原位杂交技术的应用及操作体会

孟丽

关键词：原位杂交技术, 直接检测, 异质性, 细胞基因表达, 人乳头状病毒, 互补配对原则, 组织细胞, 组织结构, 序列杂交, 信号放大, 特定序列, 基因水平, 基因互补, 核酸碱基, 观察结果, 方法, 定位, 细胞器, 检测目, DNA

摘要：原位杂交技术的原理是依据核酸碱基互补配对原则,利用标记的特定序列探针与待测样本中的原位检测目的基因互补核酸序列杂交,经信号放大显色后镜下观察结果.该方法具有2 个特点:①基因水平的检测,即直接检测DNA 或RNA ;②可以明确定位,在保存组织结构同时揭示组织细胞的异质性,细胞基因表达的异质性和细胞器中的区别定位[1].现根据我科目前开展的DNA 原位杂交人乳头状病毒(HPV)的检测,在日常操作中的方法及体会介绍如下.

实用医技杂志相关文献

重症监护室预防呼吸机相关性肺炎的护理干预研究

呼吸机相关性肺炎(VAP)在重症监护室(ICU)医院感染中居首位[1],,VAP 的病死率可达24%~50%,甚至76%[2],如何预防和控制VAP 的发生尤为重要.自2009 年2 月我们对ICU 机械通气超过48 h 的患者进行了前瞻性监测,据监测中发现的问题采取有针对性的护理干预措施,取得了良好的效果,现报道如下.

作者：马晓惠；邓双艳刊期： 2012年第01期
高频超声在跟腱损伤后愈合期的动态观察结果分析

跟腱是全身粗大的肌腱,它是由小腿三头肌向下延续而成.其起点从比目鱼肌下端变尖处为标志,终点以跟骨结节回声为标志.正常跟腱声像图特点是纤维带连续的均质高回声.高频超声能精细地显示肌腱的形态,并能实时动态观察肌腱运动状态,对于判断肌腱功能的完整性具有重要的意义.

作者：黄俊华；宋势波刊期： 2012年第01期
延长Dimension AR 生化分析仪热焊炬胶套使用寿命方法探索

Dimension AR 生化分析仪是美国DADE BEHRI NG 公司生产的,采用杜邦专利技术制作的全自动生化分析仪.该生化仪与Hitachi 、Olimpus 、罗氏等机型比较,其优点在于采用一次性反应杯,既减少交叉污染的发生,又保证杯间透光度的一致,减少了蒸馏水的用量.缺点是耗材较贵,维护成本较高[1].我院于2001 年3 月引进该机型,至今已有10 年之久,现还能正常运转.我们总结了各种保养,常见故障的处理方法等,同行也有不少报道.该生化分析仪使用几年之后,有个共同问题就是热焊炬胶套损坏加快,以至于每卷比色胶膜配送的2 个胶套已不够用,只能单独另购,不但增加了成本,由于检测过程中随时要更换胶套而影响了检测速度.如何延长热焊炬胶套使用寿命,现介绍一些经验方法如下.

作者：黄玉庭；韦炜刊期： 2012年第01期
2011年医院感染现患率调查分析

为贯彻卫生部<医院感染管理办法>、<抗菌药物合理应用指导原则>、<医院感染监测规范>,了解我院医院感染发生情况,抗菌药物使用情况及病原微生物送检率,分析医院感染相关危险因素,进一步强化医务人员医院感染预防控制意识,有效降低医院感染发生率,根据<2011 年山西省医院感染现患率调查实施方案>,我院于2011 年9 月进行现患率调查,现将调查结果汇总如下.

作者：张春萍；刘姣玲；王梅琴刊期： 2012年第01期
高频超声观察辛伐他汀对颈动脉粥样硬化斑块及内-中膜层形态学改变的价值

目前脑血管疾病已成为中、老年人第三大致死病因,其中颈动脉粥样硬化(AS)是造成脑梗死的重要原因.AS 斑块的破裂是急性脑血管事件的危险因素,在一定条件下,AS 病变可以延缓或停止发展甚至逐渐消退.本研究应用高频超声观察辛伐他汀对AS 斑块及内-中膜层厚度(IMT)形态学改变的探讨.

