学术投稿

新生大鼠海马齿状回神经干细胞的分离培养与鉴定

刘廷磊;章茜;杨春;王书春

关键词:神经干细胞, 细胞培养, 分离, 鉴定, 大鼠
摘要:目的:从新生大鼠海马齿状回分离并鉴定神经干细胞.方法:利用无血清方法分离、培养新生大鼠齿状回神经细胞,采用免疫细胞化学方法检测神经巢蛋白(Nestin)并鉴定神经元和神经胶质细胞.结果:从新生大鼠海马齿状回分离的细胞群可不断增殖形成神经球,并能自我更新,表达Nestin.自神经球分化出的细胞分别表达神经元、星形胶质细胞特异性抗原.结论:自海马齿状回分离的神经干细胞具有自我更新能力和多分化潜能.
郑州大学学报(医学版)杂志相关文献
  • BiPAP呼吸机治疗老年COPD并Ⅱ型呼吸衰竭16例体会

    本院从2002年6月至2003年6月,对老年人慢性阻塞性肺疾病(COPD)并Ⅱ型呼吸衰竭,使用BiPAP呼吸机进行无创通气治疗,观察其疗效,现报道如下.

    作者:殷莉 刊期: 2004年第03期

  • hTERT片段真核表达质粒的构建

    目的:构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)片段的真核表达质粒,方法:从肿瘤组织中提取总RNA,采用RT-PCR法扩增hTERT基因并克隆入PGEM-T Easy载体中,然后再亚克隆于pcDNA3.1真核表达载体,用PCR扩增及限制性酶切法筛选重组真核表达质粒,并以DNA测序鉴定.结果:PCR扩增及限制性酶切法证实重组真核表达质粒的构建成功.测序表明,hTERT基因片段与GenBank公布的相应基因同源性比较,核苷酸序列的同源性为98.73%,氨基酸序列的同源性为99.68%.结论:成功构建了hTERT真核表达质粒,为进一步研究与hTERT相关的抗肿瘤免疫治疗奠定了基础.

    作者:刘红梅;赵国强;杨胜利 刊期: 2004年第03期

  • 宫颈癌组织中Cyclin E和细胞增殖核抗原检测

    目的:探讨宫颈癌和宫颈上皮内瘤样病变(CIN)组织中Cyclin E的表达及与细胞增殖活性的关系.方法:应用免疫组化SP法对32例宫颈癌和20例CIN组织进行Cyclin E和细胞增殖核抗原(PCNA)检测,以20例正常宫颈组织为对照.结果:宫颈癌、CIN组织和正常宫颈组织Cyclin E的阳性表达率分别为59.38%、10.00%、0%(3者相比,P均<0.01),PCNA的阳性表达率分别为90.62%、55.00%、5%(3者相比,P均<0.01),且Cyclin E的表达与PCNA呈正相关(χ2=13.45,P<0.01).结论:Cyclin E表达增高的组织具有高度的细胞增殖活性,Cyclin E和PCNA的异常表达在宫颈癌的发生发展中起重要作用.

    作者:李筱梅;郑英 刊期: 2004年第03期

  • 组织型纤溶酶原激活剂cDNA克隆及其乳腺特异性表达载体的构建

    目的:克隆组织型纤溶酶原激活剂(tissue-type plasminogen activator,tPA)基因及构建其乳腺特异性表达载体.方法:以PCR技术克隆2.1kb tPA cDNA片段;应用体外连接技术,连接乳腺特异性表达载体pWA和2.1kb tPA cDNA片段;转化连接产物,以内切酶酶切、琼脂糖电泳及插入片段序列分析鉴定阳性克隆.结果:琼脂糖电泳显示,2.1kb tPA cDNA片段克隆成功;内切酶酶切片段与预期片段长度一致;插入片段序列与文献报道一致.结论:tPA基因克隆及其乳腺特异性表达载体构建成功.

