陈瑞红；于红刚
目的 探讨Vav3在胃癌组织中的表达以及抑制Vav3表达对人胃癌细胞株BGC823凋亡的影响及机制.方法 检测Vav3在胃癌组织、癌旁组织和人胃癌细胞株BGC823、正常胃上皮细胞株GES-1中的表达.设计合成针对Vav3的小干扰RNA(siRNA)并转染BGC823细胞株.噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性;流式细胞术检测Vav3-siRNA转染BGC823胃癌细胞后对凋亡率的影响;检测转染前后凋亡抑制蛋白家族中生存素(Survivin)、细胞凋亡抑制蛋白1(c-IAP1)、细胞凋亡抑制蛋白2 (c-IAP2)、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、黑色素瘤凋亡抑制蛋白(Livin)及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3表达.结果 Vav3蛋白水平在胃癌组织(0.727±0.101)和BGC823(0.850±0.140)中显著高于癌旁组织(0.173±0.025)和GES-1细胞株(0.250±0.036,P＜0.05).利用特异性siRNA抑制内源性Vav3的表达后,胃癌细胞株BGC823中Vav3表达明显受到抑制(P＜0.05).MTT结果显示,Vav3-siRNA介导的基因沉默抑制了胃癌细胞BGC823的活性(P＜0.05).流式细胞术显示,Vav3-siRNA转染后胃癌细胞的凋亡率[(40.4±5.53)％]明显高于对照组[(15.93±2.33)％];转染Vav3-siRNA的胃癌细胞Go/G1期比例[(57.93±3.17)％]明显高于对照组[(37.37±4.61)％],而转染组S期细胞的比例[(17.63±1.71)％]明显低于对照组[(34.52±4.60)％,P＜0.05].Vav3-siRNA介导的基因沉默下调了Survivin、c-IAP1、c-IAP2、XIAP的表达(P＜0.05),Livin表达变化不明显(P＞0.05);同时Caspase-3的表达和活性都明显升高(P＜0.05).结论 胃癌细胞中Vav3过表达,而Vav3的基因沉默可以明显促进细胞凋亡.Vav3的这一作用可能是通过调节部分凋亡抑制蛋白家族成员表达而实现的.
作者：檀碧波；李勇；范立侨；赵群；王冬；刘羽 刊期： 2015年第03期
目的 观察褪黑素对人增生性瘢痕成纤维细胞结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.方法 组织块法分离培养原代人增生性瘢痕成纤维细胞(HSFB),取第4代细胞分成4组:对照组、褪黑素(Melatonin) 10-3mmol/L组、褪黑素受体拮抗剂(Luzindole)1mmol/L组、Luzindole1 mmol/L+ Melatonin 10-3 mmol/L组,分组培养48 h,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR,SYBR Green)检测细胞裂解液CTGF、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA) mRNA表达;细胞爬片免疫荧光细胞化学方法分析CTGF、Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ)含量;酶联免疫吸咐试验(ELISA)法检测细胞培养液CTGF、COL-Ⅰ、Ⅲ型胶原(COL-Ⅲ)含量.结果 10-3 mmol/L褪黑素降低增生性瘢痕成纤维细胞CTGF、α-SMA mRNA表达及CTGF、COL-Ⅰ的含量(P＜0.05),但COL-Ⅲ没影响.对照组、褪黑素组、Luzindole组、Luzindole+褪黑素组CTGF和α-SMA mRNA分别为0.1294±0.006 1、0.086 9±0.003 1、0.1235±0.008 1、0.123 2±0.0094(F=30.130,P ＜0.01)和0.1347 ±0.0042、0.0847±0.003 1、0.128 9±0.002 6、0.128 2±0.004 1 (F=168.500,P＜0.01);CTGF和COL-Ⅰ荧光细胞化学相对表达量为0.0135±0.0003、0.0084±0.0003、0.0126±0.0005、0.012 5±0.0004 (F=140.750,P ＜0.01)和0.0127±0.0008、0.0086±0.0004、0.0120±0.0009、0.0120±0.000 8(F=24.240,P＜0.01);CTGF和COL-Ⅰ细胞培养液浓度(ng/L)为30.0569±1.2869、19.4254±0.924 5、26.673 8±0.9405、25.398 0±0.8478 (F=76.490,P＜ 0.01)和30.0445±1.1575、21.798 5±1.1260、26.5168±1.2923、25.459 4±1.705 7 (F=25.650,P＜ 0.01);COL-Ⅲ细胞培养液浓度(ng/L)为47.141 4±3.532 6、53.498 2±4.589 9、52.532 5±5.239 8、46.427 1±4.204 2(F=2.680,P＜0.01).结论 褪黑素通过与受体结合,下调增生性瘢痕成纤维细胞CTGF、α-SMA mRNA表达,从而降低CTGF、COL-Ⅰ的含量.
