学术投稿

葛根素对成骨细胞增殖、分化的促进作用以及其在体内异位成骨的影响

郑伟伟;林程;杨民

关键词:
摘要:葛根素是一类从中药葛根中提取的异黄酮单体,属植物雌激素的一种,近年来不少学者证实其具有促进成骨细胞(OB)增殖和分化以及矿化的特性[1].本研究旨在探讨葛根素促进OB增殖、分化的适浓度以及在体内对OB异位成骨的影响.
中华实验外科杂志相关文献
  • 鼠神经生长因子对急性脑梗死大鼠炎性因子与神经功能的影响

    目的 观察鼠神经生长因子(NGF)对急性脑梗死大鼠炎性因子与神经功能的影响.方法 选择30只SD大鼠作为实验动物并分为对照组、模型组以及NGF组,模型组以及NGF组建立脑梗死模型,NGF组使用鼠NGF 20 μg/(kg·d)进行干预,采用Longar和改良神经功能评分(mNSS)评价神经功能,采集血清和脑组织并测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-10含量.结果 建模后,模型组和NGF组的Longar和mNSS评分均显著高于对照组(t=11.634~17.894,P>0.05),干预后3、6、9、12、15 d时,NGF组的Longar和mNSS评分均显著低于模型组[(2.52±0.41比3.38±0.39,1.98±0.23比3.01 ±0.31,1.77 ±0.21比2.89±0.29,1.69 ±0.18比2.52±0.34,1.48±0.22比2.29±0.28),(7.69±1.02比10.74±1.48,6.82±0.89比9.44±1.36,6.21±0.77比9.12±1.27,5.84±0.62比7.99±0.94,4.91±0.55比7.13 ±0.88)](t=3.255~9.892,P>0.05);模型组和NGF组的血清和脑组织中TNF-α、IL-6、IL-10含量均显著高于对照组(t=5.345~15.160,P>0.05),NGF组的血清和脑组织中TNF-α、IL-6含量均显著低于模型组,IL-10含量均显著高于模型组[(19.51±2.77)比(28.75±3.22) pg/ml,(52.44 ±7.10) pg/ml比(80.49±11.38) pg/ml,(31.45±5.21) pg/ml比(51.47 ±7.82) pg/ml比(64.78±9.33)pg/ml比(86.41 ±7.54) pg/ml,(25.28±3.85) pg/ml比(15.52 ±2.15) pg/ml,(70.13 ±9.52)pg/ml比(40.33 ±6.95) pg/ml](t=5.702 ~8.571,P>0.05).结论 鼠NGF干预能够改善急性脑梗死大鼠的神经功能、抑制康复过程中的炎性反应.

    作者:姜炎;连亚军 刊期: 2016年第07期

  • 炎性因子对脊髓损伤作用的研究进展

    脊髓损伤可导致严重的神经功能障碍,目前尚无有效的治疗方法.炎性反应介导的继发性损伤会加重机体的损害.炎性因子在炎性反应中起关键性作用,因而有必要探明脊髓损伤后炎性因子的变化及其对脊髓损伤的作用,并寻求潜在的治疗途径.

    作者:孙超;李波;郭巍;姚雪;冯世庆 刊期: 2016年第07期

  • Rayback Ⅳ型桡骨远端骨折诊治分析

    RaybackⅣ型定义为累及腕关节面的完全骨折.其治疗方法有争议,我们选取RaybackⅣ型桡骨远端骨折的患者125例分别子保守治疗及手术治疗,比较两种方法的临床治疗效果.一、资料与方法1.临床资料:选取2010年10月至2013年10月就诊于中国石油天然气集团公司中心医院及德国WaldKrankenhaus医院诊断为RaybackⅣ型桡骨远端骨折的患者125例,其中男44例,女81例,年龄22~81岁,平均年龄(55.0±2.3)岁,65岁以上患者60例,其中手术治疗26例,保守治疗34例;65岁以下患者65例,其中手术治疗41例,保守治疗24例.