    作者:丁一;刘书漫;王萍;朱晓燕;张钦宪 刊期: 2004年第03期

  • 大鼠局灶性脑缺血再灌注脑组织神经细胞凋亡与Bcl-2、Bcl-xl蛋白检测

    目的:探讨Bcl-2、Bcl-xl与神经细胞凋亡在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤脑组织中的表达.方法:栓线法阻断健康雄性大鼠大脑中动脉(MCA)血流2 h后再灌注,分别于再灌注0.5 h,3 h,6 h,12 h,24 h和48 h断头取脑,在前联合处连续切片,分别进行TUNEL染色及Bcl-2、Bcl-xl蛋白免疫组化染色.以假手术组作对照.结果:①脑缺血区部分神经细胞发生凋亡,再灌注0.5~48 h,凋亡细胞逐渐增多,凋亡指数随再灌注时间的延长而逐渐升高,至48 h时达高峰.②Bcl-2、Bcl-xl蛋白在脑缺血再灌注早期开始表达,3~6 h达到高峰,24 h开始逐渐降低,至48 h时与对照组差异无统计学意义.③凋亡细胞,Bcl-2及Bcl-xl蛋白均分布在脑缺血梗死灶的周边,梗死中心区及正常区无表达.结论:局灶性脑缺血再灌注损伤过程中神经细胞凋亡起着重要的作用,而Bcl-2及Bcl-xl抑制神经细胞的凋亡.

    作者:蒋杞英;王志新;符风英 刊期: 2004年第03期

  • 儿童房室结双径路电生理特性与房室结折返性心动过速的关系

    目的:探索房室结双径路(DAVNP)的电生理特性与房室结折返性心动过速(AVNRT)间的关系.方法:采用经食管左心房调搏检查术(TEAP)对71例DAVNP儿童实施S1-S2刺激,测定房室结快径路前传时间(FP)、有效不应期(FPERP)、功能不应期(FPFRP)、相对不应期(FPRRP)、房室结慢径路前传时间(SP)及有效不应期(SPERP)、功能不应期(SPFRP)及S2-R跳跃幅度,计算SP与FP间、FPERP与SPERP间、SPFRP与FPFRP间的差值.诱发AVNRT后,计算其频率.结果:71例经TEAP诱发AVNRT发作25例,均为慢-快型,诱发率为35.2%;诱发与未诱发AVNRT组SP及不应期、S2-R跳跃、FP及不应期、SP-FP、FPERP-SPERP比较,差异无统计学意义;2组间SPFRP-FPFRP差异有统计学意义,P<0.01;诱发AVNRT组SPFRP均大于FPFRP,而未诱发AVNRT组12例SPFRP小于FPFRP.结论:SPFRP-FPFRP的值越大的DAVNP越容易发生AVNRT,SPFRP小于FPFRP的DAVNP儿童不容易发生AVNRT.

    作者:安金斗;张彦萍;王志远;刘松茂;高铁铮 刊期: 2004年第03期

  • 缬沙坦对原发性高血压左室肥厚患者血浆内皮素的影响

    目的:探讨原发性高血压(EH)左室肥厚(LVH)患者血浆内皮素-1(ET-1)的变化及缬沙坦降压和逆转左室肥厚的机制.方法:测定EH伴LVH(EH+LVH组,n=30)和不伴LVH(EH组,n=27)者缬沙坦治疗24周前后及健康对照组(n=30)的血压、左室质量指数(LMI)及血浆ET-1水平.结果:治疗前EH+LVH组血压、LVMI和血浆ET-1水平均明显高于对照组;与EH组比较,血压差异无统计学意义,而LVMI及ET-1水平较高;LVMI与血浆ET-1浓度呈正相关(r=0.413,P<0.05).缬沙坦治疗后EH及EH+LVH组患者血压、血浆ET-1水平均下降;EH+LVH组LVMI下降明显(P<0.01),EH组未有变化(P>0.05).结论:ET-1可能参与了原发性高血压LVH的发生发展,缬沙坦降压及逆转LVH机制可能部分源于对ET-1的影响.

    作者:张峰;李彬;李玉东 刊期: 2004年第03期

  • 乳清酸蛋白启动子克隆及其乳腺特异性表达载体的构建

    目的:克隆乳清酸蛋白基因(WAP)启动子并构建其载体.方法:以PCR技术克隆WAP启动子2.4kbDNA片段和加poly A信号0.37kbDNA片段;应用体外连接技术,连接pBluescript质粒、WAP启动子和加poly A信号DNA片段;转化连接产物,以内切酶酶切、琼脂糖电泳鉴定阳性克隆,对插入片段进行序列分析.结果:琼脂糖电泳显示,WAP启动子和加poly A信号DNA片段克隆成功;内切酶酶切鉴定阳性克隆,酶切片段与预期长度一致.插入片段序列分析与文献报道一致.结论:WAP启动子克隆及其乳腺特异性表达载体pWA构建成功.

