陈壬寅;李珊珊;高冬玲;任秀花;阎爱华
目的:构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)片段的真核表达质粒,方法:从肿瘤组织中提取总RNA,采用RT-PCR法扩增hTERT基因并克隆入PGEM-T Easy载体中,然后再亚克隆于pcDNA3.1真核表达载体,用PCR扩增及限制性酶切法筛选重组真核表达质粒,并以DNA测序鉴定.结果:PCR扩增及限制性酶切法证实重组真核表达质粒的构建成功.测序表明,hTERT基因片段与GenBank公布的相应基因同源性比较,核苷酸序列的同源性为98.73%,氨基酸序列的同源性为99.68%.结论:成功构建了hTERT真核表达质粒,为进一步研究与hTERT相关的抗肿瘤免疫治疗奠定了基础.
作者:刘红梅;赵国强;杨胜利 刊期: 2004年第03期
目的:探讨同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)与金属硫蛋白(metallothionein,MT)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)纤溶酶原激活物抑制剂(Plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)活性及mRNA表达的影响.方法:0.1 mmol/L、0.5 mmol/L、1.0 mmol/L Hcy及1.0 mmol/L Hcy加不同浓度MT(1nmol/L,5 nmol/L,10 nmol/L,50 nmol/L)分别作用HUVECs 6 h后,用PAI-1发色底物法检测PAI-1活性;用RT-PCR技术检测PAI-1 mRNA.结果:Hcy呈浓度依赖性地增加HUVECs PAI-1活性及其mRNA表达(P均<0.01);不同浓度的MT均可显著降低Hcy所致的PAI-1活性及其mRNA表达的增高(P均<0.05),且呈剂量依赖性.结论:MT可降低Hcy所致的PAI-1活性及其mRNA表达增高作用.
作者:张辉;党瑜华;张菲斐 刊期: 2004年第03期
目的:探讨人骨肉瘤组织中P27蛋白的表达及其与骨肉瘤发生、发展和病理分型的关系.方法:采用免疫组化SP法,检测10例骨软骨瘤组织和30例骨肉瘤组织(骨母细胞型14例,软骨母细胞型5例,纤维母细胞型8例,混合型3例;高分化7例,低分化23例)中P27蛋白的表达情况.结果:骨肉瘤组织中P27蛋白阳性表达率为33.33%(10/30),低于骨软骨瘤中的80%(8/10)(P<0.05).骨肉瘤高分化组P27蛋白阳性表达率为71.43%(5/7),高于低分化组的21.74%(5/23)(P<0.05).骨肉瘤各病理亚型间P27蛋白阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05).结论:P27蛋白表达与骨肉瘤发生、发展密切相关,可作为判断骨肉瘤恶性程度的一个指标.
作者:李月白;张岩;王义生;许建中;卢中道;王秀利;殷力 刊期: 2004年第03期
中晚期食管癌系指肿瘤侵犯食管肌层及肌层以外,即T2~4期病例.目前早期食管癌的切除可达100%,而中、晚期食管癌的切除率报道不一[1-3].术前判断食管癌能否切除意义重大.作者就本院1998年元月至2002年8月底收治的2 488例中、晚期食管癌患者的肿瘤活动度与手术根治情况回顾分析如下.
作者:吕荣增;马中州;刘志才;郭建庄;刘海青;刘国义;郭富强 刊期: 2004年第03期
目的:观察替罗非班治疗急性冠脉综合征的临床效果和安全性.方法:符合急性冠脉综合征(不稳定心绞痛/非Q波心肌梗死)入选标准患者73例,按就诊顺序双盲随机分为受试组(n=37)和对照组(n=36).受试组微量泵持续泵入替罗非班,对照组微量泵持续泵入安慰剂,所有患者均静脉应用普通肝素和口服阿司匹林,疗程均为2.0~4.5 d.观察2组心电图改变、血小板聚集率、主要终点事件(顽固性缺血状态、新近心肌梗死和死亡)及不良反应发生情况.结果:与对照组相比,受试组心电图缺血性改变有明显好转(P<0.05),血小板聚集率明显下降(P<0.01),主要终点事件有下降趋势,无严重不良反应.结论:替罗非班治疗急性冠脉综合征是安全有效的.
