学术投稿

人端粒酶逆转录酶核心启动子的克隆

张俊;王爱东;申咏梅;石怡珍;崔学军;刘增礼;欧阳松应

关键词:端粒酶, 端粒酶逆转录酶, 启动子
摘要:目的 克隆出人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因核心启动子,为构建hTERT核心启动子调控的重组腺病毒提供实验基础.方法 提取肝癌细胞HepG2基因组DNA作为模板,进行PCR扩增,扩增产物酶切后亚克隆至pcDNA3.1(+)质粒.对重组体进行酶切和测序鉴定.结果 PCR扩增出约250 bp的目的 片段,经酶切和测序鉴定表明质粒构建成功.结论 hTERT核心启动子的成功克隆,为进一步实验提供了基础.
苏州大学学报(医学版)杂志相关文献
  • AnnexinⅡsiRNA对淋巴瘤Jurkat细胞凋亡的影响

    目的 观察沉耿膜联蛋白Ⅱ(annexinⅡ,A2)基因对淋巴瘤Jurkat细胞凋亡的影响.方法 采用A2 siRNA转染人淋巴瘤Jurkat细胞后应用RT-PCR和Western blot鉴定干扰效果.Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测其对细胞凋亡的影响.结果 Real-time PCR和Western blot检测结果表明,A2基因被成功抑制.流式细胞术检测得A2siRNA组细胞凋亡率为57.47%±2.10%.较阴性对照组(28.68%±1.21%)明显增加,差异有统计学意义(P<0.05).结论 A2基因可增强Jurkat细胞抗凋亡作用,A2 siRNA可诱导Jurkat细胞凋亡.

    作者:包红雨;朱明清;沈飞;江淼;马珍妮;陈琳;谢丽倩;董宁征;阮长耿 刊期: 2009年第02期

  • 99Tcm-双半胱氨酸-甲硝唑SPECT显像预测鼻咽癌乏氧的初步研究

    目的 初步探讨99Tcm-EC-MN(99锝-双半胱氨酸-甲硝唑)SPECT显像对预测鼻咽癌乏氧状况的可行性及临床价值.方法 在放疗前对15例鼻咽癌初治病例进行99Tcm-EC-MN SPECT显像,测定鼻咽原发病灶肿瘤T/N值(放射性计数/正常组织放射性计数比值),并随访治疗疗效.结果 15例鼻咽原发病灶的T/N值为0.91~3.51(平均值为2.14),放疗后15例中,CR 8例,PR 7例;其3年总生存率、局部控制率和无远地转移率分别为53.3%、79.0%和86.2%.T/N值≤2.14和>2.14组的治疗反应率、总生存率、局部控制率和无远地转移率差异均无统计学意义(P>0.05).结论 99Tcm-EC-MN SPECT显像能安全地用于鼻咽癌乏氧的检测;肿瘤之间不同的T/N值提示鼻咽原发灶均存在不同程度的乏氧现象,但其临缶床应用价值不能肯定.

    作者:张云霞;陆雪官;唐军;张力元 刊期: 2009年第02期

  • 紫外光谱标准加入法测定胃液中维生素C的含量

    目的 建立一种准确、灵敏、简便、快捷的测定人胃液中VitC含量的方法,为应用VitC防治消化性溃疡提供参数依据.方法 采用紫外光谱标准加入法,在245 nm波长处测定各组胃液中VitC的含量.结果 工作曲线线性良好,回收率为99.53%,标准偏差为0.59%.结论 该法能消除基质的干扰,而且准确、灵敏、简便、快捷.