作者：戴丽冰；谢有富；姚依村；刘思隽；徐家科；刘志河；沈雁 刊期： 2015年第03期
目的 探讨水飞蓟素(silymarin)预处理对小鼠肾脏缺血再灌注损伤(I/R)的保护作用及机制.方法 雄性C57BL/6小鼠24只,随机均分为3组:假手术组(Sham组)、缺血再灌注对照组(I/R组)、水飞蓟素+缺血再灌注(silymarin+ I/R)组,每组8只.Sham仅切开腹腔,游离两侧肾蒂,但不阻断任何动脉;silymarin+ I/R组以100 mg/kg剂量silymarin每天灌胃方式给药;I/R组每天生理盐水+0.1％乙醇灌胃,连续7d至手术前.silymarin+ I/R、I/R组用无损伤微动脉夹夹闭双侧肾蒂45 min后,松开动脉夹恢复血流灌注24h后,处死小鼠.应用血生化检测小鼠血清肌酐及尿素氮水平,高碘酸-无色品红(PAS)染色观察肾脏组织损伤,检测各组肾脏髓过氧化物酶(MPO)活性、免疫荧光检测CD68的表达、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肾组织炎性因子的分泌、原位缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡、Western blot检测裂解的(Cleaved)-半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)及bcl-2相关X蛋白(bax)蛋白表达.结果 silymarin+ I/R、I/R组肌酐及尿素氮均高于Sham[(4.4±0.2)、(291.7±17.7) mg/L,P＜0.05],I/R组肌酐及尿素氮[(22.7±1.2)、(1 295.7±64.2)mg/L]明显高于silymarin+ I/R[(14.0±3.9)、(571.7±17.0) mg/L,P＜0.05];PAS染色检测肾肾小管细胞损伤Sham、silymarin+ I/R组明显低于I/R组,I/R+ silymarin组小鼠肾小管坏死评分[(1.75±0.16)分]与I/R组[(4.17±0.29)分]比较减少,差异有统计学意义(P＜0.05);silymarin+ I/R组MPO活性(31.8±5.4) U/g与I/R组(52.0±6.3) U/g比较减少(P＜0.05);免疫荧光染色法显示silymarin+ I/R组CD68表达比I/R组减少(P＜0.05);ELISA结果显示炎性因子的分泌silymarin+ I/R组与I/R组比较减少(P＜0.05);TUNEL检测细胞凋亡显示Sham、silymarin+I/R组细胞凋亡数量明显少于I/R组(P＜0.05);Western blot检测显示:I/R组Cleaved-Caspase-3、bax表达明显高于Sham、silymarin+ I/R组,bcl-2表达量低于silymarin+ I/R组(P＜0.05).结论 水飞蓟素通过抑制肾缺血再灌注过程中炎性因子的表达及免疫细胞的浸润,减少肾脏组织损伤,抑制细胞凋亡,从而达到保护肾功能的作用.
作者：谈健；何永辉；胡建鹏；崔飞伦 刊期： 2015年第03期
胃癌是发病率第4位的恶性肿瘤,每年有将近1 000 000例的新发病例;而胃癌的死亡率高居第2位,每年死于胃癌的人数超过700000例[1].超过70％的新发和死亡病例来自发展中国家,尤其是在亚洲东部和欧洲中东部[1].
作者：郭继武；王涛；何雯婷；李玉民 刊期： 2015年第03期
目前对于细胞、单一组织的深低温冷冻保存技术已经非常成熟并已进入临床应用[1],但对于复合组织仅成活远远不够,后期的感觉、运动功能的恢复更为重要,我们通过不同方法复温深低温冷冻的兔离断肢体,对比其神经纤维的组织学变化和施旺细胞活性.
