尹翠兰;张英;杨美容;毛燕群;李超;蒲云川
目的:检查大鼠Thy-1肾炎(Thy-1 nephritis,Thy-1N)肾小球系膜细胞(glomerularmesangial cell,GMC)的增生病变及亚溶解型(sublytic)C5b-9复合物在GMC增殖中的作用.方法:复制大鼠Thy-1N模型,分别于注射Thy-1抗体后18 h、3 d和7d时,取肾组织,用real-time PCR和Western blot方法检查其肾组织中细胞增殖指标,即细胞周期蛋白D2(cyclin D2)和增殖细胞核抗原(proliferative cell nuclear antigen,PCNA)的mRNA丰度及蛋白表达水平.用免疫荧光观察肾小球中C5b-9复合物的沉积.同时,使用BrdU掺入法、光镜及电镜观察大鼠肾小球细胞的增殖情况.此外,体外培养大鼠GMC,进行不同分组处理后再给予sublytic C5b-9刺激,用3H-胸腺嘧啶核苷酸掺入法(3H-thymidine incorporation,3H-TdR)检查GMC的增殖情况.结果:大鼠Thy-lN病变18 h,肾组织中cyclin D2、PCNA表达和肾内BrdU阳性细胞数均开始升高,实验3d和7d,其表达进一步提高.同时肾小球内可见C5b-9复合物沉积,部分C5b-9包绕的肾细胞形态完好.另形态学观察还发现,实验18 h,部分GMC溶解坏死,而实验3 d,GMC数量明显增多,7d增加更为显著.体外实验中,大鼠GMC在sublytic C5b-9刺激后18h,其细胞增殖水平显著增高,而用sublytic C5b-9刺激GMC产生的培养上清处理正常的GMC后,亦能轻度刺激GMC增殖.结论:大鼠Thy-1N肾小球病变存在早期增殖和继发增生的病理改变,而GMC的早期增殖可能与sublytic C5b-9作用有关.
作者:赵聃;李妍;周建博;张婧;邱文;王迎伟 刊期: 2012年第10期
目的:研究金雀异黄素对乳腺癌细胞(MDA-MB-231)浸润能力的影响及其可能机制.方法:不同浓度的金雀异黄素(25~100 μmol/L)孵育MDA-MB-231细胞24 h,用Transwell assay检测细胞浸润能力;用免疫印迹法比较细胞内磷酸化和总细胞外信号调节激酶(ERK)蛋白含量的改变;用免疫荧光实验检测细胞内磷酸化ERK的分布;用DHE染色及荧光显微镜检测细胞内超氧阴离子水平.结果:金雀异黄素处理使细胞浸润能力降低;同时,金雀异黄素的处理引起细胞内磷酸化ERK量明显降低,且磷酸化ERK在核内含量明显下降;ERK抑制剂U0126作用于细胞亦能明显降低细胞的浸润能力;金雀异黄素处理还能使细胞内超氧阴离子含量明显下降,超氧阴离子清除剂TEMPOL不仅明显抑制磷酸化ERK含量,同时细胞浸润能力也明显降低.结论:金雀异黄素可能通过抑制乳腺癌细胞的超氧阴离子水平和ERK活性,进而抑制MDA-MB-231乳腺癌细胞的浸润能力.
作者:金建明;杜军 刊期: 2012年第10期
目的:观察白癜风患儿体内25-羟维生素D[25-hydroxy vitamin D,25-(OH)D]水平,并探讨其临床意义.方法:取清晨空腹静脉血,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测65例白癜风患儿及111例健康儿童血清25-(OH)D水平.结果:白癜风组患儿血清25-(OH)D平均水平明显低于正常儿童,差异有统计学意义(P<0.01).65例中37例患儿(占56.9%)血清25-(OH)D水平低于正常值下限(50 nmol/L),25-(OH)D平均水平为(34.92±8.24) nmol/L.健康对照组111例健康儿童中27例(占24.3%)血清25-(OH)D水平低于正常值下限,25-(OH)D平均水平为(42.20±6.14) nmol/L.进展期与稳定期白癜风患儿血清中25-(OH)D平均水平差异无统计学意义(P>0.05).结论:白癜风患儿维生素D水平低于正常儿童,应引起重视,可能与发病有关.
