戴亚芬；韩云芳；农鲁明；徐慧黎；许钰；褚育新
目的 探讨免疫负调控分子肿瘤坏死因子诱导蛋白8样蛋白2(TIPE2)在甲状腺癌中的表达及其临床意义.方法 46例具有完整临床病理资料及5年以上随访资料的石蜡包埋甲状腺癌组织及其配对癌旁组织.采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测TIPE2 mRNA在甲状腺癌及其癌旁组织中的表达水平,应用免疫组织化学法分析TIPE2在甲状腺癌组织和癌旁组织的表达,分析TIPE2表达水平与临床病理特征和患者预后的关系.结果 46例癌组织中TIPE2mRNA的表达量为4.17±3.44,显著低于配对癌旁组织中TIPE2 mRNA的表达(15.34±9.81,Z=-3.825,P＜0.01).甲状腺癌组织中,TIPE2高表达16例(34.8％),低表达30例(65.2％);在对应癌旁组织中,TIPE2高表达32例(69.6％),低表达14例(30.4％),差异有统计学意义(x2=9.801,P＜0.01).癌组织中TIPE2低表达与甲状腺肿瘤患者的临床分期、淋巴结转移明显相关(P＜0.05).TIPE2 mRNA高表达组中位生存时间为84个月[95％可信区间(CI):61 ～97个月],显著高于低表达组(59个月,95％ CI:47～79个月,P＜0.01).肿瘤组织中TIPE2阳性细胞高表达组的中位生存时间为81个月(95％ CI:57～102个月),明显高于TIPE2低表达组(54个月,95％CI:44～81个月,P＜0.01).Cox多重回归分析表明TIPE2 mRNA和TIPE2阳性细胞低表达是影响甲状腺癌预后不良的独立指标[风险比(HR)=3.77,95％ CI:1.37 ～5.09,P＜0.05;HR =3.51,95％CI:2.02～4.66,P＜0.05].结论 TIPE2在甲状腺癌组织中表达下调,与甲状腺癌患者预后不良相关.
作者：郭欣；吴志宇；陈春悠 刊期： 2015年第03期
目的 探讨胃癌患者血清甲壳质酶蛋白40(YKL-40)表达水平及临床意义.方法 采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测30例正常人及60例胃癌患者血清中YKL-40的表达水平,并比较36例胃癌患者手术前后血清YKL-40水平.结果 胃癌患者血清YKL-40水平(250.83±84.39) μg/L明显高于正常对照组(72.06 ±17.08) μg/L,两两之间比较差异有统计学意义(P＜0.01);血清YKL-40水平与胃癌患者性别、年龄无明显相关,与胃癌患者临床分期、肿瘤细胞分化程度有明显相关;Ⅳ期[(362.27±18.64)μg/L]明显高于Ⅲ期[(296.20±25.49) μg/L]、Ⅲ期明显高于Ⅱ期[(212.77 ±24.17) μg/L]、Ⅱ期明显高于Ⅰ期[(136.25 ±20.83) μg/L]、Ⅰ期明显高于正常对照组、两者比较差异有统计学意义(P＜0.01),肿瘤细胞分化程度较差(低分化腺癌、黏液腺癌)胃癌患者血清YKL-40水平[(284.88±68.96) μg/L]明显高于肿瘤细胞分化程度较好(高分化腺癌、中分化腺癌)胃癌患者[(222.97±86.54) μg/L,P＜0.01];胃癌患者手术后血清YKL-40水平[(191.06±58.33)μg/L]明显低于手术前[(196.14±58.31) μg/L],两者比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 YKL-40可能参与胃癌的发生发展过程.
