郭长青；胡艳艳；邵经浩；褚燕君；张连峰；徐峰；乔瑞敏；卢瑞利
布加综合征（Budd—Chiar isyndrome，BCS）是血管性病变，外科手术和介入治疗是有效的治疗手段，其术前的影像诊断十分重要。作者结合数字减影血管造影（digital subtraction angiography，DSA）检查结果，将BCS患者下腔静脉（inferior vena cava，IVC）病变的二维及彩色多普勒超声图像（CDFI）与MRI图像进行对比，探讨两种检查方法对BCS患者IVC病变的诊断价值。
作者：王学清；贺晓 刊期： 2010年第06期
目的：观察RNA干扰沉默肾癌细胞株OS-RC-2的环氧合酶-2（COX-2）基因表达对肾癌细胞生长及体外侵袭能力的影响。方法：构建靶向COX-2的小干扰RNA（siRNA）真核表达质粒pSilencer2.0-U6-COX-2-siRNA。将对数生长期的OS-RC-2细胞分3组,干扰组转染pSilencer2.0-U6-COX-2-siRNA,空转组转染pSliencer2.0-U6,对照组不转染。培养72h后采用半定量RT-PCR、Westernblot检测COX-2mRNA和蛋白表达,CCK8增殖抑制实验观察细胞生长情况,改良Boyden小室法评估细胞体外侵袭能力。结果：酶切和测序证实pSilencer2.0-U6-COX-2-siRNA构建成功。3组细胞COX-2mRNA和蛋白的表达、细胞存活率及穿孔细胞数差异均有统计学意义（F分别为189.800,89.326,188.403和75.349,P均〈0.001）。与其他2组比较,干扰组COX-2mRNA及蛋白表达下调（P〈0.05）,细胞存活率、穿孔细胞数降低（P〈0.05）。结论：COX-2有望成为肾癌基因治疗的靶点。
作者：李金锋；丰贵文；王跃；庞新路；尚文俊；郭亮；朱同玉；王国民 刊期： 2010年第06期
目的：研究肿瘤相关抗原MAGE-1的抗肿瘤生物活性。方法：取健康人外周血,分离树突状细胞和T淋巴细胞。用脂质体介导法分别将质粒pcDNA3.1-MAGE-1和pcDNA3.1转染人肝癌SMMC-7721细胞株,设未转染的SMMC-7721细胞株为空白对照组,应用Real-timePCR检测3组细胞中MAGE-1 mRNA的表达;再分别用以上3种细胞的冻融抗原致敏树突状细胞,使其激活T淋巴细胞成为细胞毒性T淋巴细胞（CTL）。应用乳酸脱氢酶释放法检测CTL对野生型SMMC-7721细胞的杀伤活性。结果：pcDNA3.1-MAGE-1转染组MAGE-1 mRNA的表达量为（1.211±0.586）,空质粒转染组及未转染组分别为（0.412±0.021）和（0.452±0.317）,3组比较,差异有统计学意义（F=538.652,P〈0.001）。转染pcDNA3.1-MAGE-1重组质粒、pcDNA3.1空质粒的SMMC-7721细胞和未转染的野生型SMMC-7721细胞的冻融抗原所激活的CTL对野生型SMMC-7721细胞的杀伤活性分别为（48.26±2.47）%、（25.84±2.72）%和（26.27±0.81）%,3组比较,差异有统计学意义（F=139.607,P〈0.001）。结论：肿瘤相关抗原MAGE-1能够在体外诱导细胞抗肿瘤免疫反应。
作者：何炜；刘甲；郭玉琴；刘新郑 刊期： 2010年第06期
目的：构建杜氏盐藻cDNA文库并从该文库中筛选类驱动蛋白钙调素结合蛋白（KCBP）基因cDNA序列。方法：取对数生长期的杜氏盐藻细胞,提取总RNA并分离纯化mRNA,反转录合成双链cDNA,连接到pAP3neo载体上,采用电转化法将重组质粒转化大肠杆菌DH10B。计算平板上单菌落数,测定文库的滴定度和重组率。运用PCR法筛选含有KCBP基因特异片段的质粒。结果：文库滴定度为5.6×106pfu/mL,重组率在90%左右,插入片段长度在0.4～6.0kb,平均长度为1.9kb。利用PCR法从该文库中筛选到了含有新基因KCBP特异片段的单菌落,经测序与cDNA末端快速扩增（RACE）-PCR获得的杜氏盐藻KCBP基因cDNA序列相符,此序列属于kine-sin-14家族。结论：成功构建杜氏盐藻cDNA文库,并从该文库筛选出一个kinesin样cDNA序列。
