丁一;王萍;刘书漫;朱晓燕;张钦宪
目的:探讨Bcl-2、Bcl-xl与神经细胞凋亡在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤脑组织中的表达.方法:栓线法阻断健康雄性大鼠大脑中动脉(MCA)血流2 h后再灌注,分别于再灌注0.5 h,3 h,6 h,12 h,24 h和48 h断头取脑,在前联合处连续切片,分别进行TUNEL染色及Bcl-2、Bcl-xl蛋白免疫组化染色.以假手术组作对照.结果:①脑缺血区部分神经细胞发生凋亡,再灌注0.5~48 h,凋亡细胞逐渐增多,凋亡指数随再灌注时间的延长而逐渐升高,至48 h时达高峰.②Bcl-2、Bcl-xl蛋白在脑缺血再灌注早期开始表达,3~6 h达到高峰,24 h开始逐渐降低,至48 h时与对照组差异无统计学意义.③凋亡细胞,Bcl-2及Bcl-xl蛋白均分布在脑缺血梗死灶的周边,梗死中心区及正常区无表达.结论:局灶性脑缺血再灌注损伤过程中神经细胞凋亡起着重要的作用,而Bcl-2及Bcl-xl抑制神经细胞的凋亡.
作者:蒋杞英;王志新;符风英 刊期: 2004年第03期
经椎弓根钉内固定系统治疗脊柱骨折和脱位后,常遗留椎体高度恢复不全、后凸畸形矫正不理想、前脱位和侧方移位校正不全等后遗症[1,2].1997年7月至2003年10月,作者治疗胸腰段脊柱骨折脱位185例,术中首先进行脊柱过伸牵引等手法复位,然后通过内固定器械进行进一步矫形复位,骨折脱位矫正效果良好,现报道如下.
作者:陈书连;刘志成;高延征;刘涛;赵永强 刊期: 2004年第03期
目的:从新生大鼠海马齿状回分离并鉴定神经干细胞.方法:利用无血清方法分离、培养新生大鼠齿状回神经细胞,采用免疫细胞化学方法检测神经巢蛋白(Nestin)并鉴定神经元和神经胶质细胞.结果:从新生大鼠海马齿状回分离的细胞群可不断增殖形成神经球,并能自我更新,表达Nestin.自神经球分化出的细胞分别表达神经元、星形胶质细胞特异性抗原.结论:自海马齿状回分离的神经干细胞具有自我更新能力和多分化潜能.
作者:刘廷磊;章茜;杨春;王书春 刊期: 2004年第03期
目的:探讨乳腺浸润性小叶癌(ILC)和浸润性导管癌(IDC)中上皮钙依赖粘附素相关分子α-cat、β-cat、γ-Cat的表达及其意义.方法:采用免疫组织化学SP法检测38例ILC(其中有淋巴结转移17例)和64例IDC(有淋巴结转移14例)组织中α-Cat、β-Cat、γ-Cat的表达,按阳性癌细胞占肿瘤细胞的比例进行半定量分析,结果:38例ILC中α-Cat、β-Cat、γ-Cat表达缺失和低表达者分别为32例(84.21%),22例(57.89%)和33例(86.84%),而64例IDC癌组织中3者的表达缺失和低表达者分别为50例(90.62%),5例(7.81%)和52例(81.25%),α-Cat与β-Cat在ILC和IDC中的表达具有明显的正相关性(P<0.05);β-Cat的表达缺失和低表达者在乳腺ILC和IDC与有无淋巴结转移呈负相关性(P<0.05),而α-Cat、γ-Cat在乳腺ILC和IDC的表达与有无淋巴结转移无关(P>0.05).结论:α-Cat、β-Cat、γ-Cat在乳腺ILC和IDC中表达均明显减少和缺失,提示上皮钙依赖粘附素相关分子在乳腺浸润性癌发生发展中丧失了其正常的细胞粘附功能.β-Catenin的表达缺失和低表达可能与乳腺癌的淋巴结转移有关.
作者:陈壬寅;李珊珊 刊期: 2004年第03期
本院1997年6月至2002年6月,对112例踝关节骨折脱位行内固定治疗,效果满意,报道如下.