作者：杨勤；黄昕；江亮；梁卫明；周才进 刊期： 2015年第03期
目的 介绍一种简易的小鼠胰岛肾被膜下移植方法,并对移植后小鼠血糖、糖耐量和组织学进行评价.方法 采用BALB/c小鼠,胰岛采用小鼠逆行胆总管灌注胶原酶和Histopaque密度梯度液纯化,经手工挑选和简单培养之后,采用注射器结合电泳点样吸头将胰岛推注移植至糖尿病小鼠的肾被膜下,定期检测小鼠血糖、糖耐量试验,并于第10天取移植胰岛的肾,对肾被膜下胰岛进行苏木素-伊红(HE)和免疫荧光染色.结果 同时消化4只小鼠可得胰岛的数量为(1 063±122)个,当量为1 259.72±107.19,胰岛移植后小鼠血糖均在24 h内降至正常水平,糖耐量结果显示移植后小鼠的血糖值显著低于糖尿病小鼠(P＜0.01),免疫荧光染色结果显示移植后胰岛活性良好[(92.8±2.6)％].结论 本实验方法操作简易,移植后胰岛活性良好,为进一步进行胰岛移植相关的体内外药物筛选等研究奠定了基础.
作者：吴岚岚；傅红兴；张庆平；蒋煊；张伟；刘成洋；杨露宇；贺梦辉 刊期： 2015年第03期
目的 比较通道下微创经椎间孔腰椎椎体间融合术(MIS-TLIF)与传统切开后路腰椎椎体间融合术(PLIF)对单节段腰椎间盘突出症(LDH)的近期治疗效果.方法 采用椎间融合手术治疗的单节段腰椎间盘突出症患者29例.根据手术方式分为两组:MIS-TLIF组共15例,PLIF组共14例.观察两组患者手术时间、术中出血量、术后引流量、切口长度及术后下地时间,并采用日本骨科协会(JOA)评分,比较两组近期治疗效果.结果 MIS-TLIF组JOA术前评分为(13.7±4.4)分,术后评分为(24.5±1.8)分,两者差异有统计学意义(P＜0.05).PLIF组JOA术前评分为(15.5±5.6)分,术后评分为(25.0±1.8)分,两者差异有统计学意义(P＜0.05).关于手术时间、术中出血量、切口长度、术后下地时间及JOA评分改善率,MIS-TLIF组分别为(140±23) min、(77±47) ml、(54.5 ±3.2) mm、(3.1±0.7)d、(70.9±9.5)％,PLIF组分别为(148±16) min、(319±302) ml、(90.1±6.2) mm、(47.7±6.9)d、(69.7±10.2)％.MIS-TLIF组均未放置引流管,PLIF组术后引流量为(424±253) ml.两组间比较手术时间、JOA评分改善率差异无统计学意义(P＞0.05).MIS-TLIF组手术出血量、术后引流量、切口长度、术后下地时间均低于PLIF组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 与PLIF比较,MIS-TLIF对于单节段腰椎间盘突出症同样具有良好的近期治疗效果,并且在手术出血量、术后引流量、切口长度和术后下地时间方面优于PLIF.
作者：郭鑫；皮国富；刘宏建；王卫东；韩钰；李立人；孙建广 刊期： 2015年第03期
目的 观察去甲斑蝥素对人胆管癌RBE细胞组织化学及超微结构的影响,探讨去甲斑蝥素对胆管癌细胞作用机制.方法 体外培养胆管癌RBE细胞,采用不同5～40 mg/L去甲斑蝥素处理,吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色统计RBE细胞凋亡率,并观察形态学变化,扫描电镜观察去甲斑蝥素影响下胆管癌RBE细胞表面超微结构的变化,透射电镜观察细胞内超微结构的变化.结果 应用AO/EB荧光染色观察,随去甲斑蝥素剂量加大,胆管癌RBE细胞凋亡率升高,40 mg/L作用24 h后凋亡细胞占(83.1±15.6)％.光镜和扫描电镜下形态学呈现典型的凋亡变化,可见凋亡小体的形成.透射电镜可以观察到细胞核呈新月状改变.结论 去甲斑蝥素可以引起胆管癌RBE细胞显微和超微结构改变,这些改变可能与细胞凋亡和侵袭力改变等变化密切相关.
