程峰；顾晓冬；项建斌；陈宗档；蔡端
目的 制备具有凝血活性的重组人组织因子(recombinant tissue factor,r-TF)用于构建PT试剂盒.方法 将人组织因子胞外区编码基因与酵母表达载体重组,构建酵母表达质粒pPIC9K-TF,利用电穿孔法转化宿主菌Pichia pastoris GS115,转化子经G418抗性筛选后,获得高表达克隆.工程菌在摇瓶中经甲醇诱导,表达r-TF,表达产物经纯化后,鉴定生物活性.结果 SDS-PAGE证实表达产物的分子量为37 000～45 000,Western blot证明其为人组织因子衍生物,纯化后,r-TF经脂化后,具有促凝血活性,为研制凝血活酶时间测定试剂盒及研究TF的构效关系创造条件.结论 用毕赤酵母高效表达具有活性的rTF,表达量达到182 mg/L.纯化工艺简便易行,蛋白回收率高,纯化后的rTF可用于组装PT测定试剂盒.
作者：王羽雄；于敏；顾银良；宋后燕 刊期： 2008年第06期
目的 总结Stanford B型主动脉夹层的腔内手术治疗经验.方法 收集2000年至2007年70例Stanford B型主动脉夹层腔内治疗病人的临床资料,通过对其回顾性研究,结合术前影像学、术中数字减影动脉造影术(digital subtraction angiography,DSA)、术后门诊影像学随访资料.观察夹层病变的急性期解剖学数据,在随后的随访过程中观察有无内漏、移位和人工血管内支架塌陷等术后并发症,寻找并发症出现的一些高危因素.结果 70例患者平均有2.66个破口,第一破口平均距离左锁骨下动脉27.61 mm.3例同期进行左颈总、左锁骨下动脉以及2例二期进行肠系膜上动脉、肾动脉旁路术.16例支架型人工血管一期覆盖左锁骨下动脉而未做血管旁路手术.70例患者即刻Ⅰ型内漏发生率为14.3%(10/70).无移植物错放、移位、瘤体破裂和中转手术等并发症,本组技术成功率为85.7%(60/70).随访2周～72个月后,5例发生Ⅰ型内漏,3例再次接受手术.本研究表明内漏的发生同夹层病变内膜裂口数量多、术前主动脉大直径大以及近端破口在小弯侧有关.结论 主动脉夹层腔内修复术具有安全、可行、有效的特点.临床的开拓性工作成功突破短瘤颈、内脏动脉假腔累及、破口位置较低和入路动脉过细等解剖学限制,在保证手术安全的情况下拓宽了手术适应症.远期疗效有待进一步观察.
作者：沈文俊；郭大乔；符伟国 刊期： 2008年第06期
目的 观察肝移植术后1月内血糖变化,以探讨肝移植术后血楮变化规律以及肝移植术后糖尿病的相关危险因素.方法 本文收集中山医院2001年3月至2007年2月共514例肝移植患者临床资料,排除资料不完整及术前使用糖皮质激素的患者,共有324例患者进入本组分析,其中男性263例,女性61例,年龄3～81岁,平均48.9岁.根据术前空腹血糖将患者分为糖尿病组(diabetes mellitus,DM)、空腹血糖受损组(impaired fasting glucose,IFG)及空腹血糖正常组(normal fasting glucose,NFG),根据患者术后使用的免疫抑制剂类型将患者分为FK506组及环孢霉素组.采用重复测量的方差分析观察手术前后糖代谢变化情况.通过分析术前与术后4周(取术前及术后1,3,7,14,21,28 d)各组患者空腹血糖资料,得出各组术前及术后4周内的空腹血糖变化趋势,计算术后高血糖状态患病百分比,并分析术后高血糖状态的术前危险因素与药物影响.结果 肝移植术后4周内DM,IFG,NFG 3组空腹血糖均呈先升高后降低的变化趋势,空腹血糖以DM组高,IFG组次之,NFG组低,3组之间变化趋势两两比较均有统计学差异(P值均<0.000 1);术前非糖尿病组患者术后1月内高血糖状态患病百分比为:术后1 d为100%,之后逐渐降低.至术后28 d为73.6%;术前空腹血糖及年龄对术后7 d空腹血糖有明显影响;FK506组和环孢霉素组之间术后4周内空腹血糖变化无明显差异.结论 肝移植术后早期DM,IFG,NFG 3组空腹血糖均较术前有明显升高;术前非糖尿病组患者术后1月内高血精状态患病百分比由100%逐渐降至73.6%;FK506组和环孢霉素组之间术后1月内空腹血糖变化趋势无明显差异.
