学术投稿

Vav3对人胃癌细胞株BGC823凋亡抑制蛋白的调节及机制

檀碧波;李勇;范立侨;赵群;王冬;刘羽

关键词:胃癌, Vav3, 小干扰RNA, 凋亡抑制蛋白, 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3
摘要:目的 探讨Vav3在胃癌组织中的表达以及抑制Vav3表达对人胃癌细胞株BGC823凋亡的影响及机制.方法 检测Vav3在胃癌组织、癌旁组织和人胃癌细胞株BGC823、正常胃上皮细胞株GES-1中的表达.设计合成针对Vav3的小干扰RNA(siRNA)并转染BGC823细胞株.噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性;流式细胞术检测Vav3-siRNA转染BGC823胃癌细胞后对凋亡率的影响;检测转染前后凋亡抑制蛋白家族中生存素(Survivin)、细胞凋亡抑制蛋白1(c-IAP1)、细胞凋亡抑制蛋白2 (c-IAP2)、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、黑色素瘤凋亡抑制蛋白(Livin)及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3表达.结果 Vav3蛋白水平在胃癌组织(0.727±0.101)和BGC823(0.850±0.140)中显著高于癌旁组织(0.173±0.025)和GES-1细胞株(0.250±0.036,P<0.05).利用特异性siRNA抑制内源性Vav3的表达后,胃癌细胞株BGC823中Vav3表达明显受到抑制(P<0.05).MTT结果显示,Vav3-siRNA介导的基因沉默抑制了胃癌细胞BGC823的活性(P<0.05).流式细胞术显示,Vav3-siRNA转染后胃癌细胞的凋亡率[(40.4±5.53)%]明显高于对照组[(15.93±2.33)%];转染Vav3-siRNA的胃癌细胞Go/G1期比例[(57.93±3.17)%]明显高于对照组[(37.37±4.61)%],而转染组S期细胞的比例[(17.63±1.71)%]明显低于对照组[(34.52±4.60)%,P<0.05].Vav3-siRNA介导的基因沉默下调了Survivin、c-IAP1、c-IAP2、XIAP的表达(P<0.05),Livin表达变化不明显(P>0.05);同时Caspase-3的表达和活性都明显升高(P<0.05).结论 胃癌细胞中Vav3过表达,而Vav3的基因沉默可以明显促进细胞凋亡.Vav3的这一作用可能是通过调节部分凋亡抑制蛋白家族成员表达而实现的.
中华实验外科杂志相关文献
  • 抑制亲环素A表达对胃癌细胞侵袭迁移的影响及其机制

    目的 观察抑制胃癌细胞中亲环素A(CypA)表达后细胞侵袭迁移能力的改变,并探讨CypA的作用机制.方法 实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot方法检测CypA在胃癌组织和细胞株中的表达.合成针对CypA的小干扰RNA (siRNA)并转染人胃癌细胞株MGC803.噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性;细胞划痕实验检测细胞侵袭迁移能力;Real-time PCR和Western blot检测迁移侵袭基因基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-7、MMP-9、基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1、TIMP-2的表达.结果 在胃癌组织中CypA mRNA和蛋白表达水平(1.005±0.106、0.638±0.096)明显比癌旁组织高(0.284±0.039、0.353 ±0.042),胃癌细胞株CypA mRNA和蛋白表达均高于胃上皮细胞株GES-1(1.005±0.106、0.474±0.053);高分化细胞株MKN28mRNA和蛋白表达水平为0.388±0.097、0.942±0.116,中分化细胞株SGC7901 mRNA和蛋白表达水平为0.646±0.073、1.223±0.156,低分化细胞株MGC803中CypA的表达水平高(1.016±0.211、1.578±0.262).CypA-siRNA可有效抑制内源性CypA表达.MTT结果显示,CypA-siRNA可有效抑制MGC803细胞活性(P<0.05).细胞划痕实检发现抑制CypA表达后MGC803的侵袭迁移能力明显减弱,CypA-siRNA组的细胞数为(21.42 ±2.33)个,而NS对照组为(52.21±4.48)个、空白对照组为(48.76±5.02)个(P<0.05).CypA-siRNA介导的基因沉默下调了MMP-2、MMP-7,上调了TIMP-1的表达(P<0.05).结论 CypA可通过调节部分侵袭迁移基因表达而增强胃癌细胞的侵袭迁移能力.