作者：柳丽平；李杰；王翠；阎赘梦；薛乐勋 刊期： 2010年第06期
目的：检测不同品系SV40T转基因小鼠血浆胃泌素水平。方法：取已建立的8个品系SV40T转基因小鼠和B6小鼠空腹血,应用ELISA法检测血浆胃泌素水平。结果：B6小鼠、2#、4#、16#、24#、51#、57#、61#和73#品系转基因小鼠血浆胃泌素水平（μg/L）分别为（2.814±0.209）、（1.135±0.114）、（0.853±0.701）、（2.371±0.335）、（1.371±0.190）、（0.685±0.374）、（2.274±0.251）、（2.471±0.251）和（0.986±0.173）,9组相比,差异有统计学意义（F=17.449,P〈0.001）;其中2#、4#、24#、51#及73#品系转基因小鼠血浆胃泌素水平较B6小鼠明显降低（P〈0.05）。结论：筛选出了5个稳定表达的SV40T转基因小鼠品系。
作者：申琦；邵蓓新；郜十伟；陈辉；张钦宪 刊期： 2010年第06期
目的：构建具有绿色荧光蛋白（GFP）标记及嘌呤霉素（puro）抗性的重组慢病毒载体。方法：改建慢病毒载体质粒pLKO-1-puro的多克隆位点（MCS）,以质粒pEGFP-C3为模板扩增出CMV-EGFP并与pLKO-1-puro连接,形成重组的慢病毒载体质粒pLKO-1-EGFP-puro,后者与包装质粒Δ8.2和包膜蛋白质粒VSV-G在293T细胞中进行包装,产生重组慢病毒颗粒,感染非洲绿猴肾细胞Vero细胞,观察GFP的表达。结果：成功改建了慢病毒载体质粒pLKO-1-puro并插入了CMV-EGFP,形成了新型慢病毒载体质粒pLKO-1-EGFP-puro。3质粒共转染293T细胞产生的重组慢病毒颗粒感染Vero细胞后高表达绿色荧光。结论：成功构建了高效的带GFP报告基因及嘌呤霉素抗性的慢病毒载体。
作者：宋波；韩志强；吴少璞；刘景伟；蔡晓辉；杨靖；许予明 刊期： 2010年第06期
目的：建立小鼠腹水型肝癌（Hca）多药耐药（MDR）模型并探讨其产生的分子机制。方法：荷Hca小鼠分为2组,每组10只。化疗组采用临床化疗FAP方案,以剂量递增的方法诱导耐药模型,对照组仅给予等体积的生理盐水。MTT法检测瘤细胞对7种化疗药物的耐药性;流式细胞术检测瘤细胞对Rh123的蓄积与泵出能力,计算平均荧光强度（MFI）;RT-PCR检测瘤细胞mdr1和mrp1mRNA的表达及停药后化疗组小鼠瘤细胞mdr1和mrp1mR-NA的表达。结果：化疗组小鼠瘤细胞对7种化疗药物均产生耐药性。与对照组相比,化疗组小鼠瘤细胞内Rh123蓄积量减少,泵出率增加（t=6.067和6.811,P均〈0.05）,mdr1和mrp1mRNA的表达水平升高（t=18.807和4.420,P均〈0.05）;mdr1和mrp1mRNA的表达水平在停药4周内稳定（P〉0.05）,停药8周后下降（P〈0.05）。结论：成功建立了小鼠腹水型肝癌MDR模型,MDR的产生与mdr1和mrp1mRNA过度表达从而影响药物蓄积有关。
作者：王欣；张艳；王宁；江金花；郑立运；王庆端 刊期： 2010年第06期
以往针对乳头溢液疾病的诊断方法主要有溢液涂片细胞学检查、乳管造影等，但这些方法均存在诊断率不高、不直观且定位困难等缺点［1］。2007年6月至2009年6月，新乡市中心医院头颈乳腺科运用乳管镜对114例乳头溢液患者进行了诊治，效果良好，报道如下。
作者：冯跃庆；王钟富；张志敏 刊期： 2010年第06期
