张树威；周逸驰；查圆瑜；杨阳；金伟
目的 观察靶向过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因小干扰RNA(siRNA)阻断激素导致活体兔股骨头细胞内成脂基因表达的作用.方法 48只家兔随机分为4组,每组12只.正常组(N):臀肌注射生理盐水2 ml.模型组(M):每次臀肌注射地塞米松20 mg/kg,连续注射3d.干扰组(S):同M组给予地塞米松,并于1、3、6周穿刺注入一侧股骨头内siRNA腺病毒滴液25μl.无关序列组(Con):同M组给予地塞米松,注入家兔股骨头内无关序列siRNA病毒滴液.实验第4、8周末分批处死家兔,观察兔股骨头细胞内成脂基因与成骨基因的表达.结果 实验4周和8周时,S、Con、M、N组中的PPARγ mRNA表达量分别为0.40±0.05、0.69±0.09、0.71±0.08、0.38±0.06和0.43±0.05、0.71±0.08、0.71±0.08、0.42±0.08;Runx2 mRNA相对表达量分别为0.0035±0.0006、0.0019±0.0008、0.0019±0.0007、0.0036±0.0007和0.0034±0.0006、0.0017±0.0005、0.0020±0.0004、0.0035±0.0006;骨钙素(Osteocalcin) mRNA相对表达量分别为0.034±0.006、0.015±0.006、0.014±0.005、0.035±0.005和0.032±0.007、0.016±0.006、0.015±0.005、0.033±0.005.PPARγ蛋白表达量分别为0.18±0.02、0.85±0.14、0.87±0.18、0.24±0.02和0.17±0.02、0.90±0.15、0.90±0.18、0.22±0.02;核心结合蛋白因子2(Runx2)蛋白表达量分别为0.82±0.19、0.22±0.03、0.19±0.03、0.84±0.17和0.83±0.19、0.21 ±0.03、0.20±0.03、0.86±0.15;Osteocalcin蛋白表达量分别为0.83±0.17、0.19±0.02、0.20±0.02、0.83±0.15和0.82±0.17、0.18±0.02、0.20±0.03、0.80±0.14.S组中PPARγmRNA与其蛋白表达量均明显低于M、Con组(P＜0.05),与N组比较差异无统计学意义(P＞0.05).S组中Runx2、OsteocalcinmRNA与其蛋白表达量均明显高于M、Con组(P＜0.05),与N组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 靶向PPARγ的腺病毒载体介导的小干扰RNA能够有效阻断激素诱导的活体兔股骨头细胞内成脂基因PPARγ表达,保持其成骨基因Runx2与Osteocalcin表达.
作者：赵辉；金国平；刘鸣；李劲峰；赵国强；王义生；李月白 刊期： 2016年第07期
目的 探讨中国恶性肿瘤患者尿苷二磷酸葡糖苷酸转移酶1A1(UGT1 A1)基因多态性与伊立替康(CPT-11)化疗的不良反应的发生率和严重程度的关系.方法 用聚合酶链反应(PCR)法扩增目的基因片段,采用直接测序法分析UGT1 A1基因多态性,检测2011年3月至2015年5月在我院住院治疗的439例恶性肿瘤患者UGT1A1基因多态性的分布情况,并对接受CPT-11治疗的128例患者毒性反应进行观察,比较不同基因型患者接受CPT-11治疗后不良反应发生率的差异.结果 439例恶性肿瘤患者中UGT1 A1基因纯合野生型TA6/6野生基因型343例(78.1％);TA6/7杂合基因型84例(19.1％),TA7/7纯合基因型12例(2.8％).128例接受CPT-11治疗的患者总体出现3～4度中性粒细胞减少12例(9.3％);3～4度迟发性腹泻20例(15.6％);基因型TA6/6、TA6/7之间比较,差异无统计学意义(P＞0.05);TA7/7发生3～4级粒细胞减少及腹泻的比例明显增加.结论 中国患者UGT1 A1* 28多态性频率低,TA7/7纯合变异型患者应用CPT-11化疗发生Ⅲ度以上中性粒细胞减少和腹泻的风险增加,而TA6/7杂合子与TA6/6野生型相似,并不增加患者发生Ⅲ度以上中性粒细胞减少和腹泻的风险.