作者：边伟；王天阳；李秋生；张小艳；辛清旺；刘三光 刊期： 2015年第03期
目的 观察钙蛋白酶Ⅰ (Calpain Ⅰ)通过糖原合成酶激酶3β(GSK3β)对脊髓损伤后炎症纤维化的调节作用.方法 将20只SD大鼠随机分为对照组、模型组.通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot、苏木素-伊红(HE)染色检测各组差异.结果 与对照组比较,模型组大鼠脊髓损伤后炎症纤维化显著,钙蛋白酶Ⅰ、GSK3β、Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)的表达均显著升高(0.92±0.04、0.91 ±0.06、1.19±0.02、1.07±0.03,P＜0.05).应用蛋白酶抑制剂SJA6017干预后,大鼠脊髓瘢痕面积缩小[对照组比模型组(3.37 ±0.04) mm2比(1.13±0.01) mm2,P＜0.05]、损伤部位炎症因子[对照组比模型组(350±41) ng/L比(46 ±7) ng/L,P＜0.05]及纤维化蛋白表达[对照组比模型组(290±16) μg/L比(19 ±3) μg/L,P＜0.05]改善,GSK3β表达降低为0.42 ±0.02和0.35 ±0.03(P ＜0.05).结论 钙蛋白酶Ⅰ通过GSK3β对脊髓损伤后炎症纤维化的调节发挥作用.
作者：刘涛；曹富江；徐云强；冯世庆 刊期： 2015年第03期
心脏永久起搏器是治疗缓慢心律失常的有效手段,起搏器置入术后,囊袋感染是常见及严重的并发症之一[1];国内外指南建议起搏器感染需要移除全套起搏器系统,但拔出电极所需要的技术及设备要求较高[2-3];负压封闭引流(VSD)使用医用泡沫置于创面,并用半通透性的薄膜密闭创面,使伤口保持在负压状态,在骨科及整形外科中被广泛应用[4].我们参考VSD在外科中的应用,采用负压闭式引流的方法治疗起搏器囊袋局部感染,现报道如下.
作者：张韩；张永乐；陈颖；李彦明；王治中；闫成芸；万琪琳 刊期： 2015年第03期
胃癌是发病率第4位的恶性肿瘤,每年有将近1 000 000例的新发病例;而胃癌的死亡率高居第2位,每年死于胃癌的人数超过700000例[1].超过70％的新发和死亡病例来自发展中国家,尤其是在亚洲东部和欧洲中东部[1].
作者：郭继武；王涛；何雯婷；李玉民 刊期： 2015年第03期
目的 采用肝星状细胞(HSCs)株LX-2探讨不同浓度奥曲肽对该细胞生物学活性的影响及其在肝纤维化形成中的作用机制.方法 应用噻唑蓝(MTT)法检测奥曲肽对LX-2细胞增殖的影响;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法分析用奥曲肽处理后,细胞中转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Smad-4及c-Jun的转录水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测LX-2培养上清中Ⅰ型胶原的水平;小干扰RNA (siRNA)和染色质免疫共沉淀技术检测c-Jun对TGF-β1表达的调控及其对TGF-β启动子的结合.结果 奥曲肽能抑制LX-2细胞的增殖能力,细胞增殖以浓度依赖的方式显著降低(P＜0.05),当奥曲肽浓度为10-7 nmol/L和10-5 nmol/L时,其抑制率分别为27.5％和49.8％,奥曲肽组与对照组比较,能显著降低TGF-β1、α-SMA、Smad-4及c-Jun的表达(P＜0.05),同时上清中Ⅰ型胶原水平明显减少(P＜0.05),沉默c-Jun的表达后,TGF-β1的表达显著降低.结论 奥曲肽可通过抑制HSCs的增殖,降低α-SMA、Smad-4及c-Jun的表达,进而调控TGF-β1,减少Ⅰ型胶原的分泌,从而减缓纤维化的发生,对降低门静脉高压可能有重要的临床意义.
