学术投稿

5-氮-2'-脱氧胞苷对黑素瘤细胞IGFBP7表达及细胞增殖的影响

薛燕宁;陈浩;周武庆;宋亚丽;曾学思;孙建方

关键词:黑色素瘤, 5-氮-2'-脱氧胞苷, 胰岛素样生长因子结合蛋白7
摘要:目的 探讨去甲基化药物5-氮-2'-脱氧胞苷对体外培养黑素瘤细胞系A375和M14细胞胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)的表达及细胞增殖的影响.方法 体外培养黑素瘤A375和M14细胞,采用RT-PCR和免疫细胞化学法分别检测10μmol/L 5-氮-2'-脱氧胞苷处理前后A375和M14细胞中IGFBP7mRNA和蛋白的表达,噻唑蓝法检测不同浓度5-氮-2'-脱氧胞苷对A375和M14细胞的生长抑制作用.结果 10μmol/L 5-氮-2'-脱氧胞苷处理A375和M14细胞48h后,IGFBP7 mRNA和蛋白水平的表达均得到恢复.不同浓度的5-氮-2'-脱氧胞苷分别作用24、48、72、96和120h后,呈时间(F=141.35,P<0.01;F=549.33,P<0.01)和剂量(F=561.12,P<0.01;F=271.43,P<0.01)依赖性抑制A375和M14细胞增殖.结论 DNA甲基化参与调控IGFBP7基因的表达,5-氮-2'-脱氧胞苷具有抑制黑素瘤细胞增殖的作用.
中华皮肤科杂志相关文献
  • 毛囊闭锁三联征一家系17例

    先证者男,33岁.因反复臀部皮疹伴流脓12年,泛发并加重3个月于2008年9月19日入院.1996年在无明显诱因下,患者的左臀部出现一个红色核桃大硬结,表面破溃并流脓,当地医院给予手术切除并植皮愈合.

    作者:许兵;贾国泉;张正华 刊期: 2010年第06期

  • 不同效力糖皮质激素对HaCaT细胞糖皮质激素受体调节的比较

    临床上皮肤科医生常根据患者不同的皮损状况选用不同效力的糖皮质激素(glucocorticoid,GC)外用制剂,以达到理想的治疗效果.本课题组前期研究已发现,GC具有下调角质形成细胞糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)α的表达和上调GRβ表达的作用,从而导致外用GC制剂皮肤耐受,疗效降低[1-2].对GC效力等级的判定主要依据其收缩血管作用的强弱而定,那么不同效力的GC外用制剂对角质形成细胞GR表达的调节作用有何差异呢?针对这一问题,本研究以人角质形成细胞为研究对象.观察并比较经不同效力GC作用后人角质形成细胞HaCaT GRα和GRβ的表达情况,希望为临床合理地使用不同效力GC外用制剂提供理论和实验依据.

    作者:郁博;何威;张斌;杨玲 刊期: 2010年第06期

  • 肝细胞生长因子对体外培养的人外泌汗腺腺上皮细胞迁移、凋亡及p-Akt表达的影响

    目的 研究肝细胞生长因子(HGF)对人外泌汗腺上皮细胞(hESGc)的迁移、凋亡及p-Akt表达的影响.方法 在无血清培养基中分别加入不同浓度HGF(2、20、40μg/L)培养hESGc,采用细胞损伤愈合模型,培养20h后计数进入刮痕区的细胞,观察HGF对hESGc移行的作用.采用Annexin V-FITC及PI双染(膜联蛋白-异硫氰酸荧光素及碘化丙啶双染)后经流式细胞仪检测细胞凋亡,观察HGF对hESGc凋亡的影响,并用Western印迹法检测细胞中p-Akt的变化.结果 2μg/L HGF无促细胞移行作用,20μg/L和40μg/L HGF组进入划痕区的细胞分别为(23.0±6.3)个和(56.7±7.9)个,与对照组(17.3±5.5)个相比,差异均有统计学意义(t值分别为2.653、15.858,P值<0.05或0.01),两种浓度HGF促移行能力分别为33.2%和228.2%,差异有统计学意义(P<0.01).与对照组凋亡率14.76%相比,2μg/L HGF和20μg/L HGF组细胞凋亡率无明显变化,其凋亡率分别为14.16%和13.50%,而40μg/L HGF组细胞凋亡率为8.87%,显著下降(t=7.852,P<0.01).Western印迹法检测显示加入HGF后Akt被磷酸化,p-Akt升高.结论 HGF能促进hESGc移行,抑制hESGc凋亡,并刺激p-Akt表达升高.