    作者:陈胜乐;董巍;张天一;吴建伟;路博;王一凤;樊国峰;乔金环;王增立 刊期: 2016年第07期

  • 人血液中YKL-40浓度变化与膝关节退变关系的Meta分析

    迄今数项研究报道了血液中YKL40浓度与膝关节退变程度间的关联,但结论不完全一致,我们对文献进行Meta分析.一、资料与方法利用Pubmed、CNKI等数据库,检索词为“膝关节骨关节炎”“YKL40”“OA”,时间:2000年1月至2015年8月.采用Revman 5.0软件,数据采用加权均数差(WMD)、95%可信区间(CI)表示,检验水准α =0.05.

    作者:王小健;魏垒 刊期: 2016年第07期

  • 空心螺钉联合T型钢板内固定治疗股骨Hoffa骨折

    股骨远端单髁或双髁后方的冠状位骨折于1904年由Hoffa率先报道,故而又称Hoffa骨折.北京积水潭医院报道其在住院治疗股骨远端骨折患者中所占比例为8.7%[1],临床处理比较棘手,治疗不当易出现骨折不愈合、内固定失效和创伤性关节炎等.为提高疗效,减少并发症,我们于2009年2月至2014年10月采用空心螺钉联合T型钢板内固定术治疗Hoffa骨折15例,现报道如下.

    作者:苏振炎;栗磊 刊期: 2016年第07期

  • 稳定过表达微小RNA-637的TPC-1细胞株建立及其对细胞增殖的影响

    目的 构建人微小RNA(miRNA,miR)-637慢病毒过表达载体,建立稳定过表达miR-637的甲状腺乳头癌TPC-1细胞株,检测其对细胞增殖的影响.方法 设计针对miR-637前体的过表达基因片段,应用聚合酶链反应法(PCR)扩增目的基因片段,通过基因重组技术将目的基因片段插入GV369慢病毒载体中,进行PCR鉴定及DNA测序和比对分析,构建GV369-miR-637慢病毒表达载体.用慢病毒液感染TPC-1,建立稳定过表达miR-637的TPC-1细胞株.荧光显微镜下观察GV369-miR-637慢病毒表达载体的转染效果,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测GV369-miR-637-TPC-1、GV369-NC-TPC-1和TPC-1 3组细胞中miR-637的表达水平,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测各组细胞的增殖能力.结果 经限制性内切酶鉴定及DNA测序分析,成功构建GV369-miR-637慢病毒表达载体质粒.GV369-miR-637-TPC-1和GV369-NC-TPC-1细胞在荧光显微镜下均发出绿色荧光,并且转染效率高.GV369-miR-637-TPC-1组中miR-637的表达水平显著高于GV369-NC-TPC-1细胞组(45.32±3.85比2.78±1.15,P<0.05),其增殖能力受到抑制.结论 成功构建过表达miR-637的TPC-1细胞株,其抑制细胞增殖.