作者：孙涛；逯素梅；王晶晶 刊期： 2015年第03期
目的 观察微小RNA-874(miR-874)对胶质瘤细胞U87增殖和凋亡的影响.方法 通过实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测6例手术获取的非肿瘤脑组织和12例胶质母细胞瘤组织miR-874的表达;体外培养人胶质瘤细胞U87分别转染无义序列(对照组)和合成miR-874模拟体(实验组),FQ-PCR检测转染后U87细胞miR-874的表达;采用噻唑蓝(MTT)实验评估U87细胞的增殖;采用流式细胞术检测U87细胞周期和凋亡.结果 miR-874在胶质母细胞瘤组织的表达量明显低于非肿瘤脑组织,合成miR-874模拟体可以上调U87细胞miR-874的表达水平(实验组:638.00±80.63;对照组:0.17±0.04,P＜0.05),进而抑制U87细胞的增殖(48 h:实验组:0.357±0.026;对照组:0.589±0.021,P＜0.05;72 h:实验组:0.522±0.034;对照组:0.834±0.035,P＜0.05);上调U87细胞miR-874的表达导致G0/G1期细胞比例增加[实验组:(56.28±1.62)％;对照组:(48.57±0.88)％,P＜0.05],同时促进U87细胞凋亡[实验组:(12.50±0.66)％;对照组:(4.91±0.15)％,P＜0.05].结论 miR-874在胶质母细胞瘤中低表达.miR-874与胶质瘤发生、发展密切相关,可能是胶质瘤诊断和治疗的有效靶点.
作者：杜春发；王琼；张飚；尚超；豆玉超；王金环 刊期： 2015年第03期
目的 探讨芳香烃基受体相互作用蛋白(AIP)基因在国人垂体生长激素腺瘤中的体细胞突变与临床生化特征相关性.方法 收集96例垂体生长激素腺瘤患者的肿瘤标本进行检测,分析临床随访资料.结果 在对55例(57.3％)肿瘤标本中测序发现13个突变位点,其中,c.609C ＞G,c.646-38C＞T,c.646-35C＞T,c.646-34A＞T和c.692C＞T 5种类型尚未在国家生物技术信息中心(NCBI)单核苷酸多态性(SNP)数据库中报道过,为新发现AIP基因突变位点.AIP基因突变与患者起病年龄、肿瘤大直径、肿瘤侵袭性以及是否为复发肿瘤明显相关.在AIP基因突变组中,患者起病年龄明显偏低,比较于未突变组肿瘤体积更大、侵袭性更强、术后更容易复发.结论 在散发性生长激素腺瘤中,AIP基因突变检测可能对患者预后的判断、治疗策略的制定,以及随访就诊有指导意义.
作者：雷琢玮；陈娟；谢蕊繁；李朝曦；淦超；徐钰；叶飞；孙玉洁；韩晓 刊期： 2015年第03期
目的 观察双氢青蒿素(DHA)诱导人骨肉瘤细胞TE85凋亡,探讨其机制.方法 将不同浓度的DHA(0、10、20、40 μmol/L)作用于人骨肉瘤细胞TE85 24 h后,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)染色,流式细胞仪检测细胞的凋亡;同时检测人骨肉瘤细胞中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和过氧化氢酶(CAT)含量的变化以及线粒体膜电位的变化.结果 DHA作用24h后,0、10、20、40 μmol/L组TE85细胞的凋亡率分别为0.05％、8.17％、25.53％、47.26％.各组细胞中ROS含量分别为1.6600±0.0081、1.7100±0.019 7、1.7920±0.0203和1.8540±0.0194,差异有统计学意义(P＜0.05);细胞中MDA含量分别为(0.105±0.024)、(0.461±0.008)、(0.572±0.022)、(0.569±0.015) nmol/mg蛋白,差异有统计学意义(P＜0.05);随着DHA剂量的增加,细胞中CAT含量明显降低[分别为(26.750±0.533)、(14.460±0.169)、(14.020±0.104)和(12.640±0.215) U/mg prot,P＜0.05],细胞线粒体膜电位明显降低(分别为1.663±0.008、1.711±0.019、1.792±0.020和1.854±0.019,P＜0.05).结论 DHA可通过诱发人骨肉瘤细胞TE85内的氧化应激和线粒体功能障碍,进而诱导人骨肉瘤细胞TE85发生凋亡.