作者：景年财；郭环宇；王军；肖宏宇；杨吉利 刊期： 2016年第07期
闭塞性细支气管炎(OB)是影响肺移植远期疗效的主要原因[1],研究其病理生理改变机制及可能的预防和治疗策略具有重要意义.本实验通过气管原位移植模拟OB病理改变,通过组织病理检查初步分析其免疫排斥反应特点,旨在为OB的实验研究提供一种可靠的动物模型.
作者：雷成刚；吴维栋；朱勇；郑炜；郭朝辉；陈椿 刊期： 2016年第07期
目的 观察兔膝骨关节炎(KOA)软骨细胞电压依赖性钙通道(Cav)α1亚单位的表达变化.方法 8只兔随机分为对照组和KOA组.膝关节软骨细胞原代培养,采用膜片钳技术,观察软骨细胞膜电位的变化;提取软骨细胞的mRNA,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法观察软骨细胞9种电压依赖性钙通道α1亚单位和软骨细胞基质代谢相关基因mRNA表达的变化.结果 两组软骨细胞膜电位分别为(-38.3 ±2.0)mV和(-27.4±2.1)mV.与对照组比较,KOA细胞呈去极化表现,膜电位值显著减少(P＜0.01).对照组软骨细胞仅有Cav1.2、Cav1.3、Cav1.4、Cav2.1、Cav2.2和Cav2.3的mRNA表达,未见存在Cav1.1、Cav3.1和Cav3.3的mRNA表达.KOA时,软骨细胞Cav1.2、Cav1.3、Cav1.4和Cav2.1的mRNA表达增高,分别是对照组的2.2、2.3、7.6(P＜0.01)和3.0倍(P＜0.05),Cav2.2和Cav2.3的mRNA表达无明显改变.KOA时,软骨细胞Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖、转录因子性别决定区Y框蛋白(Sox)-9和转化生长因子-β的mRNA表达明显降低,分别是对照组的0.2、0.4、0.6和0.2倍(P＜0.01);基质金属蛋白酶(MMP-1)-1和MMP-13、含血小板反应蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS)4和ADAMTS-5显著增多,分别是对照组的4.1、8.0(P＜0.01)、81.3和2.0倍(P＜0.05).结论 KOA时,软骨细胞膜电位去极化,使高电压激活型钙通道开放,而L型和P/Q型钙通道的mRNA表达增高,进一步增加钙的进入.通过钙通道增加的钙可能是软骨细胞合成代谢减少,分解代谢增加的原因之一.