    作者:袁青领;刘洋;刘征;樊玉霞;王晓明;耿祖仕;卢秀波 刊期: 2016年第07期

  • 白细胞介素-1β、白细胞介素-6和白细胞介素-10在颈椎病大鼠模型中的变化及其意义

    目的 动态观察白细胞介素(IL)-1β、IL-6和IL-10在动静力失衡性大鼠颈椎退变模型血清中的表达,并探讨其意义.方法 选择60只标准大鼠,随机分为2组:实验组(45只),再随机分为术后1个月(10只)、术后3个月(15只)、术后6个月(20只)3个时间点;对照组(15只),随机分为术后1个月、术后3个月、术后6个月3个时间点,每个时间点5只.实验组手术逐层切除全层颈背部肌肉、棘间韧带及棘上韧带;对照组为假手术组.同一组大鼠分别于造模后1、3和6个月采取腹腔静脉血,离心后收集血清,运用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定实验组和对照组大鼠血清中IL-1β、IL-6和IL-10的含量,各组结果进行统计学分析比较.结果 对照组大鼠血清IL-1β含量在造模后1、3、6个月分别为(97.76±13.33)、(112.69 ±33.35)、(99.78 ±13.44) pg/ml;实验组为(266.69±85.33)、(211.22±49.23)、(143.71±38.58) pg/ml;对照组大鼠血清IL-6含量在造模后1、3、6个月分别为(261.05±14.69)、(257.84±7.87)、(254.80±21.13) pg/ml;实验组为(269.99±13.87)、(262.61±12.20)、(266.40±16.59) pg/ml;对照组大鼠血清IL-10含量在造模后1、3、6个月分别为(59.81±3.68)、(64.60 ±0.96)、(59.82±13.11) pg/ml;实验组为(94.65±9.37)、(111.73±10.42)、(69.93±9.69) pg/ml.与对照组比较,实验组大鼠血清IL-1β、IL-10含量分别在造模后1、3个月显著升高(P <0.05,P<0.01);实验组和对照组中IL-6含量在造模后1、3和6个月比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 颈椎退变过程中可能伴随着血清IL-1β、IL-10的改变,而血清中IL-6却无明显改变.

    作者:尹健健;黄永静;高共鸣;农鲁明;徐南伟 刊期: 2016年第07期

  • 骨关节结核模型的动物选择研究进展

    结核病目前仍是严重危害人类健康的主要传染病,自从抗结核药物的发展及规范应用以来,人类结核曾降到有史以来低发病率及死亡率,甚至有人说结核会像天花一样被灭绝.随着耐药结核杆菌的不断增长,20世纪80年代以来,原本在结核疫情较低的发达国家和原结核疫情较重的发展中国家,均出现明显回升且呈现出恶化的趋势.尤其是多重耐药(MDR)结核病及人类免疫缺陷病毒(HIV)伴结核感染病例的增多,使抗结核治疗又重新遇上了难题.骨关节结核是除淋巴结核发病率高的肺外结核,其中脊柱结核已超过骨关节结核总数的50%,并且会造成严重的残疾及后遗症,严重影响患者的生命和生活质量.纵观历史,国内外学者对肺结核的研究甚多,而骨与关节结核的研究相对较少,骨关节结核主要通过局部血管注射及局部钻孔接种结核杆菌来建立,但结核杆菌主要在需氧环境中生长良好,骨关节结核的构建主要在少氧甚至无氧的环境中建立,很大一部分实验动物在种植结核杆菌后通过血液循环形成肺结核,而不是骨关节结核,动物的死亡率很高,成功率较低.鉴于骨关节结核对患者造成的危害及动物模型成功率低等问题,目前急需选择一种合适的动物及方法成功建立模型,以便对骨关节结核的治疗和研究打下坚实的基础.本文通过选择不同动物建立骨关节结核模型的优缺点作一概述.

