刘文洲；周华富；孙宇；王俊龙；赵春鹤；冯旭
本实验旨在建立稳定有效的转移性人肝癌裸小鼠原位种植合并姑息性氩氦刀冷冻治疗模型,现报道如下.一、材料与方法采用48只BALB/c-nu/nu裸小鼠,建立转移性人肝癌裸小鼠原位种植模型[1];随机分为2组,移植瘤术后30 d进行姑息性氩氦刀冷冻治疗和仅开腹为假手术组.用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,开腹后暴露肝移植瘤,经多次预实验,使用3 mm氩氦刀头,选定输出功率为5％,温度降至-40℃后插入肿瘤2 mm左右,根据肿瘤大小,持续20 ～30 s,温度回升至10℃后重复1次;假手术组开腹后将不接电源的氩氦刀头插入肿瘤内1 min后关腹.
作者：周建炜；卢创新；王朝杰；马宁；罗执芬；崔勇霞；王威；王梦啸；周云 刊期： 2014年第03期
我们应用激光共聚焦显微镜观察硫化氢(H2S)对心肌细胞缺氧后细胞内Ca2+荧光强度的影响,现报道如下.一、材料与方法1.实验动物及分组:雄性SD大鼠(220～250 g)由河北省实验动物中心提供.大鼠随机分为5组,每组8只:(1)正常组;(2)缺氧组;(3)缺氧+硫氢化钠(NaHS) 100 μmol/L组;(4)缺氧+NaHS 200 μmol/L组;(5)缺氧+NaHS400 μmol/L组.参照文献[1]获得心肌细胞悬液.缺氧3h后缺氧4组心肌细胞分别置于NaHS终质量浓度为0、100、200、400μmol/L的充满95％N2的KB液.
作者：刘芳；刘广杰；张建新；李兰芳 刊期： 2014年第03期
目的 探讨血浆心房钠尿肽(ANP)在游泳力竭小鼠分泌及其抗氧化作用机制.方法 对小鼠进行分组后,让其负重游泳,并检测小鼠力竭后血浆ANP、丙二醛(MDA)、乳酸(LD)及乳酸脱氢酶(LDH)水平.结果 力竭组小鼠心脏LD为(1.69±0.29) mmol/g蛋白、LDH为(23.69±5.28) U/mg蛋白、ANP为(13.65±1.69)mg/L,显著高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).ANP对双氧水(H2O2)引起的心脏组织损伤具有保护作用,而LY83583阻断剂破坏该种保护作用,从而导致小鼠MDA水平增加,与ANP组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 ANP对心脏具有一定的抗氧化作用,在一定程度上能保护心脏免受损伤,其释放途径主要是通过环磷酸鸟苷(cGMP)-蛋白激酶C(PKC)信号传输途径实现.
作者：李廷武；徐敬 刊期： 2014年第03期
目的 分离培养前列腺癌相关成纤维细胞(CAF)及正常成纤维细胞(NPF),探讨两者生物学差异.方法 用Percoll技术分离培养CAF及NPF细胞,用免疫荧光法检测上皮细胞标志物(Pan-CK),成纤维细胞标志物波形蛋白(Vimentin)和平滑肌细胞标志物平滑肌肌动蛋白(SMA);用噻唑蓝(MTT)法检测细胞生长能力;用软琼脂糖实验检测两种细胞诱导良性细胞BPH-1恶变.结果 CAF与NPF细胞形态相似,均高表达Vimentin,不表达Pan-CK,CAF细胞高表达SMA.CAF细胞生长速度快于NPF细胞,第4天吸光度值分别为0.98 ±0.07、0.74±0.04,P＜0.05;第6天吸光度值分别为2.06±0.13、1.59±0.14(P ＜0.05),且能诱导BPH-1恶性变.结论 CAF细胞高表达SMA,增殖能力强,能促进前列腺良性细胞恶性变.
