汪群英
目的:构建含单纯疱疹病毒胸苷激酶(HsV-tk)基因的真核表达载体(pcDNA3-tk),并观察能否在食管癌细胞株中表达.方法:将HsV-tk的cDNA亚克隆于真核表达载体pcDNA3上,构建pcDNA3-tk.后者经脂质体介导转染食管癌细胞株Eca-109,通过高剂量的G418选择培养,筛选出抗性克隆.经RT-PCR检测确定HsV-tk基因是否能在转染细胞内转录.结果:成功地构建了真核表达载体pcDNA3-tk,并且在pcDNA3-tk转染的食管癌细胞内发现tk基因的mRNA.结论:含HsV-tk基因的真核表达载体能在食管癌细胞中表达.
作者:李杰;郭玉忠;谢华;薛乐勋 刊期: 2004年第01期
目的:研究铜绿微囊藻在铜离子胁迫下的生长及生理学效应和其培养的佳铜离子浓度.方法:根据铜绿微囊藻在不同浓度铜离子中的生长,光合速率、超氧化物歧化酶(sOD)活性及类金属硫蛋白(MTL)的变化进行实验.结果:①在10-5~10.mol/L范围内,Cu2+浓度越高,对微囊藻生长的抑制越强,铜绿微囊藻生长适的cu2+的浓度为10-6mol/L.②低浓度(10-7~10-6mol/L)的Cu2+对铜绿微囊藻SOD活性没有诱导作用,但可以作为微量元素促进铜绿微囊藻的生长;中浓度(10-5~10-4mol/L)的Cu2+能够诱导铜绿微囊藻SOD活性增强;而高浓度(10-3~10-2mol/L)的Cu2+对铜绿微囊藻细胞产生毒性作用,抑制铜绿微囊藻生长.③10-5mol/L Cu2+能诱导铜绿微囊藻产生MTL,且量大;10-6mol/L Cu2+诱导铜绿微囊藻产生MTL的量较小;10-3mol/L Cu2+对铜绿微囊藻生长有很强的抑制作用,诱导生成MTL的量少.6~9 d诱导MTL的量大,抗性株在相同时间内诱导MTL的量远大于野生株.结论:不同浓度的铜离子可影响铜绿微囊藻的生长及生理活动,10-6moL/L的铜离子是铜绿微囊藻生长的适浓度.
作者:刘红涛;李杰;席宇;赵以军;薛乐勋 刊期: 2004年第01期
目的:观察增殖性糖尿病视网膜病变(PDR)中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和表皮生长因子(EGF)的变化.方法:20例PDR伴不同程度增生性玻璃体视网膜病变(prolifrative vitreoretinopathy,PVR)的患者为观察组,20例健康人及无眼病的尸体眼10眼为对照,用放射免疫方法检测观察组和对照组血清及玻璃体切割物中IGF-1及EGF的含量.结果:PDR患者血清及玻璃体切割物中IGF-1及EGF的含量明显高于对照组(P<0.01);观察组玻璃体与血清中IGF-1及EGF含量差异无统计学意义(P>0.05).结论:PDR患者血清及玻璃体切割物中高表达IGF-1及EGF,IGF-1及EGF在PDR的发生和发展中起重要作用.
作者:赵宏;王新;朱冬梅;高延庆;张蕾;李铮 刊期: 2004年第01期
目的:构建盐藻荧光素酶基因表达载体.方法:分别用合适的限制性内切酶消化载体pGL3-Enhancervector、pD-B、pMD-CA和pMD-rbcs,胶回收适当的片段,T4 DNA连接酶过夜连接,转化宿主菌大肠杆菌JM109.挑取阳性克隆,提取质粒DNA,酶切鉴定.结果:得到含盐藻自身启动子碳酸酐酶(CA)基因启动子、双倍重复碳酸酐酶(DCA)基因启动子和来自衣藻的1,5二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶小亚基(rbcs)基因启动子,以及荧光素酶(Luc)基因为外源基因的3个盐藻表达载体.结论:构建了3个杜氏盐藻荧光素酶表达载体.