作者:杨苏;杨潇;李敏;谢骏逸;岳学状 刊期: 2012年第10期
目的:探讨OPG/RANK/RANKL轴与二尖瓣合并永久性房颤患者术后自动转复的窦性心律稳定性的关系及其临床意义.方法:选取135例在行单纯二尖瓣置换术后自动复律的房颤患者,根据术后7d内房颤是否复发分为房颤(AF)组和窦性心律(SR)组.术中取右心耳组织,采用Western blot及免疫组织化学法检测组织中OPG、RANK、RANKL的表达,用Masson三色法检测组织中间质纤维化程度.结果:AF组RANK和RANKL表达水平以及RANKL/OPG比值均高于SR组,胶原容积分数(CVF)在SR组显著低于AF组,RANK、RANKL表达水平以及RANKL/OPG比值与CVF呈显著正相关.结论:OPG/RANK/RANKL轴可能参与了二尖瓣合并房颤患者术后房颤的复发,因此可作为房颤上游治疗一新靶点.
作者:奚雷;曹海龙;朱锦富;吴延虎;陈亦江 刊期: 2012年第10期
目的:探讨肿瘤干细胞标志物CD133、人滋养层细胞表面抗原-2(trophoblast cell-surface antigens 2,TROP-2)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及意义.方法:用免疫组化、免疫荧光法检测CD133、TROP-2在NSCLC中的表达,激光共聚焦显微镜观察其定位和共定位.结果:①CD133、TROP-2在NSCLC组织中的阳性表达率分别为30.00%和41.25%,均明显高于癌周正常肺组织及肺良性病变组织(P<0.01);②细胞分化程度越低,CD133表达阳性率越高(P=0.024);③CD133、TROP-2在有淋巴结转移组的阳性表达率高于无淋巴结转移组(P<0.05),TROP-2的阳性表达率随着TNM分期的升高而升高(P<0.05);④CD133、TROP-2在NSCLC中的表达具有密切相关性(P<0.001),且两种蛋白有共定位现象.结论:CD 133 、TROP-2的阳性表达均与NSCLC的侵袭、转移密切相关,初步证实二者在NSCLC组织中存在共定位关系,CD133联合TROP-2或许能成为NSCLC的肿瘤干细胞筛选标记物.
作者:顾宇平;朱一蓓;张光波;赵云根;黄建安 刊期: 2012年第10期
目的:探讨肝移植术后使用ω-3脂肪酸作为静脉营养支持对移植肝功能的恢复、感染率、排斥发生率、ICU停留时间、机械通气时间和术后住院时间的影响.方法:肝移植受体术后持续5d实行静脉营养支持,对照组给予标准静脉营养:热量104.6 kJ、氨基酸1.5 g/(kg·d);试验组除标准全胃肠外营养(TPN)再给予ω-3多不饱和脂肪酸[0.2 g/(kg·d),n=31].结果:两组在术后1周感染率、急性排斥发生率、ICU停留时间和机械通气时间无显著性差异(P>0.05).术后1周肝功能明显改善总胆红素(TBIL)[ (34.2±4.2)μmol/Lvs.(39.1±5.8)μmol/L,P<0.05],丙氨酸转氨酶(ALT)[ (77.9±9.6)U/L vs.(93.8±4.1)U/L,P<0.05)],谷草转氨酶(AST)[ (73.8±8.9)U/L vs.(89.4±7.3)U/L,P<0.05)],术后住院时间缩短[(22.8±3.9)d vs.(27.4±4.3)d,P<0.05)].结论:肝移植术后使用不饱和脂肪酸可以改善移植肝功能,缩短住院时间.
作者:武正山;张峰;游伟 刊期: 2012年第10期
目的:了解尿淀粉酶与肌酐比值有不同年龄组生物学变异并建立正常参考区间.方法:检测健康人(分幼儿组,青少年组,成年组及老年组)和确诊胰腺炎患者,分别测定尿淀粉酶和尿肌酐,比较各组间结果差异及观察临床诊断效能.结果:尿淀粉酶/肌酐比值幼儿组:(35.80±10.26)U/mmol(男18例)、(34.72±11.23)U/mmol(女21例)、(35.22±10.67)U/mmol(总39例);青少年组:(21.53±6.94)U/mmol(男39例)、(24.05±8.72)U/mmol(女37例)、(22.75±7.90)U/mmol(总76例);成年组:(23.09±8.09)U/mmol(男78例)、(23.33±6.41)U/mmol(女52例)、(23.76±7.48)U/mmol(总130例);老年组(21.47±12.61)U/mrnol(男61例)、(21.77±8.40)U/mmol(女60例)、(21.62±10.69)U/mmol(总121例).确诊胰腺炎患者:(69.60±41.93)U/mmol(共36例),幼儿组明显高于其他组,青少年后没有明显变化,同年龄组性别间没有差异.结论:除低龄幼儿组外,尿淀粉酶/肌酐比值4.91~40.55 U/mmol可作为胰腺炎诊断的良好指标.