作者：于明香；王飞龙；周俭；高键；高鑫 刊期： 2008年第06期
目的 比较高龄活体亲属供肾移植与标准活体亲属供肾移植的临床效果.方法 回顾性分析高龄活体亲属供肾移植14例、标准活体亲属供肾移植84例的临床资料,并对供/受体进行回访,比较两组供肾移植术后供/受体的肾功能恢复情况及移植肾功能恢复延迟发生率、急性排斥反应发生率、存活率.结果 高龄供体及标准供体间手术前后肾功能的变化量无显著差异(P>0.05);移植肾功能恢复正常时间在高龄供肾组为(4.2±2.1)d,在标准供肾组为(3.3±1.6)d.两组间无显著差异(P>0.05);高龄供肾组和标准供肾组移植肾急性排斥反应发生率分别为14.3%和9.8%,移植肾功能恢复延迟发生率分别为21.4%和11.0%,移植肾存活率分别为92.9%和98.8%.结论 术前对高龄供体进行严格筛选及全面综合评估,高龄活体亲属供肾移植同样也是安全有效的.
作者：王继纳；程宙；许明；戎瑞明；王国民；朱同玉 刊期： 2008年第06期
目的 探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4,CTLA-4)基因启动子区多态性与系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)表型间的相关性.方法 采用单纯病例研究,按临床表型和基因型、单倍型对120例女性SLE病人分组,分析基因与表型的相关性.结果 -1722T>C位点、-318C>T位点及单倍型与SLE各器官损害无关(P>0.05).在抗SSA抗体阳性患者中,-1722T>C位点TT基因型的频率升高(P=0.020,OR=5.26,95%CI:1.30～21.32).抗RNP抗体阳性患者中,-318C>T位点CT与TT合并基因型的频率降低(P=0.016,OR=0.16,95%CI:0.04～0.71).两位点等位基因间存在连锁不平衡(P<0.05),且在抗SSA抗体阳性患者中,T-C单倍型频率升高(P=0.014,OR=1.90,95%CI:1.14～3.18),C-C单倍型频率降低(P=0.028,OR=0.55,95%CI:0.32～0.94);而在抗RNP抗体阳性患者中,T-T单倍型频率降低(P=0.029,OR=0.20,95%CI:0.05～0.85).结论 在江南地区汉族人群中,CTLA-4基因一1722T>C位点与抗SSA抗体的产生相关,=318C>T位点与抗RNP抗体的产生相关.
作者：齐媛媛；杨晓惠；孔令杰；高淑娜；江峰；付朝伟；王宝涛；许爱娥；孟炜 刊期： 2008年第06期
目的 建立人脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF)中两性霉素B(amphotericin B,AmB)和伊曲康唑(itraconazole,ITZ)含量测定的高效液相色谱方法,并用于隐球菌性脑膜炎患者脑脊液样品的测定.方法 脑脊液样品经固相萃取后直接进样.AmB测定采用Gemini 5w C18柱,流动相为5 mmol/L乙二胺四乙酸二钠(醋酸调pH至4.5)/乙腈(62/38,V/V),流速0.3 mL/min,DAD检测器:检测波长410 nm.ITZ测定采用YMC C18柱,流动相为0.2%三氟乙酸/乙腈(45/55,V/V),流速1.1 mL/min,荧光检测器:激发波长260 nm,发射波长365 nm.结果 AmB和ITZ的线性范围均为5 ng/mL～100 ng/mL,线性相关系数大于0.999,低定量限为5 ng/mL,低、中、高浓度质控样品在日内、日间精密度均小于7.6%.结论 该方法灵敏、快速、简便,适用于隐球菌性脑膜炎患者治疗药物监测.
