学术投稿

Caspase抑制剂对缺氧诱导的心肌细胞凋亡及相关基因表达的影响

赵军;郑世营;顾振纶;杨吉成;盛伟华

关键词:z-DEVD-fmk, 缺氧, 心肌细胞, 凋亡, Caspase-3
摘要:目的 探讨Caspase-3特异性抑制剂在缺氧诱导的培养乳鼠心肌细胞凋亡中的作用及其相关基因的表达.方法 将SD乳鼠的培养心肌细胞随机分为对照组、缺氧72 h组及Caspase-3抑制剂组(缺氧72 h前加入0.1 μmol/L的Z-DEVD-fmk)3组.应用Western blot分析法和RT-PCR技术检测Caspase-3、PARP蛋白及Caspase-3 mRNA的表达,同时利用流式细胞仪分析心肌细胞凋亡的变化;借助Caspase-3荧光分析试剂盒,荧光比色法检测心肌细胞凋亡过程中Caspase-3活性的变化.结果 Caspase-3抑制剂组细胞凋亡百分率为(14.93±2.47)%,显著低于缺氧72 h组的(48.43±4.18)%,差异有高度统计学意义(P<0.01).Caspase-3抑制剂组PARP及Caspase-3蛋白表达显著低于缺氧72 h组,差异有高度统计学意义(P<0.01).RT-PCR分析显示,Caspase-3抑制剂组Caspase-3 mRNA的表达量较缺氧72 h组降低了62.05%,差异有高度统计学意义,Caspase-3活性检测显示,Caspase-3抑制剂组的Caspase-3活性较缺氧72 h组降低了52.85%,差异有高度统计学意义(均P<0.01).结论 Caspase-3抑制剂能明显抑制缺氧诱导的心肌细胞凋亡、Caspase-3蛋白和mRNA的表达、Caspase-3蛋白酶活性和PARP的裂解.
苏州大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 降脂达标治疗对颈动脉粥样斑块的影响

    目的 研究降脂达标治疗对颈动脉斑块的影响.方法 选择存在颈动脉斑块的患者120例,按中国血脂防治指南中的标准进行调脂治疗,血脂达标后继续给予阿托伐他汀钙10~20 mg/d治疗6个月,测定达标前后患者的血脂,肝、肾功能及行颈动脉多普勒检查.结果 患者血脂达标后继续服用阿托伐他汀钙6个月后,颈动脉内径有所扩大(P<0.01),颈动脉斑块缩小(P<0.01),同时患者TC、LDL-C、TG降低(P<0.01),HDL-C升高(P<0.05).结论 患者颈动脉粥样斑块经血脂达标治疗后可以缩小并稳定.

    作者:蔡薇;张子滇;邓学东;陆永怡;陈群;刘静 刊期: 2007年第04期

  • 罗格列酮对高糖诱导的人血管内皮细胞纤溶系统的影响

    目的 通过观察罗格列酮对高糖诱导的内皮细胞表达一氧化氮(NO)、组织纤溶酶原激活物(t-PA)和纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的影响,探讨罗格列酮防止糖尿病患者冠脉支架术后再狭窄的机制.方法 用不同浓度葡萄糖刺激体外培养的人肺静脉血管内皮细胞24 h,检测培养上清中NO、t-PA和PAI-1的含量;用10 mmol/L浓度的葡萄糖和不同浓度的罗格列酮或二甲双胍干预共同体外培养的人肺静脉血管内皮细胞24 h后,检测NO、t-PA和PAI-1的含量.培养上清中NO采用硝酸还原酶法测定;t-PA和PAI-1采用酶联免疫法(ELISA)测定.结果 随着葡萄糖浓度的升高,NO和t-PA的浓度呈下降的趋势,PAI-1的浓度呈升高趋势;罗格列酮干预后NO和t-PA的浓度呈升高趋势,PAI-1的浓度呈降低趋势;二甲双胍对这些指标无影响.结论 高糖能刺激血管内皮细胞分泌NO、PAI-1,抑制t-PA的形成,从而引起凝血和纤溶的异常,这种高凝状态会促进血栓形成和再狭窄的发生;罗格列酮能抑制高糖引起的NO的降低,抑制高糖引起的内皮细胞的纤溶系统的平衡,促进纤溶系统的激活,防止血栓的形成,这可能是罗格列酮能减少糖尿病患者冠脉支架术后再狭窄的机制之一.