作者:李胜利;党瑜华;黄振文 刊期: 2004年第03期
踝关节骨折约占全身骨折的3.92%,是常见的关节内骨折[1].本院自1996年2月至2003年6月,对合并下胫腓联合韧带损伤的踝关节骨折49例患者进行手术治疗,疗效满意,报道如下.
作者:贾延庆;王宏章;杨民坤 刊期: 2004年第03期
目的:研究绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的荧光稳定性及对转染细胞的影响,探讨其作为供体细胞标记物的可行性.方法:将增强型GFP基因转入PC12细胞,经G418筛选并连续传代,在荧光显微镜下观察荧光蛋白阳性表达率;比较未转染细胞和转染细胞的形态、细胞活性、细胞周期等.结果:第5代、第40代及未用G418筛选3个月后的转染细胞,荧光蛋白阳性表达率为100%;未转染细胞和转染细胞的形态无明显区别,细胞活性、细胞周期等差异无统计学意义(P>0.05).结论:GFP荧光稳定,对转染细胞无明显影响,是良好的供体细胞标记物.
作者:邓晓红;许予明;张苏明;张旻;喻志源;许康 刊期: 2004年第03期
经椎弓根钉内固定系统治疗脊柱骨折和脱位后,常遗留椎体高度恢复不全、后凸畸形矫正不理想、前脱位和侧方移位校正不全等后遗症[1,2].1997年7月至2003年10月,作者治疗胸腰段脊柱骨折脱位185例,术中首先进行脊柱过伸牵引等手法复位,然后通过内固定器械进行进一步矫形复位,骨折脱位矫正效果良好,现报道如下.
作者:陈书连;刘志成;高延征;刘涛;赵永强 刊期: 2004年第03期
目的:探讨CD28、CD40通路共刺激后淋巴细胞增殖反应的变化及免疫抑制剂环孢素A(CsA)、抗CTLA4单克隆抗体对共刺激通路激活后淋巴细胞增殖反应的影响.方法:采用单克隆抗体与淋巴细胞表面CD3、CD28及CD40 L分子结合产生相应刺激信号,根据刺激条件不同设组为:①抗CD3单抗单刺激(A组)(剂量为10μg/L、100 μg/L、1 000μg/L);②抗CD3单抗+抗CD28单抗(B组);③抗CD3单抗+抗CD40 L单抗(C组);④抗CD3单抗+抗CTLA4单抗(D组)共刺激(A、B、C、D组中抗CD3单抗剂量固定为100μg/L,其余3种单抗各设10μg/L、100μg/L、1 000 μg/L 3种剂量);⑤抗CD3单抗+抗CD28单抗+抗CD40 L单抗(E组);⑥抗CD3单抗+抗CD28单抗+抗CTLA4单抗(F组)共刺激(E、F组中抗CD3单抗和抗CD28单抗的剂量固定为100 μg/L,抗CD40 L单抗和抗CTLA4单抗的剂量各设10μg/L、100μg/L、1 000 μg/L);⑦CsA干预组:抗CD3单抗+CsA(G组);⑧抗CD3单抗+抗CD28单抗+CsA(H组);⑨抗CD3单抗+抗CD28单抗+抗CD40L单抗+CsA(Ⅰ组),G、H、I组中所有单抗浓度均固定为100μg/L,CsA浓度设为10 μg/L、100 μg/L、1 000 μg/L.采用[3H]-TdR同位素掺入法测定淋巴细胞增殖水平,液体闪烁计数仪测定放射性计数值.结果:用抗CD3单抗+抗CD28单抗共刺激后,淋巴细胞增殖反应明显高于抗CD3单刺激,而在抗CD3单抗+抗CD40L单抗刺激组,淋巴细胞增殖反应低于抗CD3单刺激组.抗CTLA4单抗所提供的刺激信号可抑制抗CD3单刺激及抗CD3+抗CD28共刺激导致的淋巴细胞增殖反应,并且随着抗CTLA4单抗剂量的增加,抑制作用增强.CsA对共刺激后的淋巴细胞增殖反应有抑制作用,且随着剂量增大其抑制作用也增强,但对单刺激后增殖反应的抑制作用更为明显.结论:CD28共刺激通路在淋巴细胞活化中起着关键作用.抗CD40L单抗的刺激作用可能被其对T细胞与抗原递呈细胞(APC,包括B细胞等)间的阻断效应所掩盖.抗CTLA4单抗及CsA对共刺激后淋巴细胞的增殖反应均有抑制作用.
