张明超；亢建民；崔占群；范维佳；刘保龙；闫华
目的 探讨肾癌患者预后影响因素.方法 分析我院收治306例肾癌患者一般情况、临床病理特征及预后情况,获访253例(82.7％).数据应用Kaplan-Meier法进行单因素生存分析,采用Cox比例风险模型进行多因素分析.结果 253例患者中位随访时间为32.3个月(3～75个月).术后1、3、5年总生存率分别为98.3％、89.4％、83.7％.单因素分析表明,肿瘤直径、美国东部肿瘤协作组(ECOG)评分、Fuhmian分级、肿瘤分期、侵犯包膜、集合系统受累、静脉癌栓和辅助治疗与患者的预后有关.多因素分析结果显示,ECOG评分(P＜0.05)、Fuhrman分级(P＜0.05)、肿瘤分期(P＜0.01)是影响肾癌患者预后的独立因素.结论 ECOG评分、Fuhrman分级和肿瘤分期是影响肾癌患者预后的独立因素.
作者：张艳红；马社君；王少芳；李智勇；王颖 刊期： 2015年第03期
目的 探讨食管癌相关基因4(ECRG4)在食管癌中的抑癌功能及其机制.方法 构建ECRG4基因表达质粒pcDNA3.1-ECRG4,筛选ECRG4稳定转染细胞株.通过细胞增殖曲线和裸鼠移植瘤实验检测ECRG4过表达对食管癌细胞体外增殖和体内裸鼠成瘤能力的影响;流式细胞仪检测ECRG4过表达对食管癌细胞细胞周期的影响;Western blot检测食管癌细胞中ECRG4过表达,细胞周期调控基因p53和p21蛋白表达的变化.结果 ECRG4基因过表达,食管癌细胞体外增殖和体内裸鼠移植瘤生长减缓,体内肿瘤生长抑制率为48.5％,和空载质粒对照组比较,差异有统计学意义(P ＜0.05);ECRG4基因过表达诱导食管癌细胞细胞周期G1期阻滞,和空载质粒对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);ECRG4基因过表达,导致食管癌细胞中p53和p21蛋白表达增加,与空载质粒对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 ECRG4通过p53通路诱导食管癌细胞细胞周期G1期阻滞.
作者：李晓燕；李林蔚；王文玉；高天慧；周云 刊期： 2015年第03期
目的 观察微小RNA-874(miR-874)对胶质瘤细胞U87增殖和凋亡的影响.方法 通过实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测6例手术获取的非肿瘤脑组织和12例胶质母细胞瘤组织miR-874的表达;体外培养人胶质瘤细胞U87分别转染无义序列(对照组)和合成miR-874模拟体(实验组),FQ-PCR检测转染后U87细胞miR-874的表达;采用噻唑蓝(MTT)实验评估U87细胞的增殖;采用流式细胞术检测U87细胞周期和凋亡.结果 miR-874在胶质母细胞瘤组织的表达量明显低于非肿瘤脑组织,合成miR-874模拟体可以上调U87细胞miR-874的表达水平(实验组:638.00±80.63;对照组:0.17±0.04,P＜0.05),进而抑制U87细胞的增殖(48 h:实验组:0.357±0.026;对照组:0.589±0.021,P＜0.05;72 h:实验组:0.522±0.034;对照组:0.834±0.035,P＜0.05);上调U87细胞miR-874的表达导致G0/G1期细胞比例增加[实验组:(56.28±1.62)％;对照组:(48.57±0.88)％,P＜0.05],同时促进U87细胞凋亡[实验组:(12.50±0.66)％;对照组:(4.91±0.15)％,P＜0.05].结论 miR-874在胶质母细胞瘤中低表达.miR-874与胶质瘤发生、发展密切相关,可能是胶质瘤诊断和治疗的有效靶点.
