;张永康;朱同玉;王国民;史留生;李小秋 刊期: 2000年第01期
目的:研究bcl-2、bax基因蛋白在乳腺浸润性导管癌中表达的相关性及和预后的关系.方法:应用免疫组织化学ABC法检测乳腺浸润性导管癌组织bcl-2、bax基因蛋白的表达.结果:存活组bcl-2基因蛋白阳性表达率(46/65)明显高于死亡组的bcl-2阳性表达率(12/35),且bcl-2基因蛋白表达与淋巴结转移和临床分期呈负相关关系;而bax在死亡组的阳性率(31/35)显著高于存活组(26/65),与淋巴结转移和临床分期呈正相关关系;bcl-2(+)bax (-)组的存活率(25/26)较bcl-2(-)bax(+)组存活率(5/25)相差有显著性.bcl-2/bax≥1组的存活率(55/68)较bcl-2/bax<1组存活率(10/32)高,相差有显著性意义.结论:bcl-2、bax基因蛋白表达对于估测患者预后有重要意义.
作者:石林祥;童孩宝;贺健;王龙;张宛;徐蕾;叶世会 刊期: 2000年第01期
目的:研究CT引导下经皮肝穿刺注射无水乙醇配合肝动脉化疗栓塞术治疗原发性肝癌的疗效.方法:对68例肝癌进行肝动脉化疗栓塞术和CT引导下经皮肝穿刺注射无水乙醇治疗,并与同期53例单纯肝动脉化疗栓塞术组(对照组)比较疗效.结果:治疗组的肿瘤缩小率,AFP下降,累计生存率及局部复发率明显优于对照组.结论:CT引导下经皮肝穿刺注射无水乙醇配合肝动脉化疗栓塞术为肝癌较好的一种综合治疗方法.
作者:黄兢姚;杨维竹;江娜;郑曲彬;杨升;黄宁 刊期: 2000年第01期
异环磷酰胺(ifosphamide,IFO)为环磷酰胺的同分异构体,但抗瘤谱不同,具有广泛抗肿瘤活性.我院自1996年以来,使用连云港制药厂生产的国产IFO(商品名:匹服平)为主联合化疗方案治疗晚期恶性肿瘤共63例,疗效较好.
作者:陈继跃;张洪钦;矫立仁 刊期: 2000年第01期
目的:研究大肠恶性肿瘤的转移相关基因血管内皮细胞生长因子(VEGF)和CD44粘附分子的表达及其临床意义.方法:应用逆转录-聚合酶链反应(BT-PCR)方法检测1997年12月-1998年5月间收治的21例大肠恶性肿瘤.其中19例为大肠癌,1例为平滑肌肉瘤,1例为转移性腺样囊腺癌.大肠癌Dukes分期为B期6例,C期9例及D期4例.上述标本采用BT-PCR方法检测各类基因的mRNA表达.结果:大肠恶性肿瘤VEGF阳性表达10例,另11例为阴性结果.而CD44阳性表达8例,另13例为阴性.大肠癌的不同分期与VEGF和CD44表达稍有不同,但两者随肿瘤分期的进展而呈现阳性结果增高.结论:转移基因的VEGF和CD44表达,在大肠癌的生物学及临床分期研究中可作为判别指标.
作者:师英强;郑颂国;罗建民;沈兆忠;莫善兢 刊期: 2000年第01期
目的:研究胶质瘤中朊病毒蛋白(PrP)表达的生物学意义.方法:采用免疫组织化学和图像分析技术,对45例胶质瘤中PrP和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达进行定量研究和相关性分析.结果:PrP和PCNA在各级胶质瘤中均有不同程度的表达,Ⅰ-Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级阳性细胞吸光度分别为10±3.7、21±6.8、24±6.5和12±4.0、29±7.2、34±7.9,除Ⅲ级与Ⅳ间无显著性差异外(P>0.05),Ⅰ-Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级阳性细胞吸光度分别为10±3.7、21±6.8、24±6.5和12±4.0、29±7.2、34±7.9,除Ⅲ级与Ⅳ级间无显著性差异外(P>0.05),Ⅰ-Ⅱ级与Ⅲ级、Ⅳ级间比较均具有显著性差异(P<0.05),PrP表达的程度与胶质瘤的分化程度呈负相关,与PCNA的表达呈正相关(r=0.73、P<0.001).结论:PrP在判断胶质瘤组织学分级和预后上有较重要的使用价值.
