刘文宾;王兆钺;曹丽娟;赵小娟;朱明清;白霞;阮长耿
目的 构建含有人PD-L1基因的真核表达载体,并通过稳定转染获得稳定表达PD-L1分子的HEK293细胞系.方法 从人心脏cDNA文库中扩增出PD-L1基因,通过双酶切(Xho1和EcoR1)装入真核表达载体pIRES2-EGFP中,脂质体法转染HEK293细胞,通过G418筛选,建立稳定高表达PD-L1分子的HEK293细胞系,通过流式细胞术、RT-PCR及Western blot分析PD-L1的表达.结果 构建了真核表达载体pIRES2-EGFP/PD-L1,建立了稳定转染PD-L1目的基因的HEK293细胞系.结论 成功构建了PD-L1真核表达载体并获得了稳定转染该分子的HEK293细胞系.
作者:朱云霞;胡振华;陈永井;李文香;陈成;黄建安;张学光 刊期: 2009年第03期
目的 探讨喉外伤的诊治方法.方法 分析35例喉外伤患者的临床资料,其中闭合性喉外伤23例,开放性喉外伤12例.结果 23例闭合性喉外伤中,8例行气管切开及手术探查,术后均能拔除气管套管,声嘶1例;12例开放性喉外伤中,除1例外,余均行气管切开术后顺利拔管,其中1例行二期手术修复,声嘶2例.结论 对喉外伤应根据其病情轻重程度进行早期处理,尽快恢复喉和气管通气功能,预防后遗症的发生,提高治愈率.
作者:朱政文 刊期: 2009年第03期
目的 研究细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK cells)的体外扩增特性及其在抗肿瘤免疫治疗中的作用.方法通过提取健康供血者的PBMNC,培养诱导CIK细胞,显微镜下观察其扩增倍数、增殖速率,流式细胞仪分析细胞免疫表型,用MTT法观察其对K562细胞的体外杀伤效应,并通过流式细胞仪进一步分析30例实体瘤患者CIK细胞输注前后外周血免疫活性细胞表型的改变.结果 经2周培养,CIK细胞平均增加了30倍,总数达(4.8~5.0)×109,活性细胞比例>90%;体外杀伤率约50%,表型检测效应细胞CD3+,CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD56+亚群比例显著升高,差异有高度统计学意义(P<0.01).实体瘤患者CIK细胞输注后外周血中免疫活性细胞比例也明显升高,差异也有统计学意义(P<0.05).结论 CIK细胞在体内外能明显抑制肿瘤生长,有效改善患者的免疫功能,为晚期肿瘤治疗提供了新的方法.
作者:沈丽琴;戴宏;庄志祥 刊期: 2009年第03期
目的 建立一种新的适用于治疗重症急性胰腺炎(SAP)的猪模型,为SAP肠内给药提供实验和理论依据.方法 8只太湖梅山猪随机分成SAP组和对照组,每组4只.两组均在开腹直视下置入鼻空肠管.SAP组通过胰管内注射5%牛黄胆酸钠建立SAP模型,对照组仅行胰管插管不注射任何药物.比较两组动物一般情况、血清淀粉酶、CT评分及胰腺病理形态学改变,验证鼻空肠管置入及SAP模型诱导是否成功.结果 同对照组比较,SAP组血清淀粉酶的总体均数明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);CT、病理评分均进一步证明了鼻空肠管置入及SAP模型诱导成功.结论 在猪的SAP模型上成功置入鼻空肠营养管,为研究肠内给药在胰腺炎中的应用建立了一种简单、无创、可重复性的动物模型.
