苏庆亮；李玉明；王凯；张明凯；段长胜
目的 探讨Vav3在胃癌组织中的表达以及抑制Vav3表达对人胃癌细胞株BGC823凋亡的影响及机制.方法 检测Vav3在胃癌组织、癌旁组织和人胃癌细胞株BGC823、正常胃上皮细胞株GES-1中的表达.设计合成针对Vav3的小干扰RNA(siRNA)并转染BGC823细胞株.噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性;流式细胞术检测Vav3-siRNA转染BGC823胃癌细胞后对凋亡率的影响;检测转染前后凋亡抑制蛋白家族中生存素(Survivin)、细胞凋亡抑制蛋白1(c-IAP1)、细胞凋亡抑制蛋白2 (c-IAP2)、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、黑色素瘤凋亡抑制蛋白(Livin)及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3表达.结果 Vav3蛋白水平在胃癌组织(0.727±0.101)和BGC823(0.850±0.140)中显著高于癌旁组织(0.173±0.025)和GES-1细胞株(0.250±0.036,P＜0.05).利用特异性siRNA抑制内源性Vav3的表达后,胃癌细胞株BGC823中Vav3表达明显受到抑制(P＜0.05).MTT结果显示,Vav3-siRNA介导的基因沉默抑制了胃癌细胞BGC823的活性(P＜0.05).流式细胞术显示,Vav3-siRNA转染后胃癌细胞的凋亡率[(40.4±5.53)％]明显高于对照组[(15.93±2.33)％];转染Vav3-siRNA的胃癌细胞Go/G1期比例[(57.93±3.17)％]明显高于对照组[(37.37±4.61)％],而转染组S期细胞的比例[(17.63±1.71)％]明显低于对照组[(34.52±4.60)％,P＜0.05].Vav3-siRNA介导的基因沉默下调了Survivin、c-IAP1、c-IAP2、XIAP的表达(P＜0.05),Livin表达变化不明显(P＞0.05);同时Caspase-3的表达和活性都明显升高(P＜0.05).结论 胃癌细胞中Vav3过表达,而Vav3的基因沉默可以明显促进细胞凋亡.Vav3的这一作用可能是通过调节部分凋亡抑制蛋白家族成员表达而实现的.
作者：檀碧波；李勇；范立侨；赵群；王冬；刘羽 刊期： 2015年第03期
目的 观察夏枯草(PV)对甲状腺乳头状癌细胞(TPC-1)的抑制作用,并探讨其对卷曲螺旋结构域67基因(CCDC67)的影响.方法 不同浓度的PV作用TPC-1细胞48h后,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞毒性;用PV作用TPC67(含有目的基因CCDC67的TPC-1)48 h,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中CCDC67 mRNA的表达.结果 PV对TPC-1有明显抑制作用(F=133.476,P＜0.01),且抑制作用具有明显浓度依赖性(r2 =0.983);经PV处理TPC67细胞48h后CCDC67 mRNA的表达量增强,实验组(0.779±0.055)明显高于阴性对照组(0.318±0.109,p＜0.05).结论 PV对TPC-1细胞的增殖有明显抑制作用,PV可上调CCDC67基因的表达.
作者：殷德涛；雷梦园；许建辉；王勇飞；李红强；王庆端 刊期： 2015年第03期
目前对于细胞、单一组织的深低温冷冻保存技术已经非常成熟并已进入临床应用[1],但对于复合组织仅成活远远不够,后期的感觉、运动功能的恢复更为重要,我们通过不同方法复温深低温冷冻的兔离断肢体,对比其神经纤维的组织学变化和施旺细胞活性.
作者：朱泽兴；张树明；赵艳东；樊凯彬；赵永军；李鸿江；李波；乔林 刊期： 2015年第03期
微小RNA(miRNA,miR)是一类内源性的非编码小分子RNA,在肿瘤的发生发展中发挥重要作用[1].本研究旨在检测miR-19b在骨肉瘤组织中的表达,探讨其在骨肉瘤发生发展中的作用及临床意义.
