学术投稿

用脉冲场凝胶电泳方法对O139霍乱弧菌分型的研究

金春光;石优章;徐景野;郑剑

关键词:脉冲场凝胶电泳(PFGE), O139群霍乱弧菌, 分子分型
摘要:目的:利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术探讨O139群霍乱弧菌的分子分型方法.方法:用Sfi Ⅰ酶和Not Ⅰ酶切O139群霍乱弧菌染色体DNA,经脉冲场凝胶电泳进行片段分离.结果:14株O139群霍乱弧菌经Sfi Ⅰ酶切后电泳分离可得一个PFGE型,用Not Ⅰ酶切电泳可分为2个PFGE型.结论:脉冲场凝胶电泳技术分析O139群霍乱弧菌,分型发现微小差别有助于分析追踪疫情和来源.
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  • 平南县茶叶锰的含量及饮茶习惯与锰摄入量的调查报告

    目的:了解我县茶叶锰的含量情况及饮茶习惯与摄入量的关系.方法:获取我县不同茶厂的50份茶叶参照GB/T5009.57-2003和GB/T5009.48-2003的有关方法测定.结果:所有样品均检出不同程度的锰.结论:建议茶叶的卫生标准中增加锰的检测.

    作者:潘世毅 刊期: 2007年第04期

  • 卫生微生物检验质控结果分析

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    作者:肖永跃;秦云峰;吕蓉;代春妮;罗中好 刊期: 2007年第04期

  • 乳及乳制品中亚硝酸盐含量测定的改进

    由于人体摄入一定量的NO2-可发生高铁血红蛋白症,而且亚硝酸盐和水、土壤和食品中广泛存在的仲胺可在人胃中合成亚硝胺,其具有较强的毒性和致癌性.为预防上述有害现象的发生,应限制食品中的亚硝酸盐的含量,尤其是乳粉针对的消费者主要是婴幼儿.由于按国标法处理的滤出液不够澄清,测定的灵敏度也不够高,且量取一定体积再按固定密度换算质量,在实际操作中有一定的局限性.本方法仍采用格里斯试剂比色法,直接称取样品,通过改进样品处理,增强沉淀效果,取得澄清滤液,提高了测定的灵敏度,同时直接以亚硝酸钠配制标准溶液,避免以亚硝酸根来换算结果,简化了公式,经过多次实验.其回收率为87.46%~107.27%,低检出限为0.265 μg.

    作者:戚荣平;孟琪;商晓春 刊期: 2007年第04期

  • 火焰原子吸收光谱法测定金属罐装果汁饮料中的锡

    目的:建立火焰原子吸收光谱法测定金属罐装果汁饮料中锡的分析方法.方法:样品用硝酸和高氯酸消化后,导入火焰原子吸收分光光度计中,与标准系列比较定量.结果:在224.6 nm波长下,灯电流为4.0 mA,狭缝宽度为0.2 nm时,该方法的测定范围为0~100 mg/L,回归方程为:Y=0.0017+0.0011X,r=0.9994,检出限为0.75 mg/L,相对标准偏差为0.66%~2.15%,加标回收率为93.7%~102.9%.结论:本法具有干扰少,线性范围宽,操作简便、快速、准确等优点,适用于金属罐装果汁饮料中锡的测定.

    作者:练翠雯 刊期: 2007年第04期

  • 二氧化氯消毒剂杀菌效果的实验观察

    目的:通过实验室试验研究二氧化氯消毒剂杀灭枯草杆菌黑色变种芽孢、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的低有效剂量.方法:依据《消毒技术规范》(2002年版)采用悬液定量试验法进行了实验室观察.结果:在3%和0.3%牛血清白蛋白条件下,二氧化氯含量分别为15、2 mg/L,作用1 min和10 min对大肠杆菌平均杀灭对数值均>5.00;在3%和0.3%牛血清白蛋白条件下,二氧化氯含量分别为20、6 mg/L,作用1 min对金黄色葡萄球菌平均杀灭对数值均>5.00;在3%和0.3%牛血清白蛋白条件下,二氧化氯含量分别为100、60 mg/L,作用5 min对枯草杆菌黑色变种芽孢平均杀灭对数值均>5.00.结论:实验室的结果略低于生产企业申报检测时的二氧化氯消毒剂作用浓度,在不同实验室有效剂量也有差异,可能由于二氧化氯生产原料和工艺不同所致,终应以实验数据为准.