作者：杜春发；王琼；张飚；尚超；豆玉超；王金环 刊期： 2015年第03期
目的 探讨瘦素(Leptin)基因-2 548 G/A多态性位点与非小细胞肺癌易感性及预后的关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测162例非小细胞肺癌和200例正常者的基因型,收集整理病例的临床病理及预后资料,并进行统计学分析.结果 瘦素基因-2 548 G/A位点实验组中AA、GA基因型及A等位基因频率(AA:35.2％;GA:46.3％;A:58.3％)均分别高于对照组(AA:16.5％;GA:40.0％;A:41.7％),差异有统计学意义[比值比(OR)=5.009,95％可信区间(CI):2.758 ～9.097,P＜0.01;OR=2.719,95％ CI:1.615～4.578,P＜0.01;OR=2.436,95％ CI:1.804 ～ 3.289,P＜0.01].Ⅲ+Ⅳ期的非小细胞肺癌中基因型为GA+AA的频率(58.3％)明显高于GG基因型(33.3％),同样在淋巴结转移患者中基因型为GA+ AA的频率(62.1％)明显高于GG基因型(40.0％),差异均有统计学意义(P＜0.05).基因型为GA+ AA患者生存期[(37.7±1.1)个月]明显差于AA型患者[(45.9±2.9)个月],差异有统计学意义(x2=8.215,P＜0.01).结论 瘦素基因-2 548 G/A多态性可能与非小细胞肺癌易感性有关,并且可能是非小细胞肺癌的不良预后因子.
作者：曹凤军；万国兴；俞远东；喻雄杰；狄全书；雷金华；邓守恒；陈萍 刊期： 2015年第03期
目的 观察银离子敷料对慢性伤口的疗效及患者血清炎性因子的变化.方法 取19例慢性伤口患者为治疗组,40例门诊正常体检者为对照组.治疗组创面经38 ～40℃乳酸钠林格氏液清创,采用银离子敷料+藻酸钙渗液吸收贴覆盖,伤口渗出明显时更换敷料.治疗后2个月时评估治疗有效率;分别于治疗前、治疗后2个月取伤口分泌物行细菌培养,比较治疗前后患者伤口的细菌定植情况;分别于治疗前、治疗后2个月时抽取治疗组患者血清以及对照组血清,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中炎性因子白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-12、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平.结果 银离子敷料治疗慢性伤口有效率为89.47％;伤口细菌检出率由治疗前15例降低到治疗后2例;治疗前患者血清中IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α水平均较对照组明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05),但治疗后的水平较治疗前有所降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 银离子敷料能显著降低慢性伤口中的细菌定植,同时下调患者血清中炎性因子IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α水平.
作者：戴亚芬；韩云芳；农鲁明；徐慧黎；许钰；褚育新 刊期： 2015年第03期
经肝动脉灌注化疗栓塞术(TACE)是原发性肝癌中晚期治疗应用广的一种姑息性方法[1-2].我们通过观察TACE前后肝功能的动态变化,探讨其与术后生存率的关系.
作者：戚诚；赵晓东；闫长青；刘博 刊期： 2015年第03期
目的 观察在人甲状腺癌组织中是否存在具有干细胞特性的侧群(SP)细胞,同时比较SP细胞和非SP细胞在干细胞标志物Oct-4、三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)中的表达差异.方法 采用流式细胞分选技术分选出人甲状腺癌SP细胞和非SP细胞,采用Western blot来检测SP细胞和非SP细胞在Oct-4、ABCG2表达方面的差异.结果 人甲状腺癌中存在着具有干细胞潜能的SP细胞,实验组(未加入维拉帕米)分选出SP细胞含量为1.40％,对照组(加入维拉帕米)分选SP细胞含量为0.16％,差异有统计学意义(P＜0.05).同时SP细胞高表达干细胞标志物Oct-4及ABCG2.结论 人甲状腺癌的起源与肿瘤干细胞密切相关,并且在甲状腺癌细胞株中存在着具有干细胞特性的甲状腺癌SP细胞.
作者：谭灿亮；黄晓萍；肖刚；李宁磊；于晓园；刘立新 刊期： 2015年第03期
目的 探讨细胞色素B在胃癌发生发展中的作用.方法 收集经病理证实为胃癌的手术患者12例胃癌组织,其中淋巴结转移标本6例,无淋巴结转移标本6例.应用Western blot检测两组胃癌组织凋亡相关因子B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)的表达水平,以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路蛋白表达水平.结果 与无转移组比较,有转移的胃癌组织中促凋亡因子bax表达降低(有转移组∶无转移组=0.55∶1.00,P＜0.05),而抑制凋亡因子bcl-2表达增加(有转移组∶无转移组=1.32∶1.00,P＜0.05),细胞凋亡水平下降(活化的Caspase-3表达有转移组∶无转移组=2.86∶3.35,P＜0.05);有转移的胃癌组织MAPK通路活化水平明显较无转移组降低(P＜0.05).结论 胃癌转移与线粒体细胞色素B表达水平下降,从而抑制MAPK通路磷酸化,导致细胞凋亡减少有关.