作者：李祥；王敏；叶湛；王发圣；林金銮；林建华 刊期： 2015年第03期
目的 探讨Endoglin和骨桥蛋白(OPN)在不同性质的胸腔积液中表达水平和意义.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测45例癌性胸水患者及35例结核性胸水患者血清及胸水中的Endoglin和OPN的水平,比较两组血清和胸水中Endoglin和OPN表达水平的差异以及与临床的关系.结果 在结核性胸水患者及恶性胸水患者血清、胸水中Endoglin和OPN水平有明显差异,45例癌性胸水患者和35例结核性胸水患者血清中Endoglin水平分别为(5.1327±0.643 1)μg/L和(4.1026±0.217 1)μg/L,血清中OPN的水平分别为(141.5800±7.720 8)μg/L和(85.258 3±4.908 3)μg/L,胸水中Endoglin水平分别为(4.2344±0.235 6)μg/L和(3.1234±0.199 6)μg/L,胸水中OPN的水平分别为(118.2840±5.3998)μg/L和(70.189 7±3.104 3)μg/L,两者比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 检测胸腔积液患者血清和胸水中Endoglin和OPN水平有助于结核性胸水和恶性胸水的诊断和鉴别诊断.
作者：徐海苗；蔡宜玲；程晔 刊期： 2015年第03期
目的 探讨利用傅里叶变换红外(FTIR)光谱技术术中快速诊断甲状腺疾病的新方法.方法 联合应用衰减全反射(ATR)探头与FTIR光谱仪,测定34例正常甲状腺、56例结节性甲状腺肿及46例甲状腺癌组织的FTIR光谱,用方差分析或非参数检验等方法比较3组光谱10个谱带的峰位、相对峰强及半高宽等29个FTIR参数,找出正常甲状腺、结节性甲状腺肿及甲状腺癌的光谱差异.结果 正常甲状腺、结节性甲状腺肿及甲状腺癌红外光谱在蛋白、核酸、脂类和糖类等多个相关谱带的多个参数表现出显著性差异.通过小显著差数法(LSD)或Tamhane's T2法两两比较,进一步研究了甲状腺癌和结节性甲状腺肿在上述FTIR参数的具体变化趋势,主要有:与核酸相关的1 250/cm处峰的半高宽F1250在3类组织光谱中出现递增的变化趋势,且两两比较差异均有统计学意义.癌组织光谱与另外两种组织比较在1 085/cm处的峰位P1085发生了明显的蓝移(向高波数移动),相对峰高I1085/I1460也显著升高.半高宽F1460在结节性甲状腺肿中表现出了特异性的缩窄.F1120在结节性甲状腺肿光谱中相较另外两类显著的增宽.结论 正常甲状腺、结节性甲状腺肿及甲状腺癌红外光谱在多个谱带的峰位、相对峰强及半高宽等方面存在显著的差异.FTIR测定有望成为术中甲状腺组织快速定性诊断的有力工具.