作者：王晓峰；武文婷；常延超；武涛涛；王飞；孙然；师晨霞 刊期： 2016年第07期
目的 观察低强度全身复合振动(WBV)联合阿仑膦酸钠(ALE)预防去势大鼠骨质疏松的情况,探讨复合振动能否增加ALE改善去势大鼠骨微结构的能力.方法 128只SD大鼠随机分为对照组(Sham组)、卵巢摘除术(OVX)+注射生理盐水组(OVX +VEH组)、卵巢摘除术+全身复合振动组(OVX+ WBV组)、卵巢摘除术+阿仑膦酸钠组(OVX+ ALE)和OVX+ WBV+ ALE组.OVX+VEH组是单纯卵巢切除后给予生理盐水(1 mg/kg,每周灌胃1次);OVX+ WBV组是切除卵巢后给予全身复合振动(振动强度为0.3g,频率为45 ～ 55 Hz,每次振动20 min,每天1次,每周5次,休息间隔不大于2d,共3个月);OVX +ALE组是切除卵巢后给予ALE(1 mg/kg,每周灌胃1次);OVX+ WBV+ ALE组是切除卵巢后给予全身复合振动及ALE干预,定期收集标本,测定血清中骨钙素(OC)和Ⅰ型胶原C末端肽(CTX)水平,micro-CT检查分析和三点弯曲生物力学检测.结果 在实验12周时,血清中OC和CTX含量在卵巢切除后均显著升高(OC,+25.6％,P＜0.05;CTX,+53.1％,P＜0.05),WBV和ALE治疗组对OC影响不大,但ALE能够显著抑制血清CTX的增加(-29.6％,P＜0.05).在实验12周时,相对于WBV治疗组来说,ALE治疗组更能够显著提高胫骨近端松质骨的骨微结构参数[骨体积分数(BV/TV)(+25.3％,P＜0.05),组织容积(TV apparent)(+60.3％,P＜0.05),骨体积(BV material)(+28.4％,P＜0.05),骨小梁数量(Tb.N)(+15.6％,P＜0.05),骨小梁厚度(Tb.Th)(+16.9％,P＜0.05)].同样在实验12周时,相对于ALE治疗组来说,WBV+ ALE治疗组更能够显著提高胫骨近端的骨微结构参数[BV/TV(+25％,P＜0.05),TVapparent(+ 30.4％,P＜0.05),Tb.N(+10％,P＜0.05)和连接密度(Conn.D.)(+44.5％,P＜0.05)].在实验12周时,相对于对照治疗组(OVX+VEH组),WBV+ ALE治疗组能够显著提高胫骨近端骨的大应力(+28.7％,P＜0.05)和胫骨近端骨破坏的吸收能量(+47.6％,P＜0.05).结论 相对于低强度WBV,ALE能够更好的预防去除卵巢大鼠骨质疏松和改善骨的微结构;WBV联合ALE能够很好地预防去势大鼠骨质疏松,而且低强度WBV能够增强ALE预防骨质疏松的效果.
作者：陈国仙；郑帅；陈建庭；黄文华；林宗锦；李国山；曾清东；陈伟义；林卫挺 刊期： 2016年第07期
目的 探讨淋巴细胞/单核细胞比值(LMR)对合并远处转移结直肠癌预后的预测价值.方法 按照连续采样的方法,收集自2011年8月至2015年8月于我院就诊并确诊为合并远处转移的晚期结直肠癌患者的临床资料.记录患者的性别、年龄、体力状态评分(PS)、原发肿瘤部位(结肠、直肠)、分化程度(低/中、高)、受累器官(单/多器官)、原发灶是否切除(是/否)、对化疗反应性(完全反应/部分反应/无反应/肿瘤进展)、是否接受分子靶向治疗(是/否)、治疗开始时LMR水平、生存时间(月)、临床结局(生存/死亡)等临床资料,自患者接受治疗开始每2个月随访1次,根据随访结束时患者生存情况判定LMR预测患者死亡的临界LMR值,并据此临界值将患者分为两组,比较组间患者上述指标的差异.结果 LMR预测患者随访期间死亡的约登指数为3.38.据此将患者分为高LMR(LMR ＞3.38)组66例和低LMR(LMR＜ 3.38)组38例.结果显示,高LMR组患者对化疗反应性相对较好,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).组间生存分析结果显示,与低LMR组比较,高LMR组患者生存时间相对较长,组间差异有统计学意义(x2 =4.66,P＜0.05).患者死亡危险因素的多元回归分析结果显示,患者治疗前LMR水平、PS评分、肿瘤组织分化程度、肿瘤对化疗的反应性及是否接受分子靶向治疗与患者死亡有关,可作为随访期间患者死亡的独立危险因素[比值比(OR) ＞1.0,P＜0.05].结论 合并远处转移结直肠癌患者治疗开始前LMR值与患者对化疗的反应性和死亡风险有关,低LMR水平患者对化疗反应性相对较差,死亡风险相对较高.
