黄祝;蒋超;徐会茹;王晨阳;侯林;姚兵
目的 建立血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体的ELISA法,探讨其在类风湿关节炎(RA)患者中的应用价值.方法 以自提可溶性鸡Ⅱ型胶原蛋白(soluble chicken collagen type Ⅱ,SCC Ⅱ)作为包被抗原,优化实验条件,建立抗Ⅱ型胶原蛋白抗体间接ELISA法.对124例RA病人和54例健康人血清抗II型胶原蛋白抗体进行检测.结果 血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体的检测条件为:SCCⅡ包被浓度为20 μg/ml;以含10%羊血清的缓冲液进行封闭、稀释血清和酶标抗体;采用双波长(450nm/630 nm)进行测定.RA患者和健康人血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体阳性率分别为19.35%(24/124)和1.85%(1/54),两组有明显的统计学差异(P<0.01).结论 以SCCⅡ为包被抗原检测抗Ⅱ型胶原蛋白抗体可作为判断RA患者病情的一个辅助诊断指标.
作者:姜旭淦;陈盛霞;吴琴;汤俊民;马建芬;储青;吴亮;颜小云;刘获;姚加平;许化溪;XU Huaxi 刊期: 2008年第03期
目的 了解分离自新生儿的肺炎链球菌pbp2B、murM基因突变状况与头孢菌素耐药情况.方法 用PCR法检测8株肺炎链球菌pbp2B、murM突变基因.结果 8株肺炎链球菌均检出pbp2B突变基因.murM基因获得3种不同的序列,与美国国立生物信息中心(NCBI)已登录的序列均不同.结论 pbp2B突变基因并不一定导致头孢菌素耐药,murM基因突变可致青霉素高水平耐药和头孢菌素耐药.
作者:承晓京;范燕燕;周惠娜;郑亚芬 刊期: 2008年第03期
抗磷脂综合征(antiphospholipid syndrome,APS)是一类由抗磷脂抗体(antiphospholipid antibody,aPL)引起的自身免疫性疾病.它由Hughes等于1986年命名,1999年首次制定其诊断标准,一般称为Sapporo(札幌)标准[1].
作者:李娜;周红;齐名 刊期: 2008年第03期
1 在固定时间内作管道冲洗由于使用时间较长,管路存在一定程度的老化现象,容易附着一些结晶物之类的物质,造成堵塞、负压减低等一系列问题,必须在固定时间内作管道冲洗.
作者:贾方增 刊期: 2008年第03期
人工肝支持系统(artificial liver support system,ALSS)对于重症肝炎病人可以暂时替代病变的肝脏,使肝脏功能恢复或为下一步肝移植作准备.重症肝炎病人易出现凝血、抗凝血、纤溶系统功能失衡,表现多种指标异常.
作者:张小琼;张杰;陆琳 刊期: 2008年第03期
本院采用UF-50型尿沉渣分析仪检测随机尿液标本439份尿沉渣并与显微镜检查对照,结果(表1)报告如下.
作者:翁厚光 刊期: 2008年第03期
我科从1例慢性肾功能衰竭患者多标本中分离培养出侵袭性阿萨希毛孢子菌(Trichosporon asahii)和克柔假丝酵母菌,报告如下.1 临床资料患者,女,35岁,2007年6月25日因患狼疮性肾炎(肾功能衰竭期)并发腹膜感染入住我院肾科.
作者:唐芹芳;文怡;梅亚宁;顾兵;赵旺胜;陈友华 刊期: 2008年第03期
人类基因组测序完成为通过分析蛋白质来诊断疾病提供了前所未有的机会.作为研究蛋白质全貌的蛋白质组学技术也因此得到了空前的发展.人们对采用蛋白质组学技术寻找新的生物标志物并应用于临床寄予了很高期望.既往,主要是通过双向凝胶电泳比较差异蛋白质寻找蛋白质生物标志物,虽然该技术分离蛋白质有很好的效果,但由于操作繁琐、敏感性低,特别是在分析小分子量蛋白时更是显得力不从心,限制了该技术用于临床标本的大规模筛查分析,使其一直局限于基础研究,难以进入临床研究及应用.
作者:胡朝军;李永哲 刊期: 2008年第03期
人苍白杆菌(Ochrobactrum anthropi)是有鞭毛的革兰阴性需养菌,属苍白杆菌属,为条件致病菌,临床比较少见.我院从1例肺部感染患者痰中分离出1株.