作者:林敏;陈卫昌;刘强;祝建红 刊期: 2009年第03期
目的 探讨成人单纯性输尿管囊肿的诊断及治疗方法.方法 回顾性分析27例成人单纯性输尿管囊肿患者的临床资料.所有患者均经B超检查,部分患者还行静脉尿路造影(IVU)和(或)膀胱镜检查.治疗分别予经尿道输尿管囊肿电切开窗术或开放手术或观察随访.结果 B超检查诊断符合率为77.78%(21/27),检查时可发现输尿管末端有圆形或类圆形的囊性肿物,典型病例并可见囊肿有膨大和缩小的节律性改变;IVU检查诊断符合率为71.43%(5/7),主要可见膀胱内有边界清晰的圆形或椭圆形充盈缺损;膀胱镜检查诊断符合率为100%(23/23),均可见输尿管口呈球形或椭球形囊肿样改变,伴有节律性的膨大和缩小.除2例观察随访外,25例均行手术,其中3例行开放手术,其余22例行经尿道电切开窗术,术后随访3~26个月,症状完全消失或明显减轻,肾脏积水减轻或消失,未见囊肿复发及膀胱输尿管应反流.结论 输尿管囊肿对于成人单纯性输尿管囊肿而言,B超是必不可少的检查方法,膀胱镜是确诊的可靠方法,经尿道电切开窗术可作为首选的手术方式.
作者:黄玉华;严春寅;温端改;侯建全;浦金贤;欧阳骏;李纲;丁翔 刊期: 2009年第03期
目的 探讨脑益康对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马神经元tau蛋白过度磷酸化及其相关酶类表达的影响.方法 采用β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)右侧海马注射制备AD大鼠模型,免疫组化法和Western blot法检测大鼠海马神经元tau蛋白在Serd04位点的磷酸化水平、蛋白磷酸酯酶2A(PP-2A)的表达情况,ELISA法检测糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)蛋白的水平.结果 AD模型组大鼠海马组织p-tau(Ser404)、GSK-3β表达增加,PP-2A表达减少,与假手术组的差异有高度统计学意义(P<0.01);脑益康治疗组大鼠的p-tau(Ser404)、GSK-3β表达显著减少,PP-2A表达显著增加,差异均有高度统计学意义(均P<0.01).结论 脑益康可通过增加PP-2A的表达和抑制GSK-3β的表达减轻AD模型大鼠tau蛋白的过度磷酸化.
作者:周静;周爱玲;路燕 刊期: 2009年第03期
目的 探讨肌萎缩性脊髓侧索硬化症(ALS)发病过程中超氧化物歧化酶1(SOD1)氨基酸突变对其聚集的影响.方法 收集全部已知SOD1氨基酸错义突变106个,运用AGGRESCAN、PASTA、TANGO 3种生物信息学方法和工具,预测错义突变对蛋白质聚集倾向的作用.结果 3种生物信息学工具预测结果基本一致,共有39个对蛋白质聚集有促进作用的突变,占所有突变的37%.结论 氨基酸突变导致蛋白质聚集并非是导致ALS发病的唯一途径,ALS发病机制是一个多因素的复杂过程.
作者:刘佳骏;孙茂民;刘枫;王晓春 刊期: 2009年第03期
医用射线防护喷剂用于皮肤黏膜放射损伤的防治,目前已取得了明显的疗效<'[1]>.那么医用射线防护喷剂是否可应用到其他类型的烧伤呢?为此我科于2006年12月至2007年11月应用苏州东泉生物科技有限公司提供的医用射线防护喷剂治疗30例浅Ⅱ°烧伤患者,并与同期采用常规方法处理的30例浅Ⅱ°烧伤患者作对照,结果报道如下.
