石凤梧；张文立；陈子英；刘苏；蔡文清
目的 观察糖尿病大鼠骨折后血管内皮细胞生长因子(VEGF)的变化.方法 70只清洁雄性Wistar大鼠随机分为对照组和链脲佐菌素(stz)诱导的速发型糖尿病组,线锯锯断两组大鼠左胫骨后复位外固定.于骨折后1、2、3、4、6、8周取静脉血保留血清;大鼠左下肢X线片观察骨折愈合情况;取骨折断端组织行HE染色光镜观察、免疫组织化学检测VEGF;酶联免疫吸附分析法(Elisa)检测血清VEGF.结果 糖尿病组4周可以看见纤维骨痂,8周才有较多骨性骨痂出现,较对照组明显滞后;HE染色镜下观察糖尿病组骨形成滞后;3周VEGF免疫组织化学灰度值两组间差异有统计学意义,(实验组142.8±3.8;对照组128.0±5.5,P＜0.01);两组血清中VEGF差异无统计学意义(P＞0.05).结论 糖尿病大鼠骨折后血清中VEGF未减少,局部组织VEGF含量低是导致糖尿病大鼠骨折愈合差的原因之一.
作者：邢德国；宫明智；武士清；刘中浩 刊期： 2007年第04期
目的 探讨脾脏动、静脉组织内核因子-kappaB(NF-κB)的活化与基质Gla蛋白(matrix Gla protein,MGP)mRNA的表达在门静脉高压症性血管病变中的意义.方法 实验组为肝炎后肝硬化门静脉高压症(portal hypertension,PHT)患者28例,住院期间行择期脾切除加贲门周围血管离断术;对照组选取同期因外伤性脾破裂急诊人院行脾切除术患者12例.采用化学发光凝胶电泳迁移率(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)方法检测脾脏动、静脉血管NF-κB的活性;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测血管组织的MGPmRNA表达.结果 对照组内脾脏动、静脉组织MGPmRNA分别为0.23±0.10、0.26±0,13,显著低于PHT组脾动脉、脾静脉的0.58±0.19、0.55±0.15,差异有统计学意义(P＜0.05);于PHT组脾动、静脉内检测到NF-κB活性表达1.44±0.23、1.38±0.18,显著高于对照组脾动、静脉的0.19±0.12、0.25±0.16,差异有统计学意义(P＜0.05),且PHT组脾脏动、静脉MGP mRNA表达与NF-κB的活性呈显著正相关(r=0.692,P＜0.05;r=0.703,P＜0.05).结论 肝硬化时PHT血管组织内NF-κB的活化,MGPmRNA的表达增强,调节血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)的增殖和迁移,并参与了内脏血管病变形成和发展.
作者：曹杰；陈孝平 刊期： 2007年第04期
目的 探讨良性脑膜瘤中E26转录因子-1(E26 transformation-specitic-1,Ets-1)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达及其与肿瘤复发的关系.方法 选取52例Simpson Ⅰ级切除的良性脑膜瘤采用免疫组织化学法检测Ets-1和MMP-9的表达,分析其参数与肿瘤复发的关系.结果 Ets-1的表达:非复发组免疫组织化学(IHC)评分为(2.8±1.7),复发组为(6.3±1.5),复发组较非复发组的IHC评分增高,两者差异有统计学意义(P＜0.01).MMP-9的表达:非复发组IHC评分为(2.2±1.8),复发组为(3.3±1.7),复发组较非复发组的IHC增高,两者差异有统计学意义(P＜0.05).Ets-1和MMP-9的表达具有呈显著正相关(γ=0.822,P＜0.01).结论 Ets-1正性调节MMP-9的表达水平;Ets-1和MMP-9可以作为预测良性脑膜瘤复发的危险因素.
作者：刘安民；李方成；蔡望青；邓跃飞；吴启华 刊期： 2007年第04期
我们在前期研究[1]的基础上,选择c-kit、CK7及两者的组合对原代肝细胞癌(HCC)细胞进行流式细胞分选,从肝癌细胞中分离与鉴定干细胞亚群.
作者：刘胜军；方驰华 刊期： 2007年第04期
上尿路梗阻在临床上较为常见,以往诊断主要依赖B超、排泄性尿路造影(IVU)、逆行肾盂输尿管造影(GRP)、普通CT、MR等检查,但随着CT技术的不断进步,CT尿路成像技术对上尿路梗阻性疾病的诊断具有重要的临床价值[1].我们自2002年2月采用多层螺旋CT三维尿路成像(MSCTU)检查上尿路梗阻性疾病89例进行分析,探讨其在上尿路梗阻中的诊断价值.