作者:杨尚琪;唐孝达;顾晓;刘永;周佩军 刊期: 2004年第03期
目的:通过动物实验验证肝脾固定治疗小儿肝前性门脉高压的可能性.方法:将犬随机分为实验组(n=10)和对照组(n=5),分别制造肝前性门脉高压模型,然后对照组关腹,实验组将肝脾加以固定后关腹,饲养12周后以彩超检查肝脾间血流情况,开腹测脾脏大小、门脉压力,抽取血样,经脾穿刺,行X线造影,并取活组织进行病理学检查.结果:2组动物模型的制作均获得成功,压力变化、病理结果、X线检查和彩超检查均证实实验组肝脾固定良好,能够将门脉血液分流回肝,降低门静脉压力.结论:肝脾固定后能有效降低门脉压力,治疗门脉高压具有可行性,并且更符合生理状态.
作者:夏自强;赵峰子;王家祥 刊期: 2004年第03期
目的:构建我国新疆分离O139群霍乱弧菌菌株(93006菌株)的基因组文库,为研究我国O139群霍乱弧菌的来源及其基因组特征提供资料.方法:制备霍乱弧菌高相对分子质量的基因组DNA,用Sau3AI酶将基因组DNA部分酶切成平均大小为32~40kb的片段,将部分酶切并经碱性磷酸酶(CIAP)处理的DNA片段与经XbaI、CIAP、BamHI处理的粘粒载体SuperCos1的载体臂相连接,连接产物经体外包装并转染大肠杆菌XL-Blue1 MR,经氨苄抗性筛选得到阳性克隆,构建霍乱弧菌的基因组文库.结果:该文库共获得了1 200个单克隆,平均插入片段的大小为32kb,空载率为0.05%,相当于9个库容量,从本文库中筛选到任一霍乱弧菌的DNA单拷贝序列的机率为99.98%,该文库能承受7次反复冻溶.结论:成功构建了我国新疆分离O139群霍乱弧菌菌株93006的基因组文库,为进一步克隆霍乱弧菌的基因和研究我国O139群霍乱弧菌的来源奠定了基础.
作者:谢婧;段广才;郗园林;范清堂 刊期: 2004年第03期
1992年5月至2002年12月,作者用B超引导下经皮穿刺注射无水乙醇硬化治疗肾囊肿36例,效果良好,报道如下.
作者:程四国;王存丰;李启忠 刊期: 2004年第03期
目的:观察重度子痫前期合并腹水产妇新生儿预后.方法:选取2001年1月至2002年12月在本院住院分娩的重度子痫前期患者138例,其中123例无腹水,15例并发腹水.观察2组新生儿出生时的Apgar评分、胎儿宫内发育迟缓、7 d内新生儿存活与血浆蛋白情况.结果:重度子痫前期合并腹水组新生儿出生后低Apgar评分(14例,77.8%)比率明显高无腹水组(69例,54.8%)(P<0.01),围生儿死亡率腹水组(7例,388.9‰)高于无腹水组(8例,63.5‰)(P<0.01).结论:子痫前期合并腹水患者新生儿预后差,应予以重视.