作者：高梅娟；刘亚奇；赵瑾；徐怡庄；张小青；徐智；张元福；吴瑾光；周孝思 刊期： 2015年第03期
目的 观察电针足三里对烫伤后胞壁酰二肽诱导的大鼠脓毒症的影响.方法 健康雄性SD大鼠60只,体质量200 ～ 250 g,2～3个月龄,随机分为6组(n=10):对照组(C)、足三里组(E)、胞壁酰二肽组(MDP)、非经非穴组(NE)、α-银环蛇毒素组(α-BGT)和烫伤组(S).E、MDP、NE及α-BGT组予以烫伤后静脉注射MDP 5 mg/kg构建大鼠烫伤后脓毒症模型.C组尾静脉注射生理盐水1 ml.E组于双侧足三里穴电针刺激;NE组于双侧足三里穴旁5 mm处给予脉冲刺激;α-BGT组股静脉注射α-BGT 1.0 μg/kg后双侧足三里穴给予脉冲刺激,S组仅烫伤处理.各组大鼠于电针后48 h,取腹主动脉血、肺组织,光镜下观察肺组织病理结果;电镜下观察肺组织超微结构的改变;检测大鼠腹主动脉血血气分析、血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的含量.结果 经烫伤后大鼠急性肺损伤明显,MDP组大鼠血清TNF-α[(52±8) ng/L]、IFN-γ[(42 ±6) ng/L]、HMGB1[(33 ±6)μg/L]和血乳酸(La)值[(6.1±1.5)mmol/L]较S组TNF-α[(39 ±6) ng/L]、IFN-γ[(34 ±6) ng/L]、HMGB1[(25 ±4)μg/L]和血La值[(3.1±1.3)mmol/L]升高(P＜0.05),血pH值(6.9±0.8)、PaO2[(43 ±6) mmHg(1 mmHg =0.133 kPa)]较S组pH值[7.4±0.6]、PaO2[(59±8)mmHg]降低(P＜0.05);与MDP组比较,E组大鼠血清TNF-α[(22±3)ng/L]、IFN-γ[(20 ±4) ng/L]、HMGB1[(11±3)μg/L]和血La值[(3.2±1.1)mmol/L]降低(P＜0.05),动脉血pH值(7.3±0.9)、PaO2[(60 ±8)mmHg]升高(P＜0.05),肺组织病理损伤明显减轻.结论 MDP可以加重烫伤后大鼠的急性肺损伤及酸中毒,电针足三里穴可减轻烫伤后MDP诱导的脓毒症致大鼠急性肺损伤,机制可能与激活含α7亚基N型胆碱能受体(α7 nAchRs)介导的胆碱能抗炎通路有关.
作者：张赤；王焱林；宋学敏；乐林莉；张宗泽 刊期： 2015年第03期
目的 检测高尔基磷酸化蛋白3(GOLPH3)在胃癌组织中的表达,并探讨GOLPH3表达与胃癌发生、发展的相关性.方法 Western blot法检测63例胃癌组织和正常胃黏膜中GOLPH3的表达,免疫组织化学方法[链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法]检测胃癌组织细胞核增殖抗原(Ki-67)的表达,分析胃癌组织中GOLPH3表达与临床病理特征及增殖指数的关系.结果 胃癌组织中GOLPH3蛋白的相对表达量(1.06±0.83)明显高于正常黏膜GOLPH3蛋白的表达量(0.62 ±0.51,P＜0.05),GOLPH3蛋白在细胞分化差、浸润范围≥2/3胃区、浸润至浆膜外、有淋巴结转移、有远处转移或Ⅲ～Ⅳ期的胃癌组织中的相对表达量分别为1.47±0.84、1.62±1.03、1.14±0.85、1.17 ±0.83、2.17 ±0.74、1.23±0.85,明显高于高、中分化(0.74 ±0.66)、浸润范围＜1/3胃区(0.72 ±0.63)、浸润深度至浆膜内(0.59 ±0.49)、无淋巴结转移(0.64±0.67)、无远处转移(0.92±0.73)或Ⅰ～Ⅱ期(0.67 ±0.64)的胃癌组织(P＜0.05).此外,GOLPH3的表达与年龄、性别无明显相关(P＞0.05).胃癌组织中GOLPH3的相对表达量(1.06±0.83)与Ki-67增殖指数(49.18±20.47)呈正相关(r=0.504,P＜0.01).结论 GOLPH3在胃癌组织中存在过表达,可促进胃癌细胞的增殖.
