邬杰忠；邓美海；钟跃思；徐见亮；熊志勇；林楠；许瑞云；方和平
目的 探讨影响尿道下裂预后的相关因素,比较各因素对手术成功率的影响.方法 分析我院收治276例尿道下裂患者的临床资料,统计患者的年龄、Duckett分型、阴茎下曲程度、是否首次手术、尿道皮瓣来源、手术分期、是否膀胱造瘘、术后留置尿管时间、手术时期、缝合方式、是否合并其他疾病、术者经验等进行资料收集,先对相关数据进行单因素分析,再进行Logistic回归分析.结果 单因素分析结果表明:Duckett分型(t=7.326,P＜0.05)、阴茎下曲程度(t=6.107,P＜0.05)、手术时期(t=3.639,P＜0.05)、术者经验(t=3.154,P＜0.05)是影响尿道下裂术后成功率的因素;多因素分析表明,Duckett分型是尿道下裂术后发生的独立危险因素[比值比(OR) =2.017,P＜0.05].结论 Duckett分型是影响尿道下裂术后成功率的独立危险因素.
作者：周昆；李胜云；田静静 刊期： 2015年第03期
胆道系统的解剖变异是导致腹腔镜胆囊切除术(LC)胆管损伤、术中术后胆漏等并发症的重要原因.了解胆囊位置的解剖变异、熟悉胆囊管与肝总管的汇合方式、掌握与之相适应的手术技巧,无疑对提高LC手术质量、防止手术并发症具有重要意义.现将2000年以来我院13例异位胆囊患者的临床资料及处理经验报道如下.
作者：陶桢；夏国兵；裴斐 刊期： 2015年第03期
目的 观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)和肝癌来源间充质干细胞(LCMSCs)对肝癌细胞HepG2增殖、侵袭能力的影响.方法 贴壁筛选法分离培养LCMSCs,成脂与成骨诱导分化鉴定其分化能力,流式细胞仪检测其表面标志物.分别收集BMSCs和LCMSCs培养上清,与HepG2细胞共培养,以完全培养基为对照组,细胞计数试剂盒(CCK-8)法和Transwell侵袭实验检测各组细胞增殖与侵袭能力.结果 分离的LCMSCs形态均一,具有良好的成脂与成骨分化能力,阳性表达CD29和CD105,阴性表达CD34和CD45.CCK-8法证实BMSCs和LCMSCs培养上清均能促进HepG2细胞增殖,与BMSCs培养上清比较,LCMSCs培养上清对HepG2细胞增殖的促进作用更明显(P＜0.05).Transwell侵袭实验表明,对照组、BMSCs培养上清组及LCMSCs培养上清组穿膜细胞数分别为13、24、35个,BMSCs培养上清和LCMSCs培养上清处理后,HepG2细胞的侵袭能力明显增强;与BMSCs CM比较,LCMSCs CM对HepG2侵袭能力的增强作用更为明显(P＜0.05).结论 BMSCs和LCMSCs均可增强肝癌细胞HepG2的增殖和侵袭能力,但LCMSCs对HepG2细胞的作用更强.
作者：邬杰忠；邓美海；钟跃思；徐见亮；熊志勇；林楠；许瑞云；方和平 刊期： 2015年第03期
随着对于肝脏微环境研究的不断深入,肝细胞与各种非实质细胞共培养从而发挥异质细胞间相互作用的研究日益受到关注[1-2].我们采用肝细胞和骨髓间充质干细胞(BMSCs)共微囊化培养后,观察BMSCs对肝细胞功能的支持作用,并将其移植入急性肝功能衰竭(ALF)大鼠腹腔内,观察ALF大鼠生存率、肝功能和病理变化.