作者：薛学义；郑清水；魏勇；周辉良；罗义麒；曹林升 刊期： 2007年第04期
胰腺癌是一种高度恶性的消化道肿瘤,尽管以手术为主的胰腺癌综合治疗模式在延长患者生存时间和提高生活质量方面取得了一定进展,但其临床疗效仍不尽人意.资料显示胰腺癌术后5年生存率仅为3%～4%.面对严峻的现实,惟有多学科交叉合作,在胰腺癌发病机制、早期诊断、综合治疗等方面进行深入研究,并获得突破性进展,才有望根本改善其预后.
作者：王春友；刘涛 刊期： 2007年第04期
目的 探讨可诱导性共刺激分子(ICOS)单抗、细胞毒T淋巴细胞4Ig(CTLA4Ig)阻断共刺激通路对于异基因大鼠胰腺移植的作用及其机制.方法 建立胰腺移植模型,分A组(对照组),B组(CTLA4Ig组),C组(抗ICOS单抗组),D组(联合CTLA4Ig和抗ICOS单抗组).术后1、4、7 d监测血糖,第7天取胰腺做苏木素-伊红染色,脾脏做流式细胞检测CD3+CD8+T细胞、CD4+T细胞、CD4+CD25+T细胞.结果 与A组比较:B、C、D组排斥反应较A组明显减弱,显著延长了移植物的存活时间.CD3+CD8+T细胞计数B、C、D与A组比较均有减少,差异有统计学意义(P＜0.01).CD4+T细胞B、D与A组的差异有统计学意义(P＜0.05).CD4+CD25+T细胞各组间逐渐升高,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 抗ICOS单抗和CTLA4Ig能有效地抑制大鼠胰腺移植排斥反应,延长移植物存活时间,且联合应用比单一应用更有效.其可能机制为诱导了CD4+CD25+T细胞的产生.
作者：韩曙光；徐泽宽；张轩；苗毅 刊期： 2007年第04期
目的 探讨bcl-2表达在肝门胆管癌发生、发展中的作用,评价其在肝门胆管癌预后判断中的价值.方法 免疫组织化学法检测36例肝门胆管癌和10例正常胆管石蜡切片标本中bcl-2表达,分析其与肝门胆管癌临床病理参数和术后生存率的关系,生存率计算采用Kaplan-Meier法,Log-rank检验比较生存曲线.结果 肝门胆管癌中bcl-2阳性表达率为55.6%(20/36),正常胆管bcl-2阳性率10.0%(1/10),两者差异有统计学意义(P＜0.05);bcl-2阴性组术后1、3、5年存活率分别为82%,55%和25%,阳性组分别为33%和9%,无5年生存者,两组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 肝门胆管癌中bcl-2有较高阳性表达率,bcl-2表达在肝门胆管癌发生、发展中可能起促进作用;bcl-2表达可能是肝门胆管癌预后因素之一,阳性表达多提示预后不良.
作者：彭创；汤恢焕；吴金术 刊期： 2007年第04期
目的 探讨体外转录法合成的小干扰RNA(siENA)对大鼠淋巴细胞白细胞介素(IL)-2基因的表达和功能的影响.方法 设计并合成3条siENA(siENA-1、siRNA-2、siRNA-3)在阳离子脂质体的介导下转染淋巴细胞.于转染后0、24、48 h收集细胞,用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测IL-2 mRNA的变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测IL-2表达的变化.结果 体外合成的3条siRNA通过脂质体转染淋巴细胞后,均能不同程度地抑制IL-2的表达.转染后24 h的ELISA方法检测显示siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3组的抑制率分别为(79.20 ±1.83)%、(66.50±1.42)%、(43.90±1.22)%,以siENA-1的IL-2抑制作用强.半定量RTPCE方法检测显示siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3转染后的IL-2 mRNA均受到不同程度的抑制,其中siENA-2组的抑制作用明显(82.10±1.85)%.结论 siRNA可特异性的抑制淋巴细胞IL-2基因的转录和表达,为研究siRNA在移植免疫耐受及防移植物抗宿主病(GVHD)方面的应用提供了依据.