作者:吴敏 刊期: 2009年第03期
目的 动态研究急性冠状动脉综合征(ACS)患者住院期间静脉血中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)浓度改变及其临床意义.方法 49例冠心病患者经临床和造影证实其中有急性心肌梗死(AMT)14例、不稳定型心绞痛(UAP)19例、稳定型心绞痛(SAP)16例,在急性发作期的1、2、3、7、10天5个时间点抽取静脉血测定中性粒细胞MPO水平,选取无心绞痛发作史的健康体检老年人16人为对照组.结果 ACS(包括AMI和UAP)发作的10 d内,其MPO水平始终明显高于SAP患者和对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);第1~3天,AMI组MPO水平均高于UAP组,差异均有统计学意义(均P<0.05),第7~10天,UAP患者的MPO水平已接近AMI组,差异无统计学意义(P>0.05);SAP患者入院第1天的MPO值明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),但随即恢复正常.结论 动态观察MPO值的变化可预测冠心病患者冠状动脉中斑块的稳定情况,从而预测ACS事件的发生及预后.
作者:关艳丽;张立群;干朝晖;俞根龙;陈胜备 刊期: 2009年第03期
目的 探讨肠内营养在重症急性胰腺炎(SAP)治疗中的应用价值.方法 分析30例SAP患者的临床资料,按营养支持不同分为肠内营养(EN)16例和全胃肠外营养(TPN)14例.观察两组治疗结果及临床指标的变化.结果营养支持2周后,两组患者的APACHEⅡ评分、CTSI较前显著降低,且EN组的各项评分均显著低于TPN组,差异均有高度统计学意义(均P<0.01).营养支持后两组的血糖、血清白蛋白、血钙和血肌酐均较前有显著改善,差异有高度统计学意义(P<0.01),但两组之间各项指标的差异无统计学意义(P>0.05).同时,EN组平均住院天数明显缩短,中转手术率、感染率、病死率方面EN组均明显低于TPN组,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 EN治疗SAP疗效优于TPN,应用于临床是安全可行的.
作者:华晨;刘励军 刊期: 2009年第03期
目的 探讨硅酸二钙离子溶出液促进成骨细胞分化的能力及其可能的机制.方法 人成骨细胞株MG63细胞分别培养于硅酸二钙离子溶出液条件培养基(实验组)及正常培养基(对照组)中,于培养3、6、9、12 d后检测细胞分化标志物和骨形态蛋白2(BMP2)及其信号传递蛋白Smad1基因的表达,同时以ELISA法检测分泌至培养基中的BMP2浓度.以茜素红S染色定量检测钙矿沉积情况.结果 硅酸二钙离子溶出液条件培养基中硅离子浓度显著高于正常培养基,差异有高度统计学意义(P<0.01).此条件培养基能促进MG63细胞晚期分化,并能促进其钙矿沉积,也能促进BMP2的分泌及其基因表达,以及Smadl基因的表达.结论 硅酸二钙离子溶出液有促进MG63细胞分化的能力,这可能与高浓度硅有关,刺激MG63细胞表达BMP2及其信号传递蛋白可能是其作用机制之一.
作者:魏立;李建有;孙俊英 刊期: 2009年第03期
目的 研究神经元在丝素蛋白材料上的生长发育,为神经干细胞结合丝素蛋白材料用于临床移植修复神经系统损伤提供实验依据.方法 从新生大鼠脑室下区(SVZ)分离细胞,培养在柞蚕、家蚕两种丝素蛋白溶液制成的薄膜材料上,分别选取各时间段的细胞进行β-Ⅲ-tubulin特异性免疫荧光染色,并统计不同时间段神经元在丝素材料上的成活率及复杂度.结果 神经元在柞蚕丝素薄膜上的成活率和复杂度明显比家蚕丝素薄膜高,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 柞蚕、家蚕丝素薄膜支持神经元的生长,具有良好的生物相容性;柞蚕丝素薄膜比家蚕丝素薄膜更适合神经元的生长.
