侯政昆;刘凤斌;李培武;庄昆海
川芎具有广泛的临床应用,是常用中药之一,但其有效物质及作用机制尚不明确.该研究优选川芎治疗脑缺血的有效成分,并探究其作用机制.选取4个与脑缺血相关的靶蛋白,以对应的上市药物为参照,基于分子对接技术对文献报道的川芎所含45种成分进行联合筛选.结果显示川芎中多个成分与靶点的对接结果优于对应的上市药物,如苯酞类物质,提示可能是川芎治疗脑缺血的主要有效成分.该方法可用于研究中药的物质基础和分子作用机制.
作者:宋向岗;周威;陈超;王淑美;梁生旺 刊期: 2015年第11期
对来源于缘毛紫菀Aster souliei、萎软紫菀A.flaccidus和块根紫菀A.asteroides的藏紫菀药材进行了鉴别研究.参照《中国药典》2010年版附录相关方法,对药材进行了性状观察和描述,拍摄了药材照片;对药材粉末进行了显微观察,描述了主要显微特征,并制备了粉末显微图谱;以灯盏甲素和绿原酸为指标性成分,采用薄层色谱法建立了藏紫菀的薄层色谱鉴别方法.3种来源藏紫菀在药材性状和粉末显微特征方面均具有一定的区别,二者结合可以较好的区分3种不同的来源;薄层色谱鉴别结果显示,来源于缘毛紫菀和萎软紫菀的药材薄层色谱图较为一致,块根紫菀具有一定差别.该实验建立的性状、显微和薄层色谱鉴别方法简便、准确、重复性好,可方便、有效地区别3种不同来源的藏紫菀药材.
作者:丁锤;张炜;边樱;张朝凤;许翔鸿;张勉 刊期: 2015年第11期
目的:考察何首乌水提物(AEPM)对大鼠肝脏中胆汁酸合成、代谢、转运相关分子影响,探讨何首乌肝毒性相关机制.方法:SD大鼠分别灌胃AEPM60,30 g·kg-1,每天1次,连续28 d.28 d后解剖取肝脏,分别采用荧光定量PCR和Westernblot检测肝脏MRP3,MRP2,BSEP,FXR,CYP7A1等分子的mRNA和蛋白表达水平.结果:与正常组相比,AEPM高剂量组雄性大鼠肝脏中MRP3和BSEP的mRNA表达均显著升高(P<0.05),而AEPM高、低剂量组肝脏FXR的mRNA表达均显著降低(P<0.05);AEPM高、低剂量组雌性大鼠肝脏MRP3,MRP2,BSEP,CYP7A1的mRNA表达均显著升高(P<0.05).Westernblot检测结果显示,AEPM高、低剂量给药组雄性和雌性大鼠肝脏中MRP3,MRP2,BSEP,FXR,CYP7A1蛋白表达水平与mRNA变化基本一致,但均未达统计学显著差异.结论:AEPM大鼠灌胃给药28 d对肝脏胆汁酸合成、转运、排泄相关蛋白的表达具有一定的影响,在mRNA表达水平既具有胆汁淤积分子特征,同时也可见促进胆汁酸排泄的分子特征.
作者:王涛;王佳颖;周植星;江振洲;李妍妍;张良;张陆勇 刊期: 2015年第11期
细胞或组织内全部的RNA转录本(RNA transcripts)被称为转录组,其反映了基因在不同生命阶段、不同生理状态、不同组织类型以及不同环境条件下表达的情况.而药用植物转录组作为现今研究药用植物基因组活跃的领域之一,可从整体水平了解细胞中基因表达情况及其调控规律.对转录组的研究将有助于解决基因进化、遗传育种以及生态等诸多方面的问题.该文以转录组的研究目标、发展历程和研究方法为基础,介绍了药用植物中转录组的研究现状及未来发展趋势,为分子生药学的研究提供更多基础数据.