作者：黄成良；李舒明；曹钧；陈世勇 刊期： 2016年第07期
葛根素是一类从中药葛根中提取的异黄酮单体,属植物雌激素的一种,近年来不少学者证实其具有促进成骨细胞(OB)增殖和分化以及矿化的特性[1].本研究旨在探讨葛根素促进OB增殖、分化的适浓度以及在体内对OB异位成骨的影响.
作者：郑伟伟；林程；杨民 刊期： 2016年第07期
关于糖皮质激素性骨质疏松的相关分子生物学及干预作用研究,近年来已得到较大发展和深入.自噬作为一种维持细胞内环境稳定的自我保护机制,在细胞发育、细胞免疫、组织重塑等方面有着十分重要的作用,因此尝试从细胞自噬、凋亡的分子机制着手进行中药干预研究治疗糖皮质激素性骨质疏松,将进一步为中医药防治糖皮质激素性骨质疏松研究开辟新的思路.
作者：汤样华；李国松；曾林如；岳振双；辛大伟；徐灿达 刊期： 2016年第07期
目的 观察脑出血小鼠外周血中调节性T细胞(treg)比例与炎性因子表达水平的改变,探讨脑出血后免疫状态的改变及脑出血小鼠神经功能的缺损程度与免疫抑制状态之间的关系.方法 按完全随机数字表法将24只成年雄性C57BL/6小鼠分为假手术组、脑出血组.采用胶原酶立体定位注射法制作脑出血小鼠模型.流式细胞术检测外周血中Treg细胞占单核细胞的比例,酶联免疫吸附技术检测外周血中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与干扰素-γ(IFN-γ)的水平,并通过改良神经功能缺损程度评分(mNSS)评价小鼠神经功能变化.结果 脑出血后1、3d后外周血中Treg细胞的比例[(6.58±1.47)％与(7.07±1.60)％]均高于假手术组[(4.82±0.59)％],差异有统计学意义(P＜0.05);脑出血后1、3d外周血中TNF-α的水平[(110.23±11.59) pg/ml、(102.56±10.35) pg/ml]亦较假手术组[(30.01 ±5.59) pg/ml)明显升高,但IFN-γ的水平((2.62±0.45) pg/ml与2.09±0.60) pg/ml]较假手术组[(3.48±0.61) pg/ml]明显下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).mNSS显示,脑出血小鼠均有不同程度的神经功能缺损,且神经功能的缺损程度与Treg细胞的比例呈正相关(P＜0.05).结论 脑出血后存在外周血中免疫细胞比例与炎性因子表达水平的改变;Treg细胞的增多与免疫抑制有关,该变化提示脑出血后可能存在免疫状态的抑制.
作者：蒋超；王月娟；左方芳；罗焕；朱丽；郭志松 刊期： 2016年第07期
目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-126过表达对乳腺癌细胞侵袭的影响及其机制.方法 将miR-126的模拟物(minics)转染入MCF-7和MDA-MB-231细胞,通过实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-126的表达变化;运用Transwell实验检测转染后细胞侵袭能力的改变.采用生物信息学技术预测miR-126的潜在靶基因,然后,使miR-126的过度表达和通过拟表型实验加以证实.结果 与阴性对照组(MCF-7:0.31±0.06;MDA-MB-231:0.29±0.02)比较,转染miR-126 minics组miR-126表达水平(MCF-7:0.79±0.05;MDA-MB-231:0.71±0.03)明显升高(P＜0.01).TransweU侵袭实验结果显示相对于对照组(MCF-7:102.0±6.2;MDA-MB-231:104.0±8.9),转染miR-126 minics组细胞侵袭能力降低(MCF-7:43.0±7.8;MDA-MB-231:63.0±5.8,P＜0.05).通过生物信息学技术预测了整合素-金属蛋白酶9(ADAM9)为miR-126的潜在靶基因;miR-126的过度表达明显降低ADAM9蛋白水平,进一步抑制体外乳腺癌细胞浸润,同时,小干扰RNA将ADAM9基因沉默也明显抑制乳腺癌浸润.结论 在乳腺癌进展过程中miR-126可能通过使ADAM9表达下调对肿瘤起到抑制作用.