作者:王德民 刊期: 2004年第03期
目的:构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)片段的真核表达质粒,方法:从肿瘤组织中提取总RNA,采用RT-PCR法扩增hTERT基因并克隆入PGEM-T Easy载体中,然后再亚克隆于pcDNA3.1真核表达载体,用PCR扩增及限制性酶切法筛选重组真核表达质粒,并以DNA测序鉴定.结果:PCR扩增及限制性酶切法证实重组真核表达质粒的构建成功.测序表明,hTERT基因片段与GenBank公布的相应基因同源性比较,核苷酸序列的同源性为98.73%,氨基酸序列的同源性为99.68%.结论:成功构建了hTERT真核表达质粒,为进一步研究与hTERT相关的抗肿瘤免疫治疗奠定了基础.
作者:刘红梅;赵国强;杨胜利 刊期: 2004年第03期
目的:验证所构建的组织型纤溶酶原激活剂(tPA)乳腺特异性表达载体pWTA能否在小鼠乳腺组织中瞬时表达.方法:采用直接注射法将pWTA DNA、pWTA DNA/脂质转染胺试剂LipofectamineTM2000复合物及PBS分别注射入妊娠末期小鼠乳腺组织.应用原位杂交技术,以地高辛标记的tPA cDNA为探针,观察pWTA在小鼠乳腺组织中的瞬时表达.结果:tPA表达阳性细胞散在分布于pWTA DNA及pWTA DNA/LipofectamineTM2000复合物注射小鼠部分乳腺腺泡,PBS注射组无阳性细胞.结论:载体pWTA能够在小鼠乳腺组织中特异性表达tPA.
作者:丁一;王峰;乐晓萍;马开颜;张钦宪 刊期: 2004年第03期
目的:探讨原发性高血压(EH)左室肥厚(LVH)患者血浆内皮素-1(ET-1)的变化及缬沙坦降压和逆转左室肥厚的机制.方法:测定EH伴LVH(EH+LVH组,n=30)和不伴LVH(EH组,n=27)者缬沙坦治疗24周前后及健康对照组(n=30)的血压、左室质量指数(LMI)及血浆ET-1水平.结果:治疗前EH+LVH组血压、LVMI和血浆ET-1水平均明显高于对照组;与EH组比较,血压差异无统计学意义,而LVMI及ET-1水平较高;LVMI与血浆ET-1浓度呈正相关(r=0.413,P<0.05).缬沙坦治疗后EH及EH+LVH组患者血压、血浆ET-1水平均下降;EH+LVH组LVMI下降明显(P<0.01),EH组未有变化(P>0.05).结论:ET-1可能参与了原发性高血压LVH的发生发展,缬沙坦降压及逆转LVH机制可能部分源于对ET-1的影响.
作者:张峰;李彬;李玉东 刊期: 2004年第03期
目的:了解食管癌细胞分化过程中DNA聚合酶β(polβ)基因的表达.方法:采用全反式维甲酸(AT-RA)诱导人食管癌Eca109细胞分化,应用甲基绿-派洛宁染色、原位杂交、免疫组化和Western blot方法分别检测细胞分化和polβ基因的表达.结果:ATRA作用5 d后可以诱导Eca109细胞分化.wt-polβ和mt-polβ(截短的)基因的表达随着Eca109细胞的分化而降低.结论:ATRA可下调Eca109细胞wt-polβ和mt-polβ的表达,促使其分化.
作者:金戈;赵继敏;吴景兰;杨红艳;赵勤;赵国强;郑乃刚;董子明 刊期: 2004年第03期
目的:探讨宫颈鳞癌组织中EphA2的表达.方法:应用免疫组化法观察EphA2在206例FIGO Ⅰ a-Ⅳb期的宫颈鳞癌组织中的表达,从中选择20例不同EphA2蛋白表达的病例,应用激光捕获显微切割技术(Laser cap-ture microdissection,LCM)从冰冻组织切片中选切大约50个宫颈鳞癌细胞,应用RT-PCR方法检测EphA2mRNA的表达.结果:206例宫颈鳞癌组织中,EphA2蛋白阴性表达23例(11.2%),弱阳性表达94例(45.6%),阳性表达72例(35.0%),强阳性表达17例(8.3%);EphA2蛋白与其mRNA表达水平不完全一致;EphA2蛋白表达与宫颈鳞癌患者的年龄、FIGO分期及淋巴结转移无关,总生存期在EphA2染色强度0~3级之间差异有统计学意义(P<0.05).结论:EphA2在宫颈鳞癌中的高表达预示患者的生存差.EphA2有望成为抗宫颈癌治疗的新靶点.
作者:吴丹;李珊珊;乔玉环;Jahn M.Nesland;索振河 刊期: 2004年第03期
青壮年股骨颈骨折后骨愈合及股骨头发生缺血性坏死的发生率较高,其病因是由于局部血运不足所致.1995年以来作者采用带旋髂浅血管缝匠肌骨块移植术,治疗青壮年股骨颈骨折40例,获得满意效果,报道如下.