作者:王尧龙;黄璐琦;袁媛;查良平 刊期: 2015年第11期
采用激光诱导击穿光谱(LIBS)技术对4种珍宝藏药仁青芒觉、仁青常觉、二十五味珊瑚丸和二十五味珍珠丸进行元素定性研究,建立4种珍宝藏药的元素特征图谱.实验采用Nd∶YAG和基频1 064nm的脉冲激光器;激光光束聚焦待测样品表面产生等离子体,采用光谱仪探测其光谱信号.基于美国国家原子光谱标准与技术(NIST)数据库,对LIBS谱线进行辨识.4种珍宝藏药主要含有Ca,Na,K,Mg等,同时检测到C-N分子谱带.其中,在仁青常觉和二十五味珍珠丸中检测到Fe;仁青常觉和仁青芒觉中检测到重金属Cu,Hg;仁青常觉中检测到Ag.结果表明,LIBS提供了4种珍宝藏药的可靠、快速多元素分析;LIBS具有实时、快速、近似无损的优势,该技术在民族药物的元素检测,具有广阔的应用前景.
作者:刘晓娜;史新元;贾帅芸;赵娜;吴志生;乔延江 刊期: 2015年第11期
中药产业是我国具有极大自主创新潜力的战略性新兴产业.对我国中药产业自主创新演进历程进行回顾,其发展经历了自主创新基础奠定、自主创新核心地位确立、中药现代化体系探索及中药产业现代化体系全面建设等4个阶段.纵观中药产业自主创新的历程,呈现出鲜明的特征,从中可以探索有益的启示.
作者:丰志培;陶群山;彭代银;魏骅 刊期: 2015年第11期
利用MISA (MicroSAtelite)软件对藏茵陈川西獐牙菜转录组序列68 787条跨叠群(contigs)进行简单重复序列(SSR)位点的挖掘,发现5 099条序列中含有5 610个SSR位点,发生频率为7.41%,共有220种重复基元,平均每12.60 kb出现1个SSR位点.三核苷酸重复基元SSR出现频率高(45.99%),其次是二核苷酸(41.62%).AT/TA和AAT/TTA是二、三核苷酸中的优势重复基元.藏茵陈川西獐牙菜转录组SSR以5~10次重复为主,基序长度主要集中于12 ~ 30 bp.在藏茵陈川西獐牙菜转录组中注释的30 651个contigs中,有1 447个SSRs位于编码区,主要以三核苷酸重复为主(928,64.13%).藏茵陈川西獐牙菜转录组SSR的出现频率高,重复类型丰富,理论表明这些转录组SSR具有较高的可用性.该文通过对藏茵陈川西獐牙菜转录组资源的SSR信息的研究,为分子水平和生物信息学角度上开发藏茵陈川西獐牙菜的SSR功能性标记提供了丰富的候选序列.
作者:刘越;岳春江;王翊;马加强;孙洪波;罗敏;马鹏举;张琳霞;马徐 刊期: 2015年第11期
研究两色金鸡菊Coreopsis tinctoria头状花序的化学成分.采用柱色谱技术从采自新疆的两色金鸡菊中分离得到14个化合物,包括1个新的没药烷型倍半萜类化合物.通过理化性质和波谱数据鉴定其结构分别为coretinterpenoid A(1),coretinphenol(2),槲皮素(3),槲皮素-3-O-β-葡萄糖苷(4),木犀草素(5),花旗松素(6),7,3',5'-三羟基二氢黄酮(7),异奥卡宁(8),异奥卡宁-7-O-β-葡萄糖苷(9),5,7,3',5'-四羟基二氢黄酮-7-O-β-葡萄糖苷(10),紫铆因(11),奥卡宁(12),硫黄菊素(13),linocinnamarin (14).其中化合物1为新化合物,化合物4,10,13首次从该植物中分离得到.
