孙涛;逯素梅;王晶晶
目的 观察聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)骨水泥加入唑来膦酸后机械性能的变化,以及唑来膦酸在体外的释放.方法 将唑来膦酸与骨水泥以不同质量比混合,制成复合骨水泥试件,并分为A(0 mg)、B(4 mg)、C(20 mg)、D(40 mg)、E(80 mg)5组,每组8个标本,测定其机械性能及药物释放.结果 随载药量增加,复合骨水泥抗压、抗弯强度下降.抗压强度低值为78.99 mPa,抗弯强度低值为81.92 mPa,均高于国际标准.A组与B组间抗压强度、抗弯强度差异无统计学意义(P>0.05),与C、D、E间差异有统计学意义(P<0.05).唑来膦酸在前3d释放显著,1周后处于微量释放状态.结论 唑来膦酸可从PMMA骨水泥中释放,44 g PMMA加入不大于80 mg的唑来膦酸不会对骨水泥的机械性能产生影响.
作者:杨博;邓洲铭;侯明明;蔡林 刊期: 2015年第03期
目的 探讨胃癌组织中膜型基质金属蛋白酶-2(MT2-MMP)的表达水平与预后的关系.方法 采用免疫组织化学染色法检测胃癌组织芯片中90例癌组织及配对的癌旁组织中MT2-MMP的表达.采用x2检验分析MT2-MMP表达与临床病理特征的关系;采用Kaplan-Meier法及Log-rank检验分析MT2-MMP表达与总生存期(OS)的关系;拟合多因素Cox模型,采用风险比(HR)及95%可信区间(CI)评价不同临床指标与死亡的相关性.结果 MT2-MMP在胃癌组织中的表达高于癌旁组织(H-score评分均值分别为246和139分,P<0.01);胃癌组织中MT2-MMP的表达水平和患者的性别、年龄、肿瘤大小、病理分级、TNM分期无明显相关(P>0.05);单因素和多因素回归分析均显示MT2-MMP高表达胃癌患者的死亡风险较低表达组显著增加(HR=2.185,95% CI:1.175~4.064,P<0.05;HR=1.997,95% CI:1.042 ~3.830,P<0.05).结论 MT2-MMP高表达提示胃癌患者预后较差.
作者:徐小丽;陈陆俊;徐斌;许军;蒋敬庭;吴昌平 刊期: 2015年第03期
目的 观察沉默多药耐药相关蛋白4(MRP4)基因对SMMC-7721耐阿霉素细胞株(SMMC-7721-ADM)的影响.方法 实验分为4组:SMMC-7721组、SMMC-7721-ADM组、SiNC-SMMC-7721-ADM阴性转染组、沉默MRP4的小干扰RNA (siMRP4)-SMMC-7721-ADM转染组;设计并筛选出抑制效率高的siMRP4;Western blot及反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组MRP4蛋白和mRNA的表达水平;噻唑蓝(MTT)法观察各组对阿霉素(ADM)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)、长春新碱(VCR)和奥沙利铂(OHP)的敏感性;流式细胞术检测各组细胞凋亡.结果 浓度为25 mol/L的4-6-MRP4抑制效率为87.60%,选其为siMRP4;SMMC-7721组中MRP4 mRNA和蛋白极少量或不表达(0.08 ±0.03,P<0.05;0.025±0.009,P<0.05),SMMC-7721-ADM组显著高表达(8.76 ±0.08,P<0.05;0.684±0.004,P<0.05),siMRP4-SMMC-7721-ADM转染组(1.00 ±0.01,P <0.05;0.180±0.003,P< 0.05)较SMMC-7721-ADM组明显下降但仍稍高于SMMC-7721组;siMRP4-SMMC-7721-ADM转染组与SMMC-7721-ADM组比较对ADM、5-Fu、VCR和OHP的耐药系数(RI)分别为0.40、0.85、0.32、0.05,较SMMC-7721-ADM对化疗药物敏感性增强(P<0.05),siMRP4转染组凋亡率3.26%较SMMC-7721-ADM组增加(P<0.05).结论 MRP4在SMMC-7721极少量或不表达,SMMC-7721-ADM肝癌细胞株高表达,沉默MRP4能较大程度逆转其化疗耐药性.