    作者:王冬;李勇;赵群;范立侨;檀碧波;崔平 刊期: 2015年第03期

  • 二维与三维高清胸腔镜下肺癌手术对比

    目的 评价二维(2D)与三维(3D)高清胸腔镜下非小细胞肺癌手术的临床应用价值.方法 选取2012年9月至2014年3月60例行2D和57例行3D胸腔镜下肺叶切除及淋巴结清扫的手术患者,比较两组患者围手术期相关指标.结果 2D与3D组手术时间分别为(181.7±26.1)、(159.9 ±30.6) min,差异有统计学意义(P<0.05);术后24 h胸液引流量分别为(357.3±165.1)、(240.9±139.7)ml,差异有统计学意义(P<0.05);术后拔管时间分别为(7.9±3.1)、(5.7±1.9)d,差异有统计学意义(P<0.05);术后住院时间分别为(9.1±2.9)、(7.3±1.8)d,差异有统计学意义(P<0.05).两组在年龄、性别、肿瘤部位、术中失血量、淋巴结清除数、术后外科病理分期方面差异无统计学意义(P>0.05).结论 3D高清胸腔镜较2D有更好的景深,从而提供了更清晰的解剖结构,使手术操作更加精准,手术时间缩短及术中损伤减少,更有利于患者术后恢复.

    作者:陆世民;任斌辉;张楼乾;黄兴;王欣;许林 刊期: 2015年第03期

  • 血清甲壳质酶蛋白40在胃部肿瘤中的表达

    目的 探讨胃癌患者血清甲壳质酶蛋白40(YKL-40)表达水平及临床意义.方法 采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测30例正常人及60例胃癌患者血清中YKL-40的表达水平,并比较36例胃癌患者手术前后血清YKL-40水平.结果 胃癌患者血清YKL-40水平(250.83±84.39) μg/L明显高于正常对照组(72.06 ±17.08) μg/L,两两之间比较差异有统计学意义(P<0.01);血清YKL-40水平与胃癌患者性别、年龄无明显相关,与胃癌患者临床分期、肿瘤细胞分化程度有明显相关;Ⅳ期[(362.27±18.64)μg/L]明显高于Ⅲ期[(296.20±25.49) μg/L]、Ⅲ期明显高于Ⅱ期[(212.77 ±24.17) μg/L]、Ⅱ期明显高于Ⅰ期[(136.25 ±20.83) μg/L]、Ⅰ期明显高于正常对照组、两者比较差异有统计学意义(P<0.01),肿瘤细胞分化程度较差(低分化腺癌、黏液腺癌)胃癌患者血清YKL-40水平[(284.88±68.96) μg/L]明显高于肿瘤细胞分化程度较好(高分化腺癌、中分化腺癌)胃癌患者[(222.97±86.54) μg/L,P<0.01];胃癌患者手术后血清YKL-40水平[(191.06±58.33)μg/L]明显低于手术前[(196.14±58.31) μg/L],两者比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 YKL-40可能参与胃癌的发生发展过程.