作者：鲁力；熊治国；柳玉均；叶啟发 刊期： 2015年第03期
目的 探讨三氧化二砷(As2O3)对膀胱癌T24细胞生长和裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制.方法 应用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测不同剂量As2O3(1、5、10 μmol/L)和5-氟尿嘧啶(5-Fu,4 μmol/L)对膀胱癌T24细胞生长的体外抑制作用;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测不同剂量As2O3(1、5、10μmol/L)和5-Fu(4μmol/L)作用后膀胱癌T24细胞细胞周期素(Cyclin) D1、p2l、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)表达;观察不同剂量As2O3对[10、20、30 mg/(kg·d)]和5-Fu[20.0 mg/(kg·d)]对T24细胞裸鼠移植瘤生长的体内抑制作用.结果 膀胱癌T24细胞给药48 h后,As2O3低(1μmol/L)、中(5μmol/L)、高(10 μmol/L)剂量组和5-Fu(4μmol/L)细胞抑制率分别为36.53％、67.44％、79.60％和80.90％.荷瘤裸鼠治疗实验以生理盐水组为对照,5-Fu,As2O3低、中、高剂量组的体内抑瘤率分别为54.5％、29.4％、38.8％、52.1％,说明As2O3对裸鼠T24细胞移植瘤的生长有抑制作用.RT-PCR及Western blot结果发现药物作用24 h后,不同剂量(1、5、10 μmol/L)As2 O3均明显降低Cyclin D1和bcl-2表达,p21水平未发生变化,bax表达明显上调.结论 As2O3能明显抑制膀胱癌T24细胞的增殖和裸鼠移植瘤的生长,其作用机制可能与影响细胞周期以及诱导细胞凋亡有关,其中涉及多种基因的调控.
作者：张士龙；东辛欣；武小强；陈国晓；张祥生；单磊 刊期： 2015年第03期
目的 观察沉默多药耐药相关蛋白4(MRP4)基因对SMMC-7721耐阿霉素细胞株(SMMC-7721-ADM)的影响.方法 实验分为4组:SMMC-7721组、SMMC-7721-ADM组、SiNC-SMMC-7721-ADM阴性转染组、沉默MRP4的小干扰RNA (siMRP4)-SMMC-7721-ADM转染组;设计并筛选出抑制效率高的siMRP4;Western blot及反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组MRP4蛋白和mRNA的表达水平;噻唑蓝(MTT)法观察各组对阿霉素(ADM)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)、长春新碱(VCR)和奥沙利铂(OHP)的敏感性;流式细胞术检测各组细胞凋亡.结果 浓度为25 mol/L的4-6-MRP4抑制效率为87.60％,选其为siMRP4;SMMC-7721组中MRP4 mRNA和蛋白极少量或不表达(0.08 ±0.03,P＜0.05;0.025±0.009,P＜0.05),SMMC-7721-ADM组显著高表达(8.76 ±0.08,P＜0.05;0.684±0.004,P＜0.05),siMRP4-SMMC-7721-ADM转染组(1.00 ±0.01,P ＜0.05;0.180±0.003,P＜ 0.05)较SMMC-7721-ADM组明显下降但仍稍高于SMMC-7721组;siMRP4-SMMC-7721-ADM转染组与SMMC-7721-ADM组比较对ADM、5-Fu、VCR和OHP的耐药系数(RI)分别为0.40、0.85、0.32、0.05,较SMMC-7721-ADM对化疗药物敏感性增强(P＜0.05),siMRP4转染组凋亡率3.26％较SMMC-7721-ADM组增加(P＜0.05).结论 MRP4在SMMC-7721极少量或不表达,SMMC-7721-ADM肝癌细胞株高表达,沉默MRP4能较大程度逆转其化疗耐药性.