作者:崔婷;马建锋 刊期: 2012年第10期
目的:探讨超声造影(contrast-enhanced ultrasonography,CEUS)结合Bosniak分级在复杂肾囊性占位性病变诊断中的应用价值.方法:回顾性分析确诊的22例复杂肾囊性占位性病变患者的常规超声及超声造影、增强CT表现,超声造影和增强CT分别用Bosniak分级系统进行分级,其结果与病理结果对照分析.常规超声观察囊性肿瘤的囊隔数目、囊隔或囊壁厚度、有无实性结节及钙化,以及囊壁、囊隔或结节处血供情况;超声造影观察病灶囊壁、囊隔及实性结节等内部结构的造影增强表现.结果:22例复杂肾囊性占位性病变患者病理确诊肾癌12例.CEUS检查Bosniak分级:Ⅰ级0例、Ⅱ级3例、Ⅱf级3例、Ⅲ级6例、Ⅳ级10例;增强CT行Bosniak分级:Ⅰ级2例、Ⅱ级5例、Ⅱf级1例、Ⅲ级6例、Ⅳ级8例.12例囊性肾癌中,CT和超声造影判断为BosniakⅣ级分别为8例(66.7%)和10例(83.3%);10例良性病变中,CT和超声造影判断为BosniakⅢ级分别为2例(20.0%)和4例(40.0%).结论:超声造影能较好反映复杂肾囊性占位性病变的内部结构和血供情况,CEUS-Bosniak分级较增强CT-Bosniak分级高,差异有统计学差异(P=0.026).CEUS-Bosniak分级对复杂肾囊性占位性病变探测可能有更高灵敏性和较大诊断价值,且安全、不易遗漏恶性病变.
作者:邵剑锋;周锋盛;胡强;严志强;张坚;徐卓群 刊期: 2012年第10期
目的:探讨肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponin I,cTnI)联合超声心动图在评价兔单次照射后急性心脏放射性损伤(radiation induced heart disease,RIHD)上的应用价值.方法:新西兰大白兔25只采用直线加速器进行单次照射.依据照射剂量分为A组(临床相关剂量组)和B组(高剂量组),A组动物剂量和数目分别为0、10、14、18 Gy和3、3、6、7只;B组剂量和数目分别为22、30、40、54 Gy和3、1、1、1只.照射前后进行cTnI和超声心动图检查,超声心动图检查指标包括:①血流脉冲多普勒Tei指数;②组织多普勒:二尖瓣环收缩期峰值速度(Sa)、舒张早期峰值速度(Ea)和舒张晚期峰值速度(Aa),以及Ea/Aa;③常规指标:左心室内径、左心室射血分数(EF)和左心室短轴缩短率(FS).随访4个月后取兔心进行病理学检查并对RIHD严重程度进行评分.结果:①照射后3 h cTnI开始明显上升,24 h后开始下降,1周后降到基线水平,B组cTnI值明显高于A组;②Sa、Ea和Aa以及Tei指数在不同照射剂量组间以及照射前后存在差异,照射后Sa、Ea和Aa减小,Tei指数增大;照射剂量增大,Sa、Ea和Aa减小,Tei指数增大;左心室大小、EF和FS均无统计学差异;③A组和B组的RIHD的严重程度有差异.结论:心脏在接受单次较大剂量照射后,可以发生急性RIHD,发生几率和严重程度与照射剂量密切相关.