作者：朱泽兴；张树明；赵艳东；樊凯彬；赵永军；李鸿江；李波；乔林 刊期： 2015年第03期
我们采用大鼠原位肝移植模型,以姜黄素(CUR)进行预处理,探讨大鼠原位移植肝缺血/再灌注(I/R)所致急性肺损伤(ALI)的发病机制及CUR预处理的作用.
作者：刘贺；张加强；阮孝国 刊期： 2015年第03期
目的 观察甲基化转移酶抑制剂zebularine对人胃癌SGC-7901细胞株增殖、迁移和上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)基因表达的影响.方法 采用噻唑蓝(MTT)法和划痕实验检测zebularine对人胃癌SGC-7901细胞株的抑制率及其细胞迁移率的影响,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测作用前后E-cadherin基因表达的变化.结果 (1)终质量浓度100 μmol/L的zebularine作用24h能显著抑制SGC-7901细胞株的增殖率和迁移率.MTT法对照组吸光度值为0.50±0.01,实验组为0.45 ±0.02(P ＜0.05);对照组划痕愈合率为(47.45±10.05)％,实验组为(88.23±5.45)％ (P ＜0.05).(2) zebularine作用24h能显著增加E-cadherin mRNA的表达,对照组相对表达量为1.02±0.10,实验组为4.25±0.56(P ＜0.05).结论 甲基化转移酶抑制剂zebularine可以有效抑制SGC-7901细胞株的增殖和迁移,并提高抑癌基因E-cadherin mRNA的表达.
作者：张征；陈先祥；董荣坤；董毅飞 刊期： 2015年第03期
研究结果显示一定量的尼古丁能够促进正常关节软骨细胞和骨性关节炎(OA)患者关节软骨细胞的增殖,而且提高Ⅱ型胶原的合成[1],初步证实尼古丁对OA患者关节软骨细胞有一定的积极作用,但其机制不清.本研究旨在观察不同浓度尼古丁(0、25、50和100 μg/L)对OA患者软骨细胞分泌白细胞介素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响.
作者：程少文；应晓洲；安涛；赵志蓉；周英勇；彭磊 刊期： 2015年第03期
目的 观察双氢青蒿素(DHA)诱导人骨肉瘤细胞TE85凋亡,探讨其机制.方法 将不同浓度的DHA(0、10、20、40 μmol/L)作用于人骨肉瘤细胞TE85 24 h后,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)染色,流式细胞仪检测细胞的凋亡;同时检测人骨肉瘤细胞中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和过氧化氢酶(CAT)含量的变化以及线粒体膜电位的变化.结果 DHA作用24h后,0、10、20、40 μmol/L组TE85细胞的凋亡率分别为0.05％、8.17％、25.53％、47.26％.各组细胞中ROS含量分别为1.6600±0.0081、1.7100±0.019 7、1.7920±0.0203和1.8540±0.0194,差异有统计学意义(P＜0.05);细胞中MDA含量分别为(0.105±0.024)、(0.461±0.008)、(0.572±0.022)、(0.569±0.015) nmol/mg蛋白,差异有统计学意义(P＜0.05);随着DHA剂量的增加,细胞中CAT含量明显降低[分别为(26.750±0.533)、(14.460±0.169)、(14.020±0.104)和(12.640±0.215) U/mg prot,P＜0.05],细胞线粒体膜电位明显降低(分别为1.663±0.008、1.711±0.019、1.792±0.020和1.854±0.019,P＜0.05).结论 DHA可通过诱发人骨肉瘤细胞TE85内的氧化应激和线粒体功能障碍,进而诱导人骨肉瘤细胞TE85发生凋亡.
作者：李杰；张丰泉；杜振宁；蔡腾；蔡朋杉；范磊 刊期： 2015年第03期
目的 观察去甲斑蝥素对人胆管癌RBE细胞组织化学及超微结构的影响,探讨去甲斑蝥素对胆管癌细胞作用机制.方法 体外培养胆管癌RBE细胞,采用不同5～40 mg/L去甲斑蝥素处理,吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色统计RBE细胞凋亡率,并观察形态学变化,扫描电镜观察去甲斑蝥素影响下胆管癌RBE细胞表面超微结构的变化,透射电镜观察细胞内超微结构的变化.结果 应用AO/EB荧光染色观察,随去甲斑蝥素剂量加大,胆管癌RBE细胞凋亡率升高,40 mg/L作用24 h后凋亡细胞占(83.1±15.6)％.光镜和扫描电镜下形态学呈现典型的凋亡变化,可见凋亡小体的形成.透射电镜可以观察到细胞核呈新月状改变.结论 去甲斑蝥素可以引起胆管癌RBE细胞显微和超微结构改变,这些改变可能与细胞凋亡和侵袭力改变等变化密切相关.