作者:刘金俊;杨印军;朱寅荻;李广志;黄文华;郭宝林 刊期: 2015年第11期
甲羟戊酸(MVA)途径是萜类化合物生物合成的重要途径,该研究在厚朴转录组测序基础上,利用生物信息学方法对MVA途径中相关基因MoACOT,MoHMGS,MoHMGR,MoMK进行全面的生物信息学分析.结果表明,MoACOT和MoMK为稳定的亲水蛋白,而MoHMGS,MoHMGR为不稳定的亲水蛋白;二级结构均为混合型结构的蛋白质,α-螺旋是所有基因多肽链中大量的结构元件;利用同源建模法对三级空间结构进行了预测;跨膜域分析显示MoACOT,MoHMGS,MoMK无跨膜区,Mo-HMGR具有2个跨膜区,分别为39~61 aa和82~104 aa;系统进化树分析表明MoACOT,MoHMGS,MoHMGR,MoMK均与被子植物或双子叶植物遗传距离较近,符合遗传进化规律;基因表达水平显示MoACOT,MoHMGS,MoHMGR,MoMK表达水平在厚朴与凹叶厚朴间均无显著差异.研究结果为解析厚朴萜类生物合成MVA途径的分子机制提供理论依据.
作者:查良平;袁媛;黄璐琦;余淑琳 刊期: 2015年第11期
采用硅胶,Sephadex LH-20和半制备HPLC等色谱方法对小鱼眼草Dichrocephala benthamii全草的三萜类化学成分进行了研究,并运用质谱、核磁等波谱技术对分离得到的化合物进行了结构鉴定,结果从小鱼眼草中分离得到9个三萜类化合物,分别鉴定为β-香树脂醇甲酸酯(1),β-香树脂醇乙酸酯(2),β-香树脂醇(3),β-香树脂酮(4),3β-羟基,Δ11,13(18)-齐墩果二烯(5),Δ12-齐墩果烯(6),木栓酮(7),达玛烷二烯醇乙酸酯(8)和表木栓醇(9).化合物1~8为首次从鱼眼草属植物中分离得到,化合物9为首次从该种植物中分离得到,其中化合物1为新的天然产物.
作者:宋波;张秋博;王孟华;田新慧;孙浩理;张福宝;邹忠梅;丁刚 刊期: 2015年第11期
观察川芎含药血清对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC) Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)及下游信号因子髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)表达的影响.清洁级SD大鼠给予川芎水煎剂、秋水仙碱、生理盐水连续灌胃7d制备川芎含药血清.体外培养的肝星状细胞,除空白组外,其余各组均予LPS 1 mg·L-刺激24 h,各组含药血清干预后于37℃,5%CO2培养箱中培养.24h后收集细胞,分别采用半定量RT-PCR和Western blot法测定TLR4,MyD88的表达情况.用LPS刺激大鼠HSC后,TLR4与MyD88的mRNA和蛋白的表达均明显增加(与空白对照组比较P<0.01).川芎含药血清干预后,TLR4,MyD88 mRNA和蛋白的表达明显减少(与模型组比较P <0.01或P<0.05),其中川芎含药血清中、高剂量组减少为明显.川芎含药血清可通过抑制LPS诱导的HSCs中TLR4及下游信号因子MyD88的表达,参与TLR4信号通路而发挥其抗纤维化作用.
作者:王海兰;何娟;曹文富;陈文龙 刊期: 2015年第11期
研究经典古方开心散类方定志小丸主要化学成分在抑郁模型大鼠体内的代谢产物,并归纳总结其代谢途径.通过慢性不可预知温和刺激(CUMS)建立抑郁大鼠模型,灌胃给予大鼠定志小丸提取液后,收集血液、胆汁、尿液、粪便并进行预处理,采用UPLC-Q-TOF-MSE技术进行检测,利用UPLC C18色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,在负离子模式下获得MS/MSE质谱信息,通过对比空白与含药样品的液质数据,利用Metabolynx代谢产物分析软件处理,终对定志小丸中9个活性化合物在血浆、胆汁、尿液、粪便中的33个代谢产物进行推测,并总结了其体内代谢途径.其中从大鼠血浆中鉴定了代谢产物3个,胆汁中鉴定3个,尿液和粪便中鉴定代谢产物共27个.为阐明定志小丸在体内发挥疗效的药效物质基础和作用机制提供依据.