作者:柴玉荣;王天云;侯桂琴;侯卫红;谢华;袁保梅;王建民;薛乐勋 刊期: 2004年第01期
目的:从土壤中筛选出能立体选择性水解布洛芬乙酯,并且水解产物为S-布洛芬的菌株.方法:土样通过吐温20培养基初筛到酯酶活力较高的菌株,并通过复筛测定菌株水解布洛芬乙酯的产物旋光度,从而得到活性菌株.结果与结论:用筛选到的菌株Candida sp.的培养物催化水解布洛芬乙酯所得产品的外观、熔点、旋光度和核磁共振色谱等各项检测指标与Sigma公司的标准品S-布洛芬基本一致,表明该菌株具有生产S-布洛芬的潜力.
作者:谈重芳;王雁萍;吴健;史贤明;刘宏民;秦广雍;霍裕平 刊期: 2004年第01期
目的:验证莱茵衣藻叶绿体atpA启动子在杜氏盐藻叶绿体中的转录活性.方法:以绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)为报告基因,将报告基因插入莱茵衣藻叶绿体atpA启动子与rbcL终止子之间,构建载体pSP71-atpA-EGFP,用基因枪法转入杜氏盐藻叶绿体中,通过荧光显微镜观察EGFP基因在atpA启动子控制下的表达,以验证atpA启动子在杜氏盐藻叶绿体中的生物活性.结果:荧光显微镜下观察到EGFP在杜氏盐藻叶绿体中得到了表达.结论:莱茵衣藻叶绿体atpA启动子在杜氏盐藻叶绿体中有转录起始活性,可以应用于杜氏盐藻的叶绿体转化.
作者:潘卫东;吕玉民;张贵星;牛向丽;侯桂琴;薛乐勋 刊期: 2004年第01期
目的:研究釉原蛋白基因在良恶性成釉细胞瘤中的表达,为判断成釉细胞瘤细胞分化程度寻找有效指标.方法:收集存档的良恶性成釉细胞瘤标本72例,其中良性55例(包括滤泡型18例,丛状型20例,棘皮瘤型11例和颗粒细胞型6例),恶性17例,用原位杂交方法检测釉原蛋白基因在肿瘤组织中的表达,以12例牙胚标本作阳性对照.结果:釉原蛋白mRNA阳性表达位于肿瘤性上皮细胞胞浆内,55例良性肿瘤中,42例呈阳性表达(76.4%),各组织学类型间阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05),恶性17例有2例呈阳性表达(11.8%),其阳性表达率显著低于良性成釉细胞瘤(P<0.01).结论:釉原蛋白基因可以作为判断成釉细胞瘤细胞分化程度的一个特异性指标.
作者:刘进忠;崔淑霞;汪说之;陈新明 刊期: 2004年第01期
目的:研究缺血预适应对离体兔心的保护及机制.方法:选健康成年家兔30只,随机分为3组,对照组:应用Langendroff离体兔心灌注模型;缺血预适应组:在长缺血之前(心脏保存前),停灌5 min,复灌10 min,即缺血预适应,余同对照组;多粘菌素组:在缺血预适应后经主动脉逆灌多粘菌素B 50μmol/L 5 min,余同缺血预适应组,在长时程缺血(30 min)之前即心脏保存之前给予缺血预适应,复灌30 min后,测定心功能及生化指标.结果:缺血预适应组左室收缩末压恢复率((85.5±4.7)%)高于对照组((75.3±2.1)%)和多粘菌素组((75.4±4.7)%),P<0.05;心肌组织肌酸激酶缺血预适应组((233.6±24.6)u/g)高于对照组和多粘菌素组((132.5±24.8)u/g,(135.1±28.8)u/g),P<0.05;同功酶缺血预适应组((201.0±17.4)u/g)高于对照组和多粘菌素组((180.3±16.8)u/g,(184.5±16.9)u/g),P<0.05.结论:缺血预适应对离体兔心具有明显的保护作用,临床应用前景较好.