作者:刘建德;韩医峰;王飞 刊期: 2004年第03期
重症心脏瓣膜病是指巨大左室或小左室并发心源性恶液质及多脏器功能不全者,或伴有多次手术及合并手术(如同期冠脉搭桥术等)者,据国内外报道重症心脏瓣膜病患者心脏瓣膜置换术后早期病死率高达5%~10%[1].自2000年8月至2003年9月,作者共收治重症瓣膜病38例,疗效满意,现将患者的手术治疗情况报道如下.
作者:徐敬;舒礼良;赵文增 刊期: 2004年第03期
目的:探讨左旋精氨酸(L-Arg)对无心跳大鼠供肝缺血再灌注损伤的防护作用.方法:Wistar大鼠104只,随机取8只为正常对照组(N组),另96只随机分为供、受体组,两两随机配对后再分为6组.C1、C2、C3组为实验对照组,E1、E2、E3组为实验组.C1与E1、C2与E2、C3与E3分别行活体供肝肝移植和心跳停搏后30 min、45 min供肝肝移植;N组仅于开腹后抽取下腔静脉血及切取肝组织备检.其中各实验组供肝保存液中加入L-Arg(1mmol/L),受体鼠在移植后门静脉(PV)复流前10 min从尾静脉注射L-Arg(100mg/kg);各实验对照组则用等量生理盐水作对照.移植完成后,于PV复流后1 h、3 h、24 h检测血清一氧化氮(NO)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)及血浆内皮素(ET)水平,观察肝组织超微结构.结果:与N组相比,各实验组与实验对照组大鼠PV复流后1 h血清NO水平明显降低(P<0.05),血浆ET水平、血清ALT、AST水平明显升高(P<0.05);与对应实验对照组相比,各实验组在PV复流后1 h、3 h、24 h血清NO水平明显升高(P<0.05),血清ALT、AST、血浆ET水平明显降低(P<0.05);各实验对照组之间相比,C3、C2组血清NO水平明显低于C1组(P<0.05),C3组明显低于C2组(P<0.05);C3、C2组血清ALT、AST水平、血浆ET水平明显低于C1组(P<0.05),C3组明显低于C2组(P<0.05);电镜下,实验对照组及实验组肝组织病理损害较N组为重,实验组病理损害较实验对照组明显减轻.结论:NO/ET失衡是造成无心跳供肝缺血再灌注损伤的主要原因之一;L-Arg预处理能够改善NO/ET的平衡关系,从而减轻无心跳供肝在移植过程中的损伤.
作者:张水军;龚瑾;朱长举;宋燕;吴阳 刊期: 2004年第03期
目的:克隆乳清酸蛋白基因(WAP)启动子并构建其载体.方法:以PCR技术克隆WAP启动子2.4kbDNA片段和加poly A信号0.37kbDNA片段;应用体外连接技术,连接pBluescript质粒、WAP启动子和加poly A信号DNA片段;转化连接产物,以内切酶酶切、琼脂糖电泳鉴定阳性克隆,对插入片段进行序列分析.结果:琼脂糖电泳显示,WAP启动子和加poly A信号DNA片段克隆成功;内切酶酶切鉴定阳性克隆,酶切片段与预期长度一致.插入片段序列分析与文献报道一致.结论:WAP启动子克隆及其乳腺特异性表达载体pWA构建成功.
作者:丁一;王萍;刘书漫;朱晓燕;张钦宪 刊期: 2004年第03期
目的:鉴定表达序列标签(EST)在肝细胞癌(HCC)和癌旁非癌组织表达,扩增其全长.方法:采用半定量RT-PCR方法,对21例HCC患者的癌组织和癌旁非癌组织EST mRNA的表达情况进行检测,通过cDNA末端快速扩增(RACE)技术扩增、测序获得全长,Blast检索GenBank.结果:此EST在HCC癌组织中高表达,癌旁非癌组织中低表达(P<0.05);序列全长为1 333 bp,含有完整开放阅读框(ORF)和Poly(A)尾;Blast检索为一功能未知基因.结论:获得一个和HCC相关候选新基因,为进一步研究其功能打下基础.
作者:陈香宇;李建生;段芳龄;李玉龙;马军;薛乐勋;曾艳丽;孙鄢;孙艳 刊期: 2004年第03期
泌尿系结石是常见的泌尿外科疾病,易引起感染和肾功能损害.该病在我国的发病率较高,多见于20~40岁[1].治疗结石的方法主要有药物排石、碎石和手术治疗.