作者：王承正；袁鹏；杨晗昭；孙恒 刊期： 2016年第07期
目的 探讨基质细胞衍生因子-1(SDF-1)对髓核细胞基质金属蛋白酶-13(MMP-13)表达的调控机制.方法 体外培养大鼠髓核细胞,应用SDF-1进行干预,以CXC趋化因子受体4、7(CXCR4、CXCR7)中和抗体阻抑SDF-1/CXCR4、7轴,检测MMP-13和活性的改变,荧光素酶报告基因检测法验证SDF-1与MMP-13作用关系.结果 SDF-1促进髓核细胞MMP-13表达,CXCR4中和抗体抑制MMP-13的表达和活性改变(P＜0.05).SDF-1增加MMP-13启动子的活性2.7倍,CXCR4抑制剂可降低MMP-13启动子活性3.8倍(P＜0.05).结论 SDF-1结合CXCR4后,激活MMP-13启动子并上调其表达水平.
作者：李帅；郜勇；王琨；刘伟；宋雨；陈松峰；杨操 刊期： 2016年第07期
目的 观察DNA损伤结合蛋白2(DDB2)在肝门部胆管癌上皮-间充质转化及转移中的作用.方法 构建DDB2干扰质粒和高表达质粒,经反转录病毒稳定转染肝门部胆管癌细胞株QBC939细胞,建立DDB2沉默及高表达稳定转染细胞株.通过Western blot检测上皮-间充质转化标志物[E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)]表达变化;经划痕实验及Transwell迁移实验检测QBC939细胞迁移能力改变;经Matrigel侵袭实验检测QBC939细胞侵袭能力改变.结果 在QBC939细胞中沉默DDB2能够明显抑制上皮细胞标志物E-cadherin的表达而促进间质细胞标志物(Vimentin)的表达,在Transwell实验中可增强细胞的迁移能力[(100.00±5.37)％比(214.66±10.04)％,P＜0.05],在Matrigel实验中可增强细胞的侵袭能力[(100.00±11.18)％比(238.02±32.46)％,P＜0.05]同时增强细胞的迁移和侵袭能力;在QBC939细胞中高表达DDB2能够明显促进上皮细胞标志物E-cadherin的表达而抑制间质细胞标志物(Vimentin)的表达,在Transwell实验中可降低细胞的迁移能力[(100.00± 18.76)％比(49.31±10.21)％,P＜0.05],在Matrigel实验中可降低细胞的侵袭能力[(100.00± 12.81)％比(35.37±4.92)％,P＜0.05].同时降低细胞的迁移和侵袭能力.结论 DDB2能够抑制肝门部胆管癌细胞上皮-间充质转化及转移.
作者：胡明星；付强；王玉柱；秦涛 刊期： 2016年第07期
目的 观察肝素外用对深Ⅱ°创面进行性加深及愈合的影响.方法 48只Wistar大鼠,自动恒温电烫仪75 ℃烫伤10s,形成深Ⅱ°创面.随机分为肝素组(H组)及生理盐水组(Y组),每组18只每个时相点6只大鼠活杀用于伤后24、48、72h 3个时相点创面的组织损伤评分及创面周缘组织的髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)含量测定;每组6只大鼠不活杀,观察创面愈合进程.H组为2 500 IU/ml普通肝素钠溶液创面外用行包扎治疗,Y组生理盐水代替肝素.结果 (1)创面组织损伤评分:H组48、72 h时相点显著低于Y组.分别为:48 h H组(9.17 ±1.62)分,Y组(12.50±2.26)分(P ＜0.05);72 h H组(10.20±2.36)分,Y组(14.30±2.67)分(P＜0.05).(2)创面周缘组织MPO[U/(mg·prot)]活性,H组各时相点显著低于Y组.分别为24h H组7.92±1.35,Y组25.87±0.20(P ＜0.01);48 h H组20.69±4.23,Y组43.43±9.83(P＜0.01);72 h H组35.66±7.36,Y组75.17±18.09(P ＜0.01).创面周缘MDA[μmol/(mg· prot)]含量,H组各时相点显著低于Y组.分别为24 h H组5.40 ±0.89,Y组8.18±0.94(P ＜0.01);48 h H组5.83±0.69,Y组49.39±11.24(P ＜0.01);72h H组9.03±1.37,Y组73.72±18.14(P＜0.01).(3)创面愈合进程,伤后14、16d,H组创面面积明显小于Y组.结论 肝素外用治疗大鼠深Ⅱ°烫伤,创面的组织损伤程度减轻,愈合加速.创面及周缘组织白细胞浸润减少,组织氧化性损伤减轻是其可能的原因.