    作者:周亚峰;杨向军;李红霞;鲁燕;蒋文平 刊期: 2007年第04期

  • 鼻内镜下腺样体切除术185例疗效分析

    目的 探讨鼻内镜下经鼻腺样体切除术的疗效和优缺点.方法 在鼻内镜下对儿童及成人腺样体肥大185例,采用切削吸引、刮除、咬除等方法进行治疗,并随访观察疗效.结果 腺样体切除彻底,术后无出血,无残体存留,鼻咽部结构良好,咽鼓管无损伤.随访1~2年,患者睡眠障碍、鼻阻塞、流脓涕及耳闷塞等症状消失.结论 鼻内镜下腺样体肥大切除能在直视下操作,结合多种手术方法更能彻底切除腺样体,手术疗效显著,并发症少.

    作者:刘济生;肖根生;唐云青;吴文璎;秦照军 刊期: 2007年第04期

  • 腹腔镜下卵巢良性畸胎瘤剥除术后放置腹腔引流管的意义

    目的 探讨在腹腔镜下卵巢良性畸胎瘤剥除术后放置腹腔引流管的临床意义.方法 回顾分析385例腹腔镜下卵巢良性畸胎剥除术病例,并对照分析225例放置腹腔引流管与160例未置腹腔引流管患者的康复过程.结果 两组术后发热(≥38℃)、腹痛发生率和肠功能恢复时间比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 腹腔镜下卵巢良性畸胎瘤剥除术后放置腹腔引流管有助于患者的康复.

    作者:张红梅;商九香;陈英 刊期: 2007年第04期

  • 苏州地区冬春季儿童急性肺炎的病毒病原学研究

    目的 探讨苏州地区小儿肺炎的病毒病原学.方法 对662例患儿痰标本采用直接免疫荧光法检测7种呼吸道病毒.结果 662例患儿痰标本中, 阳性297例,总阳性率为44.9%,其中单纯病毒感染289例,呼吸道合胞病毒(RSV)255例(85.9%)占首位,其次为甲型流感病毒25例(8.4%),乙型流感病毒4例(1.3%),副流感1.3型病毒4例(1.3%),腺病毒1例(0.4%),2种或以上病毒感染8例.结论 病毒是苏州地区冬春季小儿急性肺炎的主要病原,其中RSV是首要病毒病原,其次是流感病毒.

    作者:王宇清;季伟;陈正荣;张爱丽 刊期: 2007年第04期

  • 缺血预处理对大鼠原位肝脏移植中移植肝的保护作用

    目的 探讨缺血预处理(IP)对大鼠原位肝脏移植中移植肝再灌注损伤的保护作用及其机制.方法 采用大鼠原位肝移植动物模型,80只Wistar大鼠随机配成40对,平均分成两组,每组20对.对照组:获取供肝前仅以肝素生理盐水经腹主动脉灌注;IP组:灌注前阻断肝门血供10 min,再开放10 min.每组受体中,10只观测1周生存率,另10只检测再灌注2 h后的各项相关指标.结果 IP组受体肝功能、生存率明显好于对照组;IP组肝脏组织标本中TNF-α的含量明显低于对照组;虽然各组肝脏组织都出现了凋亡细胞,但IP组凋亡细胞数明显少于对照组.结论 IP对移植肝具有保护作用,这种保护作用与TNF-α表达减少、肝窦状内皮细胞凋亡减轻密切相关.

    作者:秦磊;高广勇;余斌;钱海鑫 刊期: 2007年第04期

  • TRAIL受体在卵巢上皮癌中的表达

    目的 研究人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体在卵巢上皮癌中的表达.方法 采用免疫组化方法,检测TRAIL 4个受体DR4、DR5、DcR1、DcR2在6例正常卵巢组织、12例良性卵巢上皮性肿瘤及32例卵巢上皮癌中的表达.结果 DR4、DR5、DcR1、DcR2表达阳性染色主要定位于肿瘤细胞胞浆或胞膜中;在正常卵巢组织中和卵巢良性肿瘤组织中4个受体均呈高表达,相互间差异无统计学意义;而在卵巢上皮癌组织中假受体DcR1、DcR2的表达率(44%、22%)显著低于在卵巢良性肿瘤组织(83% ,100%)和正常卵巢组织(100%、83%)的表达率,差异有高度统计学意义(P<0.01);卵巢上皮癌中DR4、DR5、DcR1、DcR2的表达与临床期别、分化程度、组织类型无关(P>0.05).结论 在正常卵巢、良性卵巢上皮肿瘤及卵巢上皮癌中TRAIL 4个受体 DR4、DR5、DcR1、DcR2均有表达,但在卵巢上皮性癌中假受体DcR1、DcR2的表达率明显减少,可能与卵巢癌的发生有关.