作者:许璐;刘婉婉;谭潇;王石;穆丽华;董宪喆;王东晓;刘屏 刊期: 2015年第11期
目的:研究川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对白血病U937细胞增殖与凋亡的影响,并初步探讨其作用机制.方法:应用CCK-8法检测TMP对U937细胞的增殖抑制,流式细胞仪检测细胞凋亡及周期分布,采用Real-time PCR法检测bcl-2,P27 mRNA表达,Western blot检测bcl-2,caspase-3,cyclin E1,CDK2,P27的表达.结果:川芎嗪呈时间剂量依赖的方式抑制U937细胞的增殖,作用48 h的IC50为160 mg·L-1;并且诱导U937细胞凋亡,阻滞细胞周期于G0/G1期;Real-time PCR及Western blot结果显示川芎嗪使U937细胞中凋亡相关分子bcl-2表达下调,caspase-3上调,周期相关蛋白cyclin E1,CDK2表达下调,P27上调.结论:川芎嗪对白血病U937细胞呈抑制增殖及诱导凋亡的作用,其机制可能是通过影响细胞周期分布,下调bcl-2的表达,终激活caspase-3,启动凋亡途径,诱导细胞凋亡.
作者:王小静;杨桂存;陈红霞;张萍;徐酉华 刊期: 2015年第11期
随着临床上对腔隙性脑梗死纯运动性轻偏瘫(pure motor hemiparesis,PMH)治疗效果的不断重视,应用益红抗脑栓胶囊治疗得到进一步效果.对PMH的治疗主要是依靠对病因的彻底探讨,根据治疗原则来确定其临床价值.该研究通过对浙江省奉化市人民医院2013年3月-2014年9月178例腔隙性脑梗死纯运动性轻偏瘫病患分别采用益红抗脑栓胶囊和脉栓通胶囊治疗,对治疗后的有效性及血液流变学指标进行对比.后发现益红抗脑栓胶囊在应用过程中安全性高,治疗的有效性比例更大.并且有利于血脂和血液流变学指标的稳定,对神经功能的修复作用更大.因此,临床上应推广应用益红抗脑栓胶囊治疗PMH.但药物之间的总体的差异还需进一步对比,以保证临床疗效.
作者:周纪东 刊期: 2015年第11期
该文采用乙醇分级沉淀法提取不同浓度乙醇层的黄芪多糖,并探讨黄芪多糖相对分子质量、构效及活性之间的关系.采用不同浓度的乙醇(30%,50%,70%,75%,80%,90%)沉淀,以获得不同相对分子质量的黄芪多糖;采用红外及电子扫描显微镜观察各层多糖的形态特征;采用DPPH自由基清除率,还原力和β-胡萝卜素/亚油酸体系检测各层的抗氧化活性.结果显示该法所得黄芪多糖随乙醇浓度增加,相对分子质量降低,抗氧化活性增强,90%乙醇沉淀层多糖表面光滑,相对分子质量较小,三股螺旋链构象特异,抗氧化活性强(P<0.05).
作者:李红法;郭松波;满淑丽;范亚亚;王婷婷;李霞;高文远 刊期: 2015年第11期
综合运用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、ODS反相柱色谱及制备型高效液相等色谱分离技术,对茜草科九节属植物黄脉九节Psychotria straminea枝叶的化学成分进行系统的分离和纯化.根据化合物的理化性质和波谱数据,并通过与文献对照,鉴定了从黄脉九节枝叶95%乙醇提取物的石油醚萃取部位中分离得到的16个化合物,包括8个黄酮类化合物、3个香豆素类化合物和5个三萜类化合物,分别鉴定为杨芽黄素(1)、芹菜素(2)、山柰酚(3)、木犀草素(4)、香叶木素(5)、槲皮素(6)、山柰酚-4'-O-甲醚(7)、鼠李素(8)、7-羟基香豆素(9)、7-甲氧基香豆素(10)、东莨菪内酯(11)、羽扇豆醇(12)、30-醛基羽扇豆醇(13)、羽扇豆醇乙酸酯(14)、α-香树脂醇(15)和熊果酸(16).该研究首次对黄脉九节的化学成分进行了系统研究,除化合物6和9为首次从黄脉九节中分离得到以外,其他化合物均为首次从九节属植物中分离得到.