作者：龙忠恒；赵超莉；张祥明；王晖；徐培；谢卫国 刊期： 2016年第07期
目的 探讨皮质骨和松质骨Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路及相关分子表达的差异.方法 通过小鼠在体和离体实验,观察皮质骨和松质骨Wnt/β-catenin通路及相关因子β-catenin、核心结合蛋白因子2(Runx2)、成骨相关转录因子抗体(Osterix)等表达水平的差异.结果 免疫组织化学结果显示小鼠皮质骨β-catenin、Runx2、Osterix阳性表达量均明显低于松质骨[(20.30±1.21)％比(25.80±1.10)％、(10.20±3.05)％比(19.51±2.03)％、(13.90±2.06)％比(23.74±3.33)％,P＜0.05].细胞免疫荧光和实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)的结果与免疫组织化学结果一致.结论 皮质骨的Wnt/β-catenin信号通路及相关分子表达明显低于松质骨.
作者：李俊峰；陈思旭；鲍全伟；刘华渝；李昂；秦昊；赵玉峰；沈岳；钟孝政 刊期： 2016年第07期
股骨远端单髁或双髁后方的冠状位骨折于1904年由Hoffa率先报道,故而又称Hoffa骨折.北京积水潭医院报道其在住院治疗股骨远端骨折患者中所占比例为8.7％[1],临床处理比较棘手,治疗不当易出现骨折不愈合、内固定失效和创伤性关节炎等.为提高疗效,减少并发症,我们于2009年2月至2014年10月采用空心螺钉联合T型钢板内固定术治疗Hoffa骨折15例,现报道如下.
作者：苏振炎；栗磊 刊期： 2016年第07期
目的 观察人结肠癌相关成纤维细胞(CAFs)在体内对结肠癌LoVo细胞侵袭转移的影响.方法 胶原酶消化法原代培养人结肠CAFs和正常成纤维细胞(NFs);对第3代人结肠CAFs和NFs通过形态学观察和免疫细胞化学染色方法进行鉴定;BALB/c裸鼠随机分3组,实验组将CAFs和NFs分别与结肠癌LoVo细胞按浓度为1×1010/L,以1:1比例混合,以单独注射LoVo细胞为对照组,通过皮下注射和脾脏注射的方法分别建立皮下移植瘤模型和肝转移模型,比较3组间皮下移植瘤的生长速度及肝转移率之间的差异;采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法检测3组皮下移植瘤标本中CD31标记的微血管密度(MVD)以探讨CAFs和NFs对肿瘤血管生成的影响.结果 CAFs较NFs特异表达成纤维细胞活化蛋白(FAP)和成纤维细胞特异性蛋白(FSP),两种细胞结蛋白(Desmin)均为阴性表达;CAFs+ LoVo组(CAF干扰组)肿瘤生长速度和体积明显大于NFs+ LoVo组(NF干扰组)和LoVo组(未干扰组,P＜0.05);皮下移植瘤CD31免疫组织化学染色显示CAFs+ LoVo组MVD计数为(11.16±2.44)个,NFs+ LoVo组为(7.36±1.52)个,LoVo组为(6.08±1.41)个,CAFs+ LoVo组MVD计数明显多于NFs+ LoVo组和LoVo组(P＜0.05),NFs+ LoVo组MVD计数多于LoVo组(P＜0.05);CAFs+ LoVo组肝转移率为80％,明显高于NFs+ LoVo组(40％)和LoVo组(20％,P＜0.05).结论 人结肠CAFs能够促进结肠癌的侵袭和转移,可能与CAFs促进结肠癌肿瘤血管生成有关.