    作者:张跃明;杨伟文 刊期: 2007年第04期

  • 子宫内膜异位症与氧自由基的相关性分析

    目的 研究氧自由基与轻度子宫内膜异位症的相关关系.方法 检测子宫内膜异位症患者腹腔液和血清中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化脂质(LPO)、VitE水平及总抗氧化能力.结果 子宫内膜异位症患者腹腔液中SOD/LPO、VitE/LPO、总抗氧化能力/LPO均明显低于正常对照组,差异有统计学意义(均P<0.05);而两组间血清中抗氧化能力相比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 该研究为临床选择腹腔内应用抗氧化剂治疗子宫内膜异位症及其导致的不孕提供了理论依据.

    作者:陆秀芳 刊期: 2007年第04期

  • L-精氨酸预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用

    目的 探讨左旋精氨酸(L-Arg) 对肝缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用及机制.方法 健康雄性SD大鼠18只,随机分为3组(每组6只).正常对照组术中只分离肝周围韧带,不做肝门阻断及再灌注;I/R组、L-Arg组分别于缺血前20 min经阴茎背静脉注射生理盐水1 ml和L-Arg 300 mg/kg,然后进行45 min的部分肝门阻断及60 min的再灌注.取下腔静脉血2 ml,并迅速切取缺血肝组织.检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶 (AST)、乳酸脱氢酶(LDH);测定肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、一氧化氮(NO)和一氧化氮合成酶(NOS)等指标;观察光镜和电镜下肝组织学变化.结果 与正常对照组相比,I/R组ALT、AST、LDH、MDA、XOD、iNOS升高,差异有统计学意义(P<0.05);SOD、NO降低,差异有统计学意义(P<0.05).与I/R组比较,L-Arg组ALT、AST、LDH、MDA、XOD、降低,差异有统计学意义(P<0.05);SOD、NO、eNOS升高,差异有统计学意义(P<0.05).I/R组及L-Arg组肝组织病理损害较正常对照组重,L-Arg组病理损害较I/R组明显减轻.结论 L-Arg预处理对大鼠肝I/R损伤具有保护作用;NO和不同亚型NOS的变化参与其中.

    作者:侍阳;钱海鑫;秦磊;周晓俊 刊期: 2007年第04期

  • 惊厥患儿血清神经元特异性烯醇化酶的变化及其临床意义

    目的 探讨惊厥患儿血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平变化及其临床意义.方法 选择惊厥患儿62例,正常对照组20例,采用酶联免疫法测定血清NSE水平.结果 惊厥组(病毒性脑炎、癫痫、热性惊厥)惊厥发作后24 h内血清NSE水平均显著高于正常对照组,差异有高度统计学意义(P<0.01),但病毒性脑炎、癫痫、热性惊厥3组不同病因之间比较,差异无统计学意义(P>0.05).惊厥普通组与严重组患儿惊厥发作后24 h内血清NSE水平均显著高于正常对照组,差异有高度统计学意义(P<0.01).惊厥严重组患儿NSE水平显著高于普通组,差异有高度统计学意义(P<0.01).惊厥发作次数越多,持续时间越长,惊厥程度越重, NSE水平越高.结论 小儿惊厥性疾病惊厥发作后可引起血液NSE水平的显著升高,其水平高低与脑损伤严重程度密切相关,可作为早期判断惊厥性脑损伤的客观指标之一.

    作者:朱余德;袁伯稳;周辉;季风华 刊期: 2007年第04期

  • 兔骨性关节炎早期软骨细胞凋亡与软骨下骨生物力学改变的相关性

    目的 探讨骨性关节炎(OA)早期关节软骨细胞凋亡与软骨下骨生物力学改变及其相关性.方法 取24只新西兰大白兔,采用Hulth关节不稳造模,左膝为模型组,右膝为对照组,10 d、3个月时各取12只放血处死.各时相点模型组、对照组各取4个膝关节的胫骨近段,去除软组织,进行Mankin软骨损伤评分,采用Tunel法检测关节软骨细胞凋亡情况.去除软骨后用万能力学试验机测定软骨下骨的载荷-位移曲线、应力-应变曲线及弹性模量.结果 在造模10 d、3个月后软骨细胞的凋亡逐渐增加,与对照组的差异有高度统计学意义(P<0.01);10 d模型组和3个月模型组的软骨下骨的弹性模量与对照组比较,分别相差18%和19%(P<0.05);关节软骨细胞凋亡数增加与软骨下骨的弹性模量下降变化呈负相关(r=-0.7579,P<0.01).结论 OA早期即出现软骨细胞凋亡,同时软骨下骨生物力学发生改变.

