学术投稿

MTT法应用于肝癌化学免疫治疗敏感性研究

姜圣亮;朱上林;王天翔;项明;林言箴

关键词:肿瘤细胞, 培养的, 肿瘤浸润淋巴细胞(TIL), MTT比色法, 药物疗法, 免疫疗法
摘要:目的 探讨MTT法应用于肝癌细胞化疗敏感性检测及化疗与免疫治疗的合理应用。方法 应用MTT法检测肝癌细胞的化疗敏感性和化疗对肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的毒性。结果 肝癌细胞和TIL细胞数增多与生成的甲(formazan)的光密度(OD)值呈线性正相关。TIL在体外对自体肝癌细胞显示高活性的细胞毒作用。肝癌细胞对化疗药物的敏感性存在较大的个体差异。化疗药物对TIL的毒性作用大于对肝癌细胞的杀伤作用。结论 以MTT法作肝癌细胞化疗敏感性检测,既可指导临床选用肿瘤敏感性化疗药物,又可避免盲目选用肿瘤非敏感性化疗药物对机体抗肿瘤免疫细胞的毒性;TIL过继免疫治疗与化疗不宜同时应用。
肿瘤杂志相关文献
  • 同种异体脱钙骨移植修复下颌骨缺损的临床研究

    目的 应用同种异体脱钙骨移植,修复因肿瘤/瘤样病变切除后的下颌骨缺损,并研究其临床适应征、方法和要求。方法 异体脱钙下颌骨按Urist氏法制备成部分脱钙骨,术中即刻植入,截骨端采用钛板或钢丝结扎固定。结果 16例中14例获得成功,宿主接受脱钙骨移植术后3~5天,术区明显肿胀、渗出、体温达39℃,7~10天恢复正常。术后3~6月X线摄片移植骨与宿主骨界面模糊,有骨痂形成。随访颌面外形、下颌运动、咬牙 合关系,张口度恢复正常。结论 经脱钙处理的异体下颌骨免疫反应轻,形态自然,成形方便,有较好的机械支撑强度和成骨诱导能力,是修复下颌骨缺损的理想替代材料。

    作者:颜雨春;后军;陈铸石;张令达;张建湘;潘涛;武建潮 刊期: 2001年第01期

  • 异长春花碱加异环磷酰胺加顺铂联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌

    目的 评价异长春花碱加异环磷酰胺加顺铂(NIP)联合方案作为第一线化疗对晚期非小细胞肺癌病人的疗效及毒副作用。方法 化疗方案包括异长春花碱25 mg/m2 20 min静脉输注第1d和第8d,异环磷酰胺1.2 g/m2 3 h静脉输注第1~3 d,美司纳400 mg~800 mg于0、4、8 h静脉推注第1~3 d,顺铂25 mg/m2 2 h静脉输注第1~3 d。每3周重复疗程。结果 共54例病人进入本项研究。51例可评价疗效,54例可评价毒性反应。总缓解率为53 %,3例(6 %)完全缓解,24例(47 %)部分缓解。16例(31 %)肿瘤稳定,8例(16 %)肿瘤发展。中位缓解期7个月,全组中位生存期10个月。本化疗方案的剂量限制毒性为骨髓抑制,其中72 %的病人发生3~4度中性粒细胞下降。结论 NIP是治疗晚期非小细胞肺癌有效的联合化疗方案,毒性反应能够耐受,值得进一步研究。

    作者:吴海鹰;李莹;庞伟华;翟艳辉;杨朝英;黎苗 刊期: 2001年第01期

  • 细胞凋亡检测用于肿瘤细胞株对化疗敏感性的研究

    目的 评价Annexin-V荧光标记FACScan法、TUNEL法细胞凋亡检测在肿瘤细胞株化疗药物敏感性研究中的应用。方法 将DDP、MMC、5-FU、EPI按血浆峰浓度(PPC)、1/10 PPC、1/5 PPC、5 PPC、10 PPC与结肠腺癌LoVo和Ls-174-t细胞温育24及48 h,用FACScan法、TUNEL法检测细胞凋亡,用MTT比色法检测细胞生长抑制率,并提取DNA进行琼脂糖凝胶电泳。结果 LoVo与Ls-174-t细胞经化疗药物诱导48 h后,FACScan检测的细胞凋亡率在PPC时高,TUNEL法检测的凋亡率与MTT法检的细胞增殖抑制率呈正的直线相关(P<0.05)。结论 Annexin-V荧光标记FACScan法检测细胞凋亡既能优选出敏感的药物,又能寻找合适的药物浓度,是目前优选有效化疗药物种类及剂量的一个可探索、选用的方法。