    作者:雷霞;刘渤;伍津津;鲁元刚;朱堂友;杨亚东 刊期: 2010年第06期

  • 放射性皮炎继发大疱性类天疱疮一例

    经皮放射治疗(简称放疗)是肿瘤综合治疗的重要手段之一,可以明显降低肿瘤的复发率.但这种治疗能够对照射部位的皮肤产生一系列的早期和后期影响.放疗除引起放射性皮炎以外,国外也有报道可引发大疱性类天疱疮(BP),寻常型天疱疮.SLE或者表皮松解[1-6].我们诊治1例放射性皮炎继发BP,报道如下.

    作者:杜阳;张军;王云;杨勇 刊期: 2010年第06期

  • 以皮肤损害为特征表现的创伤弧菌感染23例

    目的 探讨以皮肤损害为特征表现的创伤弧菌感染患者的临床特点、治疗和转归.方法 回顾性分析1996-2008年以皮肤损害为特征表现的创伤弧菌感染23例患者的临床资料.结果 23例患者中,男15例,女8例.其中15例有慢性乙型病毒性肝炎、酒精性肝病史.17例发病前1周有生吃牡蛎等海鲜史.该病起病急,初发症状以下肢肿胀、疼痛、大疱、血疱.13例疱液培养检出创伤弧菌,9例同时血培养检出创伤弧菌;2例坏死组织培养出创伤弧菌.病理组织学特点为细胞空泡样变性、坏死,间质可见中性粒细胞浸润,血管壁呈炎症性改变,细胞内可见细菌.电镜:真皮细胞内外见众多散在分布的圆形或弧形微生物及细菌鞭毛.1996年5月至2000年5月共收治7例,无1例存活.2000年7月至2003年10月收治6例,死亡4例,存活2例.2004年5月至2008年10月共收治10例,6例存活.结论 早期识别皮肤损害,及早、及时处理是治疗创伤弧菌感染的关键,能够提高患者生存率.

    作者:高宇;应斌宇;郭蕾 刊期: 2010年第06期

  • 他克莫司对HaCaT细胞核因子-κB和糖皮质激素受体表达的影响

    目的 探讨他克莫司对TNF-α刺激的HacaT细胞核因子-κB(NF-κB)表达的影响,以及对HaCaT细胞糖皮质激素受体(GR)α和β表达的影响.方法 采用Western印迹和免疫荧光-激光共聚焦显微镜技术观察:①以TNF-α(10μg/L)单独或TNF-α(10μg/L)与他克莫司(10-8mol/L、10-7mol/L、10-6mol/L)同时作用HaCaT细胞,在24h和48h分别观察胞核NF-κB的表达;②以他克莫司(10-8mol/L、10-7mol/L、10-6mol/L)作用HaCaT细胞,在12h、24h和36h分别观察GRα和GRβ的表达.结果 未处理组HaCaT细胞的胞核有NF-κB(p65)蛋白的表达,灰度值比值为0.4988±0.03506;TNF-α作用24h和48h后,HaCaT细胞胞核NF-κB(p65)表达随时间延长而增强,灰度值比值分别为0.73±0.0316和0.8925±0.0171,与未处理组相比较.差异均有统计学意义(P<0.05).TNF-α与10-8 mol/L、10-7 mol/L、10-6mol/L他克莫司同时作用组HaCaT细胞胞核NF-κB表达灰度值比值分别为0.6825±0.0263、0.6200±0.0163和0.5575±0.0299,NF-κB表达随他克莫司浓度增加而减弱,后两组与TNF-α单独作用组相比,差异均有统计学意义(P<0.05).各浓度他克莫司作用24h和48h的NF-κB表达差异均无统计学意义(P>0.05).与未处理组相比,不同浓度他克莫司作用HaCaT细胞后,各时相点GRα和GRβ的表达差异均无统计学意义(P>0.05).结论 他克莫司能以浓度依赖方式抑制TNF-α刺激的角质形成细胞胞核NF-κB的表达,不影响角质形成细胞GRα和GRβ的表达.