作者：张华耀；刘建平；苏正；杨尚霖；韦金星；汪洋 刊期： 2015年第03期
近年来,Zero-P与椎间桥形固定颈部融合器(ROI-C)两种零切迹颈椎前路融合固定系统相继应用于临床.我们自2011年5月至2013年5月采用ROI-C与Zero-P椎间融合器治疗单节段脊髓型颈椎病48例且进行了临床疗效比较.
作者：汪智文；姜为民；李雪峰；汪恒 刊期： 2015年第03期
目的 观察中晚期胃癌患者行动脉介入化疗的临床疗效,并探讨其作用机制.方法 将110例中晚期胃癌患者随随机分为动脉介入化疗组和全身静脉化疗组.动脉介入化疗组60例,行胃左动脉、胃右动脉、胃十二指肠动脉和胃网膜右动脉1支或多支动脉灌注化疗药物亚叶酸钙、氟尿嘧啶和奥沙利铂;全身静脉化疗组50例,应用亚叶酸钙、氟尿嘧啶和奥沙利铂全身静脉化疗.结果 动脉介入化疗组3例完全缓解(CR),46例部分缓解(PR),总有效率为81.67％.全身静脉化疗组1例CR、26例PR,总有效率为54.00％,同时2组累计生存率比较差异有统计学意义(P＜0.05),同时动脉介入化疗组生活质量较全身静脉化疗组有提高.结论 在中晚期胃癌治疗中,动脉介入化疗疗效要优于全身静脉化疗,能延长患者的生存期.
作者：陈瑞红；于红刚 刊期： 2015年第03期
目的 观察菊苣改善大鼠肝功能及抗肝纤维的作用并探讨其机制.方法 采用四氯化碳(CCl4)建立大鼠肝纤维化模型,将存活的36只大鼠随机分为3组:模型组(1 ml/kg 40％ CCl4-植物油溶液)、低剂量菊苣组(2.0 g/kg)及高剂量菊苣组(18.0 g/kg).模型组大鼠腹腔注射CCl4-植物油溶液,其余两组在注射CCl4-植物油溶液的同时灌胃给予不同剂量的菊苣.另取12只大鼠作为对照组,实验过程中注射生理盐水(10 ml/kg).实验结束后测量大鼠肝脏脏器系数、肝纤维化程度及谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、羟脯氨酸(Hyp)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)水平并进行组间对比.结果 与对照组比较,模型组大鼠肝脏指数、肝纤维化程度、ALT、AST、HA、LN、Hyp、MDA明显升高,GSH、SOD明显降低(P＜0.05),分别为(3.58±0.37)％比(2.57±0.29)％、18.50比6.50、(231.27±40.09) U/L比(38.73±10.82) U/L、(241.23±22.77) U/L比(40.53±3.64)U/L、(329.08±23.97) μg/L比(203.37±29.36) μg/L、(129.03±18.26)μg/L比(83.82±10.92) μg/L、(22.01±0.32)μg/L比(15.89±0.39) μg/L、(3.05±0.35) nmol/mg蛋白比(1.13±0.12) nmol/mg蛋白、(1.82±0.38) nmol/mg蛋白比(3.07 ±0.12) nmol/mg蛋白、(151.95±22.25) U/mg蛋白比(253.72±27.76) U/mg蛋白.与模型组比较,高剂量菊苣组大鼠肝脏指数、肝纤维化程度、ALT、AST、HA、LN、Hyp、MDA明显降低,GSH、SOD明显升高(P＜0.05),分别为(3.17 ±0.18)％比(3.58±0.37)％、6.50比18.50、(117.88±20.70) U/L比(231.27±40.09) U/L、(110.39±16.62) U/L比(241.23±22.77) U/L、(238.82 ±40.08) μg/L比(329.08±23.97) μg/L、(85.67±14.20) μg/L比(129.03±18.26) μg/L、(16.83 ±0.41) μg/L比(22.01±0.32) μg/L、(1.69±0.33) nmol/mg蛋白比(3.05±0.35) nmol/mg蛋白、(2.73 ±0.18) nmol/mg蛋白比(1.82 ±0.38) nmol/mg蛋白、(220.85±18.83) U/mg蛋白比(151.95±22.25) U/mg蛋白,而低剂量菊苣组仅在肝纤维程度上明显降低(P＜0.05),其余各项指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 菊苣具有抑制肝损伤及抗肝纤维作用,其机制可能与抑制MDA的产生、抗自由基等作用有关.