作者:易祥华;吴克兰;罗本芳;张容轩;刘绍春 刊期: 2000年第01期
目的:探讨血浆同型半浆胱氨酸和血清叶酸水平与妇科肿瘤病人的关系.方法:采用高效液相色谱荧光检测仪测定77名妇科肿瘤患者血浆中同型半胱氨酸水平,同时应用96孔板微生物法测定肿瘤患者血清叶酸水平,其中子宫恶性肿瘤18,卵巢恶性肿瘤11例,子宫良性肿瘤26例,卵巢良性肿瘤14例,子宫内膜及宫颈癌前病变8例.并同时测定20名正常人的血浆同型半胱氨酸和血清叶酸水平作为对照.结果:卵巢和子宫的恶性与良性肿瘤者的同型半胱氨酸水平显著升高,与对照组相比差异显著(P<0.01).其血清叶酸水平显著低于对照组(P<0.01).卵巢恶性肿瘤组血浆同型半胱氨酸值与卵巢良性肿瘤组相比差异有显著意义(P<0.01).结论:测定血浆同型半胱氨酸和血清叶酸水平对诊断妇科恶性肿瘤有一定帮助,若与其他测定方法联合应用,可进一步提高诊断的准确性.
作者:许吉;徐惠民;王毓明;皇甫照;李明珍 刊期: 2000年第01期
目的:研究构建重组单链免疫毒素,对人体肿瘤进行导向治疗.方法:采用PCR方法从克隆化载体中拉出蓖麻毒素A链(ricin A)基因,装入经过改建的pTSA-18F表达载体,进行目的基因DNA序列分析后导人E.coli BL21(DE3)中进行表达,表达产物进行SDS-PAGE和Western blot检查,表达产物的生物活性通过RNA N-糖苷酶活性检查、无细胞体系中对蛋白质生物合成的抑制以及对肿瘤细胞的毒性作用来分析.结果:SDS-PAGE检查表明,转化子E.coli BL21(DE3)(pTSRA)中出现1条Mr约30×103大小、较空载体对照E.coli BL21(DE3)(pTS)明显浓黑的条带;Western blot检查表明,转化子E.coli BL21(DE3)(pTSRA)中有杂交条带出现,而E.coli BL21(DE3)(pTS)中没有;表达蓖麻毒素A链蛋白能够特异地作用于大鼠肝28S核糖体RNA,使其产生约450 nt大小的核酸片段;对无细胞体系中蛋白质生物合成的IC50为3.7×10-9mol/L,略高于天然蓖麻毒蛋白;具有与天然蓖麻毒蛋白相近的肿瘤细胞毒性.结论:蓖麻毒素A链基因在转化子E.coli BL21(DE3)(pTSRA)中获得表达,表达产物具有与天然蓖麻毒蛋白相近的RNA N-糖苷酶活性,在无细胞体系中对蛋白质生物合成具有抑制作用,对肿瘤细胞SPC具有毒性作用.
作者:乔生军;莫忠根;林琳 刊期: 2000年第01期
目的:研究三环类抗抑郁药地昔帕明(DMI)对脑胶质瘤C6细胞增殖的调控作用,并探讨与临床常用治疗脑瘤的化疗药物替尼泊苷(VM-26)合用的协同效应.方法:采用MTT比色法测定大鼠脑胶质瘤C6细胞增殖抑制作用和流式细胞术(FCM)进行细胞周期分析.结果:DMI(10-80μmol/L)对C6细胞的增殖具有明显的抑制作用,呈浓度时间依赖关系,药物作用24h的IC50(95%置信区间)为20.7(17.3-24.2)μmol/L.DMI(20μmol/L)可使G0-G1期细胞增加(P<0.05)而S期细胞减少(P<0.晒),G2期细胞则无改变.不同浓度DMI和VM-26合用显示明显协同效应(Q=0.72).结论:DMI体外对C6细胞增殖具有浓度时间依赖性抑制作用,使细胞阻滞于G0-G1期;与VM-26合用呈协同效应.
作者:祁红;陈红专;冯菊妹;金正均 刊期: 2000年第01期
目的:研究间隙连接蛋白Cx32、Cx43在肝癌细胞系HHCC、SMMC-7721及正常肝细胞系QZG中的表达.方法:采用免疫荧光标记技术,对HHCC、SMMC-7721及QZG细胞中Cx32、Cx43蛋白进行激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)分析.结果:Cx2、Cx43蛋白定位于肝细胞胞质中,在HHCC、SMMC-7721中阳性细胞率、阳性细胞的荧光强度较QZG中明显减弱.结论:Cx32、Cx43蛋白表达降低可能与肝细胞癌的发生有关.
作者:马向东;隋延仿;王文亮;王春梅 刊期: 2000年第01期
目的:研究人乳腺癌中p16基因mRNA及其编码蛋白的表达水平与肿瘤发生和预后的相关性.方法:采用免疫组化和原位杂交方法分别对U例乳腺良性肿瘤和59例乳腺癌中的p16基因及其编码蛋白进行检测.结果:p16基因蛋白表达水平与乳腺肿瘤的良、恶性显著相关(P<0.05);p16基因mRNA及其蛋白表达水平与乳腺癌的腋窝淋巴结转移呈显著负相关(P<0.05),而与乳腺癌的术后生存期呈显著正相关(P<0.05);且免疫组化和原位杂交两种检测方法的结果呈显著关联(P<0.01).结论:p16基因蛋白低表达与乳腺癌的发生有关;p16基因mR-NA及其蛋白表达水平均可作为估价乳腺癌预后的重要指标.