作者:张华耀;刘建平;苏正;杨尚霖;韦金星;汪洋 刊期: 2015年第03期
胃癌是严重危害人类健康的常见恶性肿瘤,幽门螺旋杆菌(H.pylori)感染与胃癌密切相关,早在1994年H.pylori就被国际抗癌联盟列为Ⅰ类致癌物[1].微小RNA(miRNA,miR)在多种疾病中扮演着重要角色,尤其在肿瘤发生发展中的作用机制已成为当前研究的热点[2].现对miRNA在H.pylori相关胃癌中的作用进行综述.
作者:魏育才;郭继武;张磊;李玉民 刊期: 2015年第03期
目的 观察银离子敷料对慢性伤口的疗效及患者血清炎性因子的变化.方法 取19例慢性伤口患者为治疗组,40例门诊正常体检者为对照组.治疗组创面经38 ~40℃乳酸钠林格氏液清创,采用银离子敷料+藻酸钙渗液吸收贴覆盖,伤口渗出明显时更换敷料.治疗后2个月时评估治疗有效率;分别于治疗前、治疗后2个月取伤口分泌物行细菌培养,比较治疗前后患者伤口的细菌定植情况;分别于治疗前、治疗后2个月时抽取治疗组患者血清以及对照组血清,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中炎性因子白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-12、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平.结果 银离子敷料治疗慢性伤口有效率为89.47%;伤口细菌检出率由治疗前15例降低到治疗后2例;治疗前患者血清中IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α水平均较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),但治疗后的水平较治疗前有所降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 银离子敷料能显著降低慢性伤口中的细菌定植,同时下调患者血清中炎性因子IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α水平.
作者:戴亚芬;韩云芳;农鲁明;徐慧黎;许钰;褚育新 刊期: 2015年第03期
目的 探讨细胞色素B在胃癌发生发展中的作用.方法 收集经病理证实为胃癌的手术患者12例胃癌组织,其中淋巴结转移标本6例,无淋巴结转移标本6例.应用Western blot检测两组胃癌组织凋亡相关因子B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)的表达水平,以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路蛋白表达水平.结果 与无转移组比较,有转移的胃癌组织中促凋亡因子bax表达降低(有转移组∶无转移组=0.55∶1.00,P<0.05),而抑制凋亡因子bcl-2表达增加(有转移组∶无转移组=1.32∶1.00,P<0.05),细胞凋亡水平下降(活化的Caspase-3表达有转移组∶无转移组=2.86∶3.35,P<0.05);有转移的胃癌组织MAPK通路活化水平明显较无转移组降低(P<0.05).结论 胃癌转移与线粒体细胞色素B表达水平下降,从而抑制MAPK通路磷酸化,导致细胞凋亡减少有关.
