王士杰
目的 利用β-甘油磷酸盐处理牛主动脉平滑肌细胞(BASMC)制备体外血管钙化模型.方法 移植块法原代培养牛主动脉中膜平滑肌细胞,8代内的传代细胞添加10 mmol/L β-甘油磷酸盐培养10 d,Von Kossa染色、茜素红S 染色和电镜检查鉴定钙化,同时测量细胞层钙沉积、碱性磷酸酶活性及培养上清的骨钙素含量.结果 10 d后细胞层出现大量钙盐沉积,并且β-甘油磷酸盐时间依赖性增加钙沉积,碱性磷酸酶活性及骨钙素含量各时间点均较正常培养细胞显著增加(P<0.01).结论 甘油磷酸盐能在短期内诱导出BASMC广泛钙化,用此方法制备的BASMC是一种良好的研究血管钙化的体外模型.
作者:刘立新;王士雯;丁秀云;王宇玫;赵玉生 刊期: 2006年第10期
目的 研究新药心肌肽素对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)的影响及其在离子通道水平的作用机制.方法 用急性酶解法分离大鼠心室肌细胞,用标准的全细胞膜片钳技术,观察不同浓度的心肌肽素对Ito的影响.结果 心肌肽素呈浓度依赖性抑制大鼠心室肌细胞Ito,心肌肽素浓度(mg/L)为10、50、100、250和500时分别使Ito降低(%)4、13、22、32和38.心肌肽素50 mg/L使Ito电流密度-电压曲线下移,但不改变曲线的形状,也不改变Ito稳态激活曲线.结论 心肌肽素抑制大鼠心室肌细胞Ito,可能是其抗心律失常作用的机制之一.
作者:吴辉;李立环;陈雷;黄爱杰 刊期: 2006年第10期
目的 研究NO/PKG介导Ca2+/钙调神经磷酸酶(CaN)信号通路对血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的调控.方法 植块法原代培养Wistar大鼠VSMCs.Western blot测定CaN表达,定磷法测定CaN活性.MTT法测定VSMCs的增殖,丫啶橙/溴化乙锭荧光染色法测定VSMCs的活性.结果 SNAP和Sp-8-pCPT-cGMPS使苯肾上腺素(PE)诱发的VSMCs吸光度分别降低,而Rp-8-pCPT-cGMPS则可使吸光度增加.维拉帕米预处理VSMCs后,PE诱发的VSMCs吸光度降低,并且上述吸光度可以被SNAP或Sp-8-pCPT-cGMPS进一步抑制,但可被Rp-8-pCPT-cGMPS轻微升高.环胞素A预处理VSMCs后,PE诱发的VSMC吸光度降低,但是这一数值不能被SNAP、Sp-8-pCPT-cGMPS或Rp-8-pCPT-cGMPS进一步抑制或升高.SNAP和Sp-8-pCPT-cGMPS抑制PE诱发的CaN表达与活性.结论 NO/PKG抑制血管SMCs增殖,但并不影响SMCs存活率;NO/PKG这一作用是介导SMCs内游离钙/CaN信号通路实现的.
作者:李世军;孙宁玲 刊期: 2006年第10期
目的 观察C57BL/6鼠胆囊结石形成过程中肝固醇载体蛋白2(SCP2)mRNA水平及胆囊胆汁中胆固醇饱和指数的变化.方法 C57BL/6鼠20只,分为结石组和对照组.对照组喂普通饲料,结石组采用1%的胆固醇饮食4周;RT-PCR方法检测肝SCP2 mRNA水平的变化;全自动生化仪检测胆脂,并计算胆固醇饱和指数.结果 胆囊结石组肝SCP2 mRNA水平显著升高,胆汁胆固醇饱和指数亦显著增加.结论 肝SCP2的表达及胆汁CSI的增高呈正相关.