作者：江峥；朱利平；于存静；郁韵秋 刊期： 2008年第06期
目的 建立复黄片微生物限度检查法.方法 通过培养基稀释法、菌体离心沉淀法等测定复黄片对试验菌株的回收率.结果 复黄片对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌及白色念珠菌、黑根霉呈现较强的抑菌作用.而对大肠埃希菌基本上没有抑制作用.采用离心沉淀法可以消除复黄片对待测微生物的影响.结论 复黄片可用离心沉淀法进行微生物限度的检查.
作者：李继扬；陆金根；曹永清；邱明丰 刊期： 2008年第06期
目的 对血管生成抑制因子纤溶酶原Kringle 5(K5)基因进行突变.构建于重组腺病毒中,并观察突变后K5蛋白的表达情况.方法 用重叠延伸技术对K5基因Furin蛋白酶水解识别位点进行定点突变,分别构建携带K5基因和突变后的K5m基因表达框的腺病毒载体Ad-EF1α-K5/K5m;用RT-PCR法比较腺病毒感染TC-1细胞后K5和K5m mRNA的表达;用免疫沉淀和Western blot法比较腺病毒感染TC-1细胞后K5蛋白和突变后K5蛋白的表达.结果 成功对K5基因进行点突变,携带K5突变基因腺病毒K5蛋白表达量明显多于携带未突变K5基因腺病毒.结论 对K5基因Furin蛋白酶水解识别位点进行定点突变能提高腺病毒介导的K5蛋白分泌表达量,为进一步以腺病毒为载体携带K5基因在眼部新生血管异常增生性疾病的实验研究提供基础.
作者：刘岩；刘芳；叶迅；董继斌；陆琴；李秋华；陈红专 刊期： 2008年第06期
目的 探讨中青年人群中鼾症和正常高值血压的流行及相关危险因素.方法 对619例广样本,进行问卷调查和体格检查,并对相关因素进行统计学分析.结果 在619人中,打鼾者占49.9%,正常高值血压者占40.1%.不论青年人还是中年人,鼾症组的收缩压,心率和体重指数均显著高于无鼾症组(P<0.01～0.05).青年组的颈围鼾症组也大于无鼾症组.单因素分析显示,中青年人群中打鼾、年龄、性别、体重指数、腰臀比等与正常高值血压有关.进一步做多因素Logistic回归分析结果表明:打鼾、腰臀比、性别和年龄4种因素对正常高值血压的影响较大.结论 鼾症和正常高值血压在城市中青年人群中有较高的流行.打鼾是除腰臀比、性别和年龄以外与正常高值血压相关的独立危险因素.习惯性打鼾可能通过长期心脏活动的增强导致正常高值血压的形成.