    作者:李涛;周铁生;张流波 刊期: 2007年第04期

  • 衢州市2005~2006年食品中食源性致病菌监测分析

    目的:为更好地开展食品安全性研究和预防控制食源性疾病的发生,了解衢州市食品中食源性致病菌的污染状况,初步确定可能被污染的高危食品,为食物中毒监测提供科学依据.方法:参考国家标准方法,采用进口CHROMagar显色培养基,对样本进行食源性致病菌的分离、生化鉴定.结果:2005年至2006年共检测食品样品223份,检出致病菌45株,总检出率20.2%;其中检出金黄色葡萄球菌11株,检出率为14.3%(11/77);其次为单增李斯特菌检出16株,检出率为7.17%(16/223);沙门菌检出16株,检出率为7.17%(16/223);副溶血性弧菌检出2株,检出率6.45%(2/31);未检出EHEC O157:H7.结论:衢州市居民主要消费食品存在食源性致病菌污染,其中生肉类食品、水产品和散装熟肉是主要污染食品品种.通过检测,为我市食品安全预警提供可靠数据.

    作者:杨瑞军;金莞尔;张建民;王文英;于丽莉 刊期: 2007年第04期

  • 原子荧光法同时测定化妆品中铋和汞

    铋化合物作为漂白剂和珠光剂添加在化妆品中,亚硝酸铋是收敛剂,对皮肤有漂白作用;汞同样具有美白的作用,被一些生产者超量添加于化妆品中,汞对人体健康的危害是众所周知的.现行测定化妆品中汞的标准方法为冷原子吸收分光光度法,此法易受水蒸气的影响,使结果偏高[1];测定铋标准方法为二甲酚橙定性法、乙二胺四乙酸二钠滴定法和原子吸收分光光度法,对含量低的样品难以定量,且操作繁琐,分析时间长.而采用原子荧光光谱法[2,3],并改进其消化方法,能节省时间,提高灵敏度,使两元素在测定时采用同一消化液,节省了大量试剂,适于批量快速检测.

    作者:徐保权;郭淑英;边疆 刊期: 2007年第04期

  • 麻疹病毒的纯化及其在麻疹IgG EIA诊断试剂中的应用

    目的:摸索纯化麻疹病毒的方法,并以其为包被抗原,制备麻疹IgG酶联免疫(EIA)诊断试剂.方法:将L4株麻疹病毒液先后用超滤、PEG沉淀的方法进行浓缩,再分别用连续和不连续蔗糖密度梯度超速离心法进行纯化,比较不同方法纯化后的效果,终建立制备高纯度麻疹病毒包被抗原的方法,并在此基础上制备麻疹IgG酶联免疫(EIA)诊断试剂.结果:用超滤、PEG沉淀及连续蔗糖密度梯度超速离心纯化后的麻疹病毒的比活性为775.76 HAU/mg,SDS-PAGE及Western-blot证明纯化产物的纯度符合要求,电镜结果显示纯化物中含大量麻疹病毒.以该纯化抗原制备的EIA检测试剂与血凝抑制实验(HI)相比,该试剂的灵敏度为99.46%,特异度为81.82%,一致性为97.58%.与SIGMA麻疹IgG EIA诊断试剂盒的一致率为95.12%.结论:采用超滤、PEG沉淀及连续蔗糖密度梯度超速离心的方法可制备满足麻疹IgG EIA诊断试剂要求的包被抗原.

    作者:詹曦菁;秦晓勇;刘丽英;孔健 刊期: 2007年第04期

  • 蔬菜中百菌清残留量的高效液相色谱测定方法

    目的:建立高效液相色谱测定蔬菜中百菌清农药的残留量的方法.方法:通过各种条件实验,对方法的各参数进行了优化.结果:方法的低检测浓度为0.015 mg/kg,标准曲线的线性相关系数(r)为0.9998,加标回收率为90.1%~93.8%,相对标准偏差(RSD)为1.85%~2.57%,并将其应用于实际蔬菜样品中的检测.结论:该方法准确,可靠,适用,具有实际应用意义.