作者:鲁力;熊治国;柳玉均;叶啟发 刊期: 2015年第03期
目的 探讨免疫负调控分子肿瘤坏死因子诱导蛋白8样蛋白2(TIPE2)在甲状腺癌中的表达及其临床意义.方法 46例具有完整临床病理资料及5年以上随访资料的石蜡包埋甲状腺癌组织及其配对癌旁组织.采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测TIPE2 mRNA在甲状腺癌及其癌旁组织中的表达水平,应用免疫组织化学法分析TIPE2在甲状腺癌组织和癌旁组织的表达,分析TIPE2表达水平与临床病理特征和患者预后的关系.结果 46例癌组织中TIPE2mRNA的表达量为4.17±3.44,显著低于配对癌旁组织中TIPE2 mRNA的表达(15.34±9.81,Z=-3.825,P<0.01).甲状腺癌组织中,TIPE2高表达16例(34.8%),低表达30例(65.2%);在对应癌旁组织中,TIPE2高表达32例(69.6%),低表达14例(30.4%),差异有统计学意义(x2=9.801,P<0.01).癌组织中TIPE2低表达与甲状腺肿瘤患者的临床分期、淋巴结转移明显相关(P<0.05).TIPE2 mRNA高表达组中位生存时间为84个月[95%可信区间(CI):61 ~97个月],显著高于低表达组(59个月,95% CI:47~79个月,P<0.01).肿瘤组织中TIPE2阳性细胞高表达组的中位生存时间为81个月(95% CI:57~102个月),明显高于TIPE2低表达组(54个月,95%CI:44~81个月,P<0.01).Cox多重回归分析表明TIPE2 mRNA和TIPE2阳性细胞低表达是影响甲状腺癌预后不良的独立指标[风险比(HR)=3.77,95% CI:1.37 ~5.09,P<0.05;HR =3.51,95%CI:2.02~4.66,P<0.05].结论 TIPE2在甲状腺癌组织中表达下调,与甲状腺癌患者预后不良相关.
作者:郭欣;吴志宇;陈春悠 刊期: 2015年第03期
目前胃肠道恶性肿瘤的外科治疗,特别是微创外科正蓬勃发展,但仅从外科角度不足以显著提高胃肠道恶性肿瘤的疗效及预后.因此,提高胃肠道恶性肿瘤总体疗效应该从其发生和发展的机制研究入手.近年来,随着相关研究的不断深入,肿瘤免疫微环境、肿瘤干细胞(CSC)、胃肠道微生物组学、肿瘤信号系统和肿瘤免疫治疗等成为了胃肠道恶性肿瘤研究的热点.
作者:陶凯雄;吴轲 刊期: 2015年第03期
目前对于细胞、单一组织的深低温冷冻保存技术已经非常成熟并已进入临床应用[1],但对于复合组织仅成活远远不够,后期的感觉、运动功能的恢复更为重要,我们通过不同方法复温深低温冷冻的兔离断肢体,对比其神经纤维的组织学变化和施旺细胞活性.
作者:朱泽兴;张树明;赵艳东;樊凯彬;赵永军;李鸿江;李波;乔林 刊期: 2015年第03期
目的 观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)和肝癌来源间充质干细胞(LCMSCs)对肝癌细胞HepG2增殖、侵袭能力的影响.方法 贴壁筛选法分离培养LCMSCs,成脂与成骨诱导分化鉴定其分化能力,流式细胞仪检测其表面标志物.分别收集BMSCs和LCMSCs培养上清,与HepG2细胞共培养,以完全培养基为对照组,细胞计数试剂盒(CCK-8)法和Transwell侵袭实验检测各组细胞增殖与侵袭能力.结果 分离的LCMSCs形态均一,具有良好的成脂与成骨分化能力,阳性表达CD29和CD105,阴性表达CD34和CD45.CCK-8法证实BMSCs和LCMSCs培养上清均能促进HepG2细胞增殖,与BMSCs培养上清比较,LCMSCs培养上清对HepG2细胞增殖的促进作用更明显(P<0.05).Transwell侵袭实验表明,对照组、BMSCs培养上清组及LCMSCs培养上清组穿膜细胞数分别为13、24、35个,BMSCs培养上清和LCMSCs培养上清处理后,HepG2细胞的侵袭能力明显增强;与BMSCs CM比较,LCMSCs CM对HepG2侵袭能力的增强作用更为明显(P<0.05).结论 BMSCs和LCMSCs均可增强肝癌细胞HepG2的增殖和侵袭能力,但LCMSCs对HepG2细胞的作用更强.