作者：薛红；李莉 刊期： 2008年第06期
目的 观察健脾益气方改善脾气虚型更年期综合征(climactericsyndrome,CS)症状及调节内分泌代谢的临床疗效.方法 取脾气虚型的更年期综合征患者30例作为病例组,另取年龄匹配的无明显更年期综合征症状的更年期女性20例作为对照组.检测两组血清瘦素(leptin)、胰岛素(insulin,INS)、睾酮(testosterone,T),胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglycerides,TG)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)、空腹血糖(Blood glucose,BG)、餐后2 h血糖(2hBG)、胰岛素敏感指数(Insulin sensitivity index,ISI)、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinizinghormone,LH)和雌二醇(estradiol,E2),测量两组腰围(waist circle,WC)、体重指数(Body mass index,BMI)和腰臀比(waist hip ratio,WHR),以及对病例组进行Kupperman评分、中医脾气虚证候评分,比较病例组与对照组检测指标的组间差异;病例组中24例作为中药组,采用健脾益气方治疗4周,比较治疗前后Kupperman评分、中医脾气虚证候评分及WC、BMI、WHR、Leptin、INS、T、ISI、BG、2hBG、TC、TG、HDL、LDL、E2、LH、FSH.结果 病例组和对照组E2、T、FSH、LH水平无显著性差异(P>0.05);病例组和对照组WC、BMI、WHR及BG、INS、ISI、Leptin比较病例组高于对照组,差异有统计学显著意义(P<0.05);病例组和对照组TC、TG、HDL、LDL比较虽无显著性差异(P>0.05),但病例组血脂水平均高于对照组;中药组治疗前后T、E2、FSH、LH无显著性差异(P>0.05);治疗后BG、血脂有下降趋势;血INS,Leptin下降而ISI增高有统计学差异(P<0.05);治疗后Kupperman评分和脾气虚评分均显著下降有统计学差异(P<0.01).结论 脾虚型更年期综合征患者存在能量物质的代谢障碍;雌激素水平低下可能并不是引起脾气虚型更年期综合征症状以及糖脂代谢异常的唯一因素;INS、Leptin分泌异常可能是脾气虚型更年期综合征发病以及导致糖脂代谢异常的不可忽略的因素;健脾益气方能有效改善脾气虚型更年期综合征症状及调节INS、Leptin的异常.
作者：王静；王兴娟 刊期： 2008年第06期
目的 探讨应用ARIMA时间序列模型预测广西孕产妇死亡率的可行性,为广西继续降低孕产妇死亡率提供理论依据.方法 基于2002-2006年广西的逐月孕产妇死亡率,采用非条件小二乘法估计模型参数.按照残差不相关原则与简洁原则确定模型结构,依据AIC与SBC准则确定模型的拟合优度.建立预测广西孕产妇死亡率的优ARIMA模型.用所得模型预测广西2007年的孕产妇死亡率,比较预测值与实际值的差异;再以2002-2007年的数据构建模型预测广西2008年的孕产妇死亡率.结果 模型ARIMA(2,1,0)(0,1,1) 12较好拟合了既往时间段孕产妇死亡率的时间序列,模型自回归参数(AR1=-0.708,AR2=-0.537)与季节滑动平均参数(SMA1=0.511)均有统计学意义(P<0.05),AIC=33.814,SBC=39.364,模型残差为白噪声(P>0.05),模型数学函数式为(1+0.708B)(1+0.53782)(1-B)(1-B12)Zt=(1-0.511 B12)μt.2007年逐月孕产妇死亡率的预测值符合实际值的变动趋势,2007年孕产妇死亡率与实际值的相对误差率仅为2.08%.预测2008年广西的孕产妇死亡率为21.232/10万.结论 ARIMA模型可以较好地拟合孕产妇死亡率的时间变化趋势,并用于预测未来的孕产妇死亡率,是一种短期预测精度较高的预测模型.
作者：黎健；陈荔丽；陈树珍；赵耐青；钱序 刊期： 2008年第06期
乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染引起多种抑癌基因启动子甲基化已有广泛的研究和报道,本文从体内和体外研究总结了目前与HBV感染相关的抑癌基因甲基化研究现状及HBV引起抑癌基因甲基化的新机制,为未来研究提供思路.
作者：高雪；朱荣 刊期： 2008年第06期
糖尿病作为胰腺癌的早期临床表现已逐渐被人们所接受,胰腺癌所伴发的糖尿病被称为新发糖尿病,通过在新发精尿病中检测某一特征标志物来提高胰腺癌的早期诊断率已成为研究热点,本文主要针对近几年对于新发糖尿病和胰腺癌关联性的研究进展作简要综述.