作者：张悦；陈学敏；孙冬林 刊期： 2015年第03期
目的 探讨肝癌患者血清及癌组织中微小RNA(miRNA,miR)-200a表达及与预后的关系.方法 选取郑州人民医院及郑州大学附属肿瘤医院肝胆外科行手术治疗的肝细胞肝癌患者95例,利用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测肝癌患者血清及肿瘤组织中miR-200a表达,并分析miR-200a表达与临床病理特征及患者预后的关系.结果 肝癌患者血清中miR-200a相对表达量为4.57±1.36,低于对照组的5.98±0.62,差异有统计学意义(P＜0.05);肝癌患者正常肝组织、癌旁组织及肝癌组织中miR-200a表达量分别为2.67 ±0.31、1.73±0.15和0.68 ±0.11,差异有统计学意义(P＜0.05),两两比较,miR-200a表达量:肝癌组织＜癌旁组织＜正常肝组织,差异均有统计学意义(P＜0.05);肝癌患者血清中miR-200a表达量与甲胎蛋白(AFP)水平、分化程度、是否转移、TNM分期有关(P＜0.05),肝癌患者肝癌组织中miR-200a表达量与分化程度和是否转移有关(P＜0.05);高表达组5年累积生存率为63.7％,低表达组5年累积生存率为41.9％,高表达组患者术后生存明显好于低表达组患者(x2 =4.711,P＜0.05).结论 miR-200a在肝癌患者血清和肝癌组织中均呈低表达,是重要的抑癌基因,与肿瘤恶性程度密切相关,并可影响患者预后.
作者：龚哲；尚闯；单国用；刘兴安 刊期： 2015年第03期
目前胃肠道恶性肿瘤的外科治疗,特别是微创外科正蓬勃发展,但仅从外科角度不足以显著提高胃肠道恶性肿瘤的疗效及预后.因此,提高胃肠道恶性肿瘤总体疗效应该从其发生和发展的机制研究入手.近年来,随着相关研究的不断深入,肿瘤免疫微环境、肿瘤干细胞(CSC)、胃肠道微生物组学、肿瘤信号系统和肿瘤免疫治疗等成为了胃肠道恶性肿瘤研究的热点.
作者：陶凯雄；吴轲 刊期： 2015年第03期
自2002年以来,国内许多医院陆续开展了完全腹腔镜胰十二指肠切除术[1],但尚未形成统一的临床标准.我们于2013年12月至2014年11月进行4例完全腹腔镜胰十二指肠切除术,现报道如下.
作者：王文斌；闫长青；刘三光；吕海涛；刘学青；秦建章；刘建华 刊期： 2015年第03期
目的 采用肝星状细胞(HSCs)株LX-2探讨不同浓度奥曲肽对该细胞生物学活性的影响及其在肝纤维化形成中的作用机制.方法 应用噻唑蓝(MTT)法检测奥曲肽对LX-2细胞增殖的影响;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法分析用奥曲肽处理后,细胞中转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Smad-4及c-Jun的转录水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测LX-2培养上清中Ⅰ型胶原的水平;小干扰RNA (siRNA)和染色质免疫共沉淀技术检测c-Jun对TGF-β1表达的调控及其对TGF-β启动子的结合.结果 奥曲肽能抑制LX-2细胞的增殖能力,细胞增殖以浓度依赖的方式显著降低(P＜0.05),当奥曲肽浓度为10-7 nmol/L和10-5 nmol/L时,其抑制率分别为27.5％和49.8％,奥曲肽组与对照组比较,能显著降低TGF-β1、α-SMA、Smad-4及c-Jun的表达(P＜0.05),同时上清中Ⅰ型胶原水平明显减少(P＜0.05),沉默c-Jun的表达后,TGF-β1的表达显著降低.结论 奥曲肽可通过抑制HSCs的增殖,降低α-SMA、Smad-4及c-Jun的表达,进而调控TGF-β1,减少Ⅰ型胶原的分泌,从而减缓纤维化的发生,对降低门静脉高压可能有重要的临床意义.