作者：周志平；郭延塔；余外市；杨晓峰；邱成志 刊期： 2015年第03期
目的 探讨胃癌患者血清甲壳质酶蛋白40(YKL-40)表达水平及临床意义.方法 采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测30例正常人及60例胃癌患者血清中YKL-40的表达水平,并比较36例胃癌患者手术前后血清YKL-40水平.结果 胃癌患者血清YKL-40水平(250.83±84.39) μg/L明显高于正常对照组(72.06 ±17.08) μg/L,两两之间比较差异有统计学意义(P＜0.01);血清YKL-40水平与胃癌患者性别、年龄无明显相关,与胃癌患者临床分期、肿瘤细胞分化程度有明显相关;Ⅳ期[(362.27±18.64)μg/L]明显高于Ⅲ期[(296.20±25.49) μg/L]、Ⅲ期明显高于Ⅱ期[(212.77 ±24.17) μg/L]、Ⅱ期明显高于Ⅰ期[(136.25 ±20.83) μg/L]、Ⅰ期明显高于正常对照组、两者比较差异有统计学意义(P＜0.01),肿瘤细胞分化程度较差(低分化腺癌、黏液腺癌)胃癌患者血清YKL-40水平[(284.88±68.96) μg/L]明显高于肿瘤细胞分化程度较好(高分化腺癌、中分化腺癌)胃癌患者[(222.97±86.54) μg/L,P＜0.01];胃癌患者手术后血清YKL-40水平[(191.06±58.33)μg/L]明显低于手术前[(196.14±58.31) μg/L],两者比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 YKL-40可能参与胃癌的发生发展过程.
作者：杨勤；黄昕；江亮；梁卫明；周才进 刊期： 2015年第03期
近年来,Zero-P与椎间桥形固定颈部融合器(ROI-C)两种零切迹颈椎前路融合固定系统相继应用于临床.我们自2011年5月至2013年5月采用ROI-C与Zero-P椎间融合器治疗单节段脊髓型颈椎病48例且进行了临床疗效比较.
作者：汪智文；姜为民；李雪峰；汪恒 刊期： 2015年第03期
研究结果显示一定量的尼古丁能够促进正常关节软骨细胞和骨性关节炎(OA)患者关节软骨细胞的增殖,而且提高Ⅱ型胶原的合成[1],初步证实尼古丁对OA患者关节软骨细胞有一定的积极作用,但其机制不清.本研究旨在观察不同浓度尼古丁(0、25、50和100 μg/L)对OA患者软骨细胞分泌白细胞介素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响.
作者：程少文；应晓洲；安涛；赵志蓉；周英勇；彭磊 刊期： 2015年第03期
目的 评价二维(2D)与三维(3D)高清胸腔镜下非小细胞肺癌手术的临床应用价值.方法 选取2012年9月至2014年3月60例行2D和57例行3D胸腔镜下肺叶切除及淋巴结清扫的手术患者,比较两组患者围手术期相关指标.结果 2D与3D组手术时间分别为(181.7±26.1)、(159.9 ±30.6) min,差异有统计学意义(P＜0.05);术后24 h胸液引流量分别为(357.3±165.1)、(240.9±139.7)ml,差异有统计学意义(P＜0.05);术后拔管时间分别为(7.9±3.1)、(5.7±1.9)d,差异有统计学意义(P＜0.05);术后住院时间分别为(9.1±2.9)、(7.3±1.8)d,差异有统计学意义(P＜0.05).两组在年龄、性别、肿瘤部位、术中失血量、淋巴结清除数、术后外科病理分期方面差异无统计学意义(P＞0.05).结论 3D高清胸腔镜较2D有更好的景深,从而提供了更清晰的解剖结构,使手术操作更加精准,手术时间缩短及术中损伤减少,更有利于患者术后恢复.