作者:宋艳红;薛秋婷 刊期: 2008年第03期
目的 系统评估本室临床化学33项指标的检测试剂对抗坏血酸、乳糜、血红蛋白、结合胆红素、游离胆红素的抗干扰性能.方法 以待评估试剂对上述各干扰物的6个不同水平样品检测,计算各水平检测均值与0点检测均值的比值,规定实验结果在90%~110%区间之内为无干扰区间.结果 抗坏血酸对UA、DBil产生负干扰;游离胆红素对CK-MB、DBil产生正干扰.对GGT产生负干扰;结合胆红素对P产生正干扰,对UA产生负干扰;血红蛋白对ALT、AST、LDH、HBDH、CK、CK-MB、TBil、DBil、Fe、UIBC(铁不饱和结合力)、TIBC(总铁结合力)、UA产生正干扰,对TBA、Amy、ALP、GGT产生负干扰;乳糜对DBil、TP产生负干扰,对Mg、GGT产生正干扰.结论 临床化学抗干扰性能的评估为临床实验室检验结果的解释和检验试剂的选择提供参考.
作者:文江平;郭拥军;鲁辛辛;刘向祎 刊期: 2008年第03期
目的 建立检测人血浆DNA中RASSF1A基因甲基化的方法.方法 以肺癌细胞株NCI-H460作为RAssF1A基因启动子区甲基化阳性样本,传统酚/氯仿法提取细胞DNA,经紫外分光光度计定量后以10倍稀释的浓度梯度依次投入到200 μl健康人血浆中,制备得到模拟肺癌患者血浆.用磁珠法从模拟血浆样本和15例早期肺癌患者血浆中提取总DNA.对血浆DNA模板进行亚硫酸氢盐化学修饰,并以TaqMan技术的实时荧光定量甲基化特异性PCR(MSP)进行检测.以模拟血浆样品作为标准品,用外标准曲线法对肺癌患者血浆中的甲基化RASSF1A进行定量.结果 实时荧光定量MSP对模拟肺癌患者血浆的检测低限为150拷贝(甲基化的肿瘤DNA)/ml(血浆).15例肺癌患者5例RASSF1A甲基化阳性(33.3%).5例肺癌患者血浆中甲基化的RASSF1A基因的浓度分别为2.56×103,8.20×104,1.45×104,3.31×104和4.24×104拷贝/ml.结论 实时荧光定量MSP法检测肺癌患者血浆DNA中RASSF1A基因甲基化,灵敏度高,特异性强.
作者:高丽;潘世扬;束永前;谢而付;陈进步;赵文君;穆原;张丽霞;陈丹;黄珮珺;张寄南 刊期: 2008年第03期
2007年10月,我科细菌室从某骨折患者伤口分泌物中分离出1例触酶试验阴性的金黄色葡萄球菌,现报道如下.1 病例摘要患者,男,14岁,因右手小指外伤后肿胀,疼痛,功能受限一月余入院,临床诊断为右小指末节骨折.
作者:陶月;张之烽;宁明哲;周宁莉 刊期: 2008年第03期
目的 探讨转录因子FoxP3在外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)内的表达特性.方法 取正常人外周血单个核细胞(PBMC),经固定/透膜处理进行细胞内染色,用流式细胞术(FCM)检测T细胞内FoxP3.以抗人CD3/CD28诱导T细胞活化,再用定量PCR及FCM术分别检测FoxP3 mRNA及蛋白质表达水平.结果 FoxP3主要表达于CD4+ T细胞,尤其是CD25高表达的CD4+T细胞,达97%左右;中等程度表达CD25的细胞中也含有少量FoxP3阳性细胞.T细胞活化后,表达FoxP3的CD4+ CD25+T细胞比例显著增高,FCM检测结果与定量PCR结果一致.结论 FoxP3不仅参与维持Treg细胞的功能,也与T细胞的活化有关.FCM检测细胞核内表达的FoxP3分子为研究Treg细胞提供了一种快速、简便的方法.
作者:焦志军;尤海燕;陈蕾;汪毅;王文红;邵启祥 刊期: 2008年第03期
目的 建立实时荧光PCR进行apoE单核苷酸多态性(SNP)分析法,快速检测人栽脂蛋白E(apoE)等位基因.方法 以人apoE基因中的Cys112Arg为研究对象,用荧光染料SYBR Green Ⅰ标记PCR产物,通过熔解曲线分析结果,并进行SNP分型.用高保真DNA聚合酶提高SNP测定的特异性;通过DNA测序验证荧光定量PCR对apoE基因Cys112Arg分型结果的准确性.结果 每个样品设立2个检测管,利用下游引物P2和SNP检测引物P33、P44进行定量PCR反应,30份样品各自获得2种等位基因扩增产物的熔解曲线,通过熔解曲线的Tm值判读,在30份样本中,apoE基因型3/3、3/4分别有27例和3例,与PCR-RFLP及DNA测序结果一致.结论 建立的apoE等位基因分型法操作简便,结果准确,适合人外周血apoE等位基因的定性检测.