    作者:张永刚;姚立军;彭巍;缪丽燕 刊期: 2009年第02期

  • 雌、孕激素受体与各类型巨乳发生发展的关系

    目的 探讨原发性小乳症女性与青春期巨乳以及妊娠后巨乳女性乳腺组织中雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)含量差异及其与巨乳发生的关系.方法 采用免疫组化S-P法分别测定10例原发性小乳症女性和6例青春期巨乳以及10例妊娠后巨乳乳腺组织中ER和PR表达.结果 ER在原发性小乳症女性乳腺组织中表达与巨乳患者(青春期巨乳和妊娠后巨乳)乳腺组织中表达差异有统计学意义(P<0.05);PR在原发性小乳症女性乳腺组织中表达与青春期巨乳患者乳腺组织中表达差异无统计学意义(P>0.05),但PR在青春期巨乳中的表达与妊娠后巨乳乳腺组织中的表达差异无统计学意义(p<0.05).结论 青春期巨乳的发生可能与乳腺组织中ER的表达水平相关;而妊娠后巨乳的发生可能与乳腺组织中ER、PR的表达水平都相关.

    作者:韩文雅;赵天兰;张永胜;谢晓明;张云涛;余道江;徐妍;陈琦 刊期: 2009年第02期

  • 维甲酸、三氧化二砷联合化疗急性早幼粒细胞白血病55例疗效观察

    目的 观察维甲酸(ATRA)加三氧化二砷(As2O2)联合治疗初治急性早幼粒细胞白血病(APL)的完全缓解(CR)率、获得CR时间、缓解后不同治疗方案融合基因转阴率及无复发生存率.方法 ATRA加(治疗组,55例)或不加(对照组,20例)As2O3治疗初治APL直至CR,根据白细胞计数同时加用蒽环类药物化疗.CR后治疗组采用包含中剂量阿糖胞苷的3个疗程的化疗巩固.维持治疗采用ATRA、As2O3,及巯基嘌呤+甲氨蝶呤(MM)的序贯治疗.对照组采用传统的DA方案2个疗程巩固,ATRA、MM加DA/HA的序贯维持治疗.结果 治疗组55例中,50例获得CR,CR率为90.9%,与对照组(85.0%)比较,差异无统计学意义(P>0.05);获得CR时间为(25.7±4.2)d,明显短于对照组的(32.6±15.7)d,差异有统计学意义(P<0.05);维持治疗期间随访的40例患者融合基因均转阴,无一例复发,与对照组无复生存率(70.6%)比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 ATRA、As2O3及化疗联合治疗初治APL CR率高,获得CR时间缩短,包含中剂量阿糖胞苷的巩固治疗、ATRA、As2O3,及MM序贯维持方案能获得长期无复发生存.

    作者:秦燕;陆德炎;蔡奕峰;宋国齐;尤学芬;滕鎔;徐瑞容;刘红 刊期: 2009年第02期

  • 肱骨近端锁定钢板治疗肱骨近端骨折48例疗效分析

    目的 评价肱骨近端锁定钢板治疗肱骨近端骨折的疗效.方法 采用有限切开复位肱骨近端锁定钢板治疗48例肱骨近端骨折.平均随访7个月(3~29个月).结果 术后无伤口感染、骨折不愈合和内固定松动退出发生.骨折愈合时间为术后2.5~7个月.肩关节功能按照Constant评分标准.结果 为优17例,良26例,中5例;优良率为89.5%.结论 肱骨近端锁定钢板对肱骨近端骨折固定可靠,并发症少,疗效满意,是理想的治疗方法.

    作者:史建勇;蒋大庆;杨桢榕 刊期: 2009年第02期

  • 急性早幼粒细胞白血病并发粒细胞肉瘤1例报告及文献复习

    粒细胞肉瘤(granulocytic sarcoma,GS)是一种未成熟粒细胞在髓外增生和浸润形成的肿瘤性包块,常侵犯的部位为皮肤、淋巴结、软组织、骨及骨膜[1].CS较多见于急性粒细胞白血病(acute myelogenous leukemia,AML)、慢性粒细胞白血病、骨髓增殖性疾病及骨髓增生异常综合征患者.在AML患者中,GS常见于存在t(8;21)、inv(16)等细胞遗传学异常者[1].