    作者:乔永杰;张吕丹;李杜鹏;曹雪飞;甄平 刊期: 2016年第07期

  • 胃肠道肿瘤患者尿苷二磷酸葡苷酸转移酶1A1基因多态性与伊立替康不良反应及疗效的关系

    目的 观察尿苷二磷酸葡苷酸转移酶1A1(UGT1A1)* 28和UGT1A1*6基因多态性在新疆维吾尔族(简称维族)人群中的分布,探讨其与伊立替康(CPT-11)为主方案治疗晚期胃肠道肿瘤的不良反应及疗效的关系.方法 收集118例维族晚期胃肠道肿瘤患者外周血标本,检测其UGT1A1*28和UGT1A1*6基因型.对其中67例接受CPT-11化疗胃肠道肿瘤患者出现的化疗不良反应及疗效进行记录,比较不同基因型患者之间的差异.结果 118例患者中,UGT1A1* 28分布:野生型TA6/6者60例(50.8%),杂合突变型TA6/7者46例(39.0%),纯合突变型TA7/7者12例(10.2%);UGT1A1*6分布:野生型G/G者97例(82.2%),杂合突变型G/A者20例(16.9%),纯合突变型A/A者1例(0.8%).67例接受CPT-11化疗胃肠道肿瘤患者,UGT1A1* 28基因突变可增加3~4级迟发性腹泻发生率(TA6/6者6.1%、TA6/7者17.9%、TA7/7者50.0%,P<0.05),而3~4级中性粒细胞减少发生率差异无统计学意义(P>0.05);不同UGT1 A1*6基因型患者3~4级迟发性腹泻和中性粒细胞减少差异无统计学意义(P>0.05).联合UGT1 A1*28和UGT1 A1*6基因,野生型患者发生3~4级迟发性腹泻的概率明显低于单点变异型和双点变异型(4.2%、12.1%、50.0%,P<0.01),而3~4级中性粒细胞减少差异无统计学意义(P>0.05).Logistic多因素分析结果显示UGT1A1* 28基因型是3~4级迟发性腹泻的影响因素.UGT1 A1* 28和UGT1A1 *6基因型对治疗有效率(RR)和疾病控制率(DCR)无显著影响.结论 新疆维族人中的UGT1A1* 28突变基因型比UGT1A1*6突变更为多见.接受CPT-11化疗维族患者,UGT1A1* 28基因突变者显著增加严重迟发性腹泻发生的风险,但UGT1 Al基因多态性与疗效无明显相关.

    作者:曲颜丽;王海峰;唐勇 刊期: 2016年第07期

  • 低频电磁场对肌卫星细胞增殖的影响

    临床上各种原因引起手部肌肉(大小鱼际肌群等)萎缩,严重影响手部正常功能,磁场对生命机体的活动有一定影响[1-2].本研究旨在观察低频脉冲电磁场对成肌诱导因子(MyoD)表达的影响,为治疗神经肌肉萎缩提供基础研究,其中MyoD是肌肉形成特异基因转录调控中的“总开关”[3].

    作者:韩福军;阴爽;杨兴辉;毕佳琦;李卫;曲志伟;孟庆刚 刊期: 2016年第07期

  • 肝素外用对大鼠深Ⅱ°创面进行性加深及愈合的影响

    目的 观察肝素外用对深Ⅱ°创面进行性加深及愈合的影响.方法 48只Wistar大鼠,自动恒温电烫仪75 ℃烫伤10s,形成深Ⅱ°创面.随机分为肝素组(H组)及生理盐水组(Y组),每组18只每个时相点6只大鼠活杀用于伤后24、48、72h 3个时相点创面的组织损伤评分及创面周缘组织的髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)含量测定;每组6只大鼠不活杀,观察创面愈合进程.H组为2 500 IU/ml普通肝素钠溶液创面外用行包扎治疗,Y组生理盐水代替肝素.结果 (1)创面组织损伤评分:H组48、72 h时相点显著低于Y组.分别为:48 h H组(9.17 ±1.62)分,Y组(12.50±2.26)分(P <0.05);72 h H组(10.20±2.36)分,Y组(14.30±2.67)分(P<0.05).(2)创面周缘组织MPO[U/(mg·prot)]活性,H组各时相点显著低于Y组.分别为24h H组7.92±1.35,Y组25.87±0.20(P <0.01);48 h H组20.69±4.23,Y组43.43±9.83(P<0.01);72 h H组35.66±7.36,Y组75.17±18.09(P <0.01).创面周缘MDA[μmol/(mg· prot)]含量,H组各时相点显著低于Y组.分别为24 h H组5.40 ±0.89,Y组8.18±0.94(P <0.01);48 h H组5.83±0.69,Y组49.39±11.24(P <0.01);72h H组9.03±1.37,Y组73.72±18.14(P<0.01).(3)创面愈合进程,伤后14、16d,H组创面面积明显小于Y组.结论 肝素外用治疗大鼠深Ⅱ°烫伤,创面的组织损伤程度减轻,愈合加速.创面及周缘组织白细胞浸润减少,组织氧化性损伤减轻是其可能的原因.