作者：李青；刘芳 刊期： 2008年第06期
目的 初步观察重组腺病毒rAd-MK-TNFα对乳腺癌细胞的抑制作用.方法 体外转染系列重组腺病毒,观察rAd-MK-TNFα在乳腺癌细胞Bcap37中TNFα的表达以及其对乳腺癌细胞的生长抑制作用,并比较其与对照病毒对乳腺癌细胞及人成纤维细胞生长的抑制作用的不同.结果 rAd-MK-TNFα感染Bcap37细胞后.可检测到TNFα的表达;rAd-MK-TNFα对Bcap37乳腺癌细胞存在生长抑制作用.且与其病毒浓度呈正相关;rAd-MK-TNFα对人成纤维细胞的抑制作用小于非靶向腺病毒(rAd-CMV-TNFa).结论 rAd-MK-TNFα可能通过靶向表达TNFα对乳腺癌细胞产生抑制细胞生长的作用.
作者：陆巍；童汉兴；叶景佳；陆维祺；郑树 刊期： 2008年第06期
鼻前庭良性新生物的病理类型多样,我科运用CO2激光治疗鼻前庭肿物,疗效满意.现将2007年随访的70例病人的相关情况报告如下.
作者：顾凌澜；仇荣星；朱丽丽；张菁 刊期： 2008年第06期
目的 构建携带人lipocalin 2基因且删除E1855基因的溶瘤腺病毒,研究其体外对胰腺癌细胞生长的抑制作用.方法 利用RT-PCR技术获得lipocalin 2基因并克隆至pCA13质粒,构建pCA13-lipocalin 2.用Bgl Ⅱ从pCA13-lipocalin 2酶切出包含CMV启动子及lipocalin 2的表达框,将该表达框亚克隆入质粒pZD55,获得pZD55-lipocalin 2.将pZD55-lipocalin 2与pBHGE3共转染293个细胞,重组产生携带lipocalin 2的溶瘤腺病毒ZD55-lipocalin 2.经PCR和Western blot鉴定正确后,体外采用结晶紫染色和MTT法,观察其对胰腺癌细胞生长的抑制作用.结果 ZD55-lipocalin 2能在PANC-1细胞中增殖复制并表达lipoealin 2蛋白,结晶紫染色和MTT法观察到该溶瘤腺病毒能明显抑制PANC-1细胞生长.结论 成功构建了携带入lipocalin 2的溶瘤腺病毒,其能明显抑制胰腺癌细胞生长,为胰腺癌治疗提供新策略.
作者：徐彬；靳大勇；王单松；刘新垣；秦新裕 刊期： 2008年第06期
目的 研究婴幼儿早期血浆磷脂脂肪酸水平对于18月内体质指数的影响作用.方法 常州地区母亲及配对婴儿作为研究对象.分别采集脐血,5 d、42 d及1岁时婴儿静脉血样本,采用高效毛细液气相色谱分析技术检测血浆磷脂脂肪酸含量.在婴儿出生,42 d,2、4、6、12及18月时对小儿进行体重、身长等体格生长指标的测量,计算体质指数(body mass index,BMI)及其Z分值.结果 6、12及18月龄婴幼儿BMI Z分值与脐血n-6/n-3多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFAs)比例呈正相关而与n-3 PUFAs及二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)含量呈负相关(P<0.05;P<0.01;P<0.01);12月龄BMI Z分值与5 d血n-6/n-3PUFAs比例呈正相关而与n-3 PUFAs及DHA含量呈负相关(P均<0.01);2、4,6、12及18月龄BMI Z分值与42 d血n-6/n-3 PUFAs比例呈正相关而与n-3 PUFAs(P<0.01;P<0.01;P<0.01;P<0.01;P<0.05)及DHA含量(P均<0.01)呈负相关.结论 婴幼儿早期血浆磷脂n-3 PUFAs水平可能对婴幼儿晚期生长具有显著影响:n-3 PUFAs(主要DHA)水平越高而n-6/n-3比例越低.则在婴儿晚期可以得到更为理想的体质指数.