作者:郑建明;范决;詹溶洲;龚志锦;马大烈 刊期: 2000年第01期
人类细胞线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)是一具有16569个碱基对的双链闭环分子,它包含22个tRNA和2个rRNA基因,并编码13个有关细胞线粒体氧化磷酸化的蛋白多肽.与核DNA相比,mtDNA分子更容易受致癌物的损伤.提示细胞质遗传与核遗传系统共同参与了细胞癌变过程.本综述重点讨论mtDNA损伤与突变在细胞癌变中的地位和可能的作用机制.
作者:胡义德;钱桂生;郑颂国;曹世龙 刊期: 2000年第01期
目的:研究喉癌变过程中细胞周期蛋白(cyclin)D1和p21WAF1/CIP1表达及其临床病理学意义.方法:用免疫组化检测20例正常黏膜、40例不典型增生病变和60例喉癌组织中cyclinD1和p21WAF1/CIP1的表达.结果:①cyclin D1和p21WAF1/CIP1阳性表达定位于细胞核.②在喉癌癌变过程中,喉正常黏膜、不典型增生病变和喉癌中cyclin D1阳性表达率分别为:5.0%(1/20),30,0%(12/40),53.3%(32/60)(P<0.001);p21WAF1/CIP1阳性表达率分别为:95.0%(19/20),75.0%(30/40)和63.3%(38/60)(P<0.05).③p21WAF1/CIP1在高、中和低分化的喉癌中阳性表达率分别为:76.2%(16/21),65.5%(19/29)和30.0%(3/10)(P<0.05);p21WAF1/CIP1阳性表达与肿瘤细胞的分化有关.④cyclin D1和p21WAF1/CIP1阳性表达显著相关.结论:①喉癌癌变过程中cyclin D1阳性表达率呈逐渐升高的趋势,而p21WAF1/CIP1阳性表达率呈呈逐渐降低的趋势.②cyclin D1异常表达是喉癌发生中早期分子事件.③p21WAF1/CIP1表达与喉癌细胞分化程度有关.④cyclin D1和p21WAF1/CIP1阳性表达显著相关.
作者:王建波;王金泉;娄卫华;董明敏 刊期: 2000年第01期
目的:研究抑癌基因p16/MTS1基因失活与肺癌发生发展的关系.方法:采用双重PCR和免疫组化技术分析48例原发性非小细胞肺癌中p16基因存在状态.结果:25例p16蛋白表达阴性(52.1%),其中14例p16基因第二外显子缺失.有淋巴结转移者和无淋巴结转移者的P16蛋白表达阴性率有显著性差异.p16基因缺失率亦如此.肺鳞癌中p16蛋白表达阴性率显著高于腺癌.结论:p16基因存在状态与非小细胞肺癌的病理组织学分型有关,p16基因失科学研究与肺癌淋巴结转移有关.
作者:石永玉;孟红;魏海明;李焱;秦立增;孙广莲;吴惠联;郭进林 刊期: 2000年第01期
目的:研究抑癌基因位点INK4a-ARF在肺肿瘤细胞中的表达状况,揭示p14ARF和p16INK4a协同表达缺失与肺癌发生发展的相关性.方法:用RT-PCR和Westem blot对6株肺癌细胞(SPC-A-1,Calu-1,H446,SH77,A549,H460)的INK4a-ARF基因位点在mRNA、蛋白质水平上进行检测,对PCR产物进行纯化和测序分析.结果:6株肺癌细胞中,有3株细胞(H460,Calu-1,A549)的p16INK4a基因表达缺失,其中,Calu-1表达正常p14ARF的mRNA,而在H460和H549这两株非小细胞肺癌中,p14ARF和p16INK4a发生协同表达缺失.结论:p14ARF基因与p16INK4a一样,是肺肿瘤细胞中的失活靶点之一.揭示了p14ARF缺失导致p53保护机制失效与肺癌的相关性.
作者:高楠;胡义德;周决;曹晓运;曹世龙 刊期: 2000年第01期
目的:研究来自10个家族性多发性肠息肉症(FAP)患者14个腺瘤的早期分子病理学变化.方法:将腱生蛋白(tenascin,TN)阳性单个腺体经微解剖分离得DNA,分析肿瘤相关基因位点的变化.结果:2例患者的TN阳性腺体分别出现5q12及18q12位点的杂合性丢失(LOH).5q12位点的LOH在所有TN阳性腺体分别出现5q12及18q12位点的杂合性丢失(LOH).5q12位点的LOH在所有TN阳性染色腺体中呈遗传均一性,而18q12位点LOH表现为遗传不均一性.18q12处的缺失证实至少覆盖6×10-6m(2 cM).结论:15q12和18q12位点LOH为早期分子生物学变化,可早于DCC的变化.TN染色可反映不典型增生病变,与分子生物学手段结合可检测肿瘤早期分子遗传学变化.
作者:孙孟红;Johannes GEBERT;Stefan RIEDL;Magnus von KNEBEL-DOEBERITZ 刊期: 2000年第01期