作者：孙涛；逯素梅；王晶晶 刊期： 2015年第03期
目的 探讨瘦素(Leptin)基因-2 548 G/A多态性位点与非小细胞肺癌易感性及预后的关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测162例非小细胞肺癌和200例正常者的基因型,收集整理病例的临床病理及预后资料,并进行统计学分析.结果 瘦素基因-2 548 G/A位点实验组中AA、GA基因型及A等位基因频率(AA:35.2％;GA:46.3％;A:58.3％)均分别高于对照组(AA:16.5％;GA:40.0％;A:41.7％),差异有统计学意义[比值比(OR)=5.009,95％可信区间(CI):2.758 ～9.097,P＜0.01;OR=2.719,95％ CI:1.615～4.578,P＜0.01;OR=2.436,95％ CI:1.804 ～ 3.289,P＜0.01].Ⅲ+Ⅳ期的非小细胞肺癌中基因型为GA+AA的频率(58.3％)明显高于GG基因型(33.3％),同样在淋巴结转移患者中基因型为GA+ AA的频率(62.1％)明显高于GG基因型(40.0％),差异均有统计学意义(P＜0.05).基因型为GA+ AA患者生存期[(37.7±1.1)个月]明显差于AA型患者[(45.9±2.9)个月],差异有统计学意义(x2=8.215,P＜0.01).结论 瘦素基因-2 548 G/A多态性可能与非小细胞肺癌易感性有关,并且可能是非小细胞肺癌的不良预后因子.
作者：曹凤军；万国兴；俞远东；喻雄杰；狄全书；雷金华；邓守恒；陈萍 刊期： 2015年第03期
目的 观察第10号染色体缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在大鼠脊髓发育过程中的表达模式.方法 选取不同发育阶段(孕15 d子鼠记为A组,出生当天大鼠记为B组,出生后7d大鼠记为C组,出生后56 d大鼠记为D组)的SD大鼠,取出其脊髓,采用Western blot法检测该通路上关键蛋白的表达水平;同时,采用免疫荧光法检测各相应蛋白在大鼠脊髓的细胞定位.结果 Western blot结果显示,A、B、C、D组PTEN与内参肌动蛋白(actin)的灰度值比分别为0.281±0.086、0.462 ±0.002、0.591±0.022、0.392±0.001,A组与其他3组比较差异有统计学意义(P＜0.05),D组与B、C组比较差异有统计学意义(P＜0.05);A、B、C、D组S6与actin的灰度值比分别为0.646 ±0.116、0.450±0.129、0.824±0.082、0.174±0.038,D组与A、C组比较差异有统计学意义(P＜0.05).免疫荧光染色结果显示脊髓神经元有丰富的PTEN与S6表达.结论 这些结果提示PTEN/mTOR信号通路可能与发育相关的表达模式,从而为中枢神经系统再生能力随着发育过程而降低这一现象提供依据.
作者：周武；吴永超；刘国辉；杨述华；蔡林鸿；代志鹏 刊期： 2015年第03期
目的 观察去甲斑蝥素对人胆管癌RBE细胞组织化学及超微结构的影响,探讨去甲斑蝥素对胆管癌细胞作用机制.方法 体外培养胆管癌RBE细胞,采用不同5～40 mg/L去甲斑蝥素处理,吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色统计RBE细胞凋亡率,并观察形态学变化,扫描电镜观察去甲斑蝥素影响下胆管癌RBE细胞表面超微结构的变化,透射电镜观察细胞内超微结构的变化.结果 应用AO/EB荧光染色观察,随去甲斑蝥素剂量加大,胆管癌RBE细胞凋亡率升高,40 mg/L作用24 h后凋亡细胞占(83.1±15.6)％.光镜和扫描电镜下形态学呈现典型的凋亡变化,可见凋亡小体的形成.透射电镜可以观察到细胞核呈新月状改变.结论 去甲斑蝥素可以引起胆管癌RBE细胞显微和超微结构改变,这些改变可能与细胞凋亡和侵袭力改变等变化密切相关.