作者：边伟；王天阳；李秋生；张小艳；辛清旺；刘三光 刊期： 2015年第03期
目的 观察前列地尔联合乌司他丁对非体外循环下心脏搭桥术中鱼精蛋白诱发肺损伤的影响及其保护作用.方法 选择择期行非体外循环下心脏搭桥手术患者60例.随机分为4组:鱼精蛋白中心静脉给药对照组(C组),前列地尔预处理组(A组),乌司他丁预处理组(U组),前列地尔联合乌司他丁预处理组(AU组).分别于鱼精蛋白给药前5min(T1)、给药后15 min(T2)经桡动脉采集血样,进行中性粒细胞(PMN)、血栓烷B2(TXB2)、血浆白细胞介素(IL)-6、IL-8、IL-10及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量测定.进行血气分析,测定肺泡-动脉氧分压(A-aDO2),计算呼吸指数(RI)和氧合指数(O1).结果 与C组比较,其他3组在T2时间点,PMN、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α的水平明显降低(P＜0.05),其中AU组监测指标低.A组,U组,AU组患者血浆TXB2水平在T2时间点明显低于C组(P＜0.05),AU组低[TXB2:(100 ±17)μg/L,P＜0.05].T2时其他3组与C组OI值比较显著升高(P＜0.05),其中AU组高[OI:(428±28)mm1Hg,P＜0.05].结论 非体外循环下心脏搭桥手术中联合应用前列地尔和乌司他丁预处理可减轻鱼精蛋白给药后炎性反应从而保护肺功能,其效果优于单独用药.
作者：谢云霞；郭晓光；李胜云；张增梅；刘超 刊期： 2015年第03期
目的 探讨β-连环蛋白(β-catenin)缺陷对脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞炎性因子表达的影响及其机制.方法 分离培养野生型及β-catenin缺陷小鼠腹腔巨噬细胞,分为4组(n=5),β-catenin=/+、β-catenin--、β-catenin=/++LPS、β-catenin-/-+LPS组.Western blot检测巨噬细胞β-catenin表达及p65磷酸化水平的变化,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)定量分析肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6等炎性因子的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清中TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度.结果 β-catenin=/++ LPS组β-catenin蛋白表达(0.717±0.101)与β-catenin=/+组(0.524±0.091)比较增加,两组差异有统计学意义(P＜0.05);β-catenin-/-+LPS组与β-catenin+/++ LPS组比较TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA及细胞上清中TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度都较β-catenin+/++ LPS组明显增高,两组差异有统计学意义(P＜0.05);β-catenin-/-+LPS组p65的磷酸化水平(0.9646±0.1510)比β-catenin+/++ LPS组(0.728 8±0.093 0)增加,两组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 β-catenin缺陷使LPS诱导巨噬细胞活化增加,促进炎性因子的分泌,其机制可能与β-catenin促进p65磷酸化,增加核因子-κB (NF-κB)的转录活性有关.
作者：何永辉；陈佳；谈健；胡建鹏；崔飞伦 刊期： 2015年第03期
目的 探讨胃癌组织中膜型基质金属蛋白酶-2(MT2-MMP)的表达水平与预后的关系.方法 采用免疫组织化学染色法检测胃癌组织芯片中90例癌组织及配对的癌旁组织中MT2-MMP的表达.采用x2检验分析MT2-MMP表达与临床病理特征的关系;采用Kaplan-Meier法及Log-rank检验分析MT2-MMP表达与总生存期(OS)的关系;拟合多因素Cox模型,采用风险比(HR)及95％可信区间(CI)评价不同临床指标与死亡的相关性.结果 MT2-MMP在胃癌组织中的表达高于癌旁组织(H-score评分均值分别为246和139分,P＜0.01);胃癌组织中MT2-MMP的表达水平和患者的性别、年龄、肿瘤大小、病理分级、TNM分期无明显相关(P＞0.05);单因素和多因素回归分析均显示MT2-MMP高表达胃癌患者的死亡风险较低表达组显著增加(HR=2.185,95％ CI:1.175～4.064,P＜0.05;HR=1.997,95％ CI:1.042 ～3.830,P＜0.05).结论 MT2-MMP高表达提示胃癌患者预后较差.