作者:安国顺;王海梅;巴图乌拉;王俊峰;倪菊华;李月廷;祝学光 刊期: 2006年第10期
现代科学技术的进步对教学任务提出了更高的要求.PBL(problem based learning)适应于这一要求,鼓励学生以问题为中心,在学习过程中探索问题,解决问题.将PBL灵活运用于生理学课堂教学,通过精心设计课堂提问、组织基于问题的专题讨论以及结合实验示教等多种方式,活跃课堂教学气氛、激发学生的探索热情,并充分培养学生的创造性思维能力,从而提高课堂教学质量.
作者:唐晓露;倪鑫 刊期: 2006年第10期
骨髓有2个重要的功能:造血和成骨.骨髓中存在造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSCs)(CD34+细胞)和间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs).这2种干细胞共同存在于骨髓腔中,MSC对HSC不仅有空间位置的机械支持作用,还分泌多种造血因子支持其造血功能,有助于HSC未分化状态的维持.这2种干细胞之间是否存在着某种联系或交叉呢?我们分离了脐血CD34+细胞,并在体外培养扩增,探讨其中是否含有成骨细胞的前体细胞.
作者:郭若霖;贾雷鸣;程瑞芳;温学红;谈志龙;王学谦 刊期: 2006年第10期
骨肉瘤肺转移是临床患者死亡的主要原因,近年来对骨肉瘤预后相关基因的发现、研究增进了人们对骨肉瘤转移机制的认识,对于骨肉瘤的个体化治疗和患者预后有一定的指导意义,本文就几个与骨肉瘤预后相关的热点基因进行综述.
作者:曲国蕃;孙志海;李佳慧 刊期: 2006年第10期
目的 探讨环氧化酶-2(COX-2)和血管内皮生长因子(VEGF)在人脑星形细胞瘤中的表达及其与肿瘤临床病理分级的关系.方法 通过免疫组化SP法测定COX-2和VEGF在50例人脑星形细胞瘤和10例正常脑组织中的表达.结果 COX-2、VEGF在人脑星形细胞瘤中的表达高于正常脑组织(P<0.001).COX-2和VEGF与人脑星形细胞瘤临床病理分级显著相关(P<0.05).人脑星形细胞瘤中COX-2与VEGF的表达存在相关性.结论 COX-2和VEGF参与人脑星形细胞瘤的发生、发展且与其恶性表型有关;COX-2可能与人脑星形细胞瘤的血管形成有关.
作者:徐滨;宋来君;徐国本;张智峰 刊期: 2006年第10期
目的 以自发性高血压(SHR)大鼠为对象,研究硫化氢(H2S)对血管中胶原堆积的影响.方法 SHR大鼠17只,随机分为SHR组(n=6),SHR+H2S(n=6)组和SHR+PPG组(n=5).WKY大鼠5只为对照组(n=5).SHR+H2S组每日腹腔注射0.25 mL H2S供体NaHS(56 μmol/kg),SHR+PPG组每日腹腔注射0.25 mL PPG(37.5 mg/Kg),连续用药5周.WKY对照组及SHR组注射等量注射用水.连续混合喂养5周后测定动脉血压;以胸主动脉组织为对象,用酶促反应法测定CSE活性;用高温裂解法测定羟脯氨酸含量.用酶联免疫法(ELISA)测定Ⅰ型胶原含量.用免疫组化法检测转化生长因子β3(TGF-β3)表达.结果 与WKY对照组相比,SHR组大鼠血压升高52%(P<0.01);CSE酶活性降低55%(P<0.01);羟脯氨酸含量增加87%(P<0.01);Ⅰ型胶原含量增加28%;TGF-β3表达增加10%(P<0.05).给予H2S后缓解了上述指标的变化.结论 给SHR大鼠补充外源性H2S能够降低动脉血压,而且使主动脉组织中羟脯氨酸和Ⅰ型胶原含量减少,从而改善SHR大鼠血管中胶原的堆积.