    作者:欧阳立群;吴富忠;仝振东;沈跃勇;王恒 刊期: 2007年第04期

  • 微量培养板不同保存时间对霍乱弧菌培养效果的观察

    目的:通过用霍乱弧菌不定期地对冰箱内保存的微量培养板进行测试,观察不同保存时间微量板对细菌检测结果的影响,探讨微量板佳保存时间.方法:采用霍乱弧菌常规培养法[1]与霍乱弧菌微量板培养法[2]平行实验,比较霍乱弧菌小检出浓度.结果:用两株菌作为测试菌,每月1次共做了6批实验,微量板长保存时间201 d.微量板培养法细菌小检出浓度为100~102 cfu/ml;常规培养法细菌小检出浓度为101~102 cfu/ml,两法对霍乱弧菌检测试验结果的敏感性较为一致.保存长达201 d的微量板未发现有培养基干裂、杂菌污染及颜色改变,并且也未影响检测结果.结论:微量培养板可以用于霍乱弧菌病原检测,结果证实微量板可在冰箱保存6个月以内使用.

    作者:吴以华;徐景野;李岳良;王汀;刘捷 刊期: 2007年第04期

  • Excel内置函数在基层卫生学调查中的应用

    在进行某项卫生学调查后往往有许多调查数据需要进行统计分析,计算样本的均数、频率分布、标准差、置信区间以及分析这种差别是否具有统计学意义,从中找出事物发生的原因和规律.如用计算器按照公式进行计算,往往费时费力,并且容易出错.使用Excel中的内置函数可以避免繁琐的数据处理工作,极大地提高工作效率,我们将Excel 2000中的函数功能在卫生学调查中的应用情况介绍如下.

    作者:黄永庆 刊期: 2007年第04期

  • 不同戊型肝炎病毒检测方法用于无偿献血筛查效果评价

    目的:评价无偿献血HEV筛查的必要性和选择适当的方法.方法:使用抗-HEV IgG和抗-HEV IgM检测方法对绍兴市2005年6月至2006年5月3 701份街头无偿献血标本进行检测,对阳性标本进行RT-PCR确认是否为病毒血症.结果:3 701份标本抗-HEV IgG和抗-HEV IgM阳性率分别为29.91%和1.35%,与RT-PCR的阳性符合率分别为0.45%和12.00%.结论:在目前献血人群中确实存在HEV病毒血症,有必要增加相应的检测项目,抗-HEV IgM检测相比抗-HEV IgG检测更适合作为无偿献血人群的HEV筛查方法.

    作者:桑列勇;傅立强;方放;吴士定 刊期: 2007年第04期

  • 石墨炉原子吸收分光光度法测定尿中锰

    目的:建立石墨炉原子吸收分光光度法测定尿中锰的方法.方法:用硝酸-高氯酸混酸消化尿液,应用石墨炉原子吸收技术,硝酸镁作为基体改进剂,测定尿中锰.结果:方法的检出限为0.06 μg/L,相对标准偏差为2.6%~4.0%,回收率为94.2%~107.5%.结论:石墨炉原子吸收分光光度法可用于尿中锰的测定.具有灵敏度高、检出限低、干扰少等特点.

    作者:李亚峰;高全成;马进 刊期: 2007年第04期

  • 荧光定量-聚合酶链反应法快速检测麻疹病毒核酸

    目的:采用荧光定量-聚合酶链反应(FQ-PCR)法,检测麻疹病毒核酸,用以建立和推广一种敏感、特异、快速的麻疹检测新技术.方法:TaqMan特异性荧光标记探针法,进行特异性、敏感性和麻疹疑似患者临床标本的检测.结果:FQ-PCR法检测麻疹病毒核酸具有高度的特异性和敏感性,本次试验检测灵敏度达0.1 TCID50.在14份麻疹患者咽拭子标本中,有13份标本检出麻疹病毒核酸,从核酸提取至完成检测仅需3 h.结论:FQ-PCR法为麻疹病毒核酸检测提供了一种可靠的方法.

    作者:姜明杰;甘云;梁勇;张振国;卢国际;王翠华;李彩云;王蒋丽 刊期: 2007年第04期

  • 北五味子主要成分测定方法的研究进展

    五味子为木兰科植物五味子Schisandra chinensis(Turcz.)Baill.或华中五味子Schisandra sphenan-thera Rehd. et Wils.的成熟果实.前者习称北五味子,后者习称南五味子.具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心的功效,具有很高的药用价值,但北五味子的药理功效要高于南五味子[1].现代药理研究表明,其在诸多方面都有较好的疗效,临床应用非常广泛.