    作者:杨玲;何威;张斌 刊期: 2010年第06期

  • 光动力作用对人血管内皮细胞分泌TNF-α的影响

    目的 观察血卟啉单甲醚光动力疗法(HMME-PDT)处理人血管内皮细胞(EC-304)后分泌TNF-α浓度变化,以探讨细胞因子与光动力疗法治疗鲜红斑痣后出现炎症反应的关系.方法将EC-304接种于6孔培养板,实验分为HMME-PDT实验组,HMME对照组,激光对照组,空白对照组.实验组在光动力疗法处理后12、24、48h分别取上清液,对照组于换液后相同时间点分别取上清液.ELISA法测量4组TNF-α的分泌量.结果每一组TNF-α在不同时间点的含量存在差异(F=62.276,P<0.01),4组之间TNF-α的含量在每个相同的时间点不完全相等(F=11.538,P<0.01),经多重比较,实验组与3组对照组之间TNF-α的含量在每个相同的时间点均有差异(P<0.01),3组对照组之间在每个相同的时间点的含量差异无统计学意义(P>0.05).结论 HMME-PDT可促进EC-304分泌TNF-α.

    作者:李光;孙建方;林彤;周展超 刊期: 2010年第06期

  • 念珠状发家系Ⅱ型毛发角蛋白基因突变的研究

    目的 探讨汉族念珠状发家系Ⅱ型毛发角蛋白(hHb)基因的突变情况.方法 采集该家系成员及50例毛发外观正常者外周血并提取基因组DNA.运用PCR扩增hHb1、hHb3、hHb6外显子1和外显子7,DNA直接测序检测突变位置.测序结果采用BLAST软件在互联网上进行比对.扫描电镜下观察毛干结构.结果 扫描电镜下,病发呈典型的念珠状表现,狭窄部见明显的纵嵴和纵沟,病发毛小皮厚薄不均,其中1例病发大部分皮质和髓质消失.经网上比对分析,该家系患者hHb6外显子7第1289位碱基鸟嘌呤(G)被腺嘌呤(A)取代,导致第430位精氨酸突变为谷氨酰胺(即R430Q).而该家系中未患病者和50位正常对照组均未发现该突变,hHb1、hHb3外显子1和外显子7及hHb6的外显子1未发现突变.结论 hHb6外显子7的R430Q错义突变是一种新的突变,可能与该家系的发病有关.

    作者:林永丽;吴瑾;许文嵘;李中明;何韶衡;范卫新 刊期: 2010年第06期

  • 黄褐斑和白癜风的诊疗标准(2010年版)

    一、白癜风(一)诊断标准:①通常在儿童期或青年期发病,表现为大小和形状各异的脱色性白斑,周围颜色正常或有色素增加.②皮损好发于面部、颈部、手背和躯干;腔口黏膜及周围皮肤也易受侵犯,如眼、鼻、口、耳、乳头、脐、阴茎、女阴和肛门;亦常见于外伤部位;白斑部位的毛发通常也变白.③排除炎症后色素减退斑、斑驳病、特发性色素减退斑、白色糠疹、无色素痣和贫血痣等皮肤病.④或者Wood灯下白斑区见亮白色荧光.

    作者:中国中西医结合学会皮肤性病专业委员会色素病学组 刊期: 2010年第06期

  • 17-β雌二醇对人皮肤成纤维细胞分泌透明质酸和胶原的影响

    透明质酸是真皮中主要基质成分,具有很强的吸水保湿性,胶原是真皮细胞间主要有形成分,对维持皮肤厚度张力和缓冲外界创伤具有重要作用,两者均由皮肤成纤维细胞产生.成纤维细胞是雌激素的靶细胞,其生物学功能受雌激素水平影响.绝经前女性体内起主要作用的雌激素是17-β雌二醇,绝经期到来后该激素水平降低,对女性绝经期后皮肤老化加速起重要作用.我们研究17-β雌二醇对体外培养人皮肤成纤维细胞产生透明质酸和胶原的影响.