作者：施琳；隋贵春；袁宏伟；韦玄；贾永峰；云芬；孙红；乌新林 刊期： 2016年第07期
目的 探讨去上皮细胞羊膜(DMAM)构建药物缓释组织工程支架联合神经于细胞(NSCs)在大鼠脊髓全横断损伤模型中的治疗效果.方法 取出生24h内的SD大鼠8只,剥离双侧海马分离、培养、纯化、鉴定NSCs备用.获取健康产妇羊膜,制备成DHAM.裁取两块DHAM4 cm×4 cm大小,吸取含5×109/L NSCs的细胞悬液分别种植其上.一块用2.5ml纤维蛋白黏合剂与18μg鼠神经生长因子的混合剂喷洒于其无细胞面,另一块单纯用18μg鼠神经生长因子喷洒于其无细胞面,卷成圆柱形支架后,分别制成DHAM药物缓释组织工程支架和无缓释功能的DHAM药物组织工程支架.将36只实验大鼠制作脊髓完全横断损伤模型,随机分为3组.A组为DHAM药物缓释组织工程支架移植组;B组为无缓释功能的DHAM药物组织工程支架移植组;C组为旷置缺损组.术后分别在1、2、4、8周对各组运动功能用脊髓损伤后后肢运动功能(BBB)评分系统进行评价.在第8周处死各组大鼠取材,行苏木素-伊红(HE)染色和镀银染色以及免疫组织化学染色观察形态学结果.结果 术后8周,A组BBB评分达(11.63 ±0.58)分,明显高于其余两组(P＜0.05).苏木素-伊红(HE)染色见A组大部分DHAM支架呈规则平行排列,DHAM支架内可见较多细胞存活生长.部分细胞发出丝状纤维沿DHAM支架间隙生长.B组DHAM支架不能保持平行排列的状态,呈波浪状或网状,细胞发出的丝状纤维混乱生长,缺乏方向.C组脊髓断端可见空洞形成.新长出的轴突杂乱交织在一起.神经元核抗原(Neun)抗体免疫组织化学染色显示部分存活的神经干细胞分化为神经元.镀银染色和神经丝蛋白-200(NF-200)抗体免疫组织化学染色证实支架内存活的细胞发出的丝状纤维为神经轴突.结论 DHAM药物缓释支架联合NSCs组建的组织上程支架对大鼠脊髓缺损有良好的治疗潜力.
作者：王沛；祁全；王挽涛；张铮 刊期： 2016年第07期
目的 构建人微小RNA(miRNA,miR)-637慢病毒过表达载体,建立稳定过表达miR-637的甲状腺乳头癌TPC-1细胞株,检测其对细胞增殖的影响.方法 设计针对miR-637前体的过表达基因片段,应用聚合酶链反应法(PCR)扩增目的基因片段,通过基因重组技术将目的基因片段插入GV369慢病毒载体中,进行PCR鉴定及DNA测序和比对分析,构建GV369-miR-637慢病毒表达载体.用慢病毒液感染TPC-1,建立稳定过表达miR-637的TPC-1细胞株.荧光显微镜下观察GV369-miR-637慢病毒表达载体的转染效果,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测GV369-miR-637-TPC-1、GV369-NC-TPC-1和TPC-1 3组细胞中miR-637的表达水平,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测各组细胞的增殖能力.结果 经限制性内切酶鉴定及DNA测序分析,成功构建GV369-miR-637慢病毒表达载体质粒.GV369-miR-637-TPC-1和GV369-NC-TPC-1细胞在荧光显微镜下均发出绿色荧光,并且转染效率高.GV369-miR-637-TPC-1组中miR-637的表达水平显著高于GV369-NC-TPC-1细胞组(45.32±3.85比2.78±1.15,P＜0.05),其增殖能力受到抑制.结论 成功构建过表达miR-637的TPC-1细胞株,其抑制细胞增殖.