作者:辛莲;宋雪慧;董运海;李明忠;张焕相 刊期: 2009年第03期
目的 探讨左胸径路行食管癌切除、弓上食管床机械吻合术的临床效果.方法 对1 500例中、下段食管癌患者采用标准左胸后外侧切口,胃代食管,食管床弓上机械吻合,吻合位置可达胸顶甚至超胸顶水平.术中常规清扫胸内淋巴结和腹腔淋巴结.结果 全组患者手术过程顺利,无吻合失败,均一次击发成功.术后并发症有吻合口瘘、乳糜胸、吻合口狭窄及心肺并发症等,死亡5例.术后病理无1例切缘阳性.结论左胸食管癌切除弓上食管床机械吻合,符合人体的生理解剖,可避免和减少术后并发症,更符合肿瘤的治疗原则,有更好的生活质量.
作者:李晓林;王嘉玮;游庆军;蒋锡初 刊期: 2009年第03期
目的 探讨剖宫产率居高不下的原因,找出解决的方法.方法 对该院1997年3月至2006年12月10年间剖宫产病例2 490例进行回顾性分析.结果 平均剖宫产率为34.44%,位于剖宫产指征前4位的分别为头盆不称、胎儿窘迫、社会因素、臀位.结论 提高产科医师水平,防止胎儿窘迫的过度诊断,做好孕产妇宣教,及时发现并处理异常胎位,从而降低剖宫产率.
作者:陈昕;钱志红 刊期: 2009年第03期
目的 探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对严重免疫缺陷(SCID)小鼠急性脑梗死的治疗作用.方法 SCID小鼠大脑中动脉闭塞后,立即皮下注射G-CSF,连续3 d,对照组注射同样剂量磷酸缓冲液(PBS),3 d后观察脑梗死体积变化、梗死边缘血管再生情况、细胞凋亡和炎症反应情况.结果 G-CSF对SCID小鼠急性脑梗死后梗死体积无影响,能促进脑梗死边缘血管再生和抑制细胞凋亡,但梗死边缘CD11b和F4/80阳性细胞数均较对照组明显增加,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 SCID小鼠急性脑梗死后,立即注射G-CSF对脑组织有保护作用,但同时也加重急性梗死后的炎症反应.
作者:温仲民;包仕尧 刊期: 2009年第03期
目的 通过将骨髓间充质干细胞(BMSCs)培养在静电纺丝素/聚乳酸纳米纤维上,研究BMSCs的生长及成神经分化情况.方法 用家蚕丝素、柞蚕丝素分别与聚乳酸共混制成静电纺丝素/聚乳酸纳米纤维,将第5代大鼠BMSCs培养其上,于24 h后通过活细胞工作站观察细胞的黏附情况,并进行表型鉴定及存活检测.接种后待细胞长至60%左右,用bFGF/BHA诱导细胞成神经分化,并设多聚赖氨酸组进行对照.在诱导5 h和维持48 h时,观察细胞的形态学改变,通过免疫荧光法鉴定神经细胞特异性标志物Nestin,β-Ⅲ-Tubulin和NCAM的表达并进行定量统计分析.结果 BMSCs在静电纺丝素/聚乳酸纳米纤维上的黏附情况良好,细胞生长于纳米纤维上.存活检测中几乎未发现死细胞,多数细胞在材料上可存活.神经分化的形态学改变与多聚赖氨酸组一致,并且培养在纳米纤维上的细胞分化时出现的突起可缠绕在纺丝纤维上.神经特异标志的表达情况与多聚赖氨酸对照组的差异无统计学意义(P>0.05).结论 静电纺丝素,聚乳酸纳米纤维具有良好的生物相容性,可支持BMSCs的黏附及成神经分化,且对细胞生存无毒性.
作者:宋琳;朱爱思;徐路尧;张锋;左宝齐;王敏;包普花;张焕相 刊期: 2009年第03期
目的 探讨多基因表达及相互作用与口腔癌前病变癌变的关系.方法 采用免疫组织化学ABC法对76例上皮异常增生和84例正常口腔黏膜p53、Ki-67、p16和cyclin D1的表达进行研究,并对上皮异常增生患者实际癌变率做了3年追踪调查.结果 口腔黏膜癌前病变组织p53和Ki-67表达明显高于正常口腔黏膜,差异有统计学意义(P<0.05);p53和Ki-67同时过度表达与实际口腔癌前病变癌变率密切相关;口腔黏膜癌前病变组织中存在p16和cyclinD1表达失衡现象.结论 p53和Ki-67同时过度表达及p16和cyclinD1表达失衡是口腔黏膜癌前病变癌变的重要标志.