    作者:杨勤;黄昕;江亮;梁卫明;周才进 刊期: 2015年第03期

  • 叉状头/翅膀状螺旋转录因子在大鼠胃癌模型组织中的表达及其功能

    目的 探讨在胃癌大鼠模型胃癌组织中叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)的表达及其功能.方法 将Wister大鼠46只分为两组,A组23只,采用肌氨酸乙酯盐酸盐及亚硝酸钠致癌剂对大鼠进行诱导处理6个月,制备胃癌大鼠模型.B组23只,为对照组.采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot、免疫组织化学染色等实验技术在不同水平上检测两组大鼠Foxp3在胃组织中的表达和定位;采用免疫组织化学方法观察Foxp3在胃癌组织中的表达和定位;分析Foxp3的表达与病变胃组织分级之间的关系.结果 A组大鼠4级病变的胃组织(Ⅰ级:增生性病变;Ⅱ级:癌前病变;Ⅲ级:早期癌;Ⅳ级:浸润性癌)中均存在不同程度Foxp3的转录.并且随着胃组织病变程度的加重,Foxp3转录程度也越来越高,而B组大鼠正常的胃组织中Foxp3无转录,通过免疫组织化学染色结果显示胃癌细胞中Foxp3蛋白的表达主要分布在肿瘤细胞核,少数分布在胞质内.A组中16例胃癌组织病理切片中10例(62.50%)呈Foxp3蛋白阳性染色,4例癌前病变胃组织中有2例(50.00%)呈Foxp3蛋白阳性染色,3例增生性病变中有1例(33.33%)呈Foxp3蛋白阳性染色.B组23例正常胃组织中无1例Foxp3蛋白阳性染色.Foxp3蛋白在胃组织中的表达与其病变分级呈线性相关(r =4.26,P<0.01).结论 胃癌细胞和组织中普遍存在Foxp3的表达,Foxp3可能在胃癌的发生发展过程中发挥重要功能.

    作者:张旭魁;孙英刚;潘甘霖;沈新;郑振华;王宝成 刊期: 2015年第03期

  • 机械通气小型猪张力性气胸实验模型的建立

    目的 探讨呼吸回路与胸膜腔间使用单向气流旁路来建立机械通气张力性气胸模型的可行性.方法 6头小型猪麻醉后气管插管行机械通气,呼吸回路与胸膜腔间连接单向气流旁路,在呼气末胸膜腔内压为5、10、15 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)时测定循环、呼吸指标等,心输出量(CO)下降超70%时,床旁X线片纵膈定位.每头小型猪行2次模型建立.结果 6头小型猪顺利实施12次模型建立,从旁路通气至CO下降至基础值的30%,需时(18±4)min,第五肋间纵隔移位≥1/4胸廓横径者12例.结论 在呼吸回路与胸膜腔之间通过单向气流旁路的连接,建立机械通气小型猪张力性气胸模型,简单有效、重复性好.

    作者:王艳芳;安敏飞;任秋生;黄丽君 刊期: 2015年第03期

  • 肾癌预后影响因素的多因素回归分析

    目的 探讨肾癌患者预后影响因素.方法 分析我院收治306例肾癌患者一般情况、临床病理特征及预后情况,获访253例(82.7%).数据应用Kaplan-Meier法进行单因素生存分析,采用Cox比例风险模型进行多因素分析.结果 253例患者中位随访时间为32.3个月(3~75个月).术后1、3、5年总生存率分别为98.3%、89.4%、83.7%.单因素分析表明,肿瘤直径、美国东部肿瘤协作组(ECOG)评分、Fuhmian分级、肿瘤分期、侵犯包膜、集合系统受累、静脉癌栓和辅助治疗与患者的预后有关.多因素分析结果显示,ECOG评分(P<0.05)、Fuhrman分级(P<0.05)、肿瘤分期(P<0.01)是影响肾癌患者预后的独立因素.结论 ECOG评分、Fuhrman分级和肿瘤分期是影响肾癌患者预后的独立因素.