作者：徐小丽；陈陆俊；徐斌；许军；蒋敬庭；吴昌平 刊期： 2015年第03期
目的 观察阿苯达唑(ABZ)壳聚糖微球(ABZ-CS-MPs)治疗感染多房棘球蚴小鼠的效果.方法 建立继发性感染多房棘球蚴小鼠模型,接种12周后将小鼠随机分为4组:阿苯达唑壳聚糖微球(ABZ-CS-MPs)组,阿苯达唑乳剂(ABZ-E)组,阿苯达唑片剂(ABZ-T)组,模型对照组,前3组小鼠均以75 mg/kg体质量的相应药物经口灌胃给药,模型对照组给予0.2ml生理盐水,每周3次,连续给药10周后,观察以下指标:(1)小鼠肝脏大体形态,称量囊湿重并计算抑囊率;(2)病理组织学观察;(3)高效液相色谱法(HPLC)测定小鼠血浆及肝组织匀浆中阿苯达唑亚砜(ABZ-SX)的浓度.结果 ABZ-CS-MPs治疗泡球蚴组织(E.m)明显钙化.各治疗组囊湿重分别为(0.114±0.030)、(0.247±0.086)、(0.582±0.145)g,与模型对照组的(1.273±0.198)g比较差异均有统计学意义(P＜0.05).ABZ-CS-MPs抑制泡球蚴生长作用显著优于ABZ-E、ABZ-T组,3组抑囊率分别为:91.04％、80.60％、54.28％.苏木素-伊红(HE)染色显示:各组泡球蚴(E.m)组织有不同程度的变性,坏死,其中ABZ-CS-MPs组对E.m角质层及生发层损伤比其他治疗组严重.HPLC法结果显示:ABZ-CS-MPs组血浆及肝脏ABZ-SX浓度在各治疗组中高,与ABZ-T组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 经口灌胃ABZ-CS-MPs对小鼠泡球蚴有明显抑制作用,壳聚糖微球促进ABZ的经肠吸收,提高其血浆、肝脏药物浓度.
作者：阿卜来海提·麦提色依提；乔雷；王新春；吴向未；阿杜瓦一；孙红；彭心宇 刊期： 2015年第03期
目的 探讨胃癌患者血清甲壳质酶蛋白40(YKL-40)表达水平及临床意义.方法 采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测30例正常人及60例胃癌患者血清中YKL-40的表达水平,并比较36例胃癌患者手术前后血清YKL-40水平.结果 胃癌患者血清YKL-40水平(250.83±84.39) μg/L明显高于正常对照组(72.06 ±17.08) μg/L,两两之间比较差异有统计学意义(P＜0.01);血清YKL-40水平与胃癌患者性别、年龄无明显相关,与胃癌患者临床分期、肿瘤细胞分化程度有明显相关;Ⅳ期[(362.27±18.64)μg/L]明显高于Ⅲ期[(296.20±25.49) μg/L]、Ⅲ期明显高于Ⅱ期[(212.77 ±24.17) μg/L]、Ⅱ期明显高于Ⅰ期[(136.25 ±20.83) μg/L]、Ⅰ期明显高于正常对照组、两者比较差异有统计学意义(P＜0.01),肿瘤细胞分化程度较差(低分化腺癌、黏液腺癌)胃癌患者血清YKL-40水平[(284.88±68.96) μg/L]明显高于肿瘤细胞分化程度较好(高分化腺癌、中分化腺癌)胃癌患者[(222.97±86.54) μg/L,P＜0.01];胃癌患者手术后血清YKL-40水平[(191.06±58.33)μg/L]明显低于手术前[(196.14±58.31) μg/L],两者比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 YKL-40可能参与胃癌的发生发展过程.