    作者:张东妍;康尔恂 刊期: 2010年第06期

  • 局部皮瓣修复鼻部皮肤恶性小肿瘤术后缺损54例

    目的 探讨鼻部下1/3皮肤恶性小肿瘤手术切除后皮肤软组织缺损的多种皮瓣修复方法和效果.方法 手术切除鼻部皮损,术中病理示无残癌组织后,根据鼻缺损的部位、大小、形状以及周围皮肤情况等我们选择双叶皮瓣、双侧旋转皮瓣、鼻唇沟皮瓣等方法进行皮肤软组织缺损的修复.结果 鼻部皮肤恶性小肿瘤54例,基底细胞癌39例占72.22%,鳞状细胞癌9例占16.67%,角化棘皮瘤6例占11.11%.切除后的缺损均位于鼻部下1/3,长径均未超过2.0 cm,术中修复缺损选择双叶皮瓣20例,双侧旋转皮瓣2例,鼻唇沟皮瓣32例,术后皮瓣全部成活,未见鼻部明显变形.随访5年未见复发.结论 局部双叶皮瓣、双侧旋转皮瓣、鼻唇沟皮瓣等修复鼻部下1/3长径未超过2.0 cm的皮肤恶性肿瘤切除后的皮肤软组织缺损,可以获得较满意效果.

    作者:张斌;刘积东;李乔;朱英华;占城;王文松 刊期: 2010年第06期

  • 表现为银屑病样皮损的慢性移植物抗宿主病一例

    患者女,23岁.因躯干、四肢泛发红斑、丘疹伴瘙痒9个月于2009年3月来我科就诊.患者1年半前无明显诱因出现头晕、乏力、活动后气促,于上海瑞金医院就诊,经检查后确诊为急性髓性白血病M4,行IA(去甲氧柔红霉素和阿糖胞苷)方案化疗后获得完全缓解.

    作者:吴华锋;孙青苗;张建中 刊期: 2010年第06期

  • 外用含维生素C、阿魏酸和根皮素的抗氧化制剂对紫外线诱导的皮肤光损伤的保护功效

    UV可诱发氧化应激反应.由皮肤暴露于UV后所导致的细胞水平上的活性氧簇(ROS)增加,将对表皮细胞和真皮细胞中的脂类、蛋白和核酸造成损伤,从而参与晒伤反应、皮肤光老化及光致癌效应.该文通过检测皮肤光损伤相关生物标记研究了含维生素C、阿魏酸(ferulic anid)和根皮素(phloretin)外用制剂对健康志愿者UV所致皮肤光损伤的保护效应.

    作者:李岷;甄雅贤 刊期: 2010年第06期

  • 泛发性大疱性固定性药疹一例

    患儿男,9岁,因发热2天,皮疹1天于2009年3月8日首次入院.入院前2天,患儿因发热,咳嗽,在当地医院诊断为上呼吸道感染,给予阿莫西林胶囊(0.25 g)口服后,因青霉素皮试阳性,改为头孢曲松静脉滴注,8小时后,患儿出现高热,颈部、腋下、阴茎皮肤潮红,伴疼痛.1 d后,潮红皮肤蔓延至整个躯十部,并出现大疱和表皮剥脱(图1).因患儿为福利院儿童,家族史、遗传病史不详.

    作者:张立新;路娣;刘秋慧;马琳 刊期: 2010年第06期

  • kit基因c.2472+1G>A突变在一个中国家系导致斑驳病

    目的 对一斑驳病家系行分子遗传学分析,明确该家系的致病突变.方法 运用PCR、逆转录PCR和DNA测序对家系成员kit基因进行基因检测.结果 先证者的kit基因存在c.2472+1G>A的杂合突变,该突变使第17号外显子3'端剪接位点丢失,导致kit基因所编码的mRNA第17号外显子缺失,家系中其他患者均存在相同突变,家系中正常个体中没有此突变.结论 kit基因的c.2472+1G>A杂合突变是导致家系成员发生斑驳病的致病突变.