    作者:可成友;康宏玲;高珍;吴晓芳;金常雪 刊期: 2007年第04期

  • 微生物实验室的质量控制管理

    微生物检验,在感染性疾病及相关病患的预防、诊断治疗中起着越来越重要的作用,近几年SARS、猪链、禽流感等传染性疾病的流行,更加警示我们要不断提高微生物的检验技术水平.为了保障检验结果的精确性和准确性,日常工作中我们要注意开展质量控制,包括室间质量控制和室内质量控制.室间质量控制是各地实验室之间进行质量控制的一种方式,也是上一级实验室对各实验室进行质量管理的手段.参加由各省临床检验中心或卫生部临床检验中心组织的室间质控,会遇见一些平时罕见或未见过的菌株,通过质控检验对它们的生长条件、菌落形态、染色、镜下、形态等有了较深的感性认识.日后工作中倘若再遇见这些菌将不再会漏检.室间质控是建立在一个较好的室内质控基础上的,做好室内质控直接关系到日常检验工作的质量.室内质控主要包括以下几个方面:人员、实验室前的质量控制、标本接种前的质量控制、培养基的质量控制、染色液及染色方法质量控制、常用仪器的质量控制、发报告前的质量控制.为了保证检验结果准确无误,应对分析前、分析中、分析后3个阶段实行全面质量管理.具体要求如下:

    作者:齐春华;王文平 刊期: 2007年第04期

  • 从进口原料奶粉中检出坂崎肠杆菌

    目的:检测进口原料奶粉中是否污染坂崎肠杆菌.方法:参照GB/T4789.6-2003致泻性大肠埃希氏菌检验和美国FDA《婴幼儿奶粉中坂崎肠杆菌检测方法》部分.结果:5份进口原料奶粉样品中有2份检出坂崎肠杆菌.结论:本文提示对进口原料奶粉检测坂崎肠杆菌的重要性.

    作者:刘铁雁;麻郁峰;李俊华;刘军 刊期: 2007年第04期

  • nm23-H1基因实时荧光定量PCR标准质粒的构建

    目的:制备用于nm23-H1基因mRNA实时荧光定量PCR检测的质粒标准品.方法:通过PCR扩增出目的片断,纯化后T-A连接至pMD18-T载体,转化宿主菌E.coli DHSα,获得阳性克隆;通过PCR扩增、双酶切鉴定和测序分析,确认重组质粒完整正确;大量抽提重组质粒,测定其拷贝浓度,10倍稀释成梯度标准品,并进行荧光定量PCR检测分析.结果:nm23-H1基因目的片段成功重组至pMD18-T载体上,获得的重组质粒保持了目的片段的特异性和序列完整性.梯度浓度标准质粒的荧光定量PCR结果显示,循环阈值(Ct)与起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系.结论:成功构建了nm23-H1基因实时荧光定量PCR质粒标准品.

    作者:张传海;刘秋英;金琳;刘格;郭朝万;张美英;王一飞 刊期: 2007年第04期

  • 混合基体改进剂测定尿镉

    目的:找出能消除基体干扰的基体改进剂,建立用石墨炉原子吸收光谱仪简便、快速、准确地直接测定尿中镉的方法.方法:选择几种基体改进剂组合,经石墨炉原子吸收光谱法测定找出效果好的一组,调整基体改进剂的不同成分,找出佳改进剂.结果:含1.0%HNO3+0.5%NH4H2PO4的混合基体改进剂测定效果好.方法的检出限为0.033μg/L,相对标准偏差2.5%,回收率为96.9%~102%.结论:利用含1.0%HNO3+0.5%NH4H2PO4的混合基体改进剂直接测定尿中镉能有效消除基体干扰,是一种简便、快速、准确的测定尿中镉的方法.

    作者:李月欢;徐淑暖;彭寨玉;杜二青;莫曦明 刊期: 2007年第04期

  • ICP-MS同时测定食盐中的Pb、Cd、Cu、As和Ba

    目的:建立ICP-MS同时测定食盐中Pb、Cd、Cu、As和Ba的分析方法.方法:采用0.1%HNO3溶解后直接用ICP-MS进行分析.结果:整个方法的检出限为0.008~0.044 mg/kg,可以满足测定的要求,精密度优于3.5%,回收率为96.0%~106%.对3个标准参考物质的分析结果令人满意.结论:可用ICP-MS同时测定食盐中Pb、Cd、Cu、As和Ba,整个方法具有简单、快速和准确的特点.

    作者:彭荣飞;甘平胜;黄聪 刊期: 2007年第04期

中国卫生检验杂志

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