作者：边伟；王天阳；李秋生；张小艳；辛清旺；刘三光 刊期： 2015年第03期
目的 分选人乳腺癌多西他赛(Docetaxel)耐药细胞株BT549/Docetaxel干细胞,探讨其生物学特征.方法 采用悬浮培养联合多西他赛法分选耐药细胞株BT549/Docetaxel干细胞,采用悬浮培养法富集BT549、BT549/Docetaxel干细胞,进行CD44、CD24细胞标记和流式细胞仪检测,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测BT549、BT549/Docetaxel干细胞中三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2 (ABCG2)基因表达.结果 BT549/Docetaxel与BT549干细胞的群体倍增时间分别为(39.22 ±0.65)、(29.20 ±0.50)h,差异有统计学意义(P＜0.05).流式分析显示,BT549微球体细胞的CD44 +/CD24-/low比例为(13.8±0.5)％,高于单层培养BT549细胞的比例(2.8±0.6)％(P＜0.01).BT549/Docetaxel微球体细胞的CD44 +/CD24-/low比例为(19.1±0.3)％,高于单层培养BT549/Docetaxel细胞的比例(5.0±0.4)％(P＜0.01).BT549/Docetaxel微球体细胞的CD44+/CD24-/low比例高于BT549微球体细胞的CD44 +/CD24-/low比例,差异有统计学意义(P＜0.05).BT549干细胞内药物的含量为(46.9 ±0.5)ng/106个细胞,BT549/Docetaxel干细胞内药物的含量为(7.1±0.3)ng/106个细胞,两者比较差异有统计学意义(P＜0.01).正常培养基培养4h后,BT549细胞内药物的含量为(28.3±0.6) ng/106个细胞,BT549/Docetaxel细胞内药物的含量(3.5±0.1) ng/106个细胞,两者比较差异有统计学意义(P＜0.01).ABCG2的mRNA在BT549/Docetaxel干细胞内表达量明显高于在BT549干细胞内中的表达,两者差异有统计学意义(P＜0.01).结论 成功筛选人乳腺癌多西他赛耐药细胞株BT549/Docetaxel干细胞,生长及耐药性稳定.ABCG2基因在BT549/Docetaxel干细胞内表达量明显增高.
作者：李文涛；孙文聪；邓萌；王磊；黄毅；刘秋荣；王冰；冯淑曼；刘秋雨 刊期： 2015年第03期
目的 观察ISOBAR TTL动态固定系统对腰椎固定节段关节突关节载荷的影响.方法 采用6具新鲜尸体腰椎标本,压敏片插入脊柱标本L3～L4两侧关节突关节间隙内,L3～L4节段在椎间盘正常及摘除状态,分别进行TTL系统固定;依次使标本处于中立位、前屈10°、后伸10°,左弯10°、左旋10°,MTS-858材料机施加400 N轴向负荷,保持大载荷1 min后卸载,压敏片图像扫描到计算机中存储、分析、处理.结果 L3～L4节段在无固定组与TTL固定组关节突关节压力在直立、前屈、后伸、侧屈、侧旋等状态结果差异有统计学意义(P＜0.05),固定组较无固定组关节突关节压力显著降低.TTL固定组在直立、前屈、后伸、侧屈和侧旋等状态时关节突关节压力分别减少为垂直载荷(400 N)的4.01％、0.74％、3.78％、3.45％和19.6％,关节突关节负荷也分别减少为正常的关节突关节负荷的24.99％、17.23％、17.0％、18.40％和35.99％;椎间盘摘除状态,关节突关节压力在直立、后伸、侧屈和侧旋等状态较正常明显增加,但前屈状态则明显减小,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 TTL半坚强动态固定系统能够起到明显缓解腰椎固定节段关节突关节载荷的作用.