    作者:王亚斌;陈向阳;董启榕 刊期: 2007年第04期

  • 阿司匹林联合氯吡格雷治疗不稳定型心绞痛疗效观察

    目的 探讨阿司匹林联合氯吡格雷抗血小板治疗在不稳定型心绞痛(UA)各危险分层中的临床疗效、安全性及心血管事件发生率.方法 选择诊断明确的UA患者105例,随机分为治疗组(53例)和对照组(52例),各组又根据危险分层标准分为低、中、高危险组.对照组采用阿司匹林、低分子肝素及抗心绞痛药物治疗;治疗组在以上治疗的基础上加用氯吡格雷,观察用药4周内两组各危险分层组的临床疗效、心血管事件发生率,并监测出、凝血指标,评价其安全性.结果 与对照组比较,治疗组能有效控制心绞痛,明显改善症状(P<0.05),明显降低心血管事件的发生率(P<0.05),并对出、凝血指标无明显影响(P>0.05),但高危险组中血运重建的发生率,治疗组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 阿司匹林联合氯吡格雷抗血小板治疗在UA各危险分层组中的疗效肯定且安全,并可降低心血管事件的发生率.

    作者:李增男;张艳晖;李德玲 刊期: 2007年第04期

  • 成年大鼠嗅球嗅鞘细胞的分离、培养、纯化与生物学特性的研究

    目的 探讨成年大鼠嗅球嗅鞘细胞(OECs)的分离、培养和纯化方法,并观察其形态学变化及免疫细胞化学特性.方法 采用原代培养技术,从成年大鼠的嗅球分离培养OECs,用差速贴壁+Thy1.1抗体及补体等方法纯化培养OECs,并用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)扩增OECs,倒置相差显微镜下观察OECs的形态变化特点及生长情况,采用GFAP、NGFRp75、S100等抗体行免疫细胞化学染色,根据NGFRp75免疫细胞化学染色结果统计培养的OECs的纯度,并计算OECs的增殖率.结果 体外培养的成年大鼠OECs主要为双极或三极细胞,其突起细长.差速贴壁+Thy1.1抗体及补体纯化法的纯化效率高于其他两种.免疫细胞化学染色显示,培养的成年大鼠OECs呈现GFAP、NGFRp75、S100蛋白染色阳性.bFGF能明显促进OECs的增殖(P<0.01),对OECs的形态、纯度没有明显影响.结论 差速贴壁+Thy1.1抗体及补体纯化法是一种高效率的纯化培养OECs的方法,bFGF能明显促进OECs的增殖.

    作者:范志海;沈忆新;陆政峰;成茂华;董启榕 刊期: 2007年第04期

  • 乳腺癌耐药蛋白在急性髓性白血病中的表达和临床意义

    目的 探讨急性髓性白血病(AML)患者乳腺癌耐药蛋白(BCRP)的表达与临床耐药的关系.方法 应用半定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR),以MCF7乳腺癌细胞株、HL60白血病细胞株分别作为BCRP及MDR1 mRNA 表达的参照标准,以β肌动蛋白(β-actin)为内对照,检测了54例AML患者BCRP mRNA的表达,其中8例患者测定MDR1 mRNA的表达,初步探讨BCRP表达在AML中的临床意义.结果 AML中BCRP mRNA表达水平差异较大, BCRP表达由低到高依次为对照组、完全缓解组、初治敏感组和临床耐药组.其中临床耐药组BCRP阳性率显著高于对照组及完全缓解组,差异有统计学意义(P<0.01及P<0.05),BCRP表达与MDR1 表达无相关性(P>0.05).结论 BCRP在AML中表达水平差异较大,与MDR1的表达无关,可能是AML患者临床耐药的一个独立的重要原因,是预后的不利因素.

    作者:刘晓健;李晟;江波;吴德沛 刊期: 2007年第04期

  • 原位心脏移植围手术期的处理(附6例报告)

    目的 研究原位心脏移植围手术期的处理.方法 对6例扩张性心肌病患者行原位心脏移植.结果 2例死亡,4例存活.结论 通过对心脏移植患者围手术期的处理,表明控制肺动脉高压、维持循环系统的稳定、纠治急性肾功能不全、有效的免疫抑制治疗和预防感染是围手术期的重点工作.