作者:郭建锋;黄敏;吴锦昌;吴传峰;郑凯 刊期: 2012年第10期
目的:分析江苏省2005~2008年首次接受抗病毒治疗的艾滋病患者到2011年底的生存状况,探讨影响艾滋病抗病毒治疗患者生存时间的因素.方法:利用中国疾病预防控制系统艾滋病综合防治信息系统收集2005~2008年首次进入抗病毒治疗的艾滋病患者数据资料,采用Kaplan-Meier绘制研究对象的生存曲线,运用COX比例风险模型对江苏省艾滋病患者首次接受抗病毒治疗后的生存状况影响因素进行分析.结果:451例研究对象男女比例为1.75:1,以已婚或同居为主,年龄多数在20~50岁之间,感染途径主要是异性性传播,患者以苏南经济发达地区为主;治疗前基线CD4+T细胞计数平均为107个/mm3,抗病毒治疗后第12、24、36、48、60个月的累计生存率分别为0.88、0.85、0.84、0.78和0.78,84例死亡病例中53.6%死于首次治疗后6个月内.多因素Cox回归分析显示,基线CD4+T细胞计数、首次抗病毒治疗方案,抗病毒治疗方案是否改变与其生存时间之间存在统计学关联.结论:艾滋病抗病毒治疗显著提高了艾滋病患者的生存率,早期治疗能提高治疗效果.
作者:丁萍;张正红;陈国红;徐晓琴;邱涛;徐金水;李雷;胡海洋;羊海涛;傅更锋 刊期: 2012年第10期
目的:分析变应性支气管肺曲霉菌病(ABPA)的CT表现.方法:回顾性分析10例临床确诊ABPA患者的CT表现.结果:10例患者均见中心性支气管扩张,5例为单侧,5例为双侧;上叶支气管受累12处,下叶支气管受累9处.10处表现为单纯中心性支气管扩张,呈囊状、柱状或静脉曲张样改变;17处表现为中心性支气管扩张伴黏液栓,呈牙膏样、指套样改变,其中12处黏液栓呈较高密度.20处扩张支气管周围可见树芽征.2例可见肺段或亚段肺实变,内见铸型的高密度支气管影.结论:熟悉ABPA临床及影像学表现,有助于提高诊断水平.
作者:张伟;俞同福;徐海;宗敏 刊期: 2012年第10期
目的:了解2006~2010年江苏省监测地区儿童跌倒/坠落伤发生特征,为制定干预措施提供依据.方法:收集5年来医院监测点儿童跌倒/坠落伤病例资料进行分析.结果:跌倒/坠落伤位居各类儿童伤害就诊的首位,占40.4%;男性多于女性,男女比例为2.1∶1;各年龄段均有发生,比例近似.跌倒/坠落伤发生的前3位地点为家中(32.9%)、学校与公共场所(32.0%)和公共居住场所(18.1%);伤害发生时从事多的活动为休闲活动,占66.5%;受伤性质以扭伤/控伤为多见,占55.3%;受伤多的3个部位为头部(39.9%)、上肢(28.9%)和下肢(24.6%);80.3%的病例为轻伤,重度伤害仅占0.4%;意外伤害占99.3%.比较城乡间跌倒/坠落伤特征,发现两地就诊者性别、伤害意图、发生季节、发生旬段4个特征分布差异无显著性,在年龄、文化程度、发生地点、发生时活动、发生时段、伤害性质、部位、严重程度、结局等特征分布差异有显著性(P<0.05).结论:跌倒/坠落伤是江苏省监测地区就诊比例高的儿童伤害,应根据不同分布特征选择优先干预的方向并开展干预活动.
作者:杨婕;张永青;张晓燕;陆晓娜;武鸣 刊期: 2012年第10期
目的:探讨Rh阴性孕妇妊娠结局及产后出血的处理.方法:对南通市妇幼保健院2007年1月~2012年1月间住院分娩的76例Rh阴性孕妇临床资料进行回顾性分析,并随机抽取同期住院分娩的76例Rh阳性孕妇作对照,分析比较两组的妊娠结局.结果:Rh阴性孕妇早产、低体质量儿、产后出血、剖宫产率、羊水粪染、新生儿窒息与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05),新生儿高胆红素血症发生率差异有统计学意义(P<0.05).既往有生产史的Rh阴性孕妇致围生儿溶血病发生率高于首次妊娠者及仅有流产史者,差异有统计学意义(P<0.05);ABO血型相合者较不相合者Rh血型抗体产生率高,差异有统计学意义(P<0.05).结论:对RH阴性孕妇应加强孕前、孕期管理和宣教,尽量减少无效妊娠,分娩时应做好备血,积极治疗,改善预后,降低孕产妇及围生儿病死率.