    作者:张艳红;马社君;王少芳;李智勇;王颖 刊期: 2015年第03期

  • 食管癌相关基因4通过p53通路诱导食管癌细胞G1期阻滞

    目的 探讨食管癌相关基因4(ECRG4)在食管癌中的抑癌功能及其机制.方法 构建ECRG4基因表达质粒pcDNA3.1-ECRG4,筛选ECRG4稳定转染细胞株.通过细胞增殖曲线和裸鼠移植瘤实验检测ECRG4过表达对食管癌细胞体外增殖和体内裸鼠成瘤能力的影响;流式细胞仪检测ECRG4过表达对食管癌细胞细胞周期的影响;Western blot检测食管癌细胞中ECRG4过表达,细胞周期调控基因p53和p21蛋白表达的变化.结果 ECRG4基因过表达,食管癌细胞体外增殖和体内裸鼠移植瘤生长减缓,体内肿瘤生长抑制率为48.5%,和空载质粒对照组比较,差异有统计学意义(P <0.05);ECRG4基因过表达诱导食管癌细胞细胞周期G1期阻滞,和空载质粒对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);ECRG4基因过表达,导致食管癌细胞中p53和p21蛋白表达增加,与空载质粒对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 ECRG4通过p53通路诱导食管癌细胞细胞周期G1期阻滞.

    作者:李晓燕;李林蔚;王文玉;高天慧;周云 刊期: 2015年第03期

  • p38丝裂原活化蛋白激酶通路对紫杉醇诱发细胞凋亡中γ-氨基丁酸B型受体表达变化的影响

    目的 通过给予p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPKs)抑制剂(SB203580),探讨紫杉醇诱发细胞凋亡中p38MAPKs通路对γ-氨基丁酸B型受体(GABAB受体)表达变化的影响及其作用机制.方法 随机选取原代培养5d,浓度约为1×109/L的海马细胞,给予不同浓度(0、0.01、0.10、1.00、10.00 μmol/L)紫杉醇,采用噻唑蓝(MTT)法及流式细胞仪检测法分别检测海马神经元细胞抑制率(n=3)及凋亡率(n=4)变化,以此确定紫杉醇诱发细胞凋亡的适浓度.另选取原代培养5d的海马细胞随机分为4组:对照组(C组)、10 μmol/L SB203580处理组(K组)、紫杉醇适浓度处理组(N组)、10 μmol/L SB203580+紫杉醇适浓度混合组(K+N组),培养时间为24h,保持各组加液量一致,Western blot法测定海马细胞GABAB受体及核因子-κB(NF-κB)蛋白表达水平(n=3).结果 紫杉醇对海马细胞活力的抑制具有时间和浓度的交互作用(F=9.127,P<0.05),根据MTT法(n=3)和流式细胞仪法(n=4)检测结果,各浓度紫杉醇处理24h对海马神经元凋亡率的影响差异有统计学意义(F=64.523,P<0.05),并计算出紫杉醇诱发细胞凋亡的适浓度为1 μmol/L[早期凋亡率达(48.63±5.76)%].蛋白表达结果显示(n=3):与C组比较,N组和K+N组GABAB受体与NF-κB表达均明显增高(P<0.05),而K组GABAB受体与NF-κB表达均降低(P<0.05);与K组比较,N组和K+N组NF-κB和GABAB受体表达均增高(P<0.05);与N组比较,K+N组NF-κB和GABAB受体表达均降低(P<0.05).结论 在紫杉醇诱发细胞凋亡过程中,抑制p38MAPKs通路可上调GABAB受体表达,而其下游因子NF-κB可能是其调控GABAB受体表达变化的关键靶点.