    作者:龙忠恒;赵超莉;张祥明;王晖;徐培;谢卫国 刊期: 2016年第07期

  • KISS-1在早期结肠癌淋巴结微转移中的表达及其临床意义

    目的 观察KISS-1在早期结肠癌原发病灶和转移淋巴结中的表达,探讨KISS-1在结肠癌淋巴结微转移中的作用.方法 收集我院经手术切除且病理检查证实的65例结肠癌病例,记录患者性别、年龄、吸烟饮酒史、肿瘤性质、浸润程度、淋巴结微转移及Dukes分期等各项临床相关资料.将切除的肿瘤标本和清扫的淋巴结标本行免疫组织化学染色,并提取肿瘤和淋巴结组织的DNA行聚合酶链反应(PCR)扩增和测序,观察KISS-1在结肠癌原发病灶和转移淋巴结中的表达情况,并分析各临床病理特征和患者术后总体生存的关系.结果 KISS-1 mRNA在65例结肠癌病例的原发灶均表达阳性(100.00%),327站淋巴结中49站(14.98%)表达阳性,196站肠系膜淋巴结中24站(12.24%)表达阳性.影响术后生存和无病生存率的因素包括:Dukes分期(P<0.01)、肠系膜淋巴结微转移(P<0.01)、清扫淋巴结总站数(P<0.01)、清扫肠系膜淋巴结站数(P<0.05)、病理分级(P<0.05).结论 检测结肠癌原发肿瘤病灶KISS-1 mRNA蛋白表达有助于预测早期结肠癌患者的预后.

    作者:徐勇超;任莹坤;张占东;唐礼恭;李星;刘英俊;郭智博 刊期: 2016年第07期

  • 丁酰胆碱酯酶抑制剂对急性高血脂小鼠模型血脂的影响

    目的 观察丁酰胆碱酯酶抑制剂对急性高血脂小鼠血脂水平的影响.方法 采用腹腔注射泰洛沙泊(400 mg/kg)的方法建立小鼠急性高血脂模型,并通过灌胃给药的方式给予辛伐他汀(10 mg/kg)、丁酰胆碱酯酶特异性抑制剂四异丙基焦磷酸亚胺(ISO-OMPA)(1mg/kg)和非特异性抑制剂新斯的明(0.5 mg/kg),分别分析丁酰胆碱酯酶被抑制的程度以及小鼠血浆中血脂的变化.结果 新斯的明对丁酰胆碱酯酶的体外抑制效果是ISO-OMPA的136倍,而ISO-OMPA体内抑制效果强于新斯的明;ISO-OMPA和新斯的明均可显著抑制小鼠血清丁酰胆碱酯酶的活性,模型组小鼠的血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)浓度分别为(586.1±99.8)、(277.2±92.7)、(164.6 ±82.5)mg/dl,新斯的明组与之比较分别下降了19%、15%和6%.结论 丁酰胆碱酯酶与血脂明显相关.