    作者:余云生;沈振亚;于曙东;朱江;叶文学;焦鹏;黄浩岳;朱雅萍;卜丽芬;胡雁秋 刊期: 2007年第04期

  • 葛根素对高胰岛素环境下大鼠肝细胞胰岛素降解酶基因表达的影响

    目的 通过观察葛根素对高胰岛素环境下正常大鼠肝细胞株BRL胰岛素降解酶基因表达的影响,初步探讨葛根素提高肝细胞胰岛素敏感性的作用机制.方法 体外培养BRL大鼠肝细胞,用高胰岛素诱导其形成胰岛素抵抗细胞模型,采用半定量的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测该细胞模型的胰岛素降解酶基因表达水平.结果 葛根素大、中剂量治疗组细胞胰岛素降解酶基因的表达较胰岛素抵抗模型组细胞显著减少,差异有高度统计学意义(P<0.01).结论 葛根素可通过抑制大鼠肝细胞胰岛素降解酶的基因表达,来提高肝细胞对胰岛素的敏感性,从而改善机体的胰岛素抵抗,缓解代谢综合征.

    作者:曹莉;茅彩萍;顾振纶 刊期: 2007年第04期

  • 中国汉族人VKORC1 G3673A基因多态性研究

    目的 检测汉族人VKORC1 G3673A 基因的分布情况.方法 应用PCR技术对正常人外周血VKORC1 G3673A基因进行扩增,以Msp I进行限制性酶切图谱分析.结果 219名(男112人,女107人) 中国汉族人VKORC1 G3673A基因中,表现型A/A的频率是81.3%(男90人,女88人),表现型G/ A是18.7% (男22人,女19人),表现型G/G是0.VKORC1 G3673A基因A的频率是90.6%, 基因G的频率是9.4%.结论 中国汉族人VKORC1 G3673A基因的分布有自己的特点,为研究VKORC1 G3673A基因在华法林个体化给药方案的制定提供了可靠的理论资料.

    作者:杨剑;缪丽燕 刊期: 2007年第04期

  • 2000年至2004年启东市居民主要恶性肿瘤减寿分析

    目的 研究恶性肿瘤对居民寿命的影响,为制订恶性肿瘤防治工作重点提供依据.方法 运用减寿分析的方法描述启东市2000年至2004年期间恶性肿瘤造成的寿命损失情况.结果 引起寿命损失的前4位恶性肿瘤为肝癌、肺癌、胃癌和白血病.恶性肿瘤标化减寿率的性别比值(男∶女)是2.53∶1.在低年龄组,白血病的潜在减寿年数(PYLL)高;中壮年中,肝癌的PYLL大;中老年人口中肺癌的PYLL位次较高.结论 肝癌、肺癌、胃癌、白血病是引起寿命损失主要的恶性肿瘤,大力保护男性人群,特别应当加强低年龄段白血病和高年龄段肝癌、肺癌、胃癌的防治.

    作者:凌良健;陈建国;陆青云;朱健;张永辉 刊期: 2007年第04期

  • 吉西他滨联合顺铂治疗中晚期胰腺癌36例疗效观察

    目的 观察吉西他滨联合顺铂治疗中晚期胰腺癌的临床疗效.方法 对36例中晚期胰腺癌患者给予吉西他滨和顺铂联合治疗,每28 d为1个疗程,两个疗程后综合评估临床疗效.结果 有效26例(26/36,72.2%),无效10例(10/36,17.8%),主要不良反应为骨髓抑制.结论 吉西他滨和顺铂联合治疗中晚期胰腺癌能较好改善相关症状,提高患者的生存质量.

    作者:王建新;李德春;张子祥;赵华 刊期: 2007年第04期

  • 白内障超声乳化术后痤疮丙酸杆菌性眼内炎1例

    白内障超声乳化术后并发感染性眼内炎是眼科严重的并发症之一,一旦发生,对眼内组织的损害十分严重,可导致失明或眼球萎缩.白内障超声乳化术后并发感染性眼内炎因致病菌种类不同而表现不一.痤疮丙酸杆菌由于其毒性较小,潜伏期较长,临床表现不典型,发病率较少见,而常被误诊为葡萄膜炎,因延误治疗而造成严重后果.我院遇1例白内障超声乳化术后痤疮丙酸杆菌性眼内炎,经玻璃体及部分晶状体后囊膜切除联合玻璃体腔及球旁注药,取得了较好的疗效,现报告如下.

    作者:顾永辉 刊期: 2007年第04期

苏州大学学报(医学版)杂志

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主管:江苏省教育厅

主办:苏州大学