作者：杨勤；黄昕；江亮；梁卫明；周才进 刊期： 2015年第03期
目的 观察大鼠胸腺内注射自体脑细胞诱导免疫耐受对于手术脑损伤的治疗效果.方法 24只SD雄性大鼠随机分为3组,每组8只,A组:手术脑损伤治疗组,B组:生理盐水对照组,C组:假手术组;术后1、3、7、14、21 d行改良大鼠神经功能缺陷评分(MNSS)、头颅核磁(MRI)检测脑水肿体积;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测外周血转化生长因子-β1(TGF-β1)、γ-干扰素(IFN-γ)浓度,流式细胞仪检测外周血CD4 +/CD8+T细胞比值.结果 与B组比较,A组大鼠神经功能恢复明显增快、脑水肿时限明显缩短(P＜0.05),其脑水肿体积(mm3)分别为[(39.41 ±3.68、80.91 ±7.50、92.25±7.06、74.53±7.05、47.80±10.00)、(42.21±4.11、87.07±4.70、108.56±10.29、97.58±12.75、65.96±11.85)];A组血清TGF-β1浓度(ng/L)在术后1、3、7d呈升高趋势,且均数高于B组(P＜0.05),浓度(ng/L)分别为[(751.96±50.24、780.99±50.23、853.20±14.81)、(704.55±36.89、724.54±18.72、804.13 ±50.07)];A组IFN-γ浓度在术后7、14、21 d呈下降趋势且均数低于B组(P＜0.05),浓度(ng/L)分别为[(132.60±19.89、129.89 ±21.12、106.34±23.91)、(164.43 ±32.52、179.98 ±40.21、157.46 ±50.68)];A组CD4 +/CD8+T比值在术后7、14 d呈下降趋势,在14d低(P＜0.05),比值为1.43±0.20;与C组比较,B组TGF-β1浓度在3、7、14 d呈升高趋势且均值较高(P＜0.05),浓度(ng/L)分别为[(724.54±18.72、804.13±50.07、808.33 ±62.12)、(646.66±94.53、652.62±98.80、619.39 ±89.20)],IFN-γ浓度在1、3、7、14d呈升高趋势且均值较高(P＜0.05),其浓度(ng/L)分别为(113.38±15.42、133.56±26.10、164.43±32.52、179.98 ±40.21)、(83.08±12.70、87.76±14.10、103.27±22.19、97.29± 13.98)];B组CD4 +/CD8+T比值在3、7、1d持续升高,比值分别为1.68 ±0.31、2.00±0.30、2.20±0.27.结论 胸腺内注射自体脑细胞诱导免疫耐受可减轻手术脑损伤后脑水肿及神经系统炎性反应,有利于神经系统功能恢复.
作者：张明超；亢建民；崔占群；范维佳；刘保龙；闫华 刊期： 2015年第03期
目的 观察吲哚胺-2,3-双加氧酶(IDO)抑制剂1-甲基色氨酸(1-MT)联合外周血单个核细胞(PBMC)对人胶质瘤细胞A172的免疫杀伤作用.方法 采用Ficoll密度梯度离心分离健康人外周血制备PBMC,根据是否联合1-MT分组.细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测梯度1-MT(0、25、125、250、500 μmol/L;1、2、4、8、10 mmol/L)联合PBMC对A172细胞存活率影响.1-MT(500 μmol/L)联合PBMC与A172细胞共培养,流式双染术检测A172细胞凋亡率,Western blot检测A172细胞IDO蛋白表达,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测PBMC中调节T细胞叉头样螺旋转录因子(Foxp3) mRNA表达.结果 在PBMC数量一定情况下,1-MT呈剂量依赖性抑制A172细胞存活率;1-MT联合PBMC组细胞凋亡比率(45.0％)显著高于PBMC组(20.0％)及1-MT组(33.7％);PBMC组A172细胞IDO蛋白相对表达量(0.313±0.017)明显高于1-MT联合PBMC组(0.182±0.015,P＜0.01),1-MT、A172空白组未见明显IDO蛋白表达;PBMC组PBMC中Foxp3mRNA表达(2.764±0.180)明显高于1-MT联合PBMC组(2.189 ±0.179,P＜0.05)及PBMC空白组(1.000±0.028,P＜0.01),1-MT联合PBMC组明显高于PBMC空白组(P＜0.01).结论 1-MT可抑制IDO表达,下调PBMC中Foxp3转录因子表达,降低调节性T细胞增殖分化,可增强PBMC对胶质瘤细胞免疫杀伤作用.