    作者:金子;王秀丽;吴川;赵爽;李昭;柴潇潇 刊期: 2015年第03期

  • 免疫负调控分子肿瘤坏死因子诱导蛋白8样蛋白2在甲状腺癌中的表达及其临床意义

    目的 探讨免疫负调控分子肿瘤坏死因子诱导蛋白8样蛋白2(TIPE2)在甲状腺癌中的表达及其临床意义.方法 46例具有完整临床病理资料及5年以上随访资料的石蜡包埋甲状腺癌组织及其配对癌旁组织.采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测TIPE2 mRNA在甲状腺癌及其癌旁组织中的表达水平,应用免疫组织化学法分析TIPE2在甲状腺癌组织和癌旁组织的表达,分析TIPE2表达水平与临床病理特征和患者预后的关系.结果 46例癌组织中TIPE2mRNA的表达量为4.17±3.44,显著低于配对癌旁组织中TIPE2 mRNA的表达(15.34±9.81,Z=-3.825,P<0.01).甲状腺癌组织中,TIPE2高表达16例(34.8%),低表达30例(65.2%);在对应癌旁组织中,TIPE2高表达32例(69.6%),低表达14例(30.4%),差异有统计学意义(x2=9.801,P<0.01).癌组织中TIPE2低表达与甲状腺肿瘤患者的临床分期、淋巴结转移明显相关(P<0.05).TIPE2 mRNA高表达组中位生存时间为84个月[95%可信区间(CI):61 ~97个月],显著高于低表达组(59个月,95% CI:47~79个月,P<0.01).肿瘤组织中TIPE2阳性细胞高表达组的中位生存时间为81个月(95% CI:57~102个月),明显高于TIPE2低表达组(54个月,95%CI:44~81个月,P<0.01).Cox多重回归分析表明TIPE2 mRNA和TIPE2阳性细胞低表达是影响甲状腺癌预后不良的独立指标[风险比(HR)=3.77,95% CI:1.37 ~5.09,P<0.05;HR =3.51,95%CI:2.02~4.66,P<0.05].结论 TIPE2在甲状腺癌组织中表达下调,与甲状腺癌患者预后不良相关.

    作者:郭欣;吴志宇;陈春悠 刊期: 2015年第03期

  • 改良大鼠脊髓损伤模型椎管开窗方法的应用

    脊髓损伤(SCI)是一种目前脊柱外科致残率相当高的疾病,对于这方面的基础研究层出无穷,而建立理想的脊髓损伤模型对于实验研究尤为重要.本研究旨在改良一种新型椎管开窗方法.

    作者:林斌;张文彬;周琴;俞辉 刊期: 2015年第03期

  • 线粒体细胞色素B降低通过丝裂原活化蛋白激酶通路对胃癌发展的影响

    目的 探讨细胞色素B在胃癌发生发展中的作用.方法 收集经病理证实为胃癌的手术患者12例胃癌组织,其中淋巴结转移标本6例,无淋巴结转移标本6例.应用Western blot检测两组胃癌组织凋亡相关因子B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)的表达水平,以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路蛋白表达水平.结果 与无转移组比较,有转移的胃癌组织中促凋亡因子bax表达降低(有转移组∶无转移组=0.55∶1.00,P<0.05),而抑制凋亡因子bcl-2表达增加(有转移组∶无转移组=1.32∶1.00,P<0.05),细胞凋亡水平下降(活化的Caspase-3表达有转移组∶无转移组=2.86∶3.35,P<0.05);有转移的胃癌组织MAPK通路活化水平明显较无转移组降低(P<0.05).结论 胃癌转移与线粒体细胞色素B表达水平下降,从而抑制MAPK通路磷酸化,导致细胞凋亡减少有关.

    作者:鲁力;熊治国;柳玉均;叶啟发 刊期: 2015年第03期

  • 异位胆囊腹腔镜切除13例手术分析

    胆道系统的解剖变异是导致腹腔镜胆囊切除术(LC)胆管损伤、术中术后胆漏等并发症的重要原因.了解胆囊位置的解剖变异、熟悉胆囊管与肝总管的汇合方式、掌握与之相适应的手术技巧,无疑对提高LC手术质量、防止手术并发症具有重要意义.现将2000年以来我院13例异位胆囊患者的临床资料及处理经验报道如下.