    作者:朱龙;许航;叶燕锐;谭文 刊期: 2016年第07期

  • 聚乙烯醇-羧甲基纤维素防粘连膜的生物相容性

    目的 探讨聚乙烯醇-羧甲基纤维素复合防粘连膜的生物相容性.方法 本研究依据GB/T16886医疗器械生物学评价标准规定的细胞毒性实验、急性全身毒性实验、皮内刺激实验和植入实验方法评价复合膜的生物相容性.结果 (1)细胞毒性实验:不同比例(100%、50%、25%、10%)聚乙烯醇-羧甲基纤维素复合膜浸提液的平均细胞相对增殖率分别为88.7%、91.5%、95.2%和96.8%,达到国颁标准对生物材料细胞毒性所限定的要求;(2)急性全身毒性实验:聚乙烯醇-羧甲基纤维素复合膜浸提液无急性全身毒性反应,实验动物的体重增加与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);(3)皮内刺激实验:材料侧注射点的刺激反应不大于阴性对照侧的刺激反应,平均原发刺激指数为0.17,说明聚乙烯醇-羧甲基纤维素复合膜无皮内刺激作用;(4)植入实验:皮下植入2周复合膜组周围组织炎性反应3例均为Ⅱ级,纤维囊腔形成Ⅱ级2例、Ⅲ级1例,4周复合膜组炎性反应Ⅰ级2例、Ⅱ级1例,纤维囊腔形成Ⅰ级2例、Ⅱ级1例,12周复合膜组炎性反应0级2例、Ⅰ级1例,纤维囊腔形成0级2例、Ⅰ级1例.符合生物材料组织相容性要求.结论 聚乙烯醇-羧甲基纤维素复合防粘连膜的生物相容性良好,有望作为国产新型防粘连膜应用于心脏手术.

    作者:胡畅;吴清玉;郭宝华;戴泽辉;李雷;阮英茆 刊期: 2016年第07期

  • 癌相关成纤维细胞对结肠癌生物学行为的影响

    目的 观察人结肠癌相关成纤维细胞(CAFs)在体内对结肠癌LoVo细胞侵袭转移的影响.方法 胶原酶消化法原代培养人结肠CAFs和正常成纤维细胞(NFs);对第3代人结肠CAFs和NFs通过形态学观察和免疫细胞化学染色方法进行鉴定;BALB/c裸鼠随机分3组,实验组将CAFs和NFs分别与结肠癌LoVo细胞按浓度为1×1010/L,以1:1比例混合,以单独注射LoVo细胞为对照组,通过皮下注射和脾脏注射的方法分别建立皮下移植瘤模型和肝转移模型,比较3组间皮下移植瘤的生长速度及肝转移率之间的差异;采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法检测3组皮下移植瘤标本中CD31标记的微血管密度(MVD)以探讨CAFs和NFs对肿瘤血管生成的影响.结果 CAFs较NFs特异表达成纤维细胞活化蛋白(FAP)和成纤维细胞特异性蛋白(FSP),两种细胞结蛋白(Desmin)均为阴性表达;CAFs+ LoVo组(CAF干扰组)肿瘤生长速度和体积明显大于NFs+ LoVo组(NF干扰组)和LoVo组(未干扰组,P<0.05);皮下移植瘤CD31免疫组织化学染色显示CAFs+ LoVo组MVD计数为(11.16±2.44)个,NFs+ LoVo组为(7.36±1.52)个,LoVo组为(6.08±1.41)个,CAFs+ LoVo组MVD计数明显多于NFs+ LoVo组和LoVo组(P<0.05),NFs+ LoVo组MVD计数多于LoVo组(P<0.05);CAFs+ LoVo组肝转移率为80%,明显高于NFs+ LoVo组(40%)和LoVo组(20%,P<0.05).结论 人结肠CAFs能够促进结肠癌的侵袭和转移,可能与CAFs促进结肠癌肿瘤血管生成有关.