    作者:邢同海;彭志海;裘国强 刊期: 2001年第01期

  • MTT法应用于肝癌化学免疫治疗敏感性研究

    目的 探讨MTT法应用于肝癌细胞化疗敏感性检测及化疗与免疫治疗的合理应用。方法 应用MTT法检测肝癌细胞的化疗敏感性和化疗对肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的毒性。结果 肝癌细胞和TIL细胞数增多与生成的甲(formazan)的光密度(OD)值呈线性正相关。TIL在体外对自体肝癌细胞显示高活性的细胞毒作用。肝癌细胞对化疗药物的敏感性存在较大的个体差异。化疗药物对TIL的毒性作用大于对肝癌细胞的杀伤作用。结论 以MTT法作肝癌细胞化疗敏感性检测,既可指导临床选用肿瘤敏感性化疗药物,又可避免盲目选用肿瘤非敏感性化疗药物对机体抗肿瘤免疫细胞的毒性;TIL过继免疫治疗与化疗不宜同时应用。

    作者:姜圣亮;朱上林;王天翔;项明;林言箴 刊期: 2001年第01期

  • 耐铂卵巢上皮癌VAM联合化疗近期疗效观察

    目的 研究VAM方案作为二线方案治疗耐药卵巢癌的疗效和毒性反应。方法 长春酰胺、阿克拉霉素、丝裂霉素联合应用治疗25例经铂类化疗失败的卵巢癌。结果 完全缓解3例,部分缓解5例,总有效率为32.0%(8/25)。对铂类难治性患者、铂类耐药者和敏感者有效率分别为18.2%、28.6%和57.1%。毒性反应以骨髓抑制为明显,Ⅲ+Ⅳ度白细胞、中性粒细胞和血小板下降分别为40.0%、60.0%和28.0%。胃肠反应、心脏、神经毒性均不严重,脱发占32.0%。结论 VAM方案是当前国内治疗耐铂卵巢癌切实可行的有效方案,值得推广应用。

    作者:汤洁;蔡树模;范建玄 刊期: 2001年第01期

  • 大肠杆菌胞嘧啶脱氨基酶基因联合5-氟胞嘧啶治疗胃癌的实验研究

    目的 观察自杀基因CD对小鼠胃癌的体内外杀伤作用及组织病理变化。方法 应用逆转录病毒方法转导自杀基因CD,通过体外实验观察CD基因对小鼠胃癌MFC细胞的杀伤性和旁观者效应;体内实验中首先在615小鼠建立胃癌模型,然后分组将病毒上清注入瘤体内,并应用前药(5-氟胞嘧啶,5-Fc),观察对肿瘤的杀伤作用及组织病理变化。结果 CD基因在体外即显出明显的杀伤作用,20%的转基因细胞可以杀伤70%~80%以上的肿瘤细胞。体内实验表明CD基因结合前药5-Fc可显著杀伤肿瘤,而单纯转导CD基因或应用5-Fc并不能起到杀伤作用。结论 自杀基因CD联合前药5-Fc对体内外小鼠胃癌细胞产生显著杀伤作用,不仅转基因细胞被杀死,而且通过旁观者效应杀伤大量周围细胞。

    作者:郭善禹;顾琴龙;朱正纲;尹浩然;林言箴 刊期: 2001年第01期

  • 内镜下食管内置入记忆合金网状支架的临床应用

    我们自1999年2月以来,在内镜直视下置入镍钛记忆合金网状支架治疗各类食道狭窄26例,均取得了满意的效果。临床资料  一、一般资料 患者26例,男21例,女5例,年龄41~81岁,平均年龄63.2岁,其中晚期食道癌食道狭窄20例,食道癌术后吻合口瘘1例,吻合口狭窄2例,放射治疗并发食道瘘2例。狭窄部位:上段2例,中段16例,下段8例。其中4例为食道下段加贲门胃底癌所致狭窄。吞咽困难程度,采用Wu-Wc分级法[1]:1级(进固体食物困难)5例,2级(进半流质食物受阻)9例,3级(进流食受阻)9例,4级(液体不能通过)3例。全部病例均经上消化道钡餐造影及胃镜病理检查确诊。

