孙克康；吴晓阳；陈文；李星；仲宁
目的 观察单克隆抗体CD44-生物素(Biotin)-亲和素(Avidin)绑定(CBA)技术,在体外构建的组织工程软骨移植修复猪膝关节负重区软骨缺损的效果.方法 分3组构建组织工程软骨:常规组:壳聚糖三维支架+软骨细胞;Biotin-Avidin绑定(BA)技术组:生物素+亲和素化壳聚糖三维支架+软骨细胞;CBA技术组:生物素化单抗CD44+亲和素化壳聚糖三维支架+软骨细胞.分4组修复猪膝关节负重区软骨全层缺损:A组植入常规组织工程软骨;B组植入BA技术构建的组织工程软骨;C组植入CBA技术构建的组织工程软骨;D组植入自体软骨.12周后取标本行大体观察并行Moran评分;生物力学方法评估标本弹性模量和刚度;Western blot检测新生软骨组织内的Ⅱ型胶原(colⅡ)、聚集蛋白聚糖(aggrecan)目的蛋白含量;对标本行苏木素-伊红染色、甲苯胺蓝染色并行Wakitani评分.结果 Moran大体评分,D组为(4.48 ±0.23)分,与C组差异无统计学意义(P＞0.05),但优于A、B两组(P＜0.05);D组弹性模量为(20.61 ±±2.02) mPa,刚度为(72.28±6.16) N/mm、colⅡ及aggreean目的蛋白含量比值分别为1.59 ±0.14和1.44±0.13,均优于其他组(P＜0.05);组织学染色及Wakitani评分均显示D组修复效果较好.结论 BA绑定技术比常规接种方法所构建组织工程软骨对猪膝关节负重区软骨缺损修复效果好,但是比较而言,单克隆抗体CBA绑定技术所构建组织工程软骨修复效果更佳,虽仍未达到自体移植修复水平.
作者：林红；周健；王会仁；沈龙祥；郭常安；董健；陈峥嵘 刊期： 2014年第03期
目的 观察盐酸氨基葡萄糖(OTL)联合姜黄素对兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡的影响.方法 成功建立兔膝关节炎模型,随机分为空白对照组(A组),模型组(B组),盐酸氨基葡萄糖治疗组(C组),联合治疗组(D组),每组10只,经过4周治疗后,采用原位缺口末端标记法(TUNEL)法检测各组软骨细胞凋亡情况,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和免疫组织化学法检测凋亡相关基因B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)、p53的基因和蛋白表达水平.结果与B组比较,C组和D组标本的软骨细胞凋亡率及促凋亡基因bax、p53的基因和蛋白表达水平明显降低(P＜0.05),而抗凋亡基因bcl-2的基因和蛋白表达水平明显升高(P＜0.05),其中D组的抗凋亡效果较C组更为显著(P＜0.05),且抗凋亡基因的mRNA和蛋白表达水平结果一致.结论 盐酸氨基葡萄糖可以抑制骨关节炎诱导的软骨细胞凋亡,有一定的保护作用,而姜黄素可以协同盐酸氨基葡萄糖抑制软骨细胞凋亡,减轻炎症,联合应用效果更为显著.
作者：刘建业；陈清汉 刊期： 2014年第03期
目的 探讨高效率的小鼠胰岛细胞分离纯化技术.方法 应用胆总管内灌注胶原酶、消化胰腺分离胰岛(灌注法),并与切碎消化胰腺分离胰岛(碎片法)比较;应用碘克沙醇(Iodixanol)不连续密度梯度(Iodixanol组)纯化胰岛,并与Ficoll不连续密度梯度(Ficoll组)比较.双硫腙(DTZ)染色观测胰岛的数量和纯度,胰岛素释放试验检测胰岛的分泌功能.结果 灌注法消化后每条胰腺可获得(298.00±15.58)个胰岛,较碎片法(36.00±3.89)个胰岛明显增高,两组间差异有统计学意义(P＜0.01).Iodixanol组和Ficoll组纯化后胰岛平均纯度均超过90％,两组间差异无统计学意义(P＞0.05).胰岛糖刺激试验于低糖(2.75 mmol/L)刺激时胰岛素分泌量Iodixanol组为(3.120±0.046) μg/L,Ficoll组为(3.060±0.426) μg/L,两组间差异无统计学意义(P＞0.05);而高糖(16.50 mmol/L)刺激时,Iodixanol组胰岛素释放量为(11.36±0.82) μg/L,明显高于Ficoll组的(7.98±0.56) μg/L,两组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 应用胆总管内灌注消化分离胰岛(灌注法)得到的胰岛更多,应用Iodixanol不连续密度梯度纯化的胰岛生物活性更高,胶原酶灌注消化Iodixanol纯化是小鼠胰岛分离提纯的较好方法.