作者:崔世红;张曦;王朕华;黄彦霞;井燕 刊期: 2004年第03期
目的:探讨宫颈癌和宫颈上皮内瘤样病变(CIN)组织中Cyclin E的表达及与细胞增殖活性的关系.方法:应用免疫组化SP法对32例宫颈癌和20例CIN组织进行Cyclin E和细胞增殖核抗原(PCNA)检测,以20例正常宫颈组织为对照.结果:宫颈癌、CIN组织和正常宫颈组织Cyclin E的阳性表达率分别为59.38%、10.00%、0%(3者相比,P均<0.01),PCNA的阳性表达率分别为90.62%、55.00%、5%(3者相比,P均<0.01),且Cyclin E的表达与PCNA呈正相关(χ2=13.45,P<0.01).结论:Cyclin E表达增高的组织具有高度的细胞增殖活性,Cyclin E和PCNA的异常表达在宫颈癌的发生发展中起重要作用.
作者:李筱梅;郑英 刊期: 2004年第03期
目的:探讨原发性高血压(EH)左室肥厚(LVH)患者血浆内皮素-1(ET-1)的变化及缬沙坦降压和逆转左室肥厚的机制.方法:测定EH伴LVH(EH+LVH组,n=30)和不伴LVH(EH组,n=27)者缬沙坦治疗24周前后及健康对照组(n=30)的血压、左室质量指数(LMI)及血浆ET-1水平.结果:治疗前EH+LVH组血压、LVMI和血浆ET-1水平均明显高于对照组;与EH组比较,血压差异无统计学意义,而LVMI及ET-1水平较高;LVMI与血浆ET-1浓度呈正相关(r=0.413,P<0.05).缬沙坦治疗后EH及EH+LVH组患者血压、血浆ET-1水平均下降;EH+LVH组LVMI下降明显(P<0.01),EH组未有变化(P>0.05).结论:ET-1可能参与了原发性高血压LVH的发生发展,缬沙坦降压及逆转LVH机制可能部分源于对ET-1的影响.
作者:张峰;李彬;李玉东 刊期: 2004年第03期
胰腺癌的早期症状隐匿,临床发现较晚,复发转移多,尤其淋巴结转移是胰腺癌转移的主要方式[1].既往应用5-FU等单药或联合化疗均疗效低微,很难改善患者的肿瘤相关症状[2].作者应用吉西他滨(GEM)联合顺铂(DDP)的化疗方案,对胰腺癌术后腹腔淋巴结转移患者28例进行治疗,效果较好,现报道如下.
作者:宋敏 刊期: 2004年第03期
继发性周期性瘫痪,是格雷夫斯病(Graves病)较常见的神经肌肉并发症,其可为Graves病的首发症状,也可在Graves病发病后发生.本院自1997至2002年共收治20例Graves病合并周期性瘫痪患者,现分析如下.
作者:黄敬青 刊期: 2004年第03期
近年来,肺炎支原体肺炎(MPP)的发病率有上升趋势,且肺外并发症越来越多[1].作者对1999年6月至2003年6月本院确诊的MPP63例进行临床分析,报道如下.
作者:高东培 刊期: 2004年第03期
肝门部胆管癌,近年发病率呈上升趋势,该病起病隐匿,误诊率高,手术切除率低,引流术是重要的解决黄疸及内毒素血症的方法[1].本院1981至2002年间,对不能手术切除的肝门部胆管癌67例行各种引流术,现将体会报道如下.
作者:范正军;吴阳;王陆林;谢志征 刊期: 2004年第03期
1998年1月至2003年8月,作者采用携带式皮瓣、肌皮瓣修复四肢大面积软组织缺损12例,疗效满意,报道如下.
作者:杨树东 刊期: 2004年第03期