作者:邬杰忠;邓美海;钟跃思;徐见亮;熊志勇;林楠;许瑞云;方和平 刊期: 2015年第03期
目的 探讨神经内镜与显微镜手术经鼻蝶治疗垂体瘤的效果.方法 遵循随机对照的实验原则,将垂体瘤患者随机分为两组,神经内镜下经鼻蝶治疗垂体瘤40例,同期显微镜下经鼻蝶治疗垂体瘤40例,通过统计分析患者术前一般资料、临床症状、术前影像学检查及内分泌学检查,术中出血量,术中是否出现脑脊液漏,术后住院时间,肿瘤切除情况,症状缓解情况,激素恢复情况及并发症,比较两种术式的手术效果.结果 两组手术均获成功,内镜组和显微镜组术中出血量分别为(48.6±6.0)和(78.4±13.0)ml、术后住院时分别为(5.3±0.8)和(9.1±0.5)d、术中是否出现脑脊液漏内镜组优于显微镜组,且差异有统计学意义(x2=13.131,P<0.05);在术前症状是否缓解(x2 =4.310,P>0.05)、肿瘤是否全切除(x2=5.322,P>0.05)及术后激素恢复情况(x2=8.342,P>0.05)的比较中,内镜组与显微镜组效果相当,差异均无统计学意义;在术后并发症发生率的对比分析中,内镜组并发症发生率明显小于显微镜组,且差异有统计学意义(x2=3.675,P<0.05).结论 神经内镜下经鼻蝶垂体瘤切除术是一种创伤小、操作简便、治疗效果好、并发症相对较少的神经外科技术.
作者:张红赟;邢振义;孙来广 刊期: 2015年第03期
我们采用大鼠原位肝移植模型,以姜黄素(CUR)进行预处理,探讨大鼠原位移植肝缺血/再灌注(I/R)所致急性肺损伤(ALI)的发病机制及CUR预处理的作用.
作者:刘贺;张加强;阮孝国 刊期: 2015年第03期
目的 探讨肝癌患者血清及癌组织中微小RNA(miRNA,miR)-200a表达及与预后的关系.方法 选取郑州人民医院及郑州大学附属肿瘤医院肝胆外科行手术治疗的肝细胞肝癌患者95例,利用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测肝癌患者血清及肿瘤组织中miR-200a表达,并分析miR-200a表达与临床病理特征及患者预后的关系.结果 肝癌患者血清中miR-200a相对表达量为4.57±1.36,低于对照组的5.98±0.62,差异有统计学意义(P<0.05);肝癌患者正常肝组织、癌旁组织及肝癌组织中miR-200a表达量分别为2.67 ±0.31、1.73±0.15和0.68 ±0.11,差异有统计学意义(P<0.05),两两比较,miR-200a表达量:肝癌组织<癌旁组织<正常肝组织,差异均有统计学意义(P<0.05);肝癌患者血清中miR-200a表达量与甲胎蛋白(AFP)水平、分化程度、是否转移、TNM分期有关(P<0.05),肝癌患者肝癌组织中miR-200a表达量与分化程度和是否转移有关(P<0.05);高表达组5年累积生存率为63.7%,低表达组5年累积生存率为41.9%,高表达组患者术后生存明显好于低表达组患者(x2 =4.711,P<0.05).结论 miR-200a在肝癌患者血清和肝癌组织中均呈低表达,是重要的抑癌基因,与肿瘤恶性程度密切相关,并可影响患者预后.
作者:龚哲;尚闯;单国用;刘兴安 刊期: 2015年第03期
目的 观察第10号染色体缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在大鼠脊髓发育过程中的表达模式.方法 选取不同发育阶段(孕15 d子鼠记为A组,出生当天大鼠记为B组,出生后7d大鼠记为C组,出生后56 d大鼠记为D组)的SD大鼠,取出其脊髓,采用Western blot法检测该通路上关键蛋白的表达水平;同时,采用免疫荧光法检测各相应蛋白在大鼠脊髓的细胞定位.结果 Western blot结果显示,A、B、C、D组PTEN与内参肌动蛋白(actin)的灰度值比分别为0.281±0.086、0.462 ±0.002、0.591±0.022、0.392±0.001,A组与其他3组比较差异有统计学意义(P<0.05),D组与B、C组比较差异有统计学意义(P<0.05);A、B、C、D组S6与actin的灰度值比分别为0.646 ±0.116、0.450±0.129、0.824±0.082、0.174±0.038,D组与A、C组比较差异有统计学意义(P<0.05).免疫荧光染色结果显示脊髓神经元有丰富的PTEN与S6表达.结论 这些结果提示PTEN/mTOR信号通路可能与发育相关的表达模式,从而为中枢神经系统再生能力随着发育过程而降低这一现象提供依据.