    作者:丁一;王萍;刘书漫;朱晓燕;张钦宪 刊期: 2004年第03期

  • 晚期非小细胞肺癌26例治疗体会

    作者自2000年8月至2002年8月,采用去甲长春花碱(NVB)联合顺铂(DDP)、反应停治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)26例,近期疗效较好,现报道如下.

    作者:张广志;岳文彬;陈社萍 刊期: 2004年第03期

  • 心理干预、咪达唑仑对全子宫切除患者术前焦虑的影响

    随着医学心理学的发展,手术相关心理问题的研究日益受到重视.作者就心理干预和咪达唑仑对全子宫切除患者哌术前焦虑的影响进行临床观察,报道如下.

    作者:刘卫校;赵秀云 刊期: 2004年第03期

  • 巴曲酶治疗重症脑梗死92例疗效观察

    重症脑梗死因梗死面积大、临床症状严重,预后较差,2000年10月至2003年4月,作者应用巴曲酶治疗重症脑梗死92例,效果较好,现报道如下.

    作者:张素玲;魏立平 刊期: 2004年第03期

  • 重症心脏瓣膜病外科治疗38例体会

    重症心脏瓣膜病是指巨大左室或小左室并发心源性恶液质及多脏器功能不全者,或伴有多次手术及合并手术(如同期冠脉搭桥术等)者,据国内外报道重症心脏瓣膜病患者心脏瓣膜置换术后早期病死率高达5%~10%[1].自2000年8月至2003年9月,作者共收治重症瓣膜病38例,疗效满意,现将患者的手术治疗情况报道如下.

    作者:徐敬;舒礼良;赵文增 刊期: 2004年第03期

  • 食管癌发生发展过程中P33/ING1、Survivin蛋白的表达

    目的:探讨食管癌发生发展过程中P33/ING1、Survivin蛋白的表达及其与食管癌病理特征的关系.方法:采用免疫组化SP法检测P33/ING1、Survivin蛋白在60例食管癌手术后大体标本中食管正常黏膜、单纯增生、不典型增生、原位癌及浸润癌组织的表达.结果:P33/ING1蛋白从正常黏膜→单纯增生→不典型增生→原位癌→浸润癌呈渐进性低表达,而Survivin蛋白则呈渐进性高表达.正常黏膜与不典型增生、原位癌及浸润癌中P33/ING1、Survivin蛋白的表达差异有统计学意义(P<0.05);P33/ING1蛋白表达情况与食管癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关(P<0.05).食管浸润癌组织中P33/ING1蛋白的低表达与Survivin蛋白的高表达呈负相关(r=-0.480,P<0.01).结论:P33/ING1、Survivin 2种蛋白与食管癌的发生发展密切相关,可作为肿瘤诊断的标志物.

    作者:任秀花;李珊珊;阎爱华;张红燕 刊期: 2004年第03期

  • 碱性成纤维细胞生长因子真核表达载体转染骨髓间充质干细胞的表达

    目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)真核表达载体转染骨髓间充质干细胞(MSCs)后的表达情况.方法:应用脂质体介导的基因转移技术将bFGF真核表达载体导入MSCs,用抗药性标志选择方法筛选出阳性克隆后,用免疫细胞化学检测bFGF表达分泌情况.结果与结论:经转染bFGF真核表达载体的MSCs细胞呈阳性,说明经转染的MSCs表达并分泌bFGF蛋白.MSCs有望成为bFGF基因治疗中枢神经系统疾病的理想载体.

    作者:许予明;马兴荣;秦洁;宋波;张化彪;张博爱;张苏明 刊期: 2004年第03期

  • 全反式维甲酸诱导的食管癌细胞DNA聚合酶β的表达

    目的:了解食管癌细胞分化过程中DNA聚合酶β(polβ)基因的表达.方法:采用全反式维甲酸(AT-RA)诱导人食管癌Eca109细胞分化,应用甲基绿-派洛宁染色、原位杂交、免疫组化和Western blot方法分别检测细胞分化和polβ基因的表达.结果:ATRA作用5 d后可以诱导Eca109细胞分化.wt-polβ和mt-polβ(截短的)基因的表达随着Eca109细胞的分化而降低.结论:ATRA可下调Eca109细胞wt-polβ和mt-polβ的表达,促使其分化.