    作者:张莉;李元平;王天连;张丙新;秦北宁;任爱琴;古彩喆;耿洪刚 刊期: 2001年第01期

  • 上海妇女妊娠期激素水平与乳腺癌发病率模式的生态学研究

    目的 乳腺癌发病率在不同国家间有明显差异,而同一国家或地区内则发病率相近。此研究旨在探讨乳腺癌的发病率模式与女性胎儿乳腺组织发育过程中宫内激素环境的关系。方法 采用生态学研究方法,在前期对发病率迥异的美国和上海妇女妊娠期激素水平比较的基础上,进一步比较上海市区和南汇县孕妇在第16和27孕周与妊娠有关的各种激素水平。结果 上海市区和南汇县孕妇16和27周前后雌二醇、雌三醇、孕酮等妊娠期激素差别无显著意义(P>0.05)。结论 相对其类似的乳腺癌发病率模式,上海市区和郊县孕妇的妊娠期激素水平也相似。

    作者:徐飚;俞顺章;李旭亮;汤明荣;宋月华;胡晓敏;法金生 刊期: 2001年第01期

  • 微血管密度与肺癌预后

    目的 为研究肺癌组织内微血管密度与肺癌的生物学行为(淋巴结转移、肿瘤复发、生存时间等)的相关性。方法 我们应用SP免疫组化法研究FⅧ因子在60例肺癌组织中的表达。结果 60例肺癌患者微血管密度N0、N1、N2(23.44±12.31、29.31±9.65、39.16±16.64),P<0.05;复发组(40.08±12.45)和无复发组(30.81±20.12),P<0.01;Logistic多元回归分析结果发现肺癌的复发与肺癌内微血管密度(P=0.0021)密切相关。Willcoxon检验发现一年,三年,五年生存率与肺癌内微血管密度、淋巴转移有密切的关系。结论 肺癌组织内微血管密度是预测肺癌患者预后的重要指标。

    作者:任迎春;张进华;张普洪;李翔九;段国辰;曹利娟;刘敬辉 刊期: 2001年第01期

  • bcl-Xs基因转移与羟基喜树碱对卵巢癌细胞生长抑制的协同效应

    目的 用复制缺陷型腺病毒介导bcl-Xs(Adv-bcl-Xs)对卵巢癌细胞作基因转移,联合使用羟基喜树碱,观察它们对卵巢癌细胞产生的生长抑制协同效应。方法 用不同浓度的Adv-bcl-Xs感染卵巢癌细胞株NuTu-19,同时联合使用不同浓度的羟基喜树碱。3天后,用噻唑蓝法检测各实验组之存活细胞。统计学软件分析结果并作图。结果 Adv-bcl-Xs与羟基喜树碱联合使用同它们单独作用相加效应比较,对卵巢癌细胞生长抑制效果明显增强(P<0.01)。结论 Adv-bcl-Xs与羟基喜树碱联合使用,对卵巢癌细胞生长抑制存在协同效应。

    作者:王和;Vicki V.Baker 刊期: 2001年第01期

  • 肠外营养配合肝动脉栓塞化疗对肝癌的影响

    目的 探讨糖一脂双能源部分肠外营养(PPN)配合肝动脉栓塞化疗(TACE)对肝癌患者肝功能、营养状态及肿瘤生长的影响。方法 58例肝癌患者随机分为含脂组(30例)与对照组(28例);两组行TACE每月1次,连续3次,同时,按组别每月给予含或不含脂肪乳剂PPN 1周、连续3个月;治疗前及治疗后每月测ALT、AST、TB、血清蛋白、AFR与AFU,治疗后每月计算肿瘤生长率。结果 与对照组比较,治疗后含脂组ALT、AST及TB有不同程度下降,血清蛋白有不同程度升高;两组治疗后AFP与AFU变化幅度及每月肿瘤生长率相近。结论 糖一脂双能源PPN可改善肝癌患者肝功能及营养状态;配合TACE治疗,对肿瘤生长并无明显促进作用。