作者：王琴；周婷婷；张婷艳；Strandvik B；Zetterstr(o)m R；彭咏梅 刊期： 2008年第06期
目的 改进Cuff技术制作小鼠颈部异位心脏移植模型,以简化手术操作,提高手术成功率.方法 使用自制套管将供心肺动脉套接于受体右颈外静脉,将供心升主动脉套接于受体右颈总动脉.结果 正式实验40例,手术成功率92.5%.手术时间约60 min,供心冷缺血时间小于30 min.结论 改良Cuff技术建立小鼠颈部异位心脏移植模型,无需显微外科操作,是一种经济实用、稳定可靠、易于复制的动物模型.
作者：程峰；顾晓冬；项建斌；陈宗档；蔡端 刊期： 2008年第06期
目的 探讨TLR4单克隆抗体(toll like receptor 4 monoclonal antibodies,TLR4mAb)对葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的急性期溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠肠黏膜的细胞因子IL-17、IL-10及TGF-β的影响情况.方法 30只BALB/c小鼠分为A-E组:对照组、模型组以及低、中、高剂量干预组.A组小鼠饮用蒸馏水7 d;B-E组小鼠仅饮用5%DSS水溶液共7d以产生急性期溃疡性结肠炎模型.造模开始的同时,分别给3组干预组小鼠以低、中、高剂量TLR4mAb腹腔内注射以观察其干预作用.观察指标包括疾病活动指数(disease activity index,DAI)、结肠组织病理学评分(histopathological score,HPS).造模及干预7 d后处死小鼠,Real time-PCR法检测各组肠黏膜IL-17、IL-10及TGF-β的mRNA表达.结果 (1)与对照组相比,模型组小鼠结肠黏膜DAI及HPS明显增高(P<0.01).与模型组相比,在使用TLR4mAb干预后低、中、高剂量组DAI和HPS均有不同程度的缓解.(2)与模型组相比,在使用TLR4mAb后低、中、高剂量组细胞因子IL-17、IL-10及TGF-β在小鼠结肠黏膜中的表达均有不同程度的降低.结论 TLR4mAb可以抑制肠道免疫的过度激活,减少炎症因子的过度表达,从而反馈性下调抑炎细胞因子的表达,打破促炎/抑炎因子的失衡状态,减轻急性期溃疡性结肠炎的炎症表现.
作者：王磊；刘懿；张志军；孙旭；黄剑平；陈坚；钟良 刊期： 2008年第06期
目的 探讨子宫内膜浆液性腺癌的临床特点、生物学行为特征、手术的范围及术后的治疗与预后的相互关系.方法 对1996年1月至2005年12月我院收治的54例子宫内膜浆液性腺癌的病例进行回顾性分析,对其临床分期、病理分级、组织学分级及肌层浸润深度进行相关的分析;统计分析手术范围、手术治疗、化疗与预后的相互关系.结果 子宫内膜浆液性腺癌多发于绝经后妇女.占总数的85%,占同期子宫内膜癌的8.91%.术前诊断性刮宫对子宫内膜浆液性腺癌的检出率为48%.子宫内膜浆液性腺癌的死亡率较高,5年生存率为76.92%.广泛性的全子宫切除+盆腔淋巴结清扫术、瘤体减灭术以及术后放疔、化疗可提高5年生存率.多因素分析结果发现.有无淋巴转移是影响预后的重要因素.结论 子宫内膜浆液性腺癌发现时往往病程已较晚,并有子宫外转移,而与子宫肌层的浸润深度无关.分段诊刮结合彩色超声检查对早期发现子宫内膜浆液性腺癌具有重要意义.术前术中准确分期并施以适当范围的手术治疗,术后辅以化疗和放疗,对预后及提高5年生存率具有重要意义.
作者：朱瑾；孙红 刊期： 2008年第06期
复旦学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：复旦大学