作者：于胜强；王科；杨典东；王健涛；李光磊；高振利 刊期： 2014年第03期
目的 探索安全有效、简单易行的后腹腔镜下肾脏低温保护技术.方法 拟行后腹腔镜下保留肾单位手术患者22例,分为研究组和对照组.研究组在后腹腔镜肾脏低温下行保留肾单位手术;对照组行常规后腹腔镜下保留肾单位手术.比较两组患者肾脏温度和直肠温度变化以及手术前后肾功能变化.结果 22例患者手术顺利;术后无继发出血、感染及漏尿.研究组冷缺血时间为(47.2±3.8)min,平均低肾脏温度为(17.73±0.91)℃.研究组术前ECT示患肾肾小球滤过率(GFR)为(30.57±4.07) ml/min,术后1个月患肾GFR为(20.92 ± 4.49) ml/min.对照组术前ECT示患肾GFR为(30.65±5.45) ml/min,术后1个月患肾GFR(17.90±3.50) ml/min.患者术后随访1 ～16个月,未见局部复发、无转移.结论 后腹腔镜下肾脏低温保护技术简单易行、效果确切.
作者：方烈奎；杨江根；黄建生；张秩庠；黄向江；熊星；姜敏；肖克峰 刊期： 2014年第03期
目的 探讨在胰腺导管癌中丛生蛋白和抑凋亡蛋白及细胞增殖标志物间的关系.方法 用双重荧光染色法对17例胰腺导管腺癌中丛生蛋白和生存素(Survivin)进行染色并计数阳性细胞进行统计;同法对丛生蛋白和增殖细胞核抗原(PCNA)及Ki-67的表达进行检测.结果 在胰腺导管癌中丛生蛋白阳性细胞数为420个,Survivin阳性细胞数为72个,其中丛生蛋白和Survivin均阳性的细胞数为59个.丛生蛋白、PCNA及Ki-67共同表达的癌细胞数为0个.结论 丛生蛋白在胰腺导管癌中的抗凋亡范围比Survivin更广泛,并且其表达和细胞增殖无相关.
作者：金俊硕；高英兰；董玉玺；任志远；李星；陆文浩；李德旭 刊期： 2014年第03期
CXC趋化因子配体14(CXCL14)作为趋化因子CXC子家族的一员,普遍存在于人体正常组织,有提供维持机体稳态的作用,但在各类实体肿瘤中表达高低不一[1-2].本研究旨在观察CXCL14在胃癌中的表达,并探讨其机制.一、材料与方法1.材料:Trizol试剂(Invitrogen公司);逆转录酶、SYBR Green试剂(Toyobo 公司);CXCL14多克隆抗体(Abcam公司);二步法免疫组织化学检测试剂、二氨基联苯胺(DAB)试剂(北京中杉金桥公司);DNA Methylation-Gold试剂盒(ZYMO公司);引物、测序(上海生工公司).
作者：胡畅远；沈贤；薛向阳；庞文洋；陈文静；张丽芳；朱冠保 刊期： 2014年第03期
目的 制备一种新型的人工软骨材料并对其进行表征及性能评价.方法 将聚甲基丙烯酸羟乙酯(PHEMA)与0.5％二氧化硅(SiO2)及1％～5％羟基磷灰石(HA)复合制备成复合材料,用红外光谱仪和扫描电镜表征了材料的结构,测试材料的吸水性及牛血清白蛋白在材料表面的吸附性.结果 SiO2与HA纳米级均匀地分散在材料的一侧,材料的吸水率为45％ ～ 50％,牛血清白蛋白在材料表面的吸附率约为5％,表明材料具有较好的生物相容性.结论 成功制备1种生物相容性较好的有机/无机复合人工软骨材料.