作者:李丽 刊期: 2012年第10期
目的:探讨糜蛋白酶、高渗糖配伍胰岛素治疗腹部切口愈合不良的效果.方法:对18例妇产科手术后腹部切口愈合不良病例的诊断、体征、特殊情况及处理方法、愈合情况等临床资料进行回顾性分析,采用局部清创,创面覆盖糜蛋白酶,切口注射高渗糖胰岛素,并用普通医用胶布闭合切口.结果:脂肪液化、感染、营养不良、缝合不当为腹壁切口愈合不良的主要因素,经糜蛋白酶清创、创面局部注射高糖胰岛素后,封闭5~7 d全部治愈,切口愈合率100%.结论:糜蛋白酶、高渗糖配伍胰岛素对治疗腹部切口愈合不良有良好的效果,且方法简单易行,见效快,花费少,患者痛苦小,易被接受.
作者:张蕾;邵振堂 刊期: 2012年第10期
目的:探讨高分辨率CT( (High-Resolusion CT,HRCT)在术前评价慢性化脓性中耳炎及胆脂瘤中耳炎面神经管裸露的诊断价值.方法:前瞻性纳入并经手术证实的化脓性中耳炎及胆脂瘤中耳炎40例,全部病例均行HRCT检查,行横断位、冠状位重建,结合MPR旋转斜位显示面神经管各段.分析面神经各段有无裸露及裸露范围,与术中所见比较.结果:HRCT诊断面神经鼓室段有无裸露敏感度、特异度、准确度为66%、70%、80%;迷路段、前膝部、乳突段诊断准确度均为100%.合计敏感度、特异度、准确度为91%、92%、95%.结论:HRCT横断位、冠状位重建图像结合MPR斜位观察对慢性化脓性中耳炎及胆脂瘤中耳炎致面神经管迷路段、前膝部、鼓室段、乳突段裸露诊断准确率高,鼓室段敏感度、特异度稍低.术前评价面神经管有无裸露具有重要参考价值.
作者:宋庆轮;窦艳玲;叶伦;何闯;冉艮龙;方宏洋 刊期: 2012年第10期
目的:探讨降钙素原对慢性重症肝炎合并感染的诊断价值.方法:以慢性重症肝炎合并细菌感染为感染组,以慢性重症肝炎不合并细菌感染为非感染组.比较二组间血清降钙素原(PCT)检测结果,并以外周血白细胞计数(wBC)、C-反应蛋白(CRP)、体温检测做比较.结果:感染组第1、3天PCT值与非感染组相比均明显高,差异有统计学意义(P<0.001).在PCT、WBC、CRP和体温4项指标的阳性率中,PCT、WBC、体温在感染组和非感染组间有显著性差异.感染组的阳性率以PCT、CRP为高,分别为96.9%(63/65)、95.38%(62/65),而WBC高、体温较低,分别为23.08%(15/65)、20.00%(13/65),说明PCT、CRP提示存在感染的灵敏性高于WBC和体温.PCT、WBC、CRP、体温在非感染组的阴性率分别是100%(60/60)、95.00%(57/60)、11.67%(7/60)、95.00%(57/60).PCT与WBC、CRP、体温在特异性上两两比较,X2分别是3.39、94.93、3.08,P分别为>0.05、<0.005、>0.05.提示PCT和WBC对感染的特异性明显高于CRP,有显著统计学意义.治疗后死亡组与存活组比较,存活组PCT、WBC均明显下降,CRP下降,死亡组PCT、WBC、CRP则均升高,且明显高于存活组,治疗前PCT、WBC、CRP与治疗后比,t分别为6.40、5.84、5.97,P均<0.001,有显著统计学意义.结论:检测血清PCT水平的高低,对判断重型肝炎是否合并细菌感染及感染的严重程度具有指导意义.