作者：高戈；冯喆 刊期： 2014年第03期
目的 探讨在胰腺导管癌中丛生蛋白和抑凋亡蛋白及细胞增殖标志物间的关系.方法 用双重荧光染色法对17例胰腺导管腺癌中丛生蛋白和生存素(Survivin)进行染色并计数阳性细胞进行统计;同法对丛生蛋白和增殖细胞核抗原(PCNA)及Ki-67的表达进行检测.结果 在胰腺导管癌中丛生蛋白阳性细胞数为420个,Survivin阳性细胞数为72个,其中丛生蛋白和Survivin均阳性的细胞数为59个.丛生蛋白、PCNA及Ki-67共同表达的癌细胞数为0个.结论 丛生蛋白在胰腺导管癌中的抗凋亡范围比Survivin更广泛,并且其表达和细胞增殖无相关.
作者：金俊硕；高英兰；董玉玺；任志远；李星；陆文浩；李德旭 刊期： 2014年第03期
目的 探讨大鼠胃空肠Roux-en-Y吻合术后早期胃液体排空功能的变化及胃空肠吻合口Cajal间质细胞(ICC)的再生.方法 20只SD雄性大鼠随机分为实验组和对照组,实验组行幽门切除+胃空肠Roux-en-Y吻合术,对照组行幽门切断再吻合术.术后4周进行以下实验:放射性核素显像法评估胃液体排空功能;扫描电镜观察胃空肠吻合口ICC再生.结果 术后4周实验组大鼠胃液体半排空时间(t1/2)为(23.5 ±4.5) min,对照组为(10.2±2.3)min,实验组胃液体排空延迟(P＜0.01);胃空肠吻合口ICC可以再生.结论 大鼠幽门切除+胃空肠Roux-en-Y吻合术后早期胃液体排空延迟,而胃空肠吻合口ICC再生可能是其重要原因之一.
作者：孙井军；尤承忠；汤文浩 刊期： 2014年第03期
目的 观察微小RNA(miR)-29a对人胃癌SGC-7901细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响.方法 以磷酸盐缓冲液(PBS)为空白对照,以负载cel-miR67的复制缺陷型腺病毒(Ad-cel)为阴性对照,注射负载miR-29a的复制缺陷型腺病毒(Ad-miR29a)液于移植瘤内,观察移植瘤生长曲线和抑瘤率;采用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测移植瘤内miR-29a表达丰度;采用免疫组织化学技术检测CD34表达以计算移植瘤内微血管密度(MVD).结果 与PBS组比较,Ad-miR29a组移植瘤内miR-29a表达显著上调(3.06±0.73比1.00±0.21,P＜0.01),而Ad-cel组与PBS组比较差异无统计学意义(P＞0.05);Ad-miR29a组移植瘤生长速度低于PBS组,而Ad-cel组与PBS组差异无统计学意义(P＞0.05);于第5周末Ad-miR29a组抑瘤率达49.30％;Ad-miR29a组的移植瘤内MVD显著低于PBS组(21.3±8.1比42.6±11.2,P＜0.01),而Ad-cel组与PBS组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 miR-29a可显著抑制裸鼠胃癌移植瘤生长,其机制可能为抑制移植瘤内MVD,miR-29a有望成为新型的胃癌基因治疗靶标.
作者：陈陵；王宗华；宋航；黄一；王国威；王仙园；任辉 刊期： 2014年第03期
随着基础医学和技术的不断进步,细胞、分子、蛋白质、基因等不同层面的研究不断深入,对于胃疾病的认识也不断深入.新时代的胃外科医生不应该仅仅将精力集中于临床手术中,而应该时刻关注医学前沿进展,才能把握学科发展方向和趋势,顺应新世纪胃外科的发展潮流.