作者:何伶 刊期: 2004年第03期
目的:探讨KAI1/CD82蛋白表达与大肠癌浸润和转移的关系.方法:利用免疫组织化学SP法检测241例大肠癌中KAI1/CD82蛋白的表达.其中高分化腺癌74例,中分化腺癌90例,低分化腺癌42例,未分化腺癌35例;肿瘤位于黏膜层(T0)88例,黏膜下层(T1)19例,肌层(T2)55例,浆膜层(T3)42例,侵及外周组织(T4)37例.血道转移14例,淋巴道转移44例,种植性转移4例.结果:KAI1/CD82蛋白的表达随大肠癌恶性程度、浸润深度及临床分期的增高而降低.临床分期有淋巴道和血道转移者KAI1/CD82蛋白表达阳性率低于无转移者(P<0.01).结论:大肠癌浸润和转移可能与KAI1/CD82基因的低表达或失表达有关.
作者:陈壬寅;李珊珊;高冬玲;任秀花;阎爱华 刊期: 2004年第03期
目的:研究C-MYC、Rb、P16及EGFR蛋白在食管鳞癌标本中的定位表达.方法:采用免疫组化方法定位分析45例原发性食管鳞癌大体标本中C-MYC、Rb、P16及EGFR蛋白的表达.将食管标本固定并沿食管长轴取成大小为2.0 cm×0.5 cm的若干段组织.根据组织学检查结果,绘图显示每例食管标本不同病变及各种蛋白在不同区域(正常黏膜、单纯增生、不典型增生、原位癌及浸润癌)中的分布情况.结果:C-MYC、EGFR在食管癌自然病史中呈现渐进性高表达,而Rb则在其中呈现渐进性低表达,P16表达则无渐进性.EGFR、P16表达在单纯增生和不典型增生中差异有统计学意义;而C-MYC、Rb则在原位癌与浸润癌中差异有统计学意义.此外,Rb与C-MYC在食管癌组织中的表达呈负相关(P<0.05).绘图显示出每一例食管癌大体标本中同一区域不同肿瘤标记物表达的差异、同一种肿瘤标记物在不同区域表达的差异及同一种肿瘤标记物在同一种黏膜病变中表达的差异.结论:EGFR、p16基因的改变可能是食管癌发生发展过程中的早期事件;而c-myc、Rb基因的改变可能是其中的中晚期事件,并赋予肿瘤细胞更多的恶性生物学行为;上述基因在食管癌发生发展中存在相互协调作用.对肿瘤标记物表达情况绘图可直观展现不同病变中肿瘤标记物的分布及相互关系,揭示食管癌形成的内在信息.
作者:郭坤;李珊珊;任秀花;阎爱华;常福聚 刊期: 2004年第03期
目的:研究绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的荧光稳定性及对转染细胞的影响,探讨其作为供体细胞标记物的可行性.方法:将增强型GFP基因转入PC12细胞,经G418筛选并连续传代,在荧光显微镜下观察荧光蛋白阳性表达率;比较未转染细胞和转染细胞的形态、细胞活性、细胞周期等.结果:第5代、第40代及未用G418筛选3个月后的转染细胞,荧光蛋白阳性表达率为100%;未转染细胞和转染细胞的形态无明显区别,细胞活性、细胞周期等差异无统计学意义(P>0.05).结论:GFP荧光稳定,对转染细胞无明显影响,是良好的供体细胞标记物.
作者:邓晓红;许予明;张苏明;张旻;喻志源;许康 刊期: 2004年第03期
目的:研究高三尖杉酯碱(Homohrringtonine,HHT)对HL60细胞端粒酶活性的影响.方法:不同浓度HHT作用于HL60细胞12 h及0.02 mg/L HHT作用HL60细胞不同时间后,采用TRAP-PCR-ELISA检测HL60细胞端粒酶活性.结果:HHT浓度增加至0.04 mg/L和0.05 mg/L时,HL60细胞端粒酶活性与0 mg/L组相比明显下降(P均<0.05).0.02 mg/L HHT作用HL60细胞18 h、24 h、30 h后,HL60细胞端粒酶活性明显低于0 h组(P均<0.05),且低于空白对照(P均<0.05).结论:HHT是一种有效的端粒酶活性抑制剂,其对端粒酶活性的抑制呈时间和浓度依赖性.
作者:孟小莉 刊期: 2004年第03期