    作者:施琳;隋贵春;袁宏伟;韦玄;贾永峰;云芬;孙红;乌新林 刊期: 2016年第07期

  • Y染色体上的性别决定区相关高迁移率族盒蛋白-5对骨肉瘤细胞MG63增殖的影响

    目的 观察骨囊肿与骨肉瘤组织中Y染色体上的性别决定区相关高迁移率族盒蛋白-5(SOX-5)的表达,探讨SOX-5对骨肉瘤细胞MG63增殖的影响.方法 通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测骨囊肿与骨肉瘤组织中的SOX-5表达,进而通过RNA干扰降低SOX-5在骨肉瘤细胞MG63中的表达,再采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法分别检测干扰后0、24、48、72 h的细胞增殖率并分别与对照组比较;流式细胞分析评估细胞周期分布,Western blot检测干扰组和对照组细胞周期调控蛋白细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)和细胞分裂周期蛋白25A(CDC25A)的表达水平.结果 与骨囊肿组织比较,SOX-5 mRNA在骨肉瘤组织显著上升(P <0.001).RNA干扰后的骨肉瘤细胞的增殖明显降低(P<0.01),SOX-5干扰组的G0/G1期细胞比例从(52.80±1.43)%增加至(66.71 ±0.62)% (P<0.01),而S期细胞比例从(30.72±1.72)%下降至(17.27±3.15)%(P<0.01).SOX-5干扰组的CDK2和CDC25A表达均显著降低(P<0.01),SOX-5的低表达降低了G1/S期的细胞周期过渡.结论 SOX-5在骨肉瘤细胞中高表达,它能促进肿瘤细胞的增殖.

    作者:张树威;周逸驰;查圆瑜;杨阳;金伟 刊期: 2016年第07期

  • 配对相关同源框-1基因过表达对人胰腺癌细胞侵袭及上皮-间充质转化的影响

    目的 观察配对相关同源框-1(Prrx-1)基因过表达对胰腺癌细胞侵袭及上皮-间充质转化(EMT)的影响.方法 培养人正常胰腺导管上皮细胞HPDE6-C7和3株胰腺癌细胞AsPC-1、BxPC-3和CFPAC-1,采用Western blot方法检测Prrx-1蛋白表达.采用Prrx-1基因过表达慢病毒载体转染胰腺癌BxPC-3细胞,构建高表达Prrx-1基因过表达BxPC-3细胞(简称Prrx-1过表达细胞)后,采用Western blot方法检测癌细胞Prrx-1蛋白水平;采用显微镜观察癌细胞形态;采用Westernblot方法检测各组癌细胞中上皮标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)和间叶标志物波形蛋白(Vimentin)蛋白;采用Transwell方法观察癌细胞侵袭能力.结果 Western blot检测结果显示:Prrx-1蛋白在HPDE-C7细胞不表达,而在AsPC-1、BxPC-3和CFPAC-1均高表达.选取BxPC-1进一步研究.采用Western blot方法检测结果显示,与空载对照组比较,Prrx-1过表达组细胞Prrx-1基因蛋白水平明显升高;形态学观察结果显示,Prrx-1基因过表达组细胞出现EMT改变;Western blot检测结果显示,与空载对照组比较,Prrx-1过表达组细胞E-Cadherin表达下调,Vimentin表达上调;Transwell方法检测发现,空载对照组和Prrx-1过表达组穿膜细胞数分别为(89 ±5)个和(139±8)个(P<0.05).结论 Prrx-1过表达可促进人胰腺癌细胞迁移和侵袭能力,其机制可能与促进EMT有关.