作者：赵程程；张猛；张秋生；王传方；刘文兰；李维平 刊期： 2015年第03期
目的 观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)和肝癌来源间充质干细胞(LCMSCs)对肝癌细胞HepG2增殖、侵袭能力的影响.方法 贴壁筛选法分离培养LCMSCs,成脂与成骨诱导分化鉴定其分化能力,流式细胞仪检测其表面标志物.分别收集BMSCs和LCMSCs培养上清,与HepG2细胞共培养,以完全培养基为对照组,细胞计数试剂盒(CCK-8)法和Transwell侵袭实验检测各组细胞增殖与侵袭能力.结果 分离的LCMSCs形态均一,具有良好的成脂与成骨分化能力,阳性表达CD29和CD105,阴性表达CD34和CD45.CCK-8法证实BMSCs和LCMSCs培养上清均能促进HepG2细胞增殖,与BMSCs培养上清比较,LCMSCs培养上清对HepG2细胞增殖的促进作用更明显(P＜0.05).Transwell侵袭实验表明,对照组、BMSCs培养上清组及LCMSCs培养上清组穿膜细胞数分别为13、24、35个,BMSCs培养上清和LCMSCs培养上清处理后,HepG2细胞的侵袭能力明显增强;与BMSCs CM比较,LCMSCs CM对HepG2侵袭能力的增强作用更为明显(P＜0.05).结论 BMSCs和LCMSCs均可增强肝癌细胞HepG2的增殖和侵袭能力,但LCMSCs对HepG2细胞的作用更强.
作者：邬杰忠；邓美海；钟跃思；徐见亮；熊志勇；林楠；许瑞云；方和平 刊期： 2015年第03期
目的 探讨芳香烃基受体相互作用蛋白(AIP)基因在国人垂体生长激素腺瘤中的体细胞突变与临床生化特征相关性.方法 收集96例垂体生长激素腺瘤患者的肿瘤标本进行检测,分析临床随访资料.结果 在对55例(57.3％)肿瘤标本中测序发现13个突变位点,其中,c.609C ＞G,c.646-38C＞T,c.646-35C＞T,c.646-34A＞T和c.692C＞T 5种类型尚未在国家生物技术信息中心(NCBI)单核苷酸多态性(SNP)数据库中报道过,为新发现AIP基因突变位点.AIP基因突变与患者起病年龄、肿瘤大直径、肿瘤侵袭性以及是否为复发肿瘤明显相关.在AIP基因突变组中,患者起病年龄明显偏低,比较于未突变组肿瘤体积更大、侵袭性更强、术后更容易复发.结论 在散发性生长激素腺瘤中,AIP基因突变检测可能对患者预后的判断、治疗策略的制定,以及随访就诊有指导意义.
作者：雷琢玮；陈娟；谢蕊繁；李朝曦；淦超；徐钰；叶飞；孙玉洁；韩晓 刊期： 2015年第03期
目的 探讨Endoglin和骨桥蛋白(OPN)在不同性质的胸腔积液中表达水平和意义.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测45例癌性胸水患者及35例结核性胸水患者血清及胸水中的Endoglin和OPN的水平,比较两组血清和胸水中Endoglin和OPN表达水平的差异以及与临床的关系.结果 在结核性胸水患者及恶性胸水患者血清、胸水中Endoglin和OPN水平有明显差异,45例癌性胸水患者和35例结核性胸水患者血清中Endoglin水平分别为(5.1327±0.643 1)μg/L和(4.1026±0.217 1)μg/L,血清中OPN的水平分别为(141.5800±7.720 8)μg/L和(85.258 3±4.908 3)μg/L,胸水中Endoglin水平分别为(4.2344±0.235 6)μg/L和(3.1234±0.199 6)μg/L,胸水中OPN的水平分别为(118.2840±5.3998)μg/L和(70.189 7±3.104 3)μg/L,两者比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 检测胸腔积液患者血清和胸水中Endoglin和OPN水平有助于结核性胸水和恶性胸水的诊断和鉴别诊断.
作者：徐海苗；蔡宜玲；程晔 刊期： 2015年第03期
中华实验外科杂志
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主办：中华医学会