作者:付艳辉;黄丽刚;汪晓翠;李小宝;李科凯;吴水玲;刘艳萍 刊期: 2015年第11期
金钱草LysimachiaeHerba和广金钱草Desmodii Styracifolii Herba都是中医治疗结石病的常用药,两者均具有清热、利尿、排石的功效,但临床应用又各有侧重,治疗肝胆结石、黄疸、淋证、痛风偏重于用前者,对泌尿系结石偏重于用后者.该文基于文献检索,对二者在排石、利胆、利尿、抗炎、抗氧化等多方面的药理作用进行较全面的比较分析,发现二者对肾结石和胆结石都有防治作用,但广金钱草对治疗已形成的肾结石较有优势,而金钱草对已形成的胆固醇结石较有优势;金钱草对治疗肝胆系统的炎症更显优势.
作者:熊颖;王俊文;邓君 刊期: 2015年第11期
分析评价银杏花粉中黄酮类、萜内酯类、银杏酸类以及原花青素类化学成分.采用UPLC-TQ-MS的方法对银杏花粉中24种资源性化学成分进行定性定量分析.结果显示芦丁和槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(4→1)-β-L-吡喃鼠李糖苷达到120.9 μg·g-1和114.0 μg·g-1,山柰酚为222.1 μg·g-1.该文采用UPLC-TQ-MS的方法首次同时测定银杏花粉中24种资源性化学成分,此方法快速、便利,质量准确,为银杏花粉的资源化利用提供了基础性工作.
作者:徐澄梅;任浩;钱大玮;孙光天;宿树兰;郭盛;欧阳臻;段金廒 刊期: 2015年第11期
为了探讨苦参总碱、美洲大蠊提取物及两者联合用药对孕激素受体(PR)阴性的子宫内膜癌细胞株JEC的作用.笔者通过MTT法、流式细胞仪、Western blot检测苦参总碱、美洲大蠊提取物和两者联合用药后对JEC细胞的生长抑制、细胞周期及P53和c-erbB-2基因蛋白的表达影响.结果发现,①MTT法:苦参总碱和美洲大蠊提取物对JEC的生长均有抑制作用,且联合给药后抑制作用显著提高.②流式细胞仪分析:苦参总碱组细胞在G0/G1期的比例上升,美洲大蠊提取物组细胞在G2/M期比例上升,联合给药组的G0/G1期比例较其他2组显著上升,细胞生长受到抑制(P<0.05).③Western blot法:苦参总碱组、美洲大蠊提取物组和联合给药组作用JEC细胞后,P53蛋白的表达水平上调,c-erbB-2蛋白表达水平下降(P<0.05).以上结果说明苦参总碱、美洲大蠊提取物及联合给药对JEC细胞的生长均有抑制作用,且能通过上调P53和下调c-erbB-2蛋白的表达诱导细胞周期阻滞,抑制细胞增殖.
作者:张晓巍;朱艳 刊期: 2015年第11期
基于三七转录组测序结果,选择萜类代谢骨架上香叶基香叶基焦磷酸合酶基因(GGPPS),结合RACE技术,克隆得到全长1 203 bp的cDNA序列,长开放阅读框为1 035 bp,命名为PnGGPPS,GeneBank登录号为KM486564,PnGGPPS基因全长2 370 bp,包含1个内含子和2个外显子,该基因编码344个氨基酸,与蓖麻Ricinus communis、丹参Salvia miltiorrhiza等植物GGPPS的同源性达到73%以上,具有富天冬氨酸区等多个结构域,属于类异戊二烯合成酶超家族.实时荧光定量PCR结果显示,PnGGPPS在一至三年生三七的根、茎、叶和三年生的花等不同器官组织中均有表达,但以三年生叶中具有显著水平的高表达量,暗示其既具有调节三七生长发育的基本功能,也与三七叶绿素和类胡萝卜素的合成、叶绿体的发育、阴生适应性,以及品质的形成有关.
作者:闵丹丹;唐美琼;李刚;屈啸声;缪剑华 刊期: 2015年第11期