作者：秦新裕；刘凤林 刊期： 2014年第03期
目的 观察阿曼托双黄酮(AF)对匹罗卡品点燃小鼠癫痫发作、海马神经元的影响,并探讨其机制.方法 建立匹罗卡品小鼠点燃模型,并给予AF进行干预.综合应用神经电生理、病理学、分子生物学等技术,观察AF对点燃小鼠癫痫发作以及海马神经元的影响.结果 与癫痫组比较,AF组小鼠行为学和局部场电位信号(LFP)表现均相对稳定,海马CA1区存活神经元数目显著增加[(121.40 ±8.72)个,P＜0.05],原位末端转移酶标记(TUNEL)染色结果显示凋亡神经元数目减少[(1.70±0.98)个,P＜0.01],免疫组织化学(4 894.25±771.18)和Western blot结果(0.49±0.13)显示核因子-κB(NF-κB) p65表达明显降低(P＜0.01).结论 AF对小鼠癫痫模型具有明显的预防惊厥发生和神经保护作用,其作用机制与AF抑制癫痫发生时的脑内炎性反应有关.
作者：张震；孙涛；杨武；高攀；李子标；李杨；夏令宝；刘阳；王峰 刊期： 2014年第03期
我们通过检测二尖瓣置换术(传统手术比微创手术)患者围手术期肺功能变化,对比两种手术方式对肺功能的影响.一、资料和方法1.一般资料:2010年至2013年华中科技大学附属同济医院心脏大血管外科二尖瓣置换手术患者60例,其中传统开胸二尖瓣置换34例(传统组)及微创二尖瓣置换26例(微创组).2.检测指标:所有患者检查术前、术后1周、术后1个月肺功能.检测指标包括用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEVl)、大呼气流量(PER)、肺总量(TLC)下降、残气量(RV).
作者：杨小威；陈涛；潘铁成；李军；程才 刊期： 2014年第03期
手术切除气管成人若超过全长50％(即超过6 cm)、儿童超过全长30％时,端端吻合困难,须植入气管替代物才能重建气道[1].由于供应气管的血管纤细且呈节段性分布,使得气管无法通过显微外科技术直接进行血管吻合.气管移植亦多因血供问题而终导致失败,严重制约了气管外科的发展[2].干细胞定位到靶组织后,在体内微环境的特异信号作用下,能定向分化成组织所需的细胞类型[3];或者通过模拟体内环境,在体外实现干细胞的定向诱导分化,这为干细胞治疗疾病提供了理论基础[4].骨髓单个核细胞(BM-MNCs)包括造血干细胞、间充质干细胞(MSCs)、内皮祖细胞(EPCs)、中胚层来源细胞等多种分化潜能的细胞群,且具有容易采集、操作简单和低免疫排斥反应等优点,因而目前干细胞临床应用较多的仍以自体骨髓和外周血单个核细胞为主[3-4].
作者：潘枢；孙飞；史宏灿 刊期： 2014年第03期
目的 分析影响脑胶质瘤患者复发的因素.方法 采用聚合酶链反应(PCR)、免疫组织化学法分别检测肿瘤精子蛋白32前体(OY-TES-1) mRNA和蛋白表达.采用Cox比例风险回归模型分析影响胶质瘤复发的因素.结果 复发性脑胶质瘤OY-TES-1 mRNA阳性率为57.50％(46/80),OY-TES-1蛋白阳性表达率为33.75％ (27/80).多困素分析显示首次病理级别和OY-TES-1 mRNA表达水平是影响胶质瘤复发时间的独立预后因素.结论 检测OY-TES-1 mRNA有助于检测胶质瘤复发时间.
作者：严峻；卢桂花；阮玉山；廖兴胜；罗昱；肖绍文 刊期： 2014年第03期
目前已发现上百种微小RNA(miRNAs,miR)在胰腺癌组织中表达异常,其中miR-148a表达异常下调[1].本研究旨在观察去甲基化药物5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对胰腺癌Bxpc-3细胞miR-148a表达、CpG岛甲基化状态以及细胞增殖的影响.
作者：肖卫东；胡伟；蔡军；熊海蔚；廖国良；李勇 刊期： 2014年第03期
目的 探讨富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(LRIGl)在垂体瘤中的表达及意义.方法 应用免疫组织化学链菌素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测74例垂体瘤、20例正常脑组织中LRIG1的表达,分析其表达与患者预后的关系.结果 LRIG1在正常脑组织中的阳性表达率为100.0％,明显高于垂体瘤中的表达(54.1％),差异有统计学意义(P＜0.05).同时,LRIG1在非侵袭性垂体瘤中的阳性表达率为66.7％,明显高于在侵袭性垂体瘤中的表达(20.0％).Kaplan-Meier生存分析表明LRIG1及垂体瘤类型与患者的预后明显相关(P＜0.05).Cox多因素生存分析表明LRIGI可作为患者预后评估的独立因素.结论 LRIG1参与了垂体瘤的发生及发展,低表达患者预后较差.