作者：鄢涛；王森；龚建平；彭勇；刘作金；石毓君；刘鸿翔 刊期： 2007年第04期
目的 探讨葛根素对小鼠乙醇性ONFH的预防作用.方法 4周龄小鼠随机分为3组,A组给予白酒,B组给予白酒和葛根素,C组给水.4、6、8、10个月分批检测动物血清学、肝脏和股骨头组织学、基因表达等变化.结果 实验6个月时:(1)3组血清CHO、TG、ALP分别为:(6.39±0.49)、(3.19±0.11)、(2.98±0.36)mmol/L,(1.01±0.15)、(0.71±0.13)、(0.68±0.22)mmol/L,(161.6+32.44)、(196.5±31.52)、(203.4±22.83)IU.(2)A组出现脂肪肝,股骨头骨小梁变细稀疏,髓内造血组织减少,脂肪与空骨陷窝明显增多.B组股骨头内脂肪稍增加,空骨陷窝比正常C组少.3组大脂肪细胞平均直径和空骨陷窝计数分别为(40.02±3.25)、(39.15±3.67)、(38.51±3.09)μm,(13.5±1.6)、(9.8±2.2)、(10.3±2.7)%.(3)A组中PPARγmRNA呈高表达,Osteocalcin mRNA呈低表达.B组和C组中PPARγmRNA呈低表达,Osteocalcin mRNA呈高表达.始自6个月,A组各数据和B、C组间差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),B、C组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 葛根素能够预防小鼠乙醇性ONFH的发生.
作者：王义生；刘沛霖；殷力；李月白 刊期： 2007年第04期
胰腺癌为常见的恶性肿瘤,发病率逐年上升,但预后很差.由于难以早期诊断,胰腺癌诊断明确时往往已属于局部进展期,肿瘤浸润肠系膜上动静脉、门静脉或者出现了肝转移而失去根治切除的机会[1].全世界范围内胰腺癌的平均切除率不足20%.不可切除的胰腺癌患者中位生存期是3～6个月,可切除患者的预后也不佳,术后5年生存率大约是10%～19%,中位生存期是12～18个月[2].尽管开展了早期诊断研究以使患者获得早期发现早期治疗的机会,开展扩大切除术以提高切除率,采用新辅助放化疗以提高疗效[3],但至今仍没有突破性的进展,胰腺癌的疗效徘徊不前[2].因此,探索新的有效的治疗手段,是国内外目前急需解决的重要课题[4,5].
作者：吴文川；靳大勇 刊期： 2007年第04期
目的 探讨中国汉族人非贲门胃癌幽门螺杆菌(Hp)感染与白细胞介素(IL)-1基因多态性的关系,探讨宿主遗传因素对Hp感染在非贲门胃癌的作用.方法 采用病例对照研究和PCR-RFLP方法,检测143例非责门胃癌患者和264例正常对照者的IL-1B和白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1 receptor antagonist,IL-1RN)双等位基因型分布.Hp感染通过检测血清Hp Ab-IgG.结果 Hp阳性非贲门胃癌患者IL-1B-511*T等位基因频率高于Hp阴性患者(60%vs 46%,P=0.0342,OR=1.666,95%CI:1.045～2.656),也高于正常对照组(60% vs 48%,P=0.0071,OR=1.665,95%CI:1.149～2.412),多因素logistic回归分析校正年龄和性别后,与携带IL-1B-511*C/C基因型者比较,携带T/T基因型者胃癌风险升高3.01倍(OR=3.01,95%CI:1.27～7.11,P=0.012),携带IL-1B-511*T等位基因者胃癌风险升高2.29倍(OR=2.29,95%CI:1.08～4.86,P=0.032).结论 IL-1B-511*T等位基因和Hp阳性胃癌相关,提示该等位基因在Hp阳性非贲门胃癌发病机制中可能起重要作用.
作者：宋继权；夏冰；李春；吴云华 刊期： 2007年第04期
目的 体外诱导大鼠骨髓间质干细胞(BMSCs)分化为胰岛样细胞.方法 采用分步法体外诱导后,间接免疫荧光法鉴定诱导前后细胞nestin、胰岛素蛋白表达;RT-PCR法检测诱导前后胰岛转录因子mRNA表达;ELISA检测诱导后细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌.结果 免疫荧光染色显示诱导5 h,nestin阳性细胞为(44.6±7.3)%.诱导24 h,nestin阳性细胞增至(61.8±8.4)%.此后,nestin阳性细胞数目开始下降,诱导第14天后,nestin表达基本消失;同时诱导后的细胞可以表达胰岛素蛋白.另一方面,RT-PCR结果 显示诱导后细胞可以表达胰岛素-1、葡萄糖转运子-2及其转录因子mRNA.ELISA结果 显示不同浓度的葡萄糖刺激的胰岛素分泌量不同,5mmol/L和25mmol/L葡萄糖刺激的胰岛素分泌量分别为(25.53±6.49)和(53.26±7.56)mU/L,而诱导前MSCs不具备上述特点.结论 大鼠BMSCs体外可以诱导成为胰岛素分泌细胞.