目的：观察虎杖总蒽醌对糖尿病肾病（DN）肾脏皮质糖基化终末产物（AGEs）、糖基化终末产物受体的（RAGE）影响。方法：运用链脲佐菌素制作DN模型,将成模NH小鼠随机分为模型组,开搏通组,虎杖总蒽醌高、中、低剂量组（每组17只）,另外选取17只NH小鼠作为正常对照组。运用荧光法、免疫组化法分别观察小鼠肾脏皮质AGEs、RAGE水平的变化。结果：与正常对照组相比,模型组组小鼠肾皮质AGEs水平明显升高,而高、中剂量虎杖总蒽醌组肾脏皮质AGEs水平明显下降（F=15.200,P〈0.001）;模型组小鼠肾皮质RAGE的表达高于正常对照组,而高、中剂量虎杖总蒽醌组较模型组降低,差异具有统计学意义（F=12.485,P〈0.001）。结论：AGEs、RAGE与DN形成有关;虎杖总蒽醌能够降低DN小鼠肾皮质AGEs水平,抑制肾RAGE的表达。
作者：王辉；陈清江；杨再刚；李伟；燕树勋；张冰；苗明三 刊期： 2010年第06期
妊娠合并血小板减少（pregnant women compli-cared with thrombocytopenia，PT）是围生期的一种常见病，约占妊娠总数的3．7％[1]。多数患者预后良好，少数病例会导致产后出血、新生儿颅内出血等严重后果。作者回顾性分析了2004年1月至2007年12月郑州大学第一附属医院收治的207例PT患者的临床资料，报道如下。
作者：赵先兰；张苗苗；张连琴；孙璐路 刊期： 2010年第06期
目的：探讨HPV感染及k-ras基因突变与直肠腺癌的关系。方法：应用PCR/SSCP银染法检测75例直肠腺癌患者癌及相应正常大肠黏膜组织中HPV DNA和k-ars基因第12、13密码子。结果：直肠腺癌组织中HPVDNA阳性检出率为73.3%（55/75）,而正常黏膜未检测到HPV DNA。HPV感染与患者年龄、Duke’s分期及淋巴结转移有关,而与患者的族别、性别、肿瘤直径、大体类型、组织学类型及浸润深度无关。75例直肠腺癌组织中检测到k-ras基因突变34例（45.3%）,均与患者年龄、肿瘤的大体类型、组织学类型、侵袭深度、淋巴结转移及Duke’s分期无关,且与HPV感染亦无关联（χ2=0.240,P=0.624,rP=0.056）。结论：HPV感染可能是导致直肠腺癌恶性表型的重要因素;而k-ras基因突变与HPV感染无关。
作者：杨新辉；赵泽亮；库热西；王海江；范川文；赵为民；孙振强 刊期： 2010年第06期
颧骨是颌面部为突出的骨骼，在遭受外力时，颧骨及其周围骨骼容易发生骨折，称为颧骨复合体骨折，是颌面部常见的骨折之一［1］。郑州人民医院2002年3月至2007年6月采用头皮冠状切口，选择性辅助局部切口入路，应用坚固内固定技术对21例颧骨复合体骨折患者进行手术治疗，疗效满意，现报道如下。
作者：董爱芬 刊期： 2010年第06期
特约述评预报、预测和预警方法及其应用………………………………… … 赵耐青（1）急性心肌梗死患者应用药物洗脱支架的安全性和有效性评估……马长生，乔岩（173）股骨头坏死的治疗策略与疗效评价…………………………王义生（533）
作者： 刊期： 2010年第06期
过敏性紫癜也称亨一舒综合征（Henoch—Schon—lein purpura，HSP），是一种儿童常见的系统性血管炎性综合征，多发于学龄前和学龄儿童，其发病呈逐年增多趋势。HSP的发病机制目前仍未明确，感染常常是HSP的诱发因素。为探讨HSP与病原体感染的关系，指导临床治疗，作者检测了50例HSP患儿和50例健康对照儿童9种病原体的感染情况，现报道如下。
作者：李晓红；盛光耀 刊期： 2010年第06期
目的：纯化杜氏盐藻葡萄糖-6-磷酸异构酶（GPI）重组蛋白,制备多克隆抗体。方法：PCR扩增得到两端分别添加NdeⅠ和EcoRⅠ酶切位点的GPI基因,双酶切后插入原核表达载体pET28a（＋）,得到重组载体pET28a-GPI,经鉴定正确后,用该重组载体转化大肠杆菌BL21（DE3）,IPTG诱导表达后用镍离子柱纯化目的蛋白并免疫新西兰白兔,间接ELISA和Westernblot法检测抗体的效价和特异性。结果：杜氏盐藻GPI基因在大肠杆菌BL21（DE3）中得到高效表达,占总蛋白的41.6%。以高纯度的目标蛋白作为抗原免疫新西兰白兔,得到抗GPI的抗血清。间接ELISA检测抗血清效价达到1：512000,Westernblot检测证实抗血清能与目的蛋白特异性结合。结论：成功纯化了杜氏盐藻GPI重组蛋白并制备了特异性的GPI多克隆抗体。