作者：陈鹏；方善鸿；郑竑；张文明；李文波；杨声波；林建华 刊期： 2014年第03期
目的 探讨ErbB-2转录因子1 (TOB1)对人类肺癌A549细胞放射敏感性的影响并探讨其机制.方法 通过脂质体介导的重组质粒转染及G418筛选,建立TOB1高表达的肺癌A549细胞稳定转染株;采用克隆形成实验检测TOB1对A549细胞放射敏感性的影响;采用单细胞凝胶电泳实验检测TOB1对电离辐射引起的DNA损伤修复的影响;同时采用Western blot实验检测TOB1对DNA损伤修复相关蛋白表达的调控作用.结果 通过重组质粒转染及G418筛选,成功建立TOB1的肺癌A549细胞稳定转染株;克隆形成实验证实外源性TOB1高表达显著增加肺癌A549细胞的放射敏感性,采用单击多靶模型拟合细胞存活曲线,细胞的放射增敏比(SER)为1.63;单细胞凝胶电泳实验证实接受6Gy的X线照射后,A549/TOB1细胞的尾矩分别为(25.71±4.32)％,明显高于A549细胞[(14.26±1.21)％,P＜0.05].Western blot实验证实与A549母细胞比较,X线照射后A549/TOB1细胞中共济失调毛细血管扩张症突变基因(ATM)、06-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)、DNA依赖性蛋白激酶催化亚单位(DNA-PKcs)、Ku70、Ku80、DNA双链断裂修复基因X线修复交叉互补4(XRCC4)蛋白的表达水平明显降低.结论 TOB1高表达增加肺癌A549细胞的放射敏感性,其机制可能与TOB1抑制DNA损伤修复相关蛋白的表达,从而抑制DNA损伤的修复有关.
作者：孙克康；吴晓阳；陈文；李星；仲宁 刊期： 2014年第03期
目的 探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)磷酸化代表的mTOR通路激活在Ⅰ期肺腺癌中与临床指标及预后的关系.方法 应用组织微阵列和免疫组织化学方法检测222例Ⅰ期肺腺癌中磷酸化mTOR蛋白,并与临床指标和生存率进行统计学分析.结果 mTOR通路在55％(122/222例)的肺腺癌标本中呈激活状态,其与患者年龄、性别、吸烟史、肿瘤分化等临床指标间无明显相关.生存分析显示,肿瘤中mTOR通路激活的患者预后好(P＜0.05).结论 mTOR通路的激活是Ⅰ期肺腺癌中的普遍事件,且患者预后较好.
作者：杨帆；陈克终；姜冠潮；王俊 刊期： 2014年第03期
目的 观察波生坦对肺纤维化(PF)的疗效.方法 48只雄性Wistar大鼠随机均分为6组:对照2、4周组(C2、C4)、模型2、4周组(F2、F4)和治疗组(D1、D2);予以博来霉素建模;DI、D2组分别于2、15d予以波生坦灌胃.2、4周末测定各组大鼠血浆内皮素-1(ET-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)水平,光镜下观察肺组织肺泡炎、纤维化的程度.结果 (1)造模后ET-1随时间延长升高[(0.10±0.05)、(0.11 ±0.04)、(0.28±0.08)、(0.41±0.13)μg/L],D1组较F4组下降,D2组与F4组差异无统计学意义(P＞0.05).(2)病理形态观察:模型组肺泡架构破坏,早期炎性细胞聚集,后期成纤维细胞、胶原纤维增生;早期波生坦治疗病变减轻.(3)ET-1与肺泡炎、纤维化评分呈正相关,MMP-9/TIMP-1与肺泡炎、纤维化评分呈负相关.结论 波生坦可延缓PF进展,早期治疗对肺泡炎、纤维化改善更明显.
作者：左万里；赵洁敏；黄积雄；周伟；黄炎明；黄艳芬 刊期： 2014年第03期
目的 探讨协同刺激分子B7-H1、B7-H4和转录因子叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)在胃癌中的表达及其临床意义.方法 应用免疫组织化学染色法检测B7-H1、B7-H4和Foxp3在100例胃癌组织及癌旁组织中的表达,分析B7-H1、B7-H4和Foxp3的表达与临床病理参数的关系.结果 B7-H1、B7-H4在胃癌组织中高表达,阳性表达率分别为65.0％和71.0％,其表达水平与浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关,差异有统计学意义(P＜0.05).Foxp3+调节性T细胞(Treg)在胃癌组织中高表达,并与淋巴结转移有关,差异有统计学意义(P＜0.05).B7-H1、B7-H4的表达水平和Foxp3+ Treg细胞数量呈正相关,相关系数分别为:r=0.437,P＜0.05;r=0.456,P＜0.05.B7-H1、B7-H4及Foxp3高表达患者的预后差于低表达者(P＜0.05).结论 B7-H1、B7-H4和Foxp3+ Treg细胞在胃癌组织中高表达,并与胃癌患者淋巴结转移和预后有关.