作者：张焱；祝新根；程祖珏；沈晓黎；肖爵贤 刊期： 2014年第03期
目的 观察偶联西妥昔单抗(C225)的金纳米颗粒(AuNPs)对肺腺癌A549细胞株的作用,研究其对细胞功能以及相关蛋白的影响并探讨其分子机制.方法 应用浓度分别为1、10、100、500 mg/L的C225、偶联IgG的金纳米颗粒(IgG-AuNPs)、偶联C225的金纳米颗粒(C225-AuNPs)处理A549细胞,药物作用24、48 h后通过细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞抑制率;通过流式细胞仪检测细胞凋亡和周期变化,通过Transwell小室法检测细胞迁移,Western blot检测表皮生长因子受体(EGFR)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt (p-Akt)、细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)以及B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)蛋白的表达变化.结果 C225-AuNPs对A549细胞株的抑制率呈剂量依赖性,当浓度达到100 mg/L时,大抑制率为28％,相对单用IgG-AuNPs和C225,C225-AuNPs显著抑制细胞增殖.100 mg/L的C225-AuNPs作用后A549细胞凋亡率为(27.40±3.54)％,明显高于相同浓度C225的(11.80±2.02)％以及IgG-AuNPs的(9.50±2.76)％;但是C225-AuNPs对细胞周期的影响并不明显;C225-AuNPs处理组后穿膜细胞数目为(94±9)个,与C225组[(155±12)个]以及IgG-AuNPs组[(136±15)个]比较明显减少;通过Western blot检测经过C225-AuNPs处理后p-AKt、p-ERK以及bcl-2蛋白的表达量较C225以及IgG-AuNPs组明显下调.结论 C225-AuNPs显著抑制A549细胞增殖、迁移,促进凋亡,增强A549细胞对C225单抗的敏感性.
作者：钱亦淳；任斌辉；田艳艳；张帅；王洁；张宇；顾宁；尹荣；许林 刊期： 2014年第03期
目的 探讨胃癌患者血清SiSo细胞表达的受体结合肿瘤抗原(RCAS1)表达水平及临床意义.方法 采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测61例胃癌患者血清RCAS1水平,以31例正常人作为对照,并比较38例胃癌患者手术前后血清RCAS1水平.结果 胃癌患者血清RCAS1水平[(40.46±13.83) U/ml]明显高于正常对照组[(14.09 ±4.66) U/ml],两者差异有统计学意义(P＜0.01);血清RCAS1水平与胃癌患者性别、年龄无明显相关,与胃癌患者临床分期、肿瘤细胞分化程度明显相关;Ⅳ期[(59.17±6.06) U/ml]明显高于Ⅲ期[(45.61±5.74) U/ml]、Ⅲ期明显高于Ⅱ期[(34.28±6.26)U/m]、Ⅱ期明显高于Ⅰ期[(22.02±8.38) U/ml]、Ⅰ期明显高于正常对照组[(14.09±4.66) U/ml],两两比较差异有统计学意义(P＜0.05).肿瘤细胞分化程度较差(低分化腺癌、黏液腺癌)胃癌患者血清RCAS1水平[(45.19±13.38) U/ml]明显高于肿瘤细胞分化程度较好(高分化腺癌、中分化腺癌)胃癌患者[(36.70±13.19) U/ml];胃癌患者术后血清RCAS1水平[(31.74 ±9.59) U/ml]明显低于术前[(32.10±9.56) U/ml],两者差异有统计学意义(P＜0.01).结论 RCAS1参与胃癌的发生发展过程.
作者：刘杨桦；冯泽荣；王展福；邓洪强；林家威；王文美 刊期： 2014年第03期
高腹腔压力的处理一直非常棘手,静息腹内压(IAP)在0～5 mmHg(1 mmHg =0.133 kPa)之间,它与个人体形、腹部特征、肌肉张力有关[1].当患者反复或持续腹腔内压力≥12 mmHg时,为腹高压(IAH);当IAP持续≥20 mmHg并伴有1个以上器官功能不全表现时为腹腔间隔室综合征(ACS)[2-3].为此我们专门设计了1种减压装置,当发生了高腹压,安装此装置后,即可以降低腹腔压力,减少IAH引起的并发症,避免进一步发展到ACS状态.本实验旨在观察此装置的减压效果.