作者：唐恒涛；赵卫东；吴学建 刊期： 2015年第03期
目的 探讨细胞色素B在胃癌发生发展中的作用.方法 收集经病理证实为胃癌的手术患者12例胃癌组织,其中淋巴结转移标本6例,无淋巴结转移标本6例.应用Western blot检测两组胃癌组织凋亡相关因子B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)的表达水平,以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路蛋白表达水平.结果 与无转移组比较,有转移的胃癌组织中促凋亡因子bax表达降低(有转移组∶无转移组=0.55∶1.00,P＜0.05),而抑制凋亡因子bcl-2表达增加(有转移组∶无转移组=1.32∶1.00,P＜0.05),细胞凋亡水平下降(活化的Caspase-3表达有转移组∶无转移组=2.86∶3.35,P＜0.05);有转移的胃癌组织MAPK通路活化水平明显较无转移组降低(P＜0.05).结论 胃癌转移与线粒体细胞色素B表达水平下降,从而抑制MAPK通路磷酸化,导致细胞凋亡减少有关.
作者：鲁力；熊治国；柳玉均；叶啟发 刊期： 2015年第03期
目的 通过给予p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPKs)抑制剂(SB203580),探讨紫杉醇诱发细胞凋亡中p38MAPKs通路对γ-氨基丁酸B型受体(GABAB受体)表达变化的影响及其作用机制.方法 随机选取原代培养5d,浓度约为1×109/L的海马细胞,给予不同浓度(0、0.01、0.10、1.00、10.00 μmol/L)紫杉醇,采用噻唑蓝(MTT)法及流式细胞仪检测法分别检测海马神经元细胞抑制率(n=3)及凋亡率(n=4)变化,以此确定紫杉醇诱发细胞凋亡的适浓度.另选取原代培养5d的海马细胞随机分为4组:对照组(C组)、10 μmol/L SB203580处理组(K组)、紫杉醇适浓度处理组(N组)、10 μmol/L SB203580+紫杉醇适浓度混合组(K+N组),培养时间为24h,保持各组加液量一致,Western blot法测定海马细胞GABAB受体及核因子-κB(NF-κB)蛋白表达水平(n=3).结果 紫杉醇对海马细胞活力的抑制具有时间和浓度的交互作用(F=9.127,P＜0.05),根据MTT法(n=3)和流式细胞仪法(n=4)检测结果,各浓度紫杉醇处理24h对海马神经元凋亡率的影响差异有统计学意义(F=64.523,P＜0.05),并计算出紫杉醇诱发细胞凋亡的适浓度为1 μmol/L[早期凋亡率达(48.63±5.76)％].蛋白表达结果显示(n=3):与C组比较,N组和K+N组GABAB受体与NF-κB表达均明显增高(P＜0.05),而K组GABAB受体与NF-κB表达均降低(P＜0.05);与K组比较,N组和K+N组NF-κB和GABAB受体表达均增高(P＜0.05);与N组比较,K+N组NF-κB和GABAB受体表达均降低(P＜0.05).结论 在紫杉醇诱发细胞凋亡过程中,抑制p38MAPKs通路可上调GABAB受体表达,而其下游因子NF-κB可能是其调控GABAB受体表达变化的关键靶点.
作者：金子；王秀丽；吴川；赵爽；李昭；柴潇潇 刊期： 2015年第03期
目的 观察中晚期胃癌患者行动脉介入化疗的临床疗效,并探讨其作用机制.方法 将110例中晚期胃癌患者随随机分为动脉介入化疗组和全身静脉化疗组.动脉介入化疗组60例,行胃左动脉、胃右动脉、胃十二指肠动脉和胃网膜右动脉1支或多支动脉灌注化疗药物亚叶酸钙、氟尿嘧啶和奥沙利铂;全身静脉化疗组50例,应用亚叶酸钙、氟尿嘧啶和奥沙利铂全身静脉化疗.结果 动脉介入化疗组3例完全缓解(CR),46例部分缓解(PR),总有效率为81.67％.全身静脉化疗组1例CR、26例PR,总有效率为54.00％,同时2组累计生存率比较差异有统计学意义(P＜0.05),同时动脉介入化疗组生活质量较全身静脉化疗组有提高.结论 在中晚期胃癌治疗中,动脉介入化疗疗效要优于全身静脉化疗,能延长患者的生存期.