作者：陆世民；任斌辉；张楼乾；黄兴；王欣；许林 刊期： 2015年第03期
目的 观察脑创伤后抗凋亡因子生存素(Survivin)的表达变化及其与内源性神经再生的相关性,探讨Survivin蛋白在促进创伤后内源性神经再生中的作用及其机制.方法 健康成年雄性C57BL/6小鼠80只,随机分为假手术组和创伤组(TBI组).在创伤(或假手术)后的12 h,1、2、5、7、14 d(n=6)取打击(或假手术)侧的海马,进行Western blot分析.进一步用免疫荧光双染的方法观察Survivin在不同类型细胞的表达(n=4).结果 Survivin蛋白在创伤后1d表达开始增高(42 003.15,P＜0.05),2d时到达高峰(90 403.34,P＜0.01),持续至第7天开始下降.小鼠打击侧海马齿状回颗粒细胞下层的Survivin+、溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU+)和双皮质素(DCX+)细胞均明显增加;绝大多数的Survivin+细胞呈现BrdU+,一部分Survivin+细胞呈现DCX+.结论 脑创伤后Survivin基因被激活,蛋白表达量明显增高;Survivin蛋白在受伤侧海马的神经干细胞和未成熟神经元中呈现高表达,与神经源性细胞的增殖有相关性.
作者：张琳；颜荣；刘晓智；赵玉军；陈镭 刊期： 2015年第03期
目的 观察第10号染色体缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在大鼠脊髓发育过程中的表达模式.方法 选取不同发育阶段(孕15 d子鼠记为A组,出生当天大鼠记为B组,出生后7d大鼠记为C组,出生后56 d大鼠记为D组)的SD大鼠,取出其脊髓,采用Western blot法检测该通路上关键蛋白的表达水平;同时,采用免疫荧光法检测各相应蛋白在大鼠脊髓的细胞定位.结果 Western blot结果显示,A、B、C、D组PTEN与内参肌动蛋白(actin)的灰度值比分别为0.281±0.086、0.462 ±0.002、0.591±0.022、0.392±0.001,A组与其他3组比较差异有统计学意义(P＜0.05),D组与B、C组比较差异有统计学意义(P＜0.05);A、B、C、D组S6与actin的灰度值比分别为0.646 ±0.116、0.450±0.129、0.824±0.082、0.174±0.038,D组与A、C组比较差异有统计学意义(P＜0.05).免疫荧光染色结果显示脊髓神经元有丰富的PTEN与S6表达.结论 这些结果提示PTEN/mTOR信号通路可能与发育相关的表达模式,从而为中枢神经系统再生能力随着发育过程而降低这一现象提供依据.
作者：周武；吴永超；刘国辉；杨述华；蔡林鸿；代志鹏 刊期： 2015年第03期
目的 观察大鼠胸腺内注射自体脑细胞诱导免疫耐受对于手术脑损伤的治疗效果.方法 24只SD雄性大鼠随机分为3组,每组8只,A组:手术脑损伤治疗组,B组:生理盐水对照组,C组:假手术组;术后1、3、7、14、21 d行改良大鼠神经功能缺陷评分(MNSS)、头颅核磁(MRI)检测脑水肿体积;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测外周血转化生长因子-β1(TGF-β1)、γ-干扰素(IFN-γ)浓度,流式细胞仪检测外周血CD4 +/CD8+T细胞比值.结果 与B组比较,A组大鼠神经功能恢复明显增快、脑水肿时限明显缩短(P＜0.05),其脑水肿体积(mm3)分别为[(39.41 ±3.68、80.91 ±7.50、92.25±7.06、74.53±7.05、47.80±10.00)、(42.21±4.11、87.07±4.70、108.56±10.29、97.58±12.75、65.96±11.85)];A组血清TGF-β1浓度(ng/L)在术后1、3、7d呈升高趋势,且均数高于B组(P＜0.05),浓度(ng/L)分别为[(751.96±50.24、780.99±50.23、853.20±14.81)、(704.55±36.89、724.54±18.72、804.13 ±50.07)];A组IFN-γ浓度在术后7、14、21 d呈下降趋势且均数低于B组(P＜0.05),浓度(ng/L)分别为[(132.60±19.89、129.89 ±21.12、106.34±23.91)、(164.43 ±32.52、179.98 ±40.21、157.46 ±50.68)];A组CD4 +/CD8+T比值在术后7、14 d呈下降趋势,在14d低(P＜0.05),比值为1.43±0.20;与C组比较,B组TGF-β1浓度在3、7、14 d呈升高趋势且均值较高(P＜0.05),浓度(ng/L)分别为[(724.54±18.72、804.13±50.07、808.33 ±62.12)、(646.66±94.53、652.62±98.80、619.39 ±89.20)],IFN-γ浓度在1、3、7、14d呈升高趋势且均值较高(P＜0.05),其浓度(ng/L)分别为(113.38±15.42、133.56±26.10、164.43±32.52、179.98 ±40.21)、(83.08±12.70、87.76±14.10、103.27±22.19、97.29± 13.98)];B组CD4 +/CD8+T比值在3、7、1d持续升高,比值分别为1.68 ±0.31、2.00±0.30、2.20±0.27.结论 胸腺内注射自体脑细胞诱导免疫耐受可减轻手术脑损伤后脑水肿及神经系统炎性反应,有利于神经系统功能恢复.