作者：王培智；李路豪；党晓卫 刊期： 2015年第03期
目的 观察阿苯达唑(ABZ)壳聚糖微球(ABZ-CS-MPs)治疗感染多房棘球蚴小鼠的效果.方法 建立继发性感染多房棘球蚴小鼠模型,接种12周后将小鼠随机分为4组:阿苯达唑壳聚糖微球(ABZ-CS-MPs)组,阿苯达唑乳剂(ABZ-E)组,阿苯达唑片剂(ABZ-T)组,模型对照组,前3组小鼠均以75 mg/kg体质量的相应药物经口灌胃给药,模型对照组给予0.2ml生理盐水,每周3次,连续给药10周后,观察以下指标:(1)小鼠肝脏大体形态,称量囊湿重并计算抑囊率;(2)病理组织学观察;(3)高效液相色谱法(HPLC)测定小鼠血浆及肝组织匀浆中阿苯达唑亚砜(ABZ-SX)的浓度.结果 ABZ-CS-MPs治疗泡球蚴组织(E.m)明显钙化.各治疗组囊湿重分别为(0.114±0.030)、(0.247±0.086)、(0.582±0.145)g,与模型对照组的(1.273±0.198)g比较差异均有统计学意义(P＜0.05).ABZ-CS-MPs抑制泡球蚴生长作用显著优于ABZ-E、ABZ-T组,3组抑囊率分别为:91.04％、80.60％、54.28％.苏木素-伊红(HE)染色显示:各组泡球蚴(E.m)组织有不同程度的变性,坏死,其中ABZ-CS-MPs组对E.m角质层及生发层损伤比其他治疗组严重.HPLC法结果显示:ABZ-CS-MPs组血浆及肝脏ABZ-SX浓度在各治疗组中高,与ABZ-T组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 经口灌胃ABZ-CS-MPs对小鼠泡球蚴有明显抑制作用,壳聚糖微球促进ABZ的经肠吸收,提高其血浆、肝脏药物浓度.
作者：阿卜来海提·麦提色依提；乔雷；王新春；吴向未；阿杜瓦一；孙红；彭心宇 刊期： 2015年第03期
目的 探讨Vav3在胃癌组织中的表达以及抑制Vav3表达对人胃癌细胞株BGC823凋亡的影响及机制.方法 检测Vav3在胃癌组织、癌旁组织和人胃癌细胞株BGC823、正常胃上皮细胞株GES-1中的表达.设计合成针对Vav3的小干扰RNA(siRNA)并转染BGC823细胞株.噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性;流式细胞术检测Vav3-siRNA转染BGC823胃癌细胞后对凋亡率的影响;检测转染前后凋亡抑制蛋白家族中生存素(Survivin)、细胞凋亡抑制蛋白1(c-IAP1)、细胞凋亡抑制蛋白2 (c-IAP2)、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、黑色素瘤凋亡抑制蛋白(Livin)及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3表达.结果 Vav3蛋白水平在胃癌组织(0.727±0.101)和BGC823(0.850±0.140)中显著高于癌旁组织(0.173±0.025)和GES-1细胞株(0.250±0.036,P＜0.05).利用特异性siRNA抑制内源性Vav3的表达后,胃癌细胞株BGC823中Vav3表达明显受到抑制(P＜0.05).MTT结果显示,Vav3-siRNA介导的基因沉默抑制了胃癌细胞BGC823的活性(P＜0.05).流式细胞术显示,Vav3-siRNA转染后胃癌细胞的凋亡率[(40.4±5.53)％]明显高于对照组[(15.93±2.33)％];转染Vav3-siRNA的胃癌细胞Go/G1期比例[(57.93±3.17)％]明显高于对照组[(37.37±4.61)％],而转染组S期细胞的比例[(17.63±1.71)％]明显低于对照组[(34.52±4.60)％,P＜0.05].Vav3-siRNA介导的基因沉默下调了Survivin、c-IAP1、c-IAP2、XIAP的表达(P＜0.05),Livin表达变化不明显(P＞0.05);同时Caspase-3的表达和活性都明显升高(P＜0.05).结论 胃癌细胞中Vav3过表达,而Vav3的基因沉默可以明显促进细胞凋亡.Vav3的这一作用可能是通过调节部分凋亡抑制蛋白家族成员表达而实现的.