作者：鲁常青；李青；王辉；耿一婷；田波；谢军；谈炎；吴昌平 刊期： 2014年第03期
X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)是新鉴定的肿瘤抑制基因,在许多肿瘤组织和肿瘤细胞株中低表达甚至不表达[1].我们以重组腺病毒为载体,探讨过表达XAF1基因对人肺腺癌细胞A549的增殖和诱导细胞凋亡的作用及机制.
作者：张福全；段善州；黄秉韬；杨文涛；施立；桑永华；朱蓉英；陈勇兵 刊期： 2014年第03期
目的 观察大鼠小肠移植排斥反应对肠道紧密连接蛋白表达的影响.方法 建立大鼠异位小肠移植模型,分为3组:假手术组、无排斥反应组和排斥反应组.通过大鼠活动状态及病理评分确定排斥反应程度.采用酶联免疫吸附试验(ELASA)法检测血浆中二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(D-LA)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-2的水平.透射电镜观察肠道紧密连接的超微结构改变.应用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)、Westem blot法检测紧密连接蛋白Occludin和ZO-1 mRNA和蛋白表达水平的变化.结果 排斥反应组随时间延长,病理评分增加[3 d:(32.67±2.34)分;5 d:(43.50 ±±2.07)分;7 d:(69.50±2.43)分],肠黏膜屏障功能损伤加重[DAO:3 d:(35.84±5.60)U/ml;5 d:(46.50±O.80) U/ml;7 d:(54.01±1.70) U/ml],TNF-α和IL-2大量释放,肠道紧密连接损伤严重,紧密连接蛋白Occludin和ZO-1 mRNA和蛋白表达水平降低.线性相关分析发现,病理评分、TNF-α、IL-2与紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的表达呈负相关(P＜0.01).结论 大鼠小肠移植排斥反应可使肠道功能受损、紧密连接断裂、紧密连接蛋白Occludin和ZO-1表达水平降低,且其蛋白表达水平与排斥反应程度呈负相关.
作者：张文；宋红丽；杨洋；刘涛；沈中阳 刊期： 2014年第03期
肺癌是影响全球居民健康的主要恶性肿瘤,其发病率和死亡率呈现逐年上升趋势.肺癌如能早发现早治疗,治疗效果较理想;晚期的治疗效果差,死亡率高.目前对体检和未确诊者,大多作外周血肺癌相关指标的检查和影像学检查,其优点是简便易行,缺点是检出率偏低[1].本研究旨在探讨G蛋白信号调节因子17(RGS17)在肺癌中的临床应用.
作者：孙红岗；杨明峰；吴东东；卢韬；董学君；王兴木 刊期： 2014年第03期
手术切除气管成人若超过全长50％(即超过6 cm)、儿童超过全长30％时,端端吻合困难,须植入气管替代物才能重建气道[1].由于供应气管的血管纤细且呈节段性分布,使得气管无法通过显微外科技术直接进行血管吻合.气管移植亦多因血供问题而终导致失败,严重制约了气管外科的发展[2].干细胞定位到靶组织后,在体内微环境的特异信号作用下,能定向分化成组织所需的细胞类型[3];或者通过模拟体内环境,在体外实现干细胞的定向诱导分化,这为干细胞治疗疾病提供了理论基础[4].骨髓单个核细胞(BM-MNCs)包括造血干细胞、间充质干细胞(MSCs)、内皮祖细胞(EPCs)、中胚层来源细胞等多种分化潜能的细胞群,且具有容易采集、操作简单和低免疫排斥反应等优点,因而目前干细胞临床应用较多的仍以自体骨髓和外周血单个核细胞为主[3-4].