作者：李杰；张丰泉；杜振宁；蔡腾；蔡朋杉；范磊 刊期： 2015年第03期
随着对于肝脏微环境研究的不断深入,肝细胞与各种非实质细胞共培养从而发挥异质细胞间相互作用的研究日益受到关注[1-2].我们采用肝细胞和骨髓间充质干细胞(BMSCs)共微囊化培养后,观察BMSCs对肝细胞功能的支持作用,并将其移植入急性肝功能衰竭(ALF)大鼠腹腔内,观察ALF大鼠生存率、肝功能和病理变化.
作者：张悦；陈学敏；孙冬林 刊期： 2015年第03期
目的 观察大鼠胸腺内注射自体脑细胞诱导免疫耐受对于手术脑损伤的治疗效果.方法 24只SD雄性大鼠随机分为3组,每组8只,A组:手术脑损伤治疗组,B组:生理盐水对照组,C组:假手术组;术后1、3、7、14、21 d行改良大鼠神经功能缺陷评分(MNSS)、头颅核磁(MRI)检测脑水肿体积;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测外周血转化生长因子-β1(TGF-β1)、γ-干扰素(IFN-γ)浓度,流式细胞仪检测外周血CD4 +/CD8+T细胞比值.结果 与B组比较,A组大鼠神经功能恢复明显增快、脑水肿时限明显缩短(P＜0.05),其脑水肿体积(mm3)分别为[(39.41 ±3.68、80.91 ±7.50、92.25±7.06、74.53±7.05、47.80±10.00)、(42.21±4.11、87.07±4.70、108.56±10.29、97.58±12.75、65.96±11.85)];A组血清TGF-β1浓度(ng/L)在术后1、3、7d呈升高趋势,且均数高于B组(P＜0.05),浓度(ng/L)分别为[(751.96±50.24、780.99±50.23、853.20±14.81)、(704.55±36.89、724.54±18.72、804.13 ±50.07)];A组IFN-γ浓度在术后7、14、21 d呈下降趋势且均数低于B组(P＜0.05),浓度(ng/L)分别为[(132.60±19.89、129.89 ±21.12、106.34±23.91)、(164.43 ±32.52、179.98 ±40.21、157.46 ±50.68)];A组CD4 +/CD8+T比值在术后7、14 d呈下降趋势,在14d低(P＜0.05),比值为1.43±0.20;与C组比较,B组TGF-β1浓度在3、7、14 d呈升高趋势且均值较高(P＜0.05),浓度(ng/L)分别为[(724.54±18.72、804.13±50.07、808.33 ±62.12)、(646.66±94.53、652.62±98.80、619.39 ±89.20)],IFN-γ浓度在1、3、7、14d呈升高趋势且均值较高(P＜0.05),其浓度(ng/L)分别为(113.38±15.42、133.56±26.10、164.43±32.52、179.98 ±40.21)、(83.08±12.70、87.76±14.10、103.27±22.19、97.29± 13.98)];B组CD4 +/CD8+T比值在3、7、1d持续升高,比值分别为1.68 ±0.31、2.00±0.30、2.20±0.27.结论 胸腺内注射自体脑细胞诱导免疫耐受可减轻手术脑损伤后脑水肿及神经系统炎性反应,有利于神经系统功能恢复.