作者:周武;吴永超;刘国辉;杨述华;蔡林鸿;代志鹏 刊期: 2015年第03期
结肠癌的侵袭、转移及复发与肿瘤微环境密切相关.肿瘤微环境中的髓样抑制性细胞(MDSCs)[1]是近几年来备受关注的免疫抑制细胞,在肿瘤逃逸中发挥重要作用[2].我们通过对结肠癌患者外周血中单核型MDSCs (M-MDSCs)的研究,探讨M-MDSCs在结肠癌中的免疫抑制功能.
作者:莫娟芬;鲍轶 刊期: 2015年第03期
《中华实验外科杂志》第七届编委会第一次全体会议于2014年12月27日在武汉召开.本届编委会121位编委、通讯编委出席了会议.中华医学会杂志社刘冰副社长宣布了本刊第七届编委会组成名单,中华医学会罗玲副秘书长、刘冰副社长代表中华医学会向第七届编委会成员颁发了聘书.罗玲副秘书长在祝贺第七届编委会成立的同时,强调本刊的发展是同历届编委、审稿专家,尤其是第六届编委所作出的贡献是密不可分的,希望他们继续关心、支持本刊工作,要求杂志在目前科技期刊改革新形势下,加强“实验外科”品牌建设,为推动中国实验外科事业发展作出更大贡献.
作者:宋咏堂 刊期: 2015年第03期
目的 观察钙蛋白酶Ⅰ (Calpain Ⅰ)通过糖原合成酶激酶3β(GSK3β)对脊髓损伤后炎症纤维化的调节作用.方法 将20只SD大鼠随机分为对照组、模型组.通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot、苏木素-伊红(HE)染色检测各组差异.结果 与对照组比较,模型组大鼠脊髓损伤后炎症纤维化显著,钙蛋白酶Ⅰ、GSK3β、Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)的表达均显著升高(0.92±0.04、0.91 ±0.06、1.19±0.02、1.07±0.03,P<0.05).应用蛋白酶抑制剂SJA6017干预后,大鼠脊髓瘢痕面积缩小[对照组比模型组(3.37 ±0.04) mm2比(1.13±0.01) mm2,P<0.05]、损伤部位炎症因子[对照组比模型组(350±41) ng/L比(46 ±7) ng/L,P<0.05]及纤维化蛋白表达[对照组比模型组(290±16) μg/L比(19 ±3) μg/L,P<0.05]改善,GSK3β表达降低为0.42 ±0.02和0.35 ±0.03(P <0.05).结论 钙蛋白酶Ⅰ通过GSK3β对脊髓损伤后炎症纤维化的调节发挥作用.