作者：杨华；李志强刊期： 2012年第01期
血细胞分析前质量控制

医学检验分析前阶段又称检验前过程.此阶段从临床医生申请检验开始,包括检验科人员素质水平及血细胞分析仪工作状态,检验项目的正确选择,生理学因素影响,患者在采集样本前的准备,标本的正确采集、保存和运送至检验科及在检验科内部的传递,检验师预处理等过程[1].近几年来,临床实验室普遍开展了室内质量控制和室间质量评价活动,这些质量控制多注意到了分析中和分析后的影响因素,据统计,分析前误差约占46%~63%,因此分析前的质量保证,对减少实验误差,提高检验质量尤为重要.

作者：赵新莹刊期： 2012年第01期
C反应蛋白在疾病诊断和预后评估中的研究进展

C 反应蛋白(C-reactive protein,CRP)因能在钙离子存在时与肺炎球菌C 多糖起沉淀反应而得名,它是机体受到微生物入侵或组织损伤等炎症性刺激时由肝脏合成的一种重要的急性期蛋白.CRP 在健康人血清中浓度很低,而在细菌感染引发炎症或组织损伤后,其浓度显著增高可达百倍甚至千倍,在炎症进程开始后6~12 h 就可检测到,因此目前的临床疾病诊断检测中通常将其作为独特的炎症标记物进行检测.

作者：刘桂香刊期： 2012年第01期
盆腔内畸胎瘤四例误诊分析

畸胎瘤并不少见,而在盆腔内发病部位及与周围组织关系变异甚大,收集我院4 例畸胎瘤并手术病理证实的患者资料,结合文献就其组织发生、B 超及CT 表现作一讨论.1 资料与方法1.1 一般资料:2010 -2011 年收集了4 例行CT 增强扫描,B超检查发现并经手术病理证实的盆腔畸胎瘤,均为女性,年龄45~55 岁.临床病史无明显症状及表现,经女性体检B 超时发现大小不等的盆腔肿物.

作者：尉志刚刊期： 2012年第01期
原位杂交技术的应用及操作体会

原位杂交技术的原理是依据核酸碱基互补配对原则,利用标记的特定序列探针与待测样本中的原位检测目的基因互补核酸序列杂交,经信号放大显色后镜下观察结果.该方法具有2 个特点:①基因水平的检测,即直接检测DNA 或RNA ;②可以明确定位,在保存组织结构同时揭示组织细胞的异质性,细胞基因表达的异质性和细胞器中的区别定位[1].现根据我科目前开展的DNA 原位杂交人乳头状病毒(HPV)的检测,在日常操作中的方法及体会介绍如下.

作者：孟丽刊期： 2012年第01期
腰椎间盘病变的CT 表现与临床分析

椎间盘病变包括椎间盘变性、膨出和突出.椎间盘突出多发生在下腰部,其次是颈部,胸部极少[1].除了退行性病变外,急性外伤和反复慢性损伤也是引起椎间盘突出的重要原因.发病时患者脊柱运动受限,局部疼痛并产生神经根受压症状,可有放射性疼痛.

作者：王以军；陈喜荣；乌开西刊期： 2012年第01期
脑出血并下肢深静脉血栓形成患者的护理

脑出血是指原发于脑内动脉、静脉和毛细血管的病变出血,血液在脑实质内积聚形成脑内血肿[1].下肢深静脉血栓(DVT)是指下肢筋膜内静脉血栓形成,包括小腿深静脉(胫前静脉、胫后静脉、腓静脉及肌肉静脉窦),以及月国静脉、股深静脉、股浅静脉、股总静脉、髂静脉[2].我科于2011 年9 月18 日收治1 例脑出血并下肢深静脉血栓形成的患者,现将其护理体会介绍如下.

作者：董璐刊期： 2012年第01期
皮下注射醋酸奥曲肽注射液和低分子肝素钙的方法和护理体会

醋酸奥曲肽注射液主要通过抑制胰酶及胰液的分泌,有效阻止急性胰腺炎转化为坏死性胰腺炎,临床上用于急性胰腺炎的治疗.低分子肝素钙主要用于预防和治疗血栓栓塞性疾病.2 种药物皮下注射后易出现注射部位小血肿、硬结、疼痛,甚至大片瘀血、皮肤坏死等情况.现将我科对住院患者皮下注射醋酸奥曲肽注射液及低分子肝素钙的方法和护理体会报告如下.