    作者:施先艳;高志清;肖建群;朱龙庆 刊期: 2001年第01期

  • 纵隔卵黄囊瘤2例报道

    卵黄囊瘤是一种少见的恶性程度极高的肿瘤,多发于性腺。性腺外少见,其中发生于纵隔者更为罕见。我院在近20年间共治2例,本文就该病的诊断、治疗等作一分析。  临床资料 病例1:男性,30岁,因体检发现“左上纵隔肿块”入院。MRI示肿块与主动脉粘连。行剖胸探查术,见肿块位于后上纵隔,与上叶后段及胸壁紧密粘连。切除肿瘤大小约5 cm×5 cm×4 cm,表面血管较丰富,镜下见“疏网状结构,少量嗜酸小体及基质样物,巢状卵圆形细胞呈腺泡状及小球状排列”。病理诊断为“低度恶性卵黄囊瘤”。免疫酶标AFP(+),HCG(-),NSE(-),KER(-)。术后行化疗4次。术后4年死于胸膜广泛转移。

    作者:赵静;丁嘉安 刊期: 2001年第01期

  • 神经酰胺诱导大肠癌LoVo细胞的凋亡

    目的 探讨外源性神经酰胺诱导大肠癌LoVo细胞凋亡的作用。方法 在有或无蛋白激酶C激活剂PMA预处理LoVo细胞3 h的条件下,分别用C2-和C6-神经酰胺以及C2-二羟基神经酰胺处理指数生长期的LoVo细胞,用琼脂糖凝胶电泳,Heochest 33342荧光染色和Annexin V/PI双染色流式细胞仪观测LoVo细胞的形态学和生化特征方面的改变。结果 C2-和C6-神经酰胺在一定的浓度范围内(10-25 μmol/L)处理LoVo细胞12~24 h可诱导其凋亡,但浓度超过50 μmol/L则引起LoVo细胞的坏死增多,而与神经酰胺结构相似但缺乏鞘脂碱基骨架C4-C5反式双键的C2-二羟基神经酰胺在相同甚至更大的剂量时都不引起LoVo细胞的凋亡;PMA对C2-和C6-神经酰胺诱导的LoVo细胞凋亡具有抑制作用。结论 神经酰胺参与LoVo细胞凋亡的信号传导过程,并具有结构特异性;蛋白激酶C可能是神经酰胺调控细胞凋亡的下游靶分子之一。

    作者:谭晓华;张亚历;周殿元 刊期: 2001年第01期

  • 胃原发性恶性淋巴癌

    目的 通过观察胃原发性恶性淋巴瘤的临床,胃镜、X线表现及治疗结果,探讨提高早期诊断率。方法 复习近年来经手术和病理确诊的10例胃原发性恶性淋巴瘤进行分析。结果 2例经胃镜活检病理证实,8例均手术病理证实,随访病例2例于手术后一年死亡。结论 胃原发性恶性淋巴瘤的临床表现无特异性,胃镜检查必须探挖多取才能得到阳性结果,结合X线及活检组织免疫组化检查可提高早期诊断率。治疗以手术后化疗(CHOP方案)为主,清除HP是治疗的关键,其预后与临床分期有关。

    作者:钱湘绮 刊期: 2001年第01期

  • 肝癌体外药物敏感性试验

    目的 通过测定肝癌对阿霉素(ADM)、顺铂(DDP)、氟尿嘧啶(FU)、长春新碱(VCR)、丝裂霉素C(MMC)及噻替哌(TSPA)的体外药物敏感性,为肝癌化疗用药提供参考依据。方法 采用滤纸支持组织块培养-MTT终点-计算机图像分析体外药物敏感性试验法。结果 在1倍血浆峰浓度(1 PPC)时作用强的药物为MMC,其抑制率中位数(MIR)为26.5%,其次是ADM为13.0%,DDP、TSPA、5-FU和VCR为4.0~8.5 %。在5倍血浆峰浓度(5 PPC)时作用强的药物亦为MMC,其MIR为92.0%,次为ADM、DDP和TSPA为41~50%,5-FU和VCR为16.0~17.0%,DDP和TSPA在5 PPC的MIR比在1 PPC时大5.0和5.8倍以上,MMC、ADM和VCR则大2~3.5倍,5-FU只增大1倍左右。结论 结果提示MMC对肝癌抑制作用较强,DDP和TSPA剂量增加与疗效提高可能有较大的关系。天然来源的药物ADM、MMC和VCR之间,无论在1 PPC或5 PPC水平,其相关系数均较大(r=0.5539~0.7208),表明部分肝癌具有多药耐药性。