作者:刘涛;曹富江;徐云强;冯世庆 刊期: 2015年第03期
目的 比较通道下微创经椎间孔腰椎椎体间融合术(MIS-TLIF)与传统切开后路腰椎椎体间融合术(PLIF)对单节段腰椎间盘突出症(LDH)的近期治疗效果.方法 采用椎间融合手术治疗的单节段腰椎间盘突出症患者29例.根据手术方式分为两组:MIS-TLIF组共15例,PLIF组共14例.观察两组患者手术时间、术中出血量、术后引流量、切口长度及术后下地时间,并采用日本骨科协会(JOA)评分,比较两组近期治疗效果.结果 MIS-TLIF组JOA术前评分为(13.7±4.4)分,术后评分为(24.5±1.8)分,两者差异有统计学意义(P<0.05).PLIF组JOA术前评分为(15.5±5.6)分,术后评分为(25.0±1.8)分,两者差异有统计学意义(P<0.05).关于手术时间、术中出血量、切口长度、术后下地时间及JOA评分改善率,MIS-TLIF组分别为(140±23) min、(77±47) ml、(54.5 ±3.2) mm、(3.1±0.7)d、(70.9±9.5)%,PLIF组分别为(148±16) min、(319±302) ml、(90.1±6.2) mm、(47.7±6.9)d、(69.7±10.2)%.MIS-TLIF组均未放置引流管,PLIF组术后引流量为(424±253) ml.两组间比较手术时间、JOA评分改善率差异无统计学意义(P>0.05).MIS-TLIF组手术出血量、术后引流量、切口长度、术后下地时间均低于PLIF组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 与PLIF比较,MIS-TLIF对于单节段腰椎间盘突出症同样具有良好的近期治疗效果,并且在手术出血量、术后引流量、切口长度和术后下地时间方面优于PLIF.
作者:郭鑫;皮国富;刘宏建;王卫东;韩钰;李立人;孙建广 刊期: 2015年第03期
目的 观察双氢青蒿素(DHA)诱导人骨肉瘤细胞TE85凋亡,探讨其机制.方法 将不同浓度的DHA(0、10、20、40 μmol/L)作用于人骨肉瘤细胞TE85 24 h后,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)染色,流式细胞仪检测细胞的凋亡;同时检测人骨肉瘤细胞中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和过氧化氢酶(CAT)含量的变化以及线粒体膜电位的变化.结果 DHA作用24h后,0、10、20、40 μmol/L组TE85细胞的凋亡率分别为0.05%、8.17%、25.53%、47.26%.各组细胞中ROS含量分别为1.6600±0.0081、1.7100±0.019 7、1.7920±0.0203和1.8540±0.0194,差异有统计学意义(P<0.05);细胞中MDA含量分别为(0.105±0.024)、(0.461±0.008)、(0.572±0.022)、(0.569±0.015) nmol/mg蛋白,差异有统计学意义(P<0.05);随着DHA剂量的增加,细胞中CAT含量明显降低[分别为(26.750±0.533)、(14.460±0.169)、(14.020±0.104)和(12.640±0.215) U/mg prot,P<0.05],细胞线粒体膜电位明显降低(分别为1.663±0.008、1.711±0.019、1.792±0.020和1.854±0.019,P<0.05).结论 DHA可通过诱发人骨肉瘤细胞TE85内的氧化应激和线粒体功能障碍,进而诱导人骨肉瘤细胞TE85发生凋亡.
作者:李杰;张丰泉;杜振宁;蔡腾;蔡朋杉;范磊 刊期: 2015年第03期
目的 观察人小干扰RNA (siRNA)沉默入骨肉瘤细胞株MG63组织蛋白酶K(Cathepsin K)对增殖和侵袭影响.方法 利用脂质体将Cathepsin K siRNA转染MG63,通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)与Western blot分别检测Cathepsin K mRNA及蛋白质表达,增殖与迁移实验评估沉默Cathepsin K后MG63增殖与侵袭改变.结果 siRNA能有效地抑制Cathepsin KmRNA及蛋白质表达(0.05±0.16、4.00±0.08),与对照组(1.10 ±0.06、1.00±0.21)比较,差异有统计学意义(P<0.01);沉默Cathepsin K细胞增殖(100.00±0.09)明显低于对照组(40.00±0.13,P<0.01);Cathepsin K siRNA组迁移细胞数[(45.0±4.9)个]明显低于对照组[(112.0±8.0)个,P<0.01].结论 siRNA可有效抑制Cathepsin K表达,降低MG63增殖与侵袭能力.
作者:李振伟;吴学建;肖鹏;朱旭 刊期: 2015年第03期