    作者:陶桢;夏国兵;裴斐 刊期: 2015年第03期

  • 神经内镜与显微镜下经鼻蝶垂体瘤切除术的对比

    目的 探讨神经内镜与显微镜手术经鼻蝶治疗垂体瘤的效果.方法 遵循随机对照的实验原则,将垂体瘤患者随机分为两组,神经内镜下经鼻蝶治疗垂体瘤40例,同期显微镜下经鼻蝶治疗垂体瘤40例,通过统计分析患者术前一般资料、临床症状、术前影像学检查及内分泌学检查,术中出血量,术中是否出现脑脊液漏,术后住院时间,肿瘤切除情况,症状缓解情况,激素恢复情况及并发症,比较两种术式的手术效果.结果 两组手术均获成功,内镜组和显微镜组术中出血量分别为(48.6±6.0)和(78.4±13.0)ml、术后住院时分别为(5.3±0.8)和(9.1±0.5)d、术中是否出现脑脊液漏内镜组优于显微镜组,且差异有统计学意义(x2=13.131,P<0.05);在术前症状是否缓解(x2 =4.310,P>0.05)、肿瘤是否全切除(x2=5.322,P>0.05)及术后激素恢复情况(x2=8.342,P>0.05)的比较中,内镜组与显微镜组效果相当,差异均无统计学意义;在术后并发症发生率的对比分析中,内镜组并发症发生率明显小于显微镜组,且差异有统计学意义(x2=3.675,P<0.05).结论 神经内镜下经鼻蝶垂体瘤切除术是一种创伤小、操作简便、治疗效果好、并发症相对较少的神经外科技术.

    作者:张红赟;邢振义;孙来广 刊期: 2015年第03期

  • 三氧化二砷对膀胱癌T24细胞生长和裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制

    目的 探讨三氧化二砷(As2O3)对膀胱癌T24细胞生长和裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制.方法 应用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测不同剂量As2O3(1、5、10 μmol/L)和5-氟尿嘧啶(5-Fu,4 μmol/L)对膀胱癌T24细胞生长的体外抑制作用;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测不同剂量As2O3(1、5、10μmol/L)和5-Fu(4μmol/L)作用后膀胱癌T24细胞细胞周期素(Cyclin) D1、p2l、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)表达;观察不同剂量As2O3对[10、20、30 mg/(kg·d)]和5-Fu[20.0 mg/(kg·d)]对T24细胞裸鼠移植瘤生长的体内抑制作用.结果 膀胱癌T24细胞给药48 h后,As2O3低(1μmol/L)、中(5μmol/L)、高(10 μmol/L)剂量组和5-Fu(4μmol/L)细胞抑制率分别为36.53%、67.44%、79.60%和80.90%.荷瘤裸鼠治疗实验以生理盐水组为对照,5-Fu,As2O3低、中、高剂量组的体内抑瘤率分别为54.5%、29.4%、38.8%、52.1%,说明As2O3对裸鼠T24细胞移植瘤的生长有抑制作用.RT-PCR及Western blot结果发现药物作用24 h后,不同剂量(1、5、10 μmol/L)As2 O3均明显降低Cyclin D1和bcl-2表达,p21水平未发生变化,bax表达明显上调.结论 As2O3能明显抑制膀胱癌T24细胞的增殖和裸鼠移植瘤的生长,其作用机制可能与影响细胞周期以及诱导细胞凋亡有关,其中涉及多种基因的调控.

    作者:张士龙;东辛欣;武小强;陈国晓;张祥生;单磊 刊期: 2015年第03期

  • 夏枯草对甲状腺乳头状癌细胞抑制作用及卷曲螺旋结构域蛋白67基因的影响

    目的 观察夏枯草(PV)对甲状腺乳头状癌细胞(TPC-1)的抑制作用,并探讨其对卷曲螺旋结构域67基因(CCDC67)的影响.方法 不同浓度的PV作用TPC-1细胞48h后,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞毒性;用PV作用TPC67(含有目的基因CCDC67的TPC-1)48 h,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中CCDC67 mRNA的表达.结果 PV对TPC-1有明显抑制作用(F=133.476,P<0.01),且抑制作用具有明显浓度依赖性(r2 =0.983);经PV处理TPC67细胞48h后CCDC67 mRNA的表达量增强,实验组(0.779±0.055)明显高于阴性对照组(0.318±0.109,p<0.05).结论 PV对TPC-1细胞的增殖有明显抑制作用,PV可上调CCDC67基因的表达.