作者：张磊；崔柳青；李杰；刘红涛；薛乐勋 刊期： 2010年第06期
目的：探讨白藜芦醇对胃癌BGC-823细胞中凋亡相关基因人程序化死亡分子5（PDCD5）表达的影响,并观察白藜芦醇诱导BGC-823细胞凋亡的效应。方法：分别用25、50、100和200μmol/L的白藜芦醇处理BGC-823细胞24、48和72h后,采用免疫细胞化学和原位杂交方法检测PDCD5表达的变化;运用流式细胞仪和TUNEL法检测细胞凋亡情况。另设空白对照组和溶剂对照组。结果：同一时间点,6组PDCD5蛋白及mRNA的表达差异均有统计学意义（F蛋白=211.881、242.438和184.866,P均〈0.001;FmRNA=207.366、148.411和158.661,P均〈0.001）;同一浓度,24、48和72h时点各组比较,PDCD5蛋白及mRNA的表达差异均无统计学意义（F蛋白=0.950、1.870、2.218和2.232,P均〉0.05;FmRNA=1.267、2.376、1.221和2.292,P均〉0.05）。各组BGC-823细胞凋亡指数比较,差异有统计学意义（F=230.069,P〈0.001）。结论：凋亡相关基因PDCD5可能在白藜芦醇诱导胃癌BGC-823细胞凋亡过程中发挥重要作用。
作者：李晓芳；柴雅玫；文小岗；周强；王志勇；崔黎；陈奎生 刊期： 2010年第06期
目的：构建人SMRT基因真核和原核表达载体。方法：体外人工合成SMRT-C645bp对应的基因片段,克隆至pUC57载体,酶切,测序正确后,PCR扩增目的基因片段,酶切后亚克隆至pCMV-myc载体和pGEX-6p-1载体,并酶切和测序鉴定。结果：成功构建了人pCMV-myc-SMRT真核表达载体和pGEX-6p-1-SMRT原核表达载体。结论：成功构建了人SMRT真核和原核表达载体,为下一步蛋白间相互作用的证实提供了基础。
作者：王春美；盛光耀；卢洁；郝庆飞；谢垒；白松婷；许松涛；薛乐勋 刊期： 2010年第06期
目的：分析24个常染色体短串联重复序列（STR）在河南省汉族群体的遗传多态性及其在亲子鉴定案例中的应用价值。方法：应用多位点复合PCR扩增技术及聚丙烯酰胺凝胶电泳分型技术,对773例亲子鉴定案例进行分析。结果：D7S3048、D18S51、D8S1179、D8S1132、D11S2368、D2S1338、D4S2639和D12S391的个体识别率≥0.94,观察杂合度≥0.79,多态性信息含量≥0.80,且这些位点参与联合排除父权率均在40%以上。结论：短串联重复序列D7S3048、D18S51、D8S1179、D8S1132、D11S2368、D2S1338、D4S2639和D12S391可作为亲子鉴定的首选基因座,在法医学应用和群体遗传学研究中有较高的价值。
作者：陈辉；徐朝阳；李晓文；郑红；程晓丽；贺颖；宋国英；刘华 刊期： 2010年第06期
64层螺旋CT为冠心病筛查提供了一种准确而有效的诊断方法，但该检查易受心率的影响而使冠状动脉图像质量下降，严重时部分冠状动脉节段无法评价，从而导致检查的失败。该研究探讨心率对64层螺旋CT冠状动脉成像质量的影响及采取的相应对策，报道如下。
作者：陈燕浩；金朝林；张树桐 刊期： 2010年第06期
随着人们生活水平的提高，糖尿病的患病率越来越高，白内障是糖尿病的主要并发症之一。目前显微技术的发展使得自内障手术目趋成熟，并发症也越来越少。但是糖尿病患者白内障手术后的急性前房炎症反应较重，严重影响患者的术后效果。
作者：帖红艳；陈彬川；王永成 刊期： 2010年第06期
郑州大学学报（医学版）杂志
主管:河南省教育厅
主办：郑州大学