作者：潘枢；孙飞；史宏灿 刊期： 2014年第03期
高腹腔压力的处理一直非常棘手,静息腹内压(IAP)在0～5 mmHg(1 mmHg =0.133 kPa)之间,它与个人体形、腹部特征、肌肉张力有关[1].当患者反复或持续腹腔内压力≥12 mmHg时,为腹高压(IAH);当IAP持续≥20 mmHg并伴有1个以上器官功能不全表现时为腹腔间隔室综合征(ACS)[2-3].为此我们专门设计了1种减压装置,当发生了高腹压,安装此装置后,即可以降低腹腔压力,减少IAH引起的并发症,避免进一步发展到ACS状态.本实验旨在观察此装置的减压效果.
作者：郭晓东；杨兴东；李扬；王家坡；崔会专；李子国；华军霞；许爱国；张思永 刊期： 2014年第03期
目的 观察经皮肾镜手术中使用室温灌注液和温热灌注液对患者体温变化的影响.方法 选取经皮肾镜手术患者120例,分别在术中使用室温灌注液和温热灌注液,记录核心体温.结果 室温灌注液组患者在手术开始30 min以后各时间点核心体温分别为(36.12±0.25)、(36.10±0.37)、(36.05±0.32)、(35.97±0.28)、(35.92±0.32)℃,温热灌注液组患者在这些时间点核心体温分别为(36.23±0.20)、(36.19 ±0.25)、(36.16±0.17)、(36.11±0.29)、(36.10±0.26)℃,两组患者在这些时间点核心体温的差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 在经皮肾镜手术中应用温热灌注液,可有效避免患者围手术期低体温的出现.
作者：张增梅；李胜云；魏薇 刊期： 2014年第03期
目的 探讨膜联蛋白A2在结直肠癌中的磷酸化水平及其与临床病理特征及肿瘤预后的相关性.方法 分析2006年8月至2007年7月在第二军医大学附属长海医院肛肠外科进行治疗的183例散发性结直肠癌患者的临床及随访资料.建立患者肿瘤标本组织芯片,对磷酸化膜联蛋白A2的水平进行免疫组织化学检测并对结果进行统计分析.结果 肿瘤组织中磷酸化膜联蛋白A2的水平高于非恶性的对照组织(P＜0.01).患者肿瘤组织中较高的磷酸化膜联蛋白A2水平与T分期(P＜0.01)、N分期(P＜0.05)、肝转移(P＜0.01)、TNM分期(P＜0.01)、Duke分期(P＜0.01)、复发(P＜0.01)、肿瘤致死(P＜0.05)密切相关.生存曲线分析显示肿瘤组织中磷酸化膜联蛋白A2水平较低的患者其未复发率(P＜0.01)和总体生存率(P＜0.05)均高于磷酸化膜联蛋白A2水平较高的患者.多因素分析显示肿瘤组织中磷酸化膜联蛋白A2的水平可以作为衡量患者未复发率(P＜0.05)和总体生存率(P＜0.05)的独立因素.结论 结直肠癌患者肿瘤组织中磷酸化膜联蛋白A2的水平与肿瘤分期和临床特征密切相关.
作者：郝立强；傅传刚；薛赓；洪永刚；张艳 刊期： 2014年第03期
已有报告外源性血管内皮生长因子(VEGF)能显著降低急性肝衰竭(ALF)大鼠的死亡率[1].然而,VEGF半衰期和作用时间短.我们通过比较VEGF静脉注射和载VEGF纳米粒子培养肝细胞移植(HT)后ALF大鼠存活率、肝功能、肝脏VEGF mRNA的表达量、肝脏CD34标记的微血管密度(MVD),观察载VEGF纳米粒子对肝再生的影响.
作者：陈红健；陈佳慧；陈钟 刊期： 2014年第03期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