作者：陈瑞红；于红刚 刊期： 2015年第03期
目的 探讨Vav3在胃癌组织中的表达以及抑制Vav3表达对人胃癌细胞株BGC823凋亡的影响及机制.方法 检测Vav3在胃癌组织、癌旁组织和人胃癌细胞株BGC823、正常胃上皮细胞株GES-1中的表达.设计合成针对Vav3的小干扰RNA(siRNA)并转染BGC823细胞株.噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性;流式细胞术检测Vav3-siRNA转染BGC823胃癌细胞后对凋亡率的影响;检测转染前后凋亡抑制蛋白家族中生存素(Survivin)、细胞凋亡抑制蛋白1(c-IAP1)、细胞凋亡抑制蛋白2 (c-IAP2)、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、黑色素瘤凋亡抑制蛋白(Livin)及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3表达.结果 Vav3蛋白水平在胃癌组织(0.727±0.101)和BGC823(0.850±0.140)中显著高于癌旁组织(0.173±0.025)和GES-1细胞株(0.250±0.036,P＜0.05).利用特异性siRNA抑制内源性Vav3的表达后,胃癌细胞株BGC823中Vav3表达明显受到抑制(P＜0.05).MTT结果显示,Vav3-siRNA介导的基因沉默抑制了胃癌细胞BGC823的活性(P＜0.05).流式细胞术显示,Vav3-siRNA转染后胃癌细胞的凋亡率[(40.4±5.53)％]明显高于对照组[(15.93±2.33)％];转染Vav3-siRNA的胃癌细胞Go/G1期比例[(57.93±3.17)％]明显高于对照组[(37.37±4.61)％],而转染组S期细胞的比例[(17.63±1.71)％]明显低于对照组[(34.52±4.60)％,P＜0.05].Vav3-siRNA介导的基因沉默下调了Survivin、c-IAP1、c-IAP2、XIAP的表达(P＜0.05),Livin表达变化不明显(P＞0.05);同时Caspase-3的表达和活性都明显升高(P＜0.05).结论 胃癌细胞中Vav3过表达,而Vav3的基因沉默可以明显促进细胞凋亡.Vav3的这一作用可能是通过调节部分凋亡抑制蛋白家族成员表达而实现的.
作者：檀碧波；李勇；范立侨；赵群；王冬；刘羽 刊期： 2015年第03期
目的 观察人胃癌组织来源的间充质干细胞(hGC-MSCs)对胃癌荷瘤鼠瘤体生长的影响.方法 培养胃癌细胞株SGC-7901,将浓度为1×107个/只的细胞接种于BABL/c裸鼠右侧背部皮下,建立荷瘤鼠模型.经不同剂量(0.5×106、1.0 ×106、2.0×106个/只)的hGC-MSCs作用于荷瘤鼠为实验组,磷酸盐缓冲液(PBS)作用于荷瘤鼠为对照组.测量肿瘤体积变化,采用免疫组织化学染色、实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)、Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)和基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)在各组中的表达.结果 对照组与各实验组的肿瘤体积分别为(1.06±0.15)、(2.21 ±0.44)、(3.38±1.23)、(4.60±0.86) cm3,各组差异有统计学意义(P＜0.05).免疫组织化学结果示PCNA在对照组和各实验组中的吸光度(A)值分别为0.349±0.008、0.376±0.013、0.441 ±0.012、0.500±0.022;MMP-9在4组中的A值分别为0.341±0.027、0.429±0.015、0.474±0.006、0.527±0.033,各组之间差异有统计学意义(P＜0.01).Real-time PCR证实hGC-MSCs能够上调PCNA mRNA的表达,在对照组和各实验组分别为1.000±0.000、1.640±0.013、1.890±0.021、2.150±0.021;MMP-9 mRNA在4组中的表达分别为1.000±0.000、1.810±0.101、2.310±0.004、2.700±0.034,各组之间差异有统计学意义(P＜0.05).Western blot检测对照组和各实验组PCNA的表达分别为14.99 ±0.90、17.64 ±0.90、25.11 ±0.40、28.31±1.10;MMP-9在4组中的表达分别为18.48±1.30、32.95±1.20、67.26±1.20、141.16±3.80,各组之间差异有统计学意义(P＜0.01).结论 hGC-MSCs在体内能促进胃癌荷瘤鼠瘤体的生长,其机制可能与上调PCNA和MMP-9的表达有关.