作者：孙吉平；杨于嘉；贾延劼 刊期： 2007年第04期
目的 探讨羟基磷灰石纳米粒子(Nano HAP)在体内对兔VX2肝种植瘤生长的抑制作用及对肿瘤细胞bax/bcl-2凋亡蛋白表达的影响.方法 将56只VX2肝荷瘤兔随机分成四组,通过肝动脉灌注Nano HAP溶胶、5-Fu以及5-Fu与Nano HAP的混合液,并与生理盐水组对照.观察各组动物的一般情况,对肿瘤体积进行监测并比较.采用免疫组织化学染色观察bax/bcl-2蛋白的表达.结果 各治疗组对肿瘤生长都有明显的抑制作用.Nano HAP溶胶组肿瘤体积明显小于对照组(P＜0.05),肿瘤生长抑制率达到28.1%;5-Fu组抑瘤率达到43.7%,但动物表现出明显毒副作用;联合治疗组抑瘤率达到51.2%,而且毒副反应明显小于5-Fu组.Nano HAP组及联合治疗组免疫组织化学染色显示bcl-2蛋白表达率分别为41.7%(5/12)、38.5%(5/13),较对照组72.7%(8/11)明显降低;bax蛋白表达率为50.0%(6/12)、61.5%(8/13),明显高于对照组27.3%(3/11).结论 Nano HAP在体内对兔VX2肝种植瘤生长有明显的抑制作用,而且能明显降低5-Fu的毒性作用.其抑瘤机制可能是通过影响bax/bcl-2的表达加速肿瘤细胞凋亡.
作者：胡军；刘志苏；唐胜利；何跃明；刘俊 刊期： 2007年第04期
目的 建立一种基于新西兰白兔的骨髓炎模型以供毒性评估和治疗性研究.方法 40例健康新西兰大白兔,采用胫骨近段髓腔注射0.1 ml 5%鱼肝油酸钠和0.1 ml 1×108 CFU/ml耐甲氧西林药金黄色葡葡球菌(MRSA)悬浮液的方法诱导骨髓炎,不用抗生素来预防菌血症.采用大体观察,放射影像,细菌学和组织病理学等方法来评价.结果 所有大白兔都可以看到早期局部组织肿胀、病腿跛行,不同程度食欲减退,同时伴有体重增长缓慢.37例有典型骨髓炎的放射学表现,表现为中度到广泛的皮质反应,皮质骨破坏,轻度到广泛新骨形成,在胫骨髓腔的近端多有死骨形成.38例培养出MRSA,病理学显示为慢性活动性炎症,骨溶解,并有新生编织骨.结论 本方法简便易行,效果较满意,未出现严重并发症和死亡,可以用作骨髓炎相关研究.
作者：李云飞；赵明东；戴文达；董健；王惠生；罗苹 刊期： 2007年第04期
目的 构建表达转化生长因子βⅡ型受体(TβRⅡ)胞外区-活化T细胞表达和分泌的调节因子(RANTES)融合基因重组腺病毒并鉴定其在肿瘤细胞的表达.方法 采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法扩增小鼠TβRⅡ胞外区和RANTES基因,重叠PCR法扩增TβRⅡ胞外区-RANTES融合基因,将融合基因克隆至pDC316载体,采用AdMax Adenovirus Vector Creation试剂盒构建融合基因重组腺病毒载体,融合基因重组腺病毒按moi=100:1的比例体外感染小鼠肺腺癌L795细胞系,Western Blot方法检测感染后肿瘤细胞的蛋白表达.结果 RT-PCR正确扩增了440 bpTβRⅡ胞外区、244 bp RANTES基因,重叠PCR正确扩增了745 bpTβRⅡ胞外区-RANTES融合基因,重组质粒融合基因-pDC316经酶切鉴定正确,与pJM17双质粒共转染获得表达融合基因重组腺病毒,病毒滴度为8×1010 pfu/ml,感染后的LA795细胞有相对分子质量为33 000的蛋白表达.结论 成功构建表达TβRⅡ胞外区-RANTES融合基因重组腺病毒载体,为进行体内抗肿瘤基因治疗的研究创造条件.