作者：张明超；亢建民；崔占群；范维佳；刘保龙；闫华 刊期： 2015年第03期
目的 观察银离子敷料对慢性伤口的疗效及患者血清炎性因子的变化.方法 取19例慢性伤口患者为治疗组,40例门诊正常体检者为对照组.治疗组创面经38 ～40℃乳酸钠林格氏液清创,采用银离子敷料+藻酸钙渗液吸收贴覆盖,伤口渗出明显时更换敷料.治疗后2个月时评估治疗有效率;分别于治疗前、治疗后2个月取伤口分泌物行细菌培养,比较治疗前后患者伤口的细菌定植情况;分别于治疗前、治疗后2个月时抽取治疗组患者血清以及对照组血清,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中炎性因子白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-12、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平.结果 银离子敷料治疗慢性伤口有效率为89.47％;伤口细菌检出率由治疗前15例降低到治疗后2例;治疗前患者血清中IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α水平均较对照组明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05),但治疗后的水平较治疗前有所降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 银离子敷料能显著降低慢性伤口中的细菌定植,同时下调患者血清中炎性因子IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α水平.
作者：戴亚芬；韩云芳；农鲁明；徐慧黎；许钰；褚育新 刊期： 2015年第03期
目的 观察聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)骨水泥加入唑来膦酸后机械性能的变化,以及唑来膦酸在体外的释放.方法 将唑来膦酸与骨水泥以不同质量比混合,制成复合骨水泥试件,并分为A(0 mg)、B(4 mg)、C(20 mg)、D(40 mg)、E(80 mg)5组,每组8个标本,测定其机械性能及药物释放.结果 随载药量增加,复合骨水泥抗压、抗弯强度下降.抗压强度低值为78.99 mPa,抗弯强度低值为81.92 mPa,均高于国际标准.A组与B组间抗压强度、抗弯强度差异无统计学意义(P＞0.05),与C、D、E间差异有统计学意义(P＜0.05).唑来膦酸在前3d释放显著,1周后处于微量释放状态.结论 唑来膦酸可从PMMA骨水泥中释放,44 g PMMA加入不大于80 mg的唑来膦酸不会对骨水泥的机械性能产生影响.
作者：杨博；邓洲铭；侯明明；蔡林 刊期： 2015年第03期
我们采用大鼠原位肝移植模型,以姜黄素(CUR)进行预处理,探讨大鼠原位移植肝缺血/再灌注(I/R)所致急性肺损伤(ALI)的发病机制及CUR预处理的作用.
作者：刘贺；张加强；阮孝国 刊期： 2015年第03期
目的 分选人乳腺癌多西他赛(Docetaxel)耐药细胞株BT549/Docetaxel干细胞,探讨其生物学特征.方法 采用悬浮培养联合多西他赛法分选耐药细胞株BT549/Docetaxel干细胞,采用悬浮培养法富集BT549、BT549/Docetaxel干细胞,进行CD44、CD24细胞标记和流式细胞仪检测,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测BT549、BT549/Docetaxel干细胞中三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2 (ABCG2)基因表达.结果 BT549/Docetaxel与BT549干细胞的群体倍增时间分别为(39.22 ±0.65)、(29.20 ±0.50)h,差异有统计学意义(P＜0.05).流式分析显示,BT549微球体细胞的CD44 +/CD24-/low比例为(13.8±0.5)％,高于单层培养BT549细胞的比例(2.8±0.6)％(P＜0.01).BT549/Docetaxel微球体细胞的CD44 +/CD24-/low比例为(19.1±0.3)％,高于单层培养BT549/Docetaxel细胞的比例(5.0±0.4)％(P＜0.01).BT549/Docetaxel微球体细胞的CD44+/CD24-/low比例高于BT549微球体细胞的CD44 +/CD24-/low比例,差异有统计学意义(P＜0.05).BT549干细胞内药物的含量为(46.9 ±0.5)ng/106个细胞,BT549/Docetaxel干细胞内药物的含量为(7.1±0.3)ng/106个细胞,两者比较差异有统计学意义(P＜0.01).正常培养基培养4h后,BT549细胞内药物的含量为(28.3±0.6) ng/106个细胞,BT549/Docetaxel细胞内药物的含量(3.5±0.1) ng/106个细胞,两者比较差异有统计学意义(P＜0.01).ABCG2的mRNA在BT549/Docetaxel干细胞内表达量明显高于在BT549干细胞内中的表达,两者差异有统计学意义(P＜0.01).结论 成功筛选人乳腺癌多西他赛耐药细胞株BT549/Docetaxel干细胞,生长及耐药性稳定.ABCG2基因在BT549/Docetaxel干细胞内表达量明显增高.