作者:高颖欣;谢云志;张新 刊期: 2004年第01期
近几年来自动脱水机已被广泛应用于各医院病理科,在使用过程中一些意外因素,如断电、电压过低、人为操作不当等,均可以使脱水机停止运行,使制片不能按时完成,或者出现盛有组织标本的脱水篮悬吊在空中,使标本干枯、变形以至硬脆,给病理制片带来很大困难.针对以上这些情况,作者采用不同的处理方法,均取得良好的效果.
作者:孙廷谊;孔令非 刊期: 2004年第01期
1998年9月至2000年12月,作者用动力髋螺钉治疗股骨粗隆间骨折23例,疗效满意,报道如下.
作者:郑若昆 刊期: 2004年第01期
目的:探讨高血压性脑出血患者并发肺部感染时T淋巴细胞亚群和TNFα的变化.方法:将64例高血压脑出血患者分为并发肺部感染组和肺部正常组38例,采用桥联酶联免疫法、ELISA法测定外周血T淋巴细胞亚群、采用酶联免疫吸附法测定血清肿瘤坏死因子α(TNFα),并与健康对照组52例比较.结果:高血压脑出血并发肺部感染组CD3(64.69%±5.40%)、CD4(41.15%±9.07%)、CD4/CD8(1.40±0.22)比值分别与正常对照组相比(70.65%±4.39%,48.02%±8.27%,1.96±0.24)降低,CD8(30.08%±7.87%)、TNFα(197.24±23.51 ng-L-1)与正常对照组相比(24.42%±7.10%,57.62±21.64 ng@L-1)增高,P<0.01.结论:高血压性脑出血并发肺部感染存在细胞免疫功能低下,细胞因子TNFα可能是影响肺部感染发生和发展的重要因素.
作者:王献;陈品;屈宝华;齐进兴 刊期: 2004年第01期
随着耳显微手术的迅速发展,乳突根治术后中耳炎治愈率不断提高,但仍有部分患者术后中耳长期反复感染流脓.1990年至2000年,本科做乳突翻查术59例,现将59例术中情况分析如下.
作者:耿曼英;贾艳丽 刊期: 2004年第01期
百草枯(Paraquat,PQ)又名克芜踪,是一种对人畜有很强毒性的有机杂环类接触性除草剂,使用过程中操作不当、误服或自杀性服用均可造成中毒.患者病情危重,病死率很高[1].百草枯中毒可引起肺、心、肝、肾等脏器严重损害,由于病变主要发生在肺,故又称百草枯肺.有关百草枯中毒的基础研究与治疗较多[1,2],而相关影像报道较少[3].作者总结了14例百草枯中毒患者肺部的X线与CT所见,报道如下.
作者:韩东明;王清华;孙建明;窦文广;孙凤霞;李玉侠;李长松 刊期: 2004年第01期
目的:探讨单纯肥胖对男性青少年性发育的影响.方法:测量58例单纯肥胖青少年(肥胖组)和46例同年龄、同身高体重正常者(对照组)的体重指数(BMI)、臀围比值(WHR)、阴毛发育程度、首次遗精发生率、阴茎大小、睾丸体积,放免法测定血清黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、总睾酮(TT)、雌二醇(E2)、催乳素(PRL)和空腹胰岛素(INS)水平.结果:肥胖组的阴毛发育程度、首次遗精发生率、阴茎和睾丸大小均明显小于对照组;而血清LH、FSH、PRL、INS均明显高于对照组,TT水平明显低于对照组,E2水平2组差异无统计学意义.肥胖组BMI与阴毛发育程度、阴茎长度、睾丸大小、血清TT水平呈显著负相关,r分别为-0.291,-0.302,-0.317,-0.319,P均<0.05.BMI及WHR均与空腹INS水平呈正相关,r分别为0.301,0.357,P均<0.05.结论:肥胖引起男性青少年性发育滞后.