作者：檀碧波；李勇；范立侨；赵群；王冬；刘羽 刊期： 2015年第03期
目的 观察双氢青蒿素(DHA)对人脑胶质瘤BT325细胞的抑制作用以及对线粒体途径和蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响.方法 采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖、流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测Akt、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)以及凋亡相关蛋白的表达.结果 DHA以时间及剂量依赖的方式抑制BT325细胞增殖,24、48、72 h的半数抑制剂量(IC50)分别为116.3、78.2、48.3 μmol/L;流式分析结果显示,对照组凋亡率为(1.42±1.25)％,50、100、200 μmol/LDHA实验组凋亡率分别为(2.48±4.58)％,(10.50 ±3.56)％、(25.28±5.56)％,凋亡率随药物浓度的增高而增高;Western blot结果显示,DHA可以抑制p-Akt、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)和髓样细胞白血病-1(Mcl-1)蛋白表达水平,而总Akt和B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)表达无明显变化.结论 DHA能够通过线粒体依赖途径诱胶质瘤细胞凋亡,其机制与抑制磷酸肌醇3激酶/Akt信号通路有关.
作者：庞长河；杜伟；王栋梁；薛亚轲；魏新亭；宋来君 刊期： 2015年第03期
《中华实验外科杂志》第七届编委会第一次全体会议于2014年12月27日在武汉召开.本届编委会121位编委、通讯编委出席了会议.中华医学会杂志社刘冰副社长宣布了本刊第七届编委会组成名单,中华医学会罗玲副秘书长、刘冰副社长代表中华医学会向第七届编委会成员颁发了聘书.罗玲副秘书长在祝贺第七届编委会成立的同时,强调本刊的发展是同历届编委、审稿专家,尤其是第六届编委所作出的贡献是密不可分的,希望他们继续关心、支持本刊工作,要求杂志在目前科技期刊改革新形势下,加强“实验外科”品牌建设,为推动中国实验外科事业发展作出更大贡献.
作者：宋咏堂 刊期： 2015年第03期
目的 通过给予p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPKs)抑制剂(SB203580),探讨紫杉醇诱发细胞凋亡中p38MAPKs通路对γ-氨基丁酸B型受体(GABAB受体)表达变化的影响及其作用机制.方法 随机选取原代培养5d,浓度约为1×109/L的海马细胞,给予不同浓度(0、0.01、0.10、1.00、10.00 μmol/L)紫杉醇,采用噻唑蓝(MTT)法及流式细胞仪检测法分别检测海马神经元细胞抑制率(n=3)及凋亡率(n=4)变化,以此确定紫杉醇诱发细胞凋亡的适浓度.另选取原代培养5d的海马细胞随机分为4组:对照组(C组)、10 μmol/L SB203580处理组(K组)、紫杉醇适浓度处理组(N组)、10 μmol/L SB203580+紫杉醇适浓度混合组(K+N组),培养时间为24h,保持各组加液量一致,Western blot法测定海马细胞GABAB受体及核因子-κB(NF-κB)蛋白表达水平(n=3).结果 紫杉醇对海马细胞活力的抑制具有时间和浓度的交互作用(F=9.127,P＜0.05),根据MTT法(n=3)和流式细胞仪法(n=4)检测结果,各浓度紫杉醇处理24h对海马神经元凋亡率的影响差异有统计学意义(F=64.523,P＜0.05),并计算出紫杉醇诱发细胞凋亡的适浓度为1 μmol/L[早期凋亡率达(48.63±5.76)％].蛋白表达结果显示(n=3):与C组比较,N组和K+N组GABAB受体与NF-κB表达均明显增高(P＜0.05),而K组GABAB受体与NF-κB表达均降低(P＜0.05);与K组比较,N组和K+N组NF-κB和GABAB受体表达均增高(P＜0.05);与N组比较,K+N组NF-κB和GABAB受体表达均降低(P＜0.05).结论 在紫杉醇诱发细胞凋亡过程中,抑制p38MAPKs通路可上调GABAB受体表达,而其下游因子NF-κB可能是其调控GABAB受体表达变化的关键靶点.