作者：李文涛；孙文聪；邓萌；王磊；黄毅；刘秋荣；王冰；冯淑曼；刘秋雨 刊期： 2015年第03期
目的 观察吲哚胺-2,3-双加氧酶(IDO)抑制剂1-甲基色氨酸(1-MT)联合外周血单个核细胞(PBMC)对人胶质瘤细胞A172的免疫杀伤作用.方法 采用Ficoll密度梯度离心分离健康人外周血制备PBMC,根据是否联合1-MT分组.细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测梯度1-MT(0、25、125、250、500 μmol/L;1、2、4、8、10 mmol/L)联合PBMC对A172细胞存活率影响.1-MT(500 μmol/L)联合PBMC与A172细胞共培养,流式双染术检测A172细胞凋亡率,Western blot检测A172细胞IDO蛋白表达,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测PBMC中调节T细胞叉头样螺旋转录因子(Foxp3) mRNA表达.结果 在PBMC数量一定情况下,1-MT呈剂量依赖性抑制A172细胞存活率;1-MT联合PBMC组细胞凋亡比率(45.0％)显著高于PBMC组(20.0％)及1-MT组(33.7％);PBMC组A172细胞IDO蛋白相对表达量(0.313±0.017)明显高于1-MT联合PBMC组(0.182±0.015,P＜0.01),1-MT、A172空白组未见明显IDO蛋白表达;PBMC组PBMC中Foxp3mRNA表达(2.764±0.180)明显高于1-MT联合PBMC组(2.189 ±0.179,P＜0.05)及PBMC空白组(1.000±0.028,P＜0.01),1-MT联合PBMC组明显高于PBMC空白组(P＜0.01).结论 1-MT可抑制IDO表达,下调PBMC中Foxp3转录因子表达,降低调节性T细胞增殖分化,可增强PBMC对胶质瘤细胞免疫杀伤作用.
作者：赵程程；张猛；张秋生；王传方；刘文兰；李维平 刊期： 2015年第03期
目的 检测大肿瘤抑制基因1(LATS1)在人胃腺癌组织的表达,探讨LATS1过表达对胃癌细胞增殖和转移的作用及其分子机制.方法 免疫组织化学法和实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测LATS1在30例人胃腺癌及癌旁组织的表达.利用慢病毒载体构建稳定过表达LATS1的胃癌SGC-7901细胞株,Western blot检测LATS1、增殖细胞核抗原(PCNA)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达水平.噻唑蓝(MTT)法和Transwell实验检测LATS1过表达对胃癌细胞增殖和转移的影响.结果 与癌旁组织(1.53±0.63)比较,LATS1 mRNA在胃腺癌的表达量约为0.41±0.12,其蛋白在胃腺癌组织的阳性表达较低(30.0％比60.0％,P＜0.05).体外实验显示,LATS1上调表达能减少PCNA和MMP-2蛋白的表达,并抑制胃癌细胞增殖活性.与对照组[(90.25±10.33)个]和空载组[(87.20±8.40)个]穿过小室的细胞数比较,LATS1组胃癌侵袭转移细胞数[(43.33±6.33)个]明显减少(P＜0.01).结论 LATS1在人胃腺癌组织低表达,其过表达能抑制胃癌细胞的增殖和侵袭潜能.
作者：陆雯雯；张靖；张瑞；夏丽琼；朱金水 刊期： 2015年第03期
中华实验外科杂志
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主办：中华医学会