作者：张明超；亢建民；崔占群；范维佳；刘保龙；闫华 刊期： 2015年第03期
目的 探讨免疫负调控分子肿瘤坏死因子诱导蛋白8样蛋白2(TIPE2)在甲状腺癌中的表达及其临床意义.方法 46例具有完整临床病理资料及5年以上随访资料的石蜡包埋甲状腺癌组织及其配对癌旁组织.采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测TIPE2 mRNA在甲状腺癌及其癌旁组织中的表达水平,应用免疫组织化学法分析TIPE2在甲状腺癌组织和癌旁组织的表达,分析TIPE2表达水平与临床病理特征和患者预后的关系.结果 46例癌组织中TIPE2mRNA的表达量为4.17±3.44,显著低于配对癌旁组织中TIPE2 mRNA的表达(15.34±9.81,Z=-3.825,P＜0.01).甲状腺癌组织中,TIPE2高表达16例(34.8％),低表达30例(65.2％);在对应癌旁组织中,TIPE2高表达32例(69.6％),低表达14例(30.4％),差异有统计学意义(x2=9.801,P＜0.01).癌组织中TIPE2低表达与甲状腺肿瘤患者的临床分期、淋巴结转移明显相关(P＜0.05).TIPE2 mRNA高表达组中位生存时间为84个月[95％可信区间(CI):61 ～97个月],显著高于低表达组(59个月,95％ CI:47～79个月,P＜0.01).肿瘤组织中TIPE2阳性细胞高表达组的中位生存时间为81个月(95％ CI:57～102个月),明显高于TIPE2低表达组(54个月,95％CI:44～81个月,P＜0.01).Cox多重回归分析表明TIPE2 mRNA和TIPE2阳性细胞低表达是影响甲状腺癌预后不良的独立指标[风险比(HR)=3.77,95％ CI:1.37 ～5.09,P＜0.05;HR =3.51,95％CI:2.02～4.66,P＜0.05].结论 TIPE2在甲状腺癌组织中表达下调,与甲状腺癌患者预后不良相关.
作者：郭欣；吴志宇；陈春悠 刊期： 2015年第03期
目的 观察阿苯达唑(ABZ)壳聚糖微球(ABZ-CS-MPs)治疗感染多房棘球蚴小鼠的效果.方法 建立继发性感染多房棘球蚴小鼠模型,接种12周后将小鼠随机分为4组:阿苯达唑壳聚糖微球(ABZ-CS-MPs)组,阿苯达唑乳剂(ABZ-E)组,阿苯达唑片剂(ABZ-T)组,模型对照组,前3组小鼠均以75 mg/kg体质量的相应药物经口灌胃给药,模型对照组给予0.2ml生理盐水,每周3次,连续给药10周后,观察以下指标:(1)小鼠肝脏大体形态,称量囊湿重并计算抑囊率;(2)病理组织学观察;(3)高效液相色谱法(HPLC)测定小鼠血浆及肝组织匀浆中阿苯达唑亚砜(ABZ-SX)的浓度.结果 ABZ-CS-MPs治疗泡球蚴组织(E.m)明显钙化.各治疗组囊湿重分别为(0.114±0.030)、(0.247±0.086)、(0.582±0.145)g,与模型对照组的(1.273±0.198)g比较差异均有统计学意义(P＜0.05).ABZ-CS-MPs抑制泡球蚴生长作用显著优于ABZ-E、ABZ-T组,3组抑囊率分别为:91.04％、80.60％、54.28％.苏木素-伊红(HE)染色显示:各组泡球蚴(E.m)组织有不同程度的变性,坏死,其中ABZ-CS-MPs组对E.m角质层及生发层损伤比其他治疗组严重.HPLC法结果显示:ABZ-CS-MPs组血浆及肝脏ABZ-SX浓度在各治疗组中高,与ABZ-T组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 经口灌胃ABZ-CS-MPs对小鼠泡球蚴有明显抑制作用,壳聚糖微球促进ABZ的经肠吸收,提高其血浆、肝脏药物浓度.