作者：袁青领；刘洋；刘征；樊玉霞；王晓明；耿祖仕；卢秀波 刊期： 2016年第07期
目的 观察低剂量电离辐射(LDI)对钛(Ti)颗粒干预成骨样细胞MC3T3-E1后的影响.方法 不同浓度Ti颗粒与MC3T3-E1细胞共同培养后,接受LDI干预,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、酶联免疫吸附试验法(ELISA)、碱性磷酸酶(ALP)试剂盒、实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及茜素红染色法检测MC3T3-E1细胞的增殖、分化、矿化及炎性因子白细胞介素-6(IL-6)的表达.结果 照射后24h,Ti颗粒各组细胞活性(0.78±0.03、0.61 ±0.04、0.63 ±0.07)与对照组(1.00±0.10)比较显著下降(P＜0.01),但LDI对细胞活性没有显著影响.LDI对MC3T3-E1细胞的活性在照射48 h和72 h表现出抑制效应(P＜0.01).照射后7d,照射各组Ⅰ型前胶原羧基端肽(PICP)的浓度[(3.97±1.00)、(3.70±2.00)、(3.78±0.39)、(2.22 ±1.53) ng/g]与假照射各组[(3.32±0.84)、(2.47±0.94)、(2.51±0.50)、(1.39 ±0.40) ng/g]比较均升高,差异有统计学意义(P＜0.05);ALP结果显示照射后14 d,各个Ti颗粒浓度组ALP活性[(0.0123±0.0002)、(0.011 7 ±0.0006)、(0.011 5 ±0.0006)、(0.0120±0.0002)μmol/(min· μg)]均高于假照射组[(0.0108 ±0.0005)、(0.0091±0.0005)、(0.0095±0.0006)、(0.010 1±0.000 2)μmol/(min·μg)],差异均有统计学意义(P＜0.05).Real-time PCR结果显示LDI可有效降低Ti颗粒刺激后MC3T3-E1细胞IL-6的表达(0.86 ±0.12,P＜0.05).茜素红染色结果显示在Ti颗粒存在的情况下LDI仍具有促进矿化的效应.结论 LDI早期会加重Ti颗粒对成骨样细胞增殖的影响,但在Ti颗粒存在的情况下仍具有促进成骨样细胞分化、矿化的作用,同时可下调Ti颗粒刺激后成骨样细胞IL-6的表达.
作者：余昶；徐炜；周晓中；任培根；史高龙；李涧；田野；董启榕 刊期： 2016年第07期
目的 检测线粒体转录因子A (TFAM)在肾细胞癌中的表达,探讨其与肾细胞癌发生发展的关系.方法 选取2009年1月至2010年6月在我院行肾细胞癌手术患者97例.采用免疫组织化方法对肾细胞癌及癌旁组织中TFAM蛋白的表达进行检测,观察TFAM的表达与肾细胞癌病理分级、临床分期、淋巴结转移及预后的关系.结果 TFAM在肾细胞癌中的表达率(38.1％)明显高于癌旁组织(5.0％),差异有统计学意义(P＜0.01).TFAM蛋白异常表达与肾细胞癌临床分期、病理分级、淋巴结转移有关,即肾细胞癌临床分期越高、病理分级越高、淋巴结转移时,TFAM表达越明显,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 TFAM的表达异常可能是肾细胞癌发生发展的分子机制之一.
作者：张良荣；李欣遥；吴斌；崔颢；张墨；殷波；王鹏；韩斌；李志杰 刊期： 2016年第07期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