    作者:金戈;赵继敏;吴景兰;杨红艳;赵勤;赵国强;郑乃刚;董子明 刊期: 2004年第03期

  • 胸腰椎骨折脱位内固定术中手法复位185例

    经椎弓根钉内固定系统治疗脊柱骨折和脱位后,常遗留椎体高度恢复不全、后凸畸形矫正不理想、前脱位和侧方移位校正不全等后遗症[1,2].1997年7月至2003年10月,作者治疗胸腰段脊柱骨折脱位185例,术中首先进行脊柱过伸牵引等手法复位,然后通过内固定器械进行进一步矫形复位,骨折脱位矫正效果良好,现报道如下.

    作者:陈书连;刘志成;高延征;刘涛;赵永强 刊期: 2004年第03期

  • 新疆O139群霍乱弧菌93006菌株基因组文库的构建

    目的:构建我国新疆分离O139群霍乱弧菌菌株(93006菌株)的基因组文库,为研究我国O139群霍乱弧菌的来源及其基因组特征提供资料.方法:制备霍乱弧菌高相对分子质量的基因组DNA,用Sau3AI酶将基因组DNA部分酶切成平均大小为32~40kb的片段,将部分酶切并经碱性磷酸酶(CIAP)处理的DNA片段与经XbaI、CIAP、BamHI处理的粘粒载体SuperCos1的载体臂相连接,连接产物经体外包装并转染大肠杆菌XL-Blue1 MR,经氨苄抗性筛选得到阳性克隆,构建霍乱弧菌的基因组文库.结果:该文库共获得了1 200个单克隆,平均插入片段的大小为32kb,空载率为0.05%,相当于9个库容量,从本文库中筛选到任一霍乱弧菌的DNA单拷贝序列的机率为99.98%,该文库能承受7次反复冻溶.结论:成功构建了我国新疆分离O139群霍乱弧菌菌株93006的基因组文库,为进一步克隆霍乱弧菌的基因和研究我国O139群霍乱弧菌的来源奠定了基础.

    作者:谢婧;段广才;郗园林;范清堂 刊期: 2004年第03期

  • 郑州某高校新生肥胖状况对体能素质的影响

    目的:研究高校新生肥胖状况对体能素质的影响.方法:对郑州某大学医学院952名2000级新生以问卷方式进行普查,填表合格860人.对此860人的体重与铅球、短跑、长跑、立定跳远及引体向上/仰卧起坐5项体育达标情况进行分析.结果:正常、肥胖前期及肥胖大学生除铅球掷远项目外,其他项目达标成绩随体重级别的升高而逐渐下降,不及格率逐渐升高.肥胖大学生达标不及格率明显高于体重正常大学生(P<0.01),肥胖前期大学生除引体向上(男)、仰卧起坐(女)项目达标不及格率高于体重正常大学生外,其余项目不及格率2者相比差异无统计意义.结论:肥胖较肥胖前期对大学生体质有更大影响.大学生肥胖者体能素质较差,应加强营养健康教育,通过合理饮食、纠正不良生活方式及改进体育课教学方式加以改善.

    作者:韩萍;王玲;吕全军;王旗;裴迎新;时宝庆;朱明君;江苏娟 刊期: 2004年第03期

  • 继发性肾上腺皮质增生症17例临床分析

    继发性肾上腺皮质增生症的主要原因为垂体促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropin,ACTH)分泌过多,由于ACTH的长期慢性刺激而引起皮质束状带增生突出,有明显的柯兴综合征表现;部分肾上腺皮质增生的患者血浆ACTH水平未见明显升高,但有临床症状和肾上腺的病理改变,多以肾上腺皮质球状带增生为主,主要表现为血压升高[1].作者对17例继发性肾上腺皮质增生症患者的临床资料进行了分析,报道如下.

    作者:徐培元;乔保平;赵高贤;周四维 刊期: 2004年第03期

  • 恶性肿瘤化疗患者780例医院感染分析

    1995年至2002年,作者对本院收治的恶性肿瘤化疗患者所发生的医院感染进行了回顾性分析,现报道如下.

    作者:鲍亚丽 刊期: 2004年第03期

郑州大学学报(医学版)杂志

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