作者：阿卜来海提·麦提色依提；乔雷；王新春；吴向未；阿杜瓦一；孙红；彭心宇 刊期： 2015年第03期
目的 分选人乳腺癌多西他赛(Docetaxel)耐药细胞株BT549/Docetaxel干细胞,探讨其生物学特征.方法 采用悬浮培养联合多西他赛法分选耐药细胞株BT549/Docetaxel干细胞,采用悬浮培养法富集BT549、BT549/Docetaxel干细胞,进行CD44、CD24细胞标记和流式细胞仪检测,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测BT549、BT549/Docetaxel干细胞中三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2 (ABCG2)基因表达.结果 BT549/Docetaxel与BT549干细胞的群体倍增时间分别为(39.22 ±0.65)、(29.20 ±0.50)h,差异有统计学意义(P＜0.05).流式分析显示,BT549微球体细胞的CD44 +/CD24-/low比例为(13.8±0.5)％,高于单层培养BT549细胞的比例(2.8±0.6)％(P＜0.01).BT549/Docetaxel微球体细胞的CD44 +/CD24-/low比例为(19.1±0.3)％,高于单层培养BT549/Docetaxel细胞的比例(5.0±0.4)％(P＜0.01).BT549/Docetaxel微球体细胞的CD44+/CD24-/low比例高于BT549微球体细胞的CD44 +/CD24-/low比例,差异有统计学意义(P＜0.05).BT549干细胞内药物的含量为(46.9 ±0.5)ng/106个细胞,BT549/Docetaxel干细胞内药物的含量为(7.1±0.3)ng/106个细胞,两者比较差异有统计学意义(P＜0.01).正常培养基培养4h后,BT549细胞内药物的含量为(28.3±0.6) ng/106个细胞,BT549/Docetaxel细胞内药物的含量(3.5±0.1) ng/106个细胞,两者比较差异有统计学意义(P＜0.01).ABCG2的mRNA在BT549/Docetaxel干细胞内表达量明显高于在BT549干细胞内中的表达,两者差异有统计学意义(P＜0.01).结论 成功筛选人乳腺癌多西他赛耐药细胞株BT549/Docetaxel干细胞,生长及耐药性稳定.ABCG2基因在BT549/Docetaxel干细胞内表达量明显增高.