作者:严冰冰;虞涛;方华红;覃瑞;游上游 刊期: 2008年第03期
目的 探讨B细胞性非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)组织中Skp2和p27kip1蛋白的表达、定位及意义.方法 用免疫组织化学方法检测72例B-NHL和14例反应性增生淋巴结组织Skp2、p27kip1蛋白及细胞增殖指标Ki-67的表达情况,结合病理资料进行统计分析;用免疫荧光双标记技术检测淋巴瘤Raji细胞株Skp2和p27kip1蛋白的定位情况.结果 Skp2蛋白在B-NHL组织中的表达高于反应性增生的淋巴结(不含生发中心),在侵袭性B-NHL组织中的表达高于惰性组;p27kip1蛋白在B-NHL组织中的表达低于反应性增生淋巴结(不含生发中心),在侵袭性B-NHL组织中的表达低于惰性组;skp2蛋白主要在Raji细胞的胞浆中表达,p27kip1蛋白主要表达于胞核.结论 在B-NHL组织中,Skp2的高表达和p27kip1的低表达可能与其发生发展有关;skp2和p27kip1在Raji细胞中的亚细胞定位与其生物学功能一致.
作者:陆建明;陆建新;沈爱国;张冬梅;王燏婵;何松;程纯 刊期: 2008年第03期
目的 测定肝细胞癌(HCC)癌组织和非癌组织的HBVcccDNA含量,探讨癌组织HBVcccDNA与HCC的关系.方法 采用荧光定量PCR检测45例肝细胞癌患者癌组织和非癌组织中总HBVDNA和HBVcccDNA含量,分析2种组织中HBVc-ccDNA和总HBVDNA与癌组织病理分级的关系.结果 血清HBsAg阳性的癌组织较对应非癌组织总HBV DNA无显著性差异(4.33±1.1 vs 4.13±1.09,P=0.439),而癌组织HBVcccDNA水平显著升高(3.09±1.22 vs 2.62±0.97,P=0.039),HB-VcccDNA所占比例也显著升高(70.09% vs 62.33%,P=0.015);42例中有14例(33%)的癌组织HBVcccDNA几乎成为HB-VDNA唯一存在形式;3例血清HBsAg阴性的HCC中均检测到了HBVcccDNA的存在,且HBVcccDNA比例均较高;癌组织和非癌组织HBVcccDNA与组织总HBVDNA均呈正相关(r=0.8244,P<0.001;r=0.8460,P<0.001);癌组织中HBVcccDNA定量和肿瘤的病理分级无明显相关性(P>0.05).结论 肝癌组织中HBVcccDNA水平和所占比例较非癌组织均升高,HBVc-ccDNA在肝细胞癌变中有重要的作用,但水平与肝细胞癌的病理分级无明显相关.
作者:李涛;任万华;许世峰;主余华;韩国庆;石军 刊期: 2008年第03期
目的 应用ROC曲线探讨UF-100自动尿液分析仪定量检测尿液白细胞和细菌数作为筛检细菌培养标本的可行性.方法 分别用定量细菌培养法和UF-100自动尿液分析仪检测300例疑似泌尿系统感染患者清洁中段尿标本.结果 UF-100尿液分析仪检测WBC数和细菌数的ROC曲线下面积分别为0.813和0.931;以白细胞数≥30/μl和细菌数≥4341/μl为阈值筛检需要细菌培养的标本,敏感性为83.8%,特异性为87.1%,阳性似然比为6.50,阴性似然比为0.19.结论 以UF-100尿分析仪检测白细胞数≥30/μl和细菌数≥4341/μl作为筛选培养标本的阈值,具有良好的分析性能,可作为尿路感染筛检的一项有价值的指标.
作者:石晶;赵敏;欧阳金铭 刊期: 2008年第03期
我们对343例哮喘患儿进行吸人性过敏原特异性IgE抗体(sIgE)体外检测,了解本地区哮喘儿童常见过敏原分布情况,为预防和治疗提供依据.
作者:唐寅;许中;陆恽 刊期: 2008年第03期
洋葱伯克霍尔德菌复合体(Burkholderia cepacia complex,BCC)是一组关系相近的非发酵革兰阴性杆菌,广泛分布于自然界和临床环境.BCC是机会致病菌,常定植于囊性纤维化(cystic fibrosis,CF)、慢性肉芽肿(chronic granulomatous)患者的肺部,是CF患者的高毒力、高致命性病原菌,也是引起抵抗力低下患者医院感染的重要病原菌.
作者:李金钟 刊期: 2008年第03期
生化分析仪在自动分析过程中存在着携带污染现象[1-3],我们在实际工作中发现,肌酐(Cr)试剂(碱性苦味酸法)对测定直接胆红素(D-Bil)结果有负干扰,对测定载脂蛋白B(apoB)结果有正干扰.为此,我们用Olympus AU2700全自动生化分析仪进行了相关实验,结果报道如下.
作者:王时南;金明慧 刊期: 2008年第03期