    作者:张旭辉;张日;何雪峰;周峰 刊期: 2009年第02期

  • 硫酸镁对大鼠急性放射性脑损伤后脑NMDA受体及血清神经元特异性稀醇化酶的影响

    目的 探讨硫酸镁对电离辐射诱发的脑组织损伤的保护作用.方法 将成熟的SD大鼠36只随机分为空白对照组、实验对照组和硫酸镁实验用药组,用6 MeV电子线对实验组大鼠进行20 Gy全脑单次垂直照射,吸收剂量率为200 cGy/min,分别于照射后1、3、7和14 d解剖大鼠行腹主动脉取血,取其脑组织,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清神经元特异性稀醇化酶(NSE)含量,Westem blot方法检测大鼠脑组织N-甲基-D-天门冬氨酸受体NR1及NR2B蛋白表达量的变化.结果 与空白对照组相比,实验对照组大鼠血清NSE含量及脑组织NR1和NR2B蛋白表达量升高,各时间点血清NSE含量差异均有统计学意义(P<0.05);实验用药组与实验对照组相比,照射后1d血清NSE含量差异没有统计学意义(P>0.05).但随着照射后观察时间的延长,NSE含量出现显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),直到14d仍然未恢复至正常水平;实验用药组大鼠脑组织NR1和NR2B蛋白表达量在照射后的各时间点与实验对照组相比,均有所降低.结论 早期使用硫酸镁可降低照射后血清NSE的含量及脑组织NR1和NR2B蛋白表达量,硫酸镁对急性放射性脑损伤有保护作用.

    作者:袁文佳;崔凤梅;王利利;刘萍;何超;涂彧 刊期: 2009年第02期

  • 高血糖抑制大鼠载脂蛋白M的表达和分泌

    目的 了解高血糖对SD大鼠载脂蛋白M(apoM)表达和分泌的影响.方法 于大鼠尾静脉置管,采用微量注射泵以2.5 ml/h速度连续6 h泵入25%葡萄糖注射液的方法建立生理性高血糖大鼠模型.对照组采用同样方法泵入生理盐水.Dot-blotting法检测血清apoM浓度的变化,Beal-Time PCR法检测肝脏apoM mRNA的表达.采用Mann-Whitney检验进行统计分析.结果 高糖组大鼠肝脏apoM mRNA的表达较对照组降低54%(P<0.01),血清apoM的浓度较对照下降32.1%,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 高血糖可抑制大鼠载脂蛋白M的表达和分泌.

    作者:蒋波;张晓膺;罗光华;郑璐;Peter Nilsson-Ehle;徐宁 刊期: 2009年第02期

  • 高碳酸血症时的肺循环血流动力学的仿真分析

    目的 用计算机仿真方法评价高碳酸血症对肺循环血流动力性的影响.方法 利用包含多种心血管反射的血流动力学模型,在高碳酸血症条件下,运用动态仿真工具Simulink.采用ODE45可变步长算法实现仿真.结果 在高碳酸血症条件下,去除化学反射后,肺动脉压基本无变化,肺静脉压和肺毛细血管压都有一定程度的下降;而在去除压力反射后,肺动脉压显著升高.结论 压力反射对肺动脉压的缓冲作用有重要意义,这对动物实验设计有启示作用.

    作者:周希平;王国卿;邹容;孙茂民 刊期: 2009年第02期

  • 新生儿先天性梅毒并发脑积水、骨损害1例报告及文献复习

    近年来,一些性传播疾病的发病率有所增加.梅毒是由苍白螺旋体(也称梅毒螺旋体)感染人类而发病的,可以损害到全身多个器官.先天性梅毒亦称胎传梅毒(congenital syphilis,CS),是梅毒螺旋体由母体经过胎盘进入胎儿血液循环后造成的胎儿全身性感染.