作者：李文涛；孙文聪；邓萌；王磊；黄毅；刘秋荣；王冰；冯淑曼；刘秋雨 刊期： 2015年第03期
目的 酪氨酸蛋白激酶抑制剂——金雀异黄素对人胃癌细胞MGC-803的抑制作用,及其对细胞周期素(Cyclin) B1蛋白表达和细胞周期的影响.方法 体外培养MGC-803细胞,经170、200、220μmol/L的金雀异黄素分组处理后采用噻唑蓝(MTT)法判断金雀异黄素对MGC-803的抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期的变化;采用Western blot法检测Cyclin B1和周期蛋白依赖性蛋白激酶1(CDK1)蛋白的表达.结果 MTT法检测显示随着金雀异黄素浓度增高,作用时间24～72 h的延长,MGC-803细胞增殖抑制率升高,呈时间和剂量依赖性(P＜0.01).流式细胞术结果显示24、48、72 h金雀异黄素组与对照组比较均出现S期阻滞[(24.37±3.25)％、(27.11±2.82)％、(28.20±4.17)％比(12.35±2.62)％,P＜0.01]和G2/M期阻滞[(23.11±3.31)％、(27.41±2.70)％、(35.61±2.67)％比(9.65±3.62)％,P＜0.01],其中以72 h组的G2/M期细胞比例的增加为显著.Western blot结果显示,随着金雀异黄素浓度增高(170、200、220μmmol/L),处理时间的延长(24、48、72 h),Cyclin B1和CDK1蛋白表达均逐渐减少,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 金雀异黄素可以有效地降低Cyclin B1和CDK1蛋白的表达,同时对MGC-803细胞的细胞周期也会产生影响,金雀异黄素对MGC-803细胞的增殖起抑制作用.
作者：刘磊；韩亮 刊期： 2015年第03期
目的 观察菊苣改善大鼠肝功能及抗肝纤维的作用并探讨其机制.方法 采用四氯化碳(CCl4)建立大鼠肝纤维化模型,将存活的36只大鼠随机分为3组:模型组(1 ml/kg 40％ CCl4-植物油溶液)、低剂量菊苣组(2.0 g/kg)及高剂量菊苣组(18.0 g/kg).模型组大鼠腹腔注射CCl4-植物油溶液,其余两组在注射CCl4-植物油溶液的同时灌胃给予不同剂量的菊苣.另取12只大鼠作为对照组,实验过程中注射生理盐水(10 ml/kg).实验结束后测量大鼠肝脏脏器系数、肝纤维化程度及谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、羟脯氨酸(Hyp)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)水平并进行组间对比.结果 与对照组比较,模型组大鼠肝脏指数、肝纤维化程度、ALT、AST、HA、LN、Hyp、MDA明显升高,GSH、SOD明显降低(P＜0.05),分别为(3.58±0.37)％比(2.57±0.29)％、18.50比6.50、(231.27±40.09) U/L比(38.73±10.82) U/L、(241.23±22.77) U/L比(40.53±3.64)U/L、(329.08±23.97) μg/L比(203.37±29.36) μg/L、(129.03±18.26)μg/L比(83.82±10.92) μg/L、(22.01±0.32)μg/L比(15.89±0.39) μg/L、(3.05±0.35) nmol/mg蛋白比(1.13±0.12) nmol/mg蛋白、(1.82±0.38) nmol/mg蛋白比(3.07 ±0.12) nmol/mg蛋白、(151.95±22.25) U/mg蛋白比(253.72±27.76) U/mg蛋白.与模型组比较,高剂量菊苣组大鼠肝脏指数、肝纤维化程度、ALT、AST、HA、LN、Hyp、MDA明显降低,GSH、SOD明显升高(P＜0.05),分别为(3.17 ±0.18)％比(3.58±0.37)％、6.50比18.50、(117.88±20.70) U/L比(231.27±40.09) U/L、(110.39±16.62) U/L比(241.23±22.77) U/L、(238.82 ±40.08) μg/L比(329.08±23.97) μg/L、(85.67±14.20) μg/L比(129.03±18.26) μg/L、(16.83 ±0.41) μg/L比(22.01±0.32) μg/L、(1.69±0.33) nmol/mg蛋白比(3.05±0.35) nmol/mg蛋白、(2.73 ±0.18) nmol/mg蛋白比(1.82 ±0.38) nmol/mg蛋白、(220.85±18.83) U/mg蛋白比(151.95±22.25) U/mg蛋白,而低剂量菊苣组仅在肝纤维程度上明显降低(P＜0.05),其余各项指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 菊苣具有抑制肝损伤及抗肝纤维作用,其机制可能与抑制MDA的产生、抗自由基等作用有关.
作者：王培智；李路豪；党晓卫 刊期： 2015年第03期
中华实验外科杂志
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