    作者:殷德涛;雷梦园;许建辉;王勇飞;李红强;王庆端 刊期: 2015年第03期

  • 银离子敷料在慢性伤口疗效及炎性因子变化的观察

    目的 观察银离子敷料对慢性伤口的疗效及患者血清炎性因子的变化.方法 取19例慢性伤口患者为治疗组,40例门诊正常体检者为对照组.治疗组创面经38 ~40℃乳酸钠林格氏液清创,采用银离子敷料+藻酸钙渗液吸收贴覆盖,伤口渗出明显时更换敷料.治疗后2个月时评估治疗有效率;分别于治疗前、治疗后2个月取伤口分泌物行细菌培养,比较治疗前后患者伤口的细菌定植情况;分别于治疗前、治疗后2个月时抽取治疗组患者血清以及对照组血清,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中炎性因子白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-12、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平.结果 银离子敷料治疗慢性伤口有效率为89.47%;伤口细菌检出率由治疗前15例降低到治疗后2例;治疗前患者血清中IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α水平均较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),但治疗后的水平较治疗前有所降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 银离子敷料能显著降低慢性伤口中的细菌定植,同时下调患者血清中炎性因子IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α水平.

    作者:戴亚芬;韩云芳;农鲁明;徐慧黎;许钰;褚育新 刊期: 2015年第03期

  • 一种小鼠胰岛肾被膜下移植方法及效果评价

    目的 介绍一种简易的小鼠胰岛肾被膜下移植方法,并对移植后小鼠血糖、糖耐量和组织学进行评价.方法 采用BALB/c小鼠,胰岛采用小鼠逆行胆总管灌注胶原酶和Histopaque密度梯度液纯化,经手工挑选和简单培养之后,采用注射器结合电泳点样吸头将胰岛推注移植至糖尿病小鼠的肾被膜下,定期检测小鼠血糖、糖耐量试验,并于第10天取移植胰岛的肾,对肾被膜下胰岛进行苏木素-伊红(HE)和免疫荧光染色.结果 同时消化4只小鼠可得胰岛的数量为(1 063±122)个,当量为1 259.72±107.19,胰岛移植后小鼠血糖均在24 h内降至正常水平,糖耐量结果显示移植后小鼠的血糖值显著低于糖尿病小鼠(P<0.01),免疫荧光染色结果显示移植后胰岛活性良好[(92.8±2.6)%].结论 本实验方法操作简易,移植后胰岛活性良好,为进一步进行胰岛移植相关的体内外药物筛选等研究奠定了基础.

    作者:吴岚岚;傅红兴;张庆平;蒋煊;张伟;刘成洋;杨露宇;贺梦辉 刊期: 2015年第03期

  • 奥曲肽对肝星状细胞活性的影响及在肝纤维化形成中的意义

    目的 采用肝星状细胞(HSCs)株LX-2探讨不同浓度奥曲肽对该细胞生物学活性的影响及其在肝纤维化形成中的作用机制.方法 应用噻唑蓝(MTT)法检测奥曲肽对LX-2细胞增殖的影响;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法分析用奥曲肽处理后,细胞中转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Smad-4及c-Jun的转录水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测LX-2培养上清中Ⅰ型胶原的水平;小干扰RNA (siRNA)和染色质免疫共沉淀技术检测c-Jun对TGF-β1表达的调控及其对TGF-β启动子的结合.结果 奥曲肽能抑制LX-2细胞的增殖能力,细胞增殖以浓度依赖的方式显著降低(P<0.05),当奥曲肽浓度为10-7 nmol/L和10-5 nmol/L时,其抑制率分别为27.5%和49.8%,奥曲肽组与对照组比较,能显著降低TGF-β1、α-SMA、Smad-4及c-Jun的表达(P<0.05),同时上清中Ⅰ型胶原水平明显减少(P<0.05),沉默c-Jun的表达后,TGF-β1的表达显著降低.结论 奥曲肽可通过抑制HSCs的增殖,降低α-SMA、Smad-4及c-Jun的表达,进而调控TGF-β1,减少Ⅰ型胶原的分泌,从而减缓纤维化的发生,对降低门静脉高压可能有重要的临床意义.