作者：郝爱玲；宁立立刊期： 2012年第01期
高校医院放射科体检胸部X线胶片按需打印的探讨

当前,医学影像存储与传输系统(picture archiving andcommunication system,PACS)的开发与应用已逐渐规范和成熟[1 -4 ].高校医院作为基层医院由于资金等方面的原因只是为放射科建立了影像工作站或小型医学影像传输与存储系统(mini-PASC).教职员工的胸部体检是高校医院放射科工作的重要内容.对于还没有配备DI-COM 打印服务器和自动打印机的高校医院,如何在胸部体检中充分发挥mini-PACS 的功能,实现胶片按需打印,终提高工作效率和服务质量,是高校医院放射科胸部体检过程中需要解决的问题之一.2006 -2010 年每2 年1 次的教职工体检过程中本院放射科胸部X 线胶片逐步实现了由按受检人数打印到按需打印的转变.本文结合实际情况对按需打印的初步实现进行探讨.

作者：王志华；翟应华；侯德仁刊期： 2012年第01期
低场磁共振增强长时间延迟扫描在肝脏炎性假瘤诊断中的应用

肝脏炎性假瘤(IPL)是一种以纤维组织增生和慢性炎性细胞浸润为特征的良性病变,以往其误诊率极高,达90%以上.随着磁共振特别是动态增强扫描技术的应用[1],人们对该病的认识不断深入[1].而低场磁共振因其条件所限,不能行真正意义上的动态增强扫描.本研究利用现有低场磁共振条件,行弥散加权成像(DWI)及长时间延迟扫描,找出可以提示该病变有价值的征象,避免不必要的手术.

作者：龙光宇刊期： 2012年第01期
山西省大同地区部分体检矿工血脂水平和动脉硬化指数调查分析

心脑血管病是威胁人类健康的主要疾病之一,据2002 年中国居民营养与健康状况调查资料显示,我国成人血脂异常人数达10.6 亿,每年大约260 万人死于心脑血管病.动脉硬化指数(AIP)和血脂4 项:血清胆固醇(TC)、血清甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的分析测定是心脑血管病的预防诊断及研究的重要指标.

作者：王翠兰刊期： 2012年第01期
临床安全用血体会

为了确保临床用血安全,我院血库做了有关工作,主要有输血申请单的审核;查对血液标本;按照SOP 标准操作规程做好血型鉴定(输血者及献血者ABO Rh 血型);同时积极参加临床室间质量评价,加强室内质量控制等措施,保证输血质量.

作者：林繁智；胡亚远刊期： 2012年第01期
声辐射力脉冲成像技术应用于肝脏疾病的初步研究

声辐射力脉冲成像(acoustic radiation force impulse,ARFI)技术是在超声弹性成像基础上建立的一项新技术,包括声触诊组织成像(virtual touch tissue imaging)和声触诊组织量化(virtual touch quantification,VTQ)技术.

作者：赵明珠；金清刊期： 2012年第01期
影响手术患者安全的因素及护理对策

安全、有效、高质量的围手术期护理成为手术室护理工作管理的目标.影响手术患者安全的潜在性危险因素很多,如果我们不认真学习,积累经验,及时发现护理工作中存在的问题,提高防范措施,这些潜在性危险因素在一定条件下可逐步转变为明显损伤,危害手术患者的安全,造成不良后果.笔者对影响手术患者安全的因素及护理对策做了一些探讨,现报告如下.

作者：王志芳刊期： 2012年第01期
高压氧综合治疗儿童颅脑损伤

儿童颅脑损伤是指小儿颅脑在外力的作用下所致的损伤.儿童颅脑损伤多发生于车祸、坠落、打击头部等,随着现代化进程,目前患病人数有增加的趋势,也逐渐演变成儿童脑外科的常见病.随着医疗诊治水平的飞速发展,脑外伤的病死率也明显下降,但有相当比例儿童遗留肢体残疾,增加了社会和家庭负担.

作者：梁秀清；王振芳刊期： 2012年第01期
定期强化教育对支气管哮喘患者整体疗效的影响

儿童和成人哮喘的发病率、病死率以每10 年20%~50%比例增长,已造成巨大的社会负担,成为日益严重的公共卫生问题[1].初步统计,哮喘患者分别占我科门诊及住院患者人数的5.3%和11%,我科从2005 年开始依照全球哮喘防治指南(GINA)对哮喘患者进行正规的吸入糖皮质激素等综合治疗措施,但很大一部分患者依从性差,不能坚持用药,根本达不到GINA 提出的完全控制哮喘的标准.通过健康教育可提高患者依从性,现报告如下.

作者：苏凝；王晋利；马文途刊期： 2012年第01期