    作者:梁永钜;周昕熙;潘启超;冯启胜 刊期: 2001年第01期

  • 胸内巨大淋巴结增生症6例报道

    巨大淋巴结增生症是一种特殊的淋巴结增生性疾病。该病少见,但有其一定的临床特征。1989年以来共收治6例胸内巨大淋巴结增生症,现将其临床特点及手术治疗效果总结如下:临床资料  1989~1997年间收治并经手术切除胸内肿块病检证实为巨大淋巴结增生的6例病例(见表1),其中女性5例,男性1例;年龄22~31岁,平均27.8±3.4岁。多数病例无临床症状,1例以胸闷、气促、消瘦、体检时影像学检查发现胸腔积液,1例因疲劳就诊。所有病例无特殊的实验室检查异常,胸片及CT表现为弧立性,密度均匀增高,边界清楚的软组织阴影,2例有多个小点状钙化。肿瘤大小3 cm~10 cm,4例位于纵隔,1例位于肺门,1例位于左第8后肋间,再发1例位于肺斜裂中部。

    作者:杨鸿生;叶卫华;施云飞;肖正清;晃福 刊期: 2001年第01期

  • MTT比色法测定膀胱癌细胞的体外侵袭力

    目的 用MTT比色法与Boyden小室侵袭试验相结合,测定膀胱癌细胞的体外侵袭力。方法 采用人工基质胶构建侵袭小室,将EJ、T24、BIU-87三个膀胱癌细胞株在装有趋化物的Boyden小室内培养12 h,加入MTT,用自动酶标记数仪测定吸光度,根据光密度值确定侵袭指数。结果 三个膀胱癌细胞株的侵袭指数分别为:EJ 0.326 %±0.046 %、T24 0.569 %±0.044 %、BIU-871.256 %±0.066 %。癌细胞趋化移动性的移动率分别为:EJ 0.508 %±0.037 %、T24 0.672 %±0.039 %、BIU-871.524 %±0.043 %。结论 将MTT比色法与Boyden小室侵袭试验相结合,能较准确的测定出癌细胞的体外侵袭力,具有敏感准确、快速简便、无放射污染等优点。

    作者:王元天;许纯孝 刊期: 2001年第01期

  • 更正“1997年上海市市区恶性肿瘤发病率”标化率数据

    作者: 刊期: 2001年第01期

  • p53基因诱导膀胱癌细胞HTB9凋亡及相关基因的表达

    目的 研究野生型p53基因诱导膀胱癌细胞凋亡的作用,及其对凋亡相关基因bcl-2、bax和ICE表达的调控。方法 将野生型p53基因重组腺病毒载体转染人膀胱癌细胞HTB9,应用RT-PCR检测bax的mRNA表达水平,应用免疫组化法检测bcl-2、bax和ICE蛋白表达水平,以DNA琼脂糖凝胶电泳、脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP切口末端标记技术(TUNEL)和流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 野生型p53基因导入可诱导HTB9细胞凋亡,调亡细胞百分率可达50.4%;bax mRNA和蛋白水平增高,ICE和Bcl-2蛋白水平分别增高和下降。结论 野生型p53基因很可能是通过调控凋亡相关基因ICE、Bax和Bcl-2的表达来诱导细胞凋亡。

    作者:张小田;陈维刚;黎健 刊期: 2001年第01期

  • 全国肿瘤耐药与肿瘤化疗药物临床应用学术会议征文通知

    为促进和总结我国肿瘤耐药研究及肿瘤化疗药物临床合理应用,提高肿瘤化疗效果,由中华医学会、中华医学杂志编辑委员会主办的“全国肿瘤耐药与肿瘤化疗药物临床应用学术会议”定于2001年第三季度在海口市召开(具体时间、地点另行通知)。会议除编辑出版《肿瘤耐药与肿瘤化疗临床研究进展》外,会后中华医学杂志将组织一期“肿瘤耐药与肿瘤化疗临床应用”重点号发表。现将征文内容通知如下:

    作者: 刊期: 2001年第01期

肿瘤杂志

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主管:中华人民共和国教育部

主办:上海市肿瘤研究所 上海交通大学医学院附属仁济医院