    作者:李永富;冯星;汤文决;周珉 刊期: 2009年第02期

  • 解脲支原体感染对男女不育的影响

    目的 探讨解脲支原体(Uu)感染与男女不育不孕发生的相关性.方法 以457例女性不孕症患者及其配偶259名作为观察组,353名有正常生育史的育龄妇女及其配偶282名作为对照组;取生殖道分泌物采用PCR方法检测两组标本中Uu的感染情况.结果 观察组分泌物中Uu阳性率分别为50.5%和48.3%,对照组分别为15.6%和13.5%.两组比较,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 Uu感染与男性不育和女性不孕症发生有密切关系.

    作者:华月琴;徐文新;朱静英 刊期: 2009年第02期

  • 超声对聚丙烯酰胺水凝胶注射隆乳术后并发症的诊断价值

    目的 探讨超声对聚丙烯酰胺水凝胶注射隆乳术后并发症的诊断价值.方法 采用超声检查对行聚丙烯酰胺水凝胶注射隆乳术术后并发症的26例(39个乳房)患者进行回顾性分析,将其结果与手术结果相对照.结果 22例中29个乳房注射层次不正确,5个乳房注射层次正确;注射隆乳合并纤维腺瘤1例(1个乳房);乳腺炎和乳腺脓肿2例(3个乳房);急性血肿1例(1个乳房).结论 超声对聚丙烯酰胺水凝胶注射隆乳术后并发症有较高的诊断和应用价值.

    作者:闫磊;许良标;张本寿 刊期: 2009年第02期

  • 格林-巴利综合征30例肌电图表现分析

    格林-巴利综合征(Guinain-Barre syndrome,GBS)是可能与感染有关和免疫机制参与的急性(或亚急性)特发性多发性神经病,其诊断主要根据典型临床表现、脑脊液检查及肌电图检查.肌电图在早期较脑脊液检测具有更重要的诊断价值[1].本文对我院2003年8月至2007年12月收治的30例GBS患者的肌电图表现分析如下.

    作者:王丽;戴永萍;李向;赵合庆 刊期: 2009年第02期

  • 经自然腔道取出标本的腹腔镜直肠癌根治术16例效果观察

    目的 探讨经自然腔道取出标本腹腔镜直肠癌根治术的可行性与疗效.方法 回顾性分析16例经自然腔道取出标本腹腔镜直肠癌根治术患者的临床资料,对手术的可行性、安全性、根治性等进行评价.结果 16例手术均获成功,无中转术式,无严重术中术后并发症,无手术相关死亡.手术平均时间为156(90~210)min,平均失血量147(50~350)ml,术后平均留置导尿时间10(7~15)d,平均住院日14(10~21)d.所有患者3个月后排便控便功能均良好.平均清扫淋巴结13(8~21)枚,11例低位直肠癌平均远切缘1.7(1~4)cm,无切缘阳性病例.结论 经自然腔道取出标本腹腔镜直肠癌根治术安全可行,同时具有腹部创口小化、降低直肠低位横断的难度等优点.

    作者:金留根;曹华祥;费伯健 刊期: 2009年第02期

  • 腹腔镜下应用Fowler-Stephens法诊治小儿腹内型高位隐睾12例报告

    目的 探讨腹腔镜下Fowler-Stephens法诊治腹内型高位隐睾的价值.方法 对12例(13侧)腹内型高位隐睾患儿行腹腔镜下Fowle-Stephens法定位诊断和高位精索血管结扎,6个月后二期手术行睾丸下降固定术.结果 12例(13侧)隐睾均在腹腔镜下诊断为腹内型高位隐睾,均不能-期降人阴囊,行分期手术后随访0.5~1年,睾丸位置理想,无睾丸萎缩,超声血流检查血供良好.结论 腹腔镜下诊断定位和采用Fower-Stephens法分期治疗是小儿腹腔内型高位隐睾的有效诊治方法.