作者:丁德刚;李启忠 刊期: 2004年第01期
先天性唇裂是一种口腔科常见的先天性畸形,在我国发病率高达1.82%[1].关于先天性唇裂的修补时间一直存在争论,传统的观点认为唇裂修补术的佳时间为出生为3~6个月,也有学者主张在新生儿期施术[2].作者对本院1992年至2002年间收住的新生儿唇裂患儿76例行唇裂修补术,现将体会报道如下.
作者:黄建华;苏智勇;王永玉 刊期: 2004年第01期
目的:了解杜氏盐藻与其他藻类和高等植物间的亲缘关系.方法:将杜氏盐藻的叶绿体16S rRNA序列与一些藻类和陆生植物叶绿体的16S rRNA序列资料进行同源性比较与分析,并构建进化树.结果:进化树显示整个植物界明显分为3个大的类群:蓝藻门、红藻门、隐藻门、金藻门、褐藻门、硅藻门和甲藻门形成一个类群,裸藻门单独形成一个类群,而绿藻门和陆生高等植物共同形成一个大的类群.陆生高等植物间的亲缘关系非常近,拥有一个共同的绿藻祖先,而杜氏盐藻、莱茵衣藻等所归属的团藻目则与其他绿藻及高等植物分离,独立形成一个极为分散的类群.结论:杜氏盐藻所隶属的团藻目属于较为原始的绿藻,彼此之间亲缘关系较远,而且与进化主干上的其他绿藻及高等植物较早分离.
作者:潘卫东;张娟;张贵星;袁保梅;王建民;薛乐勋 刊期: 2004年第01期
放射治疗是肺癌现代治疗中常用的方法之一.近年来,随着科技的发展,放射肿瘤学取得了突破性进展.2001年2月至2002年12月,作者采用立体定向伽马射线全身治疗系统(简称全身伽玛刀)共治疗60例中晚期非小细胞肺癌(NSCLC),近期疗效良好,报道如下.
作者:单国用;庆明轩;陈永顺;宋淑兰 刊期: 2004年第01期
目的:克隆杜氏盐藻叶绿体atpA基因片段.方法:把GenBank中近10种藻类的atpA全基因的氨基酸序列进行比较,设计简并引物,利用PCR方法从盐藻叶绿体DNA中扩增atpA基因片段,然后胶回收所扩片段并与T-vector相连,转化大肠杆菌JM109,挑阳性克隆鉴定,并测序,再将序列与所选藻类有关序列比较同源性.结果:从盐藻叶绿体基因组中扩增出约400 bp的片段.测序结果显示此片段长405 bp,推导的氨基酸序列与莱茵衣藻的同源性为92%,普通小球藻为88%,原始绿藻为87%,卵形肾藻为86%,Cyanidioschyzon merolae为85%.结论:本实验中所克隆的序列为杜氏盐藻的叶绿体atpA基因片段.
作者:侯桂琴;王宁;谢华;姜国忠;柴玉荣;王天云;薛乐勋 刊期: 2004年第01期
慢性鼻窦炎、鼻息肉的治疗以往采用传统的手术方式,很难彻底清除病灶.上世纪90年代以来,随着鼻内窥镜手术的开展,鼻窦炎、鼻息肉手术的疗效有了很大的提高.2000年3月至2001年2月,作者应用鼻内窥镜手术治疗慢性鼻窦炎、鼻息肉等患者142例,报道如下.
作者:赵玉林;朱洪海;娄卫华;董明敏 刊期: 2004年第01期
目的:利用同源重组方法,将外源基因氯霉素乙酰转移酶(CAT)转入杜氏盐藻叶绿体中.方法:以杜氏盐藻叶绿体16S rRNA序列为同源片段,构建盐藻叶绿体表达载体,并利用基因枪法转化盐藻,使CAT基因得到表达.结果:转化后的盐藻可以在含有氯霉素的培养基中生存3~4周,表明CAT基因已转入盐藻叶绿体中并表达.结论:盐藻叶绿体转化是可行的,为获得稳定转化的盐藻,需要合适的同源片段.
作者:潘卫东;袁保梅;谢华;牛向丽;许培荣;薛乐勋;王建民 刊期: 2004年第01期