作者：郭晓东；杨兴东；李扬；王家坡；崔会专；李子国；华军霞；许爱国；张思永 刊期： 2014年第03期
肿瘤组织中巨噬细胞的浸润与肿瘤患者的不良预后相关[1].我们通过巨噬细胞与微囊化胃癌细胞共培养,观察其对微囊化胃癌细胞表型的影响.一、材料与方法1.材料:人胃癌细胞株SGC-7901购自中国科学院上海细胞生物学研究所细胞库.链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)免疫组织化学检测试剂盒(北京中衫金桥公司),明胶酶谱试剂盒(Invitrogen公司).
作者：冀学宁；范学军；全秀莲；吴忠；王若雨；王为；马小军 刊期： 2014年第03期
目的 观察应用高渗氯化钠羟乙基淀粉40注射液(HH40)行血液稀释对胃癌根治术患者血流动力学、血电解质及体液平衡的影响.方法 选取全麻下行胃癌根治术患者60例,随机分为高渗氯化钠羟乙基淀粉组(Ⅰ组)和生理盐水组(Ⅱ组),各30例.在手术进腹后达到麻醉深度稳定[脑双频指数(BIS)在55 ～65]时,分别给予HH40和生理盐水4 mL/kg行血液稀释,25 ～ 30 min输完.术中维持BIS为55 ～ 65.应用FloTrac/Vigileo (FV)心排血量监测系统监测心输出量(C0)、每搏输出量(SV)、每搏变异度(SVV)、平均动脉压(MAP)、心率(HR)和中心静脉压(CVP)等血流动力学参数,分别在人室后30 min(麻醉前基础值,T0)、血液稀释前(T1)、血液稀释后即时(T2)、稀释后30 min(T3)、稀释后60 min(T4)及稀释后120 min(T5)记录各项指标.经桡动脉采取血样测定T1、T2、T3、T4及T5时点患者的血钾及血钠浓度.统计总输液量、尿量、出血量及使用麻黄碱例次,观察有无出现过敏或肺水肿征象.结果 Ⅰ组在行血液稀释后(T2)MAP、CO、SV较血液稀释前(T1)明显升高,较对照组也显著升高(P＜0.01).Ⅰ组在输注HH40 30 min后(T3)SVV值较Ⅱ组明显降低(P＜0.05).Ⅰ组的血钠浓度在血液稀释后较前升高,与Ⅱ组比较亦较高(P＜0.05),但尚在正常范围,120 min后(T5)与Ⅱ组比较差异无统计学意义(P＞0.05).Ⅰ组的尿量较Ⅱ组明显增加(P＜0.05).结论 术中以HH40行血液稀释能有效维持患者的血流动力学稳定,在不增加输液量的情况下增加了肾脏灌注使患者尿量明显增加,对肾功能有保护作用.
作者：胡毅平；孙达良 刊期： 2014年第03期
我们利用电子颅脑损伤仪(eCCI)制备创伤性颅脑损伤(TBI)动物模型的具体方法并对其进行评价,现报道如下.一、制作方法1.动物及分组:西安交通大学实验动物中心提供(批号:20121023)雌性SD大鼠65只,体质量为220 ～240 g,适应性饲养3d后,随机分为正常对照组(A组)、模型1组(B组)、模型2组(C组)、模型3组(D组)和假手术组(E组).
作者：王瑞辉；郭新荣；吴涛；屈红艳 刊期： 2014年第03期
我们采用间接免疫荧光法检测乳腺恶性肿瘤患者术前血清中抗核抗体水平,探讨抗核抗体在乳腺恶性肿瘤患者愈后的临床意义.一、材料与方法1.一般资料:66例患者为2008年11月至2009年12月收治的进行手术治疗,并经病理组织学检查证实的初诊女性乳腺肿瘤患者,既往身体健康,无慢性病史.术后病理学分类按2003年乳腺肿瘤WHO组织学分类标准进行.
作者：张道强；田玫玲；张春江；衣翠红 刊期： 2014年第03期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