作者：金子；王秀丽；吴川；赵爽；李昭；柴潇潇 刊期： 2015年第03期
目的 观察抑制胃癌细胞中亲环素A(CypA)表达后细胞侵袭迁移能力的改变,并探讨CypA的作用机制.方法 实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot方法检测CypA在胃癌组织和细胞株中的表达.合成针对CypA的小干扰RNA (siRNA)并转染人胃癌细胞株MGC803.噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性;细胞划痕实验检测细胞侵袭迁移能力;Real-time PCR和Western blot检测迁移侵袭基因基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-7、MMP-9、基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1、TIMP-2的表达.结果 在胃癌组织中CypA mRNA和蛋白表达水平(1.005±0.106、0.638±0.096)明显比癌旁组织高(0.284±0.039、0.353 ±0.042),胃癌细胞株CypA mRNA和蛋白表达均高于胃上皮细胞株GES-1(1.005±0.106、0.474±0.053);高分化细胞株MKN28mRNA和蛋白表达水平为0.388±0.097、0.942±0.116,中分化细胞株SGC7901 mRNA和蛋白表达水平为0.646±0.073、1.223±0.156,低分化细胞株MGC803中CypA的表达水平高(1.016±0.211、1.578±0.262).CypA-siRNA可有效抑制内源性CypA表达.MTT结果显示,CypA-siRNA可有效抑制MGC803细胞活性(P＜0.05).细胞划痕实检发现抑制CypA表达后MGC803的侵袭迁移能力明显减弱,CypA-siRNA组的细胞数为(21.42 ±2.33)个,而NS对照组为(52.21±4.48)个、空白对照组为(48.76±5.02)个(P＜0.05).CypA-siRNA介导的基因沉默下调了MMP-2、MMP-7,上调了TIMP-1的表达(P＜0.05).结论 CypA可通过调节部分侵袭迁移基因表达而增强胃癌细胞的侵袭迁移能力.
作者：王冬；李勇；赵群；范立侨；檀碧波；崔平 刊期： 2015年第03期
目的 探讨微小RNA(miR)-107对膀胱移行细胞癌侵袭转移的调控作用及其分子机制.方法 miR-107模拟物和抑制物用脂质体Lipofectamine 2000在体外瞬时转染膀胱癌细胞株T24,转染72 h后采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)的方法检测Let-7、Dicer、Ras/人高迁移率族蛋白A2(HMGA2)、锌指E-盒结合同源异形盒1(ZEB1)/ZEB2的表达;Western blot检测Dicer、Ras/HMGA2、ZEB1/ZEB2蛋白的表达变化;细胞划痕实验、Boyden小室体外侵袭实验、吖啶橙/溴乙锭(AO/EB)荧光染色法反映细胞转移潜能和凋亡的变化.结果 转染miR-107模拟物后:(1)膀胱癌细胞株中Let-7的表达量明显降低,FQ-PCR及Western blot结果显示Ras、HMGA2在基因及蛋白的表达水平明显上调,差异有统计学意义(P ＜0.05);(2) FQ-PCR及Western blot结果显示Dicer蛋白质水平被显著抑制,而核转录因子ZEB1/ZEB2表达增强.转染miR-107抑制物后,膀胱癌细胞株T24细胞形态由间质表型向正常上皮表型转化,体外实验表明膀胱癌细胞的运动和侵袭能力明显减弱[(17.5±1.4)％比(77.4±0.9)％],凋亡率增高(13.7％比34.2％).结论 miR-107在膀胱癌细胞中高表达,可能通过调控Let-7、Dicer的表达增强膀胱癌细胞增殖,诱发癌细胞上皮-间充质转化(EMT)过程及侵袭转移.
作者：王智宇；杨锦建；朱朝晖；曾甫清；魏金星 刊期： 2015年第03期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