    作者:范钰;蒋孟林;满昌峰;臧晔;邹晨 刊期: 2016年第07期

  • 微小RNA-126过表达对乳腺癌细胞侵袭的影响及其机制

    目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-126过表达对乳腺癌细胞侵袭的影响及其机制.方法 将miR-126的模拟物(minics)转染入MCF-7和MDA-MB-231细胞,通过实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-126的表达变化;运用Transwell实验检测转染后细胞侵袭能力的改变.采用生物信息学技术预测miR-126的潜在靶基因,然后,使miR-126的过度表达和通过拟表型实验加以证实.结果 与阴性对照组(MCF-7:0.31±0.06;MDA-MB-231:0.29±0.02)比较,转染miR-126 minics组miR-126表达水平(MCF-7:0.79±0.05;MDA-MB-231:0.71±0.03)明显升高(P<0.01).TransweU侵袭实验结果显示相对于对照组(MCF-7:102.0±6.2;MDA-MB-231:104.0±8.9),转染miR-126 minics组细胞侵袭能力降低(MCF-7:43.0±7.8;MDA-MB-231:63.0±5.8,P<0.05).通过生物信息学技术预测了整合素-金属蛋白酶9(ADAM9)为miR-126的潜在靶基因;miR-126的过度表达明显降低ADAM9蛋白水平,进一步抑制体外乳腺癌细胞浸润,同时,小干扰RNA将ADAM9基因沉默也明显抑制乳腺癌浸润.结论 在乳腺癌进展过程中miR-126可能通过使ADAM9表达下调对肿瘤起到抑制作用.

    作者:王承正;袁鹏;杨晗昭;孙恒 刊期: 2016年第07期

  • 串联飞行时间质谱分析人良性胆管瘢痕成纤维细胞差异蛋白表达

    目的 探讨人良性胆管瘢痕成纤维细胞蛋白表达差异.方法 收集15例良性胆管狭窄患者的胆管瘢痕,用10例正常人胆管作为对照,进行体外组织培养,提取两种细胞总蛋白,通过双向凝胶电泳,图像分析,获得差异表达蛋白点.结果 组织培养5d后可见梭形细胞移出、贴壁,14d细胞连接成片,传代后生长良好,电镜可见微丝,免疫荧光检测该细胞有Vimentin表达.检测出人良性胆管瘢痕成纤维细胞差异蛋白28种,上调蛋白9种,下调蛋白19种,其功能与细胞代谢、凋亡等相关.结论 胆管瘢痕成纤维细胞蛋白表达存在差异.

    作者:方钱;蔡秀军;王卫军;梁霄;俞图南;方益锋 刊期: 2016年第07期

  • 消退素D1对大鼠烧伤后疼痛和脊髓胶质细胞活化的影响

    目的 观察消退素D1(RvD1)对大鼠烧伤后疼痛及脊髓胶质细胞活化的影响.方法 140~150 g幼年大鼠随机分为4组:对照组、烧伤组(B组)、RvD1低剂量治疗组[R(S)组]、RvD1高剂量治疗组[R(L)组].制备烧伤模型,R(S)组和R(L)组于烧伤前30 min及烧伤后1~7d分别腹腔注射100、300 ng RvD1 50μl,2次/d.分别于烧伤前1d和烧伤后1、3、5、7、14 d测定大鼠机械缩足反应阈(MWT).于烧伤后7dMWT测定结束后处死3只大鼠,用荧光免疫组织化学检测脊髓小胶质细胞和星形胶质细胞标志物离子钙结合适配器分子-1(Iba-1)和胶质酸性纤维蛋白(GFAP)表达.结果 与对侧比较,B组烧伤侧烧伤后各时点MWT[(4.4 ±2.6)、(2.9±1.7)、(3.0±1.8)、(2.4±1.5)、(4.0±2.4)g]降低(P<0.05),脊髓Iba-1 (24.7±2.8)和GFAP表达(324±27)上调(P<0.05);与B组比较,R(S)组[(8.9±2.1)、(7.6±2.5)、(7.5±3.0)、(7.6±3.1)、(6.6±3.0)g]、R(L)组[(13.4±2.3)、(12.0±1.8)、(12.9±2.1)、(11.9±2.3)、(11.1±2.7)g]烧伤侧烧伤后各时点MWT升高(P<0.05),R(L)组脊髓Iba-1(6.7±2.2)和GFAP表达(210 ±25)下调(P<0.05).结论 RvD1可通过抑制烧伤引起的大鼠脊髓胶质细胞活化,减轻大鼠烧伤后疼痛.

    作者:王艳萍;赵小娜;郭慧玲;冉菊红;李新新;李明明;马民玉 刊期: 2016年第07期

中华实验外科杂志

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