    作者:全意;廖希;梁德生;邬玲仟 刊期: 2010年第06期

  • 手术切除黑素痣继发皮肤垢着病一例

    患者女,24岁,于2008年11月15日因右颊部黑素痣20年,来我院皮肤科就诊.检查:患者面部皮肤白润,光滑.右颊部可见一处黄豆大小椭圆形黑素痣,高出皮肤表面,表面光滑,无破溃,边缘规则.

    作者:张芳芳;高玉雪;廖晓东;涂彩霞 刊期: 2010年第06期

  • Akt和mTOR在皮肤基底细胞癌中的表达

    基底细胞癌(BCC)是较常见的皮肤肿瘤之一,尽管其生长缓慢,转移少见,但可造成局部组织破坏,造成感染及大出血,甚至毁损容貌.因此,其发病机制的研究具有重要的意义.Akt/mTOR信号通路普遍存在于各种细胞中,是参与细胞生长、增殖、分化调节的信号通路.其表达异常与人类多种恶性肿瘤的发生、发展密切相关.在乳腺癌、肺癌以及胶质瘤中均已发现Akt与mTOR的高表达[1-3].目前对Akt和mTOR在皮肤BCC中表达的研究报道不多,我们采用免疫组化法检测Akt和mTOR在BCC组织中的表达水平,旨在探讨Akt/mTOR信号通路在BCC发展过程中所起的作用.

    作者:张桂英;周双元;姚明珠;陈明亮 刊期: 2010年第06期

  • 5-氮-2'-脱氧胞苷对黑素瘤细胞IGFBP7表达及细胞增殖的影响

    目的 探讨去甲基化药物5-氮-2'-脱氧胞苷对体外培养黑素瘤细胞系A375和M14细胞胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)的表达及细胞增殖的影响.方法 体外培养黑素瘤A375和M14细胞,采用RT-PCR和免疫细胞化学法分别检测10μmol/L 5-氮-2'-脱氧胞苷处理前后A375和M14细胞中IGFBP7mRNA和蛋白的表达,噻唑蓝法检测不同浓度5-氮-2'-脱氧胞苷对A375和M14细胞的生长抑制作用.结果 10μmol/L 5-氮-2'-脱氧胞苷处理A375和M14细胞48h后,IGFBP7 mRNA和蛋白水平的表达均得到恢复.不同浓度的5-氮-2'-脱氧胞苷分别作用24、48、72、96和120h后,呈时间(F=141.35,P<0.01;F=549.33,P<0.01)和剂量(F=561.12,P<0.01;F=271.43,P<0.01)依赖性抑制A375和M14细胞增殖.结论 DNA甲基化参与调控IGFBP7基因的表达,5-氮-2'-脱氧胞苷具有抑制黑素瘤细胞增殖的作用.

    作者:薛燕宁;陈浩;周武庆;宋亚丽;曾学思;孙建方 刊期: 2010年第06期

  • 成人先天性无汗无痛症一例

    患者男,42岁,因左足溃疡不愈23天就诊.患者自出生后经常出现高热,在当地卫生院按夏季热或感冒诊治,效果不佳.患者3~4岁时经常咬破舌尖并形成溃疡,致使舌尖缺损.

    作者:廖晖;吴敏;刘江波 刊期: 2010年第06期

  • 大疱性类天疱疮患者血清与疱液中巨噬细胞游走抑制因子的检测

    目前认为大疱性类天疱疮(BP)的发病不仅与自身抗体的产生有关,而且与细胞因子网络的紊乱密切相关.巨噬细胞游走抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)作为一种前炎症因子,在细胞因子网络平衡中发挥一定作用.本研究采用ELISA方法检测BP患者活动期血清、疱液中MIF的含量和缓解期血清中MIF的含量,以探讨MIF在BP发病机制中的作用及其临床意义.

    作者:马蕾;黄萍 刊期: 2010年第06期

中华皮肤科杂志

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主管:中国科学技术协会

主办:中华医学会