    作者:于忠勤;徐建国;樊剑峰;宣晓琪 刊期: 2009年第02期

  • 骨髓瘤细胞对骨髓间充质干细胞成骨分化潜能的影响

    目的 检测骨髓瘤细胞对骨髓间充质干细胞成骨潜能的影响,探讨骨髓瘤细胞在骨髓瘤骨病发病机制中的作用.方法 分离培养骨髓间充质干细胞,鉴定其生物学特性.采用midiMACs阳性免疫磁珠分选系统分离多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓CD138+细胞,与骨髓间充质干细胞行Transwell成骨共培养,两周后进行定时定量PCR检测间充质于细胞成骨指标骨特异性碱性磷酸酶(ALP)和Cbfal的mRNA表达量,Von Kossa染色鉴定其钙质沉积程度改变.结果 骨髓CD138+细胞可以抑制骨髓间充质干细胞ALP和Cbfal的mRNA表达量,间充质干细胞钙质沉积也相应减少.结论 骨髓瘤细胞可抑制骨髓间充质干细胞的成骨潜能,这种抑制作用可能参与了骨髓瘤骨病的发生.

    作者:李炳宗;庄文卓;傅晋翔 刊期: 2009年第02期

  • 小鼠胚胎干细胞无饲养层培养及其生物学特性

    目的 建立小鼠胚胎干(ES)细胞株S8在无饲养层的条件下短期内连续传代体系,获得大量纯的ES细胞.方法 ES-S8细胞无饲养层连续传代后,检测其未分化指标以及多分化潜能.结果 ES-S8细胞在无饲养层条件下培养5代,AKP染色、SSEA-1免疫荧光、OCT-4均显阳性,以及经拟胚体(EB)途径自发分化后,能形成多种类型的细胞.结论 ES-S8细胞能够在无饲养层条件下堵养,至少传5代仍能保持未分化特异性指标和多分化潜能.

    作者:韩甫;叶荣;鲍柳君;张军超;张焕相 刊期: 2009年第02期

  • 疏血通注射液对急性脑梗死患者的疗效及血液流变学指标的影响

    目的 评价疏血通注射液治疗急性脑梗死的疗效和对血液流变学指标、血凝系统、纤溶系统的影响及安全性.方法 观察组50例急性脑梗死患者在基础治疗的基础上加用疏血通注射液静滴;对照组46例只采用基础治疗.结果 观察组总有效率(92%)明显高于对照组(76.1%),差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后全血黏度、血浆黏度、红细胞压积、血小板聚集率等均有明显改善,凝血酶原时间(PT)、部分凝血酶原时间(APTT)均延长,纤维蛋白原(FBG)、血小板计数(PC)降低,以上指标的变化均有高度统计学意义(P<0.01).但两组PC比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 疏血通注射液可能通过作用于红细胞、血小板,抑制血小板聚集、降低血黏度、延长PT、APIT等途径改善微循环,增强脑梗死患者神经功能的恢复.

    作者:吴方萍;江乃丽;魏红玉;蔡增林 刊期: 2009年第02期

  • 左卡尼汀对大鼠阿霉素心肌病的干预作用

    目的 观察大鼠阿霉索心肌病的病理改变及左卡尼汀对阿霉素心肌病的干预作用.方法 30只雄性SD大鼠,随机分为阿霉索组、左卡尼汀组和对照组,于实验第2、6周末分别取3组大鼠血测定大鼠血浆中丙二醛(MDA)及全血还原性谷胱甘肽(GSH)含量.计算心脏指数(HW1)并观察心肌病理改变.结果 左卡尼汀组MDA含量显著低于阿霉素组,GSH含量显著高于阿霉素组,心脏质量指数显著低于阿霉素组.差异均有统计学意义(P<0.01);但与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 左卡尼汀能有效改善心肌能量代谢,减少心肌氧化性损害,减轻阿霉素心肌病的病变程度.

    作者:黄洁;严文华 刊期: 2009年第02期

苏州大学学报(医学版)杂志

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主办:苏州大学