作者:尹翠兰;张英;杨美容;毛燕群;李超;蒲云川 刊期: 2012年第10期
目的:了解本院病原菌的分布及其耐药性趋势,为临床合理使用抗菌药物提供依据.方法:对本院2011年1月~12月门诊和住院患者送检的临床标本进行细菌培养及药敏检测,并对细菌耐药性进行分析.结果:①1643份细菌培养标本,检出致病菌750株,检出阳性率为45.6%;病原菌中,革兰阳性球菌242株,占32.3%,以金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肠球菌属为主.革兰阴性杆菌382株,占50.9%,以大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、克雷伯菌属、肠杆菌属、鲍曼不动杆菌为主;②葡萄球菌属中的金黄色葡萄球菌对青霉素、头孢唑啉耐药率均为100.0%;59.2%的金黄色葡萄球菌为耐甲氧西林(MRSA),且除克林霉素和左氧氟沙星外,MRSA的耐药性均高于非MRSA;③肠球菌属中分离率高的为粪肠球菌和屎肠球菌,两者对青霉素的耐药率分别为37.5%和30.0%;④大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs检出率分别为77.3%和58.3%,且产ESBLs的耐药性均高于非产ESBLs的;⑤非发酵菌以铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌为主,耐碳青酶烯类鲍曼不动杆菌分离率占鲍曼不动杆菌37%.鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率分别为46.1%和29.6%.结论:本院细菌耐药性较高,应加强抗菌药物的合理应用,应谨慎使用第三代头孢菌素等β-内酰胺类抗菌药物,以减轻抗生素的选择性压力,防止耐药菌株在医院内播散.
作者:黄新次 刊期: 2012年第10期
目的:探讨薏苡仁甘油三酯注射液在三维适形放疗同步吉西他滨化疗治疗局部晚期胰腺癌中的免疫调节功能及对生存的影响.方法:56例局部晚期的胰腺癌随机分为治疗组和对照组.对照组:吉西他滨同步三维适形放疗;治疗组:薏苡仁甘油三酯注射液(100 ml/d)联合吉西他滨同步三维适形放疗,连用21、28 d为1个周期,共使用2个疗程,分别测定治疗前后CD3、CD4、CD8、CD4/CD8的值.结果:治疗组CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞治疗后比治疗前显著提高(P<0.05),治疗组中位生存期17.2个月,对照组12.4个月(P<0.05);结论:薏苡仁甘油三酯注射液能提高接受三维适形放疗同步吉西他滨化疗的局部晚期胰腺癌患者的免疫能力,提高患者中位生存期.
作者:曹向明;沈伟生;舒中琴;邓立春;奚蕾 刊期: 2012年第10期
目的:探讨彩色多普勒超声在甲状腺乳头状癌中的应用价值.方法:选取2009年2月~2011年12月在本院经病理证实为甲状腺乳头状癌的患者66例,回顾性分析和总结其声像图特征.结果:66例超声共检出结节82个,大径≤10 mm的结节占24.4%(20/82).其中52例为单侧单发,14例为多发.82个结节中低回声结节占91.5%(75/82),实质性结节占92.7%(76/82),结节内见砂粒样钙化的占80.5%(66/82),形态不规则边界不清的结节占78.0%(64/82),阻力指数>0.7结节占86.6%(71/82).超声探及淋巴结转移的占25.8%(17/66).合并弥漫性病变的占60.6%.结论:甲状腺乳头状癌其超声表现具有一定的特征性;同时超声能监测甲状腺弥漫性病变患者合并的结节是否发生恶变,为临床早期诊断和治疗甲状腺癌提供有力依据.
作者:王亚丽;邓晶;王剑翔;叶新华 刊期: 2012年第10期
目的:构建S100A16原核表达载体,制备S100A16蛋白多克隆抗体并初步鉴定.方法:RT-PCR扩增得到小鼠肝脏组织的S100A16基因,将此片段克隆到带有His标签的原核表达载体pET-28a多克隆位点,并转化大肠杆菌BL21(DE3).IPTG诱导融合蛋白表达,以亲和层析的方法纯化His-S100A16融合蛋白.纯化蛋白经SDS-PAGE电泳鉴定后,免疫新西兰白兔制备抗血清.分别采用ELISA和Western blot方法检测抗体效价和特异性.结果:经双酶切和核酸序列分析证实成功构建pET-28a-S100A16原核表达质粒.考马斯亮兰染色结果证实IPTG可有效诱导融合蛋白表达.用纯化融合蛋白免疫新西兰白兔得到的S100A16抗体血清,经ELISA和Western blot检测结果显示该抗体效价高,特异性好.结论:构建带有His标签的S100A16原核表达载体,并获得高纯度His-S100A16融合蛋白及其多克隆抗体,为进一步研究S100A16生物学功能奠定基础.
作者:薛一;孙静;刘梦兰;黄琼;杜新丽;张日华;刘云 刊期: 2012年第10期