作者：王旭东；刘虹；曹水；李慧；任秀宝；郝希山 刊期： 2007年第04期
目的 观察一氧化氮(NO)对重症急性胰腺炎(SAP)肺损伤Toll样受体(TLR)表达的影响.方法 动物分为假手术组、胰腺炎组、氯喹(CQ)治疗组和L-精氨酸(L-Arg)治疗组;实时荧光逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织TLR2/4 mRNA表达.结果 SAP大鼠肺组织TLR2/4表达明显增高(3 h:0.787±0.751、1.512±1.794 E-2;6 h:1.086±1.738、2.097±3.735 E-2;12 h:1.113±6.141、2.957±2.620 E-2),肺损伤加重(P＜0.05或P＜0.01).以CQ抑制肺组织中TLR2/4表达后(3 h:0.313±5.491 E-2,0.005±1.419 E-3;6 h:0.488±7.442 E-2,0.010±1.518E-3;12 h:0.883±8.911 E-2,0.024±2.760 E-3),肺损伤减轻(P＜0.05或P＜0.01).给予L-Arg治疗后,肺组织NO浓度明显升高,TLR2/4表达降低(0.656±3.972 E-2,1.501±6.111 E-2;0.260±0.891 E-2,0.732±5.135E-2;0.126±0.914E-2,0.414±1.678 E-2),肺损伤程度减轻(P＜0.05或P＜0.01).结论 肺组织内TLR2/4表达在SAP肺损伤中明显上调,肺组织损伤加重;NO可以明显抑制SAP肺组织TLR2/4表达从而减轻肺组织损伤.
作者：张磊；吴河水；王琳；郭兴军；陶京；陈燕 刊期： 2007年第04期
目的 建立SD鼠胰腺癌模型并探讨其癌变过程中病理形态学改变及胰腺上皮内瘤变(PanIN)的计数和分级.方法 将二甲基苯并蒽(DMBA)置入胰实质内作为实验组(A组)及设立曲古霉素(TSA)干预组(B组),3～5个月内处死观察胰腺癌发生情况,苏木素-伊红(HE)染色镜下观察胰腺病理学变化及PanIN计数和分级.结果 A组(实验组)发癌率为48.6%(18/37),其中胰腺导管癌17例和纤维肉瘤1例;B组发癌率为33.3%(12/36),其中胰腺导管癌11例和纤维肉瘤1例;A组肿块大径明显大于B组(P＜0.05);C组(对照组)胰腺及A、B组胰腺外主要脏器均未见肿瘤发生和无明显病理学改变.A组癌旁组织高级PanIN(HpanIN)数高于B组各时段,差异无统计学意义(P＞0.05);A组非癌胰腺组织各时段HpanIN数高于B组,差异无统计学意义(P＞0.05);A组和B组3个月鼠胰腺HpanIN数明显低于4个月鼠和5个月鼠,差异有统计学意义(P＜0.05);C组仅见1个HpanIN,均明显低于A、B组鼠(P＜0.01).结论 DMBA置入胰实质内可在短期获得较高的SD鼠胰腺癌发生率,TSA能抑制胰腺癌的发生和生长;HPanIN可能是胰腺导管癌发生过程中必不可少的重要病理形态学改变.
作者：黄生福；杨竹林；梁珊；李清龙；范文涛 刊期： 2007年第04期
目的 探讨三氧化二砷(As2O3)对两种不同p53表型胶质瘤细胞U87MG、T98G作用后细胞程序性死亡相关基因表达的影响.方法 应用基因芯片技术筛选出As2O3作用于两种胶质瘤细胞U87MG、T98G前、后与细胞程序性死亡有关的表达差异有统计学意义的基因;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞生长抑制率;用电镜和原位凋亡检测(TUNEL)法及及吖啶噔/溴乙啶双荧光染色进行细胞形态观察、流式细胞仪等方法检测细胞程序性死亡改变.结果 两种胶质瘤细胞应用As2O3后,透射电镜下T98G中频繁地观察到细胞自噬现象;筛选出U87MG细胞在As2O3作用前后差异表达且与程序性死亡相关基因共46条(上调33条,下调13条).T98G细胞在As2O,作用前后差异表达且与程序性死亡相关基因共54条(上调34条,下调20条).结论 As2O3以剂量依赖的方式通过细胞程序性死亡来抑制U87MG和T98 G细胞的增殖;As2O,诱导下的两种不同P53表型的细胞系中还存在非凋亡调控的细胞程序性死亡(自噬);P53/ATM通路的基因、Bcl-2家族、TNF配体家族、TNF受体家族基因参与As2O3诱导胶质瘤细胞程序性死亡的发生机制.
作者：张健；赵世光 刊期： 2007年第04期
随着心脏血运重建全动脉化概念在CABG(冠状动脉旁路移植术)中的广泛被接受,RA(桡动脉)成为仅次于胸廓内动脉的候选血管桥.RA桥术后近期通畅率较高,但中、长期随访结果差异较大[1,2].我们通过建立自体肢体动脉桥动物模型,观察移植后肢体动脉重塑情况.
作者：张杨杨；葛文；袁彪；张倞；李刚；张伟倍 刊期： 2007年第04期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