    作者:孙涛;逯素梅;王晶晶 刊期: 2015年第03期

  • 去甲斑蝥素对胆管癌RBE细胞组织化学及超微结构的影响

    目的 观察去甲斑蝥素对人胆管癌RBE细胞组织化学及超微结构的影响,探讨去甲斑蝥素对胆管癌细胞作用机制.方法 体外培养胆管癌RBE细胞,采用不同5~40 mg/L去甲斑蝥素处理,吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色统计RBE细胞凋亡率,并观察形态学变化,扫描电镜观察去甲斑蝥素影响下胆管癌RBE细胞表面超微结构的变化,透射电镜观察细胞内超微结构的变化.结果 应用AO/EB荧光染色观察,随去甲斑蝥素剂量加大,胆管癌RBE细胞凋亡率升高,40 mg/L作用24 h后凋亡细胞占(83.1±15.6)%.光镜和扫描电镜下形态学呈现典型的凋亡变化,可见凋亡小体的形成.透射电镜可以观察到细胞核呈新月状改变.结论 去甲斑蝥素可以引起胆管癌RBE细胞显微和超微结构改变,这些改变可能与细胞凋亡和侵袭力改变等变化密切相关.

    作者:边伟;王天阳;李秋生;张小艳;辛清旺;刘三光 刊期: 2015年第03期

  • 电针足三里对烫伤后胞壁酰二肽诱导的大鼠脓毒症的影响

    目的 观察电针足三里对烫伤后胞壁酰二肽诱导的大鼠脓毒症的影响.方法 健康雄性SD大鼠60只,体质量200 ~ 250 g,2~3个月龄,随机分为6组(n=10):对照组(C)、足三里组(E)、胞壁酰二肽组(MDP)、非经非穴组(NE)、α-银环蛇毒素组(α-BGT)和烫伤组(S).E、MDP、NE及α-BGT组予以烫伤后静脉注射MDP 5 mg/kg构建大鼠烫伤后脓毒症模型.C组尾静脉注射生理盐水1 ml.E组于双侧足三里穴电针刺激;NE组于双侧足三里穴旁5 mm处给予脉冲刺激;α-BGT组股静脉注射α-BGT 1.0 μg/kg后双侧足三里穴给予脉冲刺激,S组仅烫伤处理.各组大鼠于电针后48 h,取腹主动脉血、肺组织,光镜下观察肺组织病理结果;电镜下观察肺组织超微结构的改变;检测大鼠腹主动脉血血气分析、血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的含量.结果 经烫伤后大鼠急性肺损伤明显,MDP组大鼠血清TNF-α[(52±8) ng/L]、IFN-γ[(42 ±6) ng/L]、HMGB1[(33 ±6)μg/L]和血乳酸(La)值[(6.1±1.5)mmol/L]较S组TNF-α[(39 ±6) ng/L]、IFN-γ[(34 ±6) ng/L]、HMGB1[(25 ±4)μg/L]和血La值[(3.1±1.3)mmol/L]升高(P<0.05),血pH值(6.9±0.8)、PaO2[(43 ±6) mmHg(1 mmHg =0.133 kPa)]较S组pH值[7.4±0.6]、PaO2[(59±8)mmHg]降低(P<0.05);与MDP组比较,E组大鼠血清TNF-α[(22±3)ng/L]、IFN-γ[(20 ±4) ng/L]、HMGB1[(11±3)μg/L]和血La值[(3.2±1.1)mmol/L]降低(P<0.05),动脉血pH值(7.3±0.9)、PaO2[(60 ±8)mmHg]升高(P<0.05),肺组织病理损伤明显减轻.结论 MDP可以加重烫伤后大鼠的急性肺损伤及酸中毒,电针足三里穴可减轻烫伤后MDP诱导的脓毒症致大鼠急性肺损伤,机制可能与激活含α7亚基N型胆碱能受体(α7 nAchRs)介导的胆碱能抗炎通路有关.

    作者:张赤;王焱林;宋学敏;乐林莉;张宗泽 刊期: 2015年第03期

中华实验外科杂志

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