作者:马三成;赵今;Paul Speight 刊期: 2009年第03期
目的 分析哮喘和慢性阻塞性肺病(COPD)患者主要临床特征与肾上腺皮质功能之间的关系.方法 37例哮喘患者分为有夜间症状组(NA组)和无夜间症状组(NNA组),根据控制情况分为部分控制组和未控制组.33例COPD患者根据病情严重程度分轻~中度组与重~极重度组,对所有患者进行肺功能测定并分别测定上午8时与下午4时血浆皮质醇水平.结果 上午8时皮质醇水平哮喘组较COPD组显著下降,NA组较NNA组显著下降,差异均有高度统计学意义(分别P<0.001和<0.01);未控制组与部分控制组、重~极重度组COPD患者与轻~中度组相比,差异均无统计学意义(均P>0.05).下午4时皮质醇水平除NA组较NNA组明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)外,其余哮喘组与COPD、未控制组与部分控制组、重~极重度组与轻~中度组的差异均无统计学意义(均P>0.05).COPD患者上午8时平均皮质醇水平显著高于下午4时,差异有高度统计学意义(P<0.01),哮喘组患者上午8时与下午4时的平均皮质醇水平接近甚至倒置.结论 哮喘患者较COPD患者可能存在更明显的肾上腺皮质功能障碍和昼夜节律的紊乱,哮喘夜间症状的发生可能与此有关.
作者:钱亚娟;施敏骅 刊期: 2009年第03期
目的 探讨内镜黏膜下剥离术(ESD)治疗胃间质瘤的疗效和安全性.方法 对胃间质瘤应用头端弯曲的针形切开刀进行ESD治疗:(1)黏膜下注射生理盐水;(2)预切开病变周围黏膜;(3)剥离黏膜下层组织显露病变,一次性完整切除病变.结果 24例胃间质瘤,20例病变一次性完整剥离,4例未能剥离后接受外科手术.ESD手术时间25~140 min(平均62.5 min).1例术中出现消化道穿孔,应用金属夹成功闭合.术中平均出血量约50 ml,术后均未出现出血.亦未出现其他并发症.结论 ESD治疗胃间质瘤安全、有效,大多可以一次性完整切除病变,提供完整的病理学诊断资料,达到外科手术同样的疗效.
作者:徐进康;徐宏伟 刊期: 2009年第03期
目的 探讨经肛门内镜显微手术(TEM)治疗直肠良、恶性肿瘤的手术方法和近期疗效.方法 分析应用TEM治疗直肠良、恶性肿瘤12例(恶性3例,良性9例)的结果,从术中出血、术后疼痛、伤口感染等并发症,以及住院时间等评价其近期疗效.并从肿瘤切除到切缘缝合方法进行了相应的改进.结果 3例直肠恶性肿瘤中2例侵及肌层,1例侵及全层,但标本切缘均为阴性.良性9例中,有3例伴有中、低级别上皮内瘤变.采用强生超声刀切除肿瘤、强生自动打结线盒缝合后,12例患者术中出血均<5 ml,除1例直肠中分化腺癌术后有少量出血外,余均未见术后便血,也无术后疼痛、大便失禁、伤口感染等并发症.住院时间平均4.6 d.结论 TEM是治疗直肠良、恶性肿瘤的安全术式,超声刀切除病灶、强生自动打结线盒缝合是有效的TEM手术技术.
作者:邢春根;吕孝东;杨晓东;陈强;吴永友;陈正荣;王浩炜 刊期: 2009年第03期