作者：苏庆亮；李玉明；王凯；张明凯；段长胜 刊期： 2015年第03期
目的 观察吲哚胺-2,3-双加氧酶(IDO)抑制剂1-甲基色氨酸(1-MT)联合外周血单个核细胞(PBMC)对人胶质瘤细胞A172的免疫杀伤作用.方法 采用Ficoll密度梯度离心分离健康人外周血制备PBMC,根据是否联合1-MT分组.细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测梯度1-MT(0、25、125、250、500 μmol/L;1、2、4、8、10 mmol/L)联合PBMC对A172细胞存活率影响.1-MT(500 μmol/L)联合PBMC与A172细胞共培养,流式双染术检测A172细胞凋亡率,Western blot检测A172细胞IDO蛋白表达,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测PBMC中调节T细胞叉头样螺旋转录因子(Foxp3) mRNA表达.结果 在PBMC数量一定情况下,1-MT呈剂量依赖性抑制A172细胞存活率;1-MT联合PBMC组细胞凋亡比率(45.0％)显著高于PBMC组(20.0％)及1-MT组(33.7％);PBMC组A172细胞IDO蛋白相对表达量(0.313±0.017)明显高于1-MT联合PBMC组(0.182±0.015,P＜0.01),1-MT、A172空白组未见明显IDO蛋白表达;PBMC组PBMC中Foxp3mRNA表达(2.764±0.180)明显高于1-MT联合PBMC组(2.189 ±0.179,P＜0.05)及PBMC空白组(1.000±0.028,P＜0.01),1-MT联合PBMC组明显高于PBMC空白组(P＜0.01).结论 1-MT可抑制IDO表达,下调PBMC中Foxp3转录因子表达,降低调节性T细胞增殖分化,可增强PBMC对胶质瘤细胞免疫杀伤作用.
作者：赵程程；张猛；张秋生；王传方；刘文兰；李维平 刊期： 2015年第03期
目的 探讨食管癌相关基因4(ECRG4)在食管癌中的抑癌功能及其机制.方法 构建ECRG4基因表达质粒pcDNA3.1-ECRG4,筛选ECRG4稳定转染细胞株.通过细胞增殖曲线和裸鼠移植瘤实验检测ECRG4过表达对食管癌细胞体外增殖和体内裸鼠成瘤能力的影响;流式细胞仪检测ECRG4过表达对食管癌细胞细胞周期的影响;Western blot检测食管癌细胞中ECRG4过表达,细胞周期调控基因p53和p21蛋白表达的变化.结果 ECRG4基因过表达,食管癌细胞体外增殖和体内裸鼠移植瘤生长减缓,体内肿瘤生长抑制率为48.5％,和空载质粒对照组比较,差异有统计学意义(P ＜0.05);ECRG4基因过表达诱导食管癌细胞细胞周期G1期阻滞,和空载质粒对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);ECRG4基因过表达,导致食管癌细胞中p53和p21蛋白表达增加,与空载质粒对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 ECRG4通过p53通路诱导食管癌细胞细胞周期G1期阻滞.
作者：李晓燕；李林蔚；王文玉；高天慧；周云 刊期： 2015年第03期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