作者:张春雨;杜军保;闫辉;唐朝枢 刊期: 2006年第10期
目的 构成BCL-2基因表达的人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞模型.方法 质粒pcDNA3-BCL-2 经酶切鉴定后,以脂质体法转染人胃黏膜上皮细胞GES-1,经G418筛选获得细胞克隆,荧光免疫组化法鉴定BCL-2基因表达阳性细胞.结果 经酶切鉴定为携带BCL-2基因的质粒pcDNA3-BCL-2,荧光免疫组化结果显示7个克隆中,均有不同程度的BCL-2基因表达.BCL-2主要表达在胞质及细胞核膜.结论 GES-1细胞为BCL-2表达阳性的细胞,为进一步研究BCL-2基因与胃癌的关系提供了理想的细胞模型.
作者:ZHU Li-hua;朱丽华;甄永占;李淑英;习瑾昆;章广玲;周天戟;赵红 刊期: 2006年第10期
目的 研究食管癌组织中HSP70的表达情况,探索HSP70-多肽复合物分离的可行性途径.方法 采用人HSP70基因探针P17与人食管癌组织中提取的RNA进行Northern杂交;用亲和柱层析法分离HSP70-多肽复合物.结果 癌组织提取物出现了比正常组织较强的杂交信号,从食管癌组织中提取蛋白质,经一系列层析柱(Con-Asepharose、ADP-agarose、MonoQ及HSP70抗体亲和层析柱),分离到HSP70-多肽复合物.结论 HSP70基因在食管癌组织中的高表达,为提取肿瘤HSP70-多肽复合物提供了可行性方法.
作者:赵安芳;高富荣;张玉焕;李新利;陈兰英;张志谦 刊期: 2006年第10期
目的 了解血红素加氧酶-1(HO-1)在延长异基因大鼠心脏移植物存活中的作用及其机制.方法 雄性LEW(RT1Ⅰ)和 LEW.1W(RT1Ⅱ)大鼠分别作为供体和受体,受体鼠分别应用CoPPIX 5 mg/(kg·d),SnPPIX5 mg/(kg·d).对照组及实验组均6只鼠.由移植手术前1日开始至发生排斥,比较心脏移植物存活时间,分别在移植后第5天取心脏进行HE染色及CD3、CD25、ED1和Ki-67染色;并测定HO-1活性和用Western blot定量HO-1蛋白;进行受体脾细胞接受供体脾细胞刺激的混合淋巴细胞培养.结果 对照组心脏移植物平均7 d出现排斥;应用CoPPIX诱导HO-1表达后存活时间为13.5 d,显著长于对照组(P<0.05).而应用SnPPIX治疗后存活时间为6.5 d.对照组与SnPPIX治疗组的心脏移植物中有中等量的细胞浸润,CoPPIX治疗组移植物组织中的CD3+T细胞、CD25+细胞、巨噬细胞和增殖细胞都明显少于SnPPIX及对照组.同对照组相比,CoPPIX诱导HO-1表达明显抑制体内脾细胞增生(P<0.05),而SnPPIX无抑制.结论 诱导HO-1表达能够抑制大鼠淋巴细胞的免疫活性并延长异基因心脏移植物的存活.
作者:徐涛;王晓峰;曲星珂;叶海云;张晓鹏;黄晓波;侯树坤 刊期: 2006年第10期
目的 研究含分泌型人酸性成纤维细胞生长因子(sp-haFGF)基因的重组腺相关病毒(rAAV)感染内皮祖细胞(EPCs)的可行性.方法 用PCR法将FGF-4的信号序列与原始的aFGF基因连接,形成sp-haFGF基因.将此目的基因克隆到AAV载体质粒pAAV-IRES-hrGFP中,并与包装质粒(pAAV-RC)和辅助质粒(pHelper)共转染HEK293细胞,获得编码sp-haFGF的重组腺相关病毒.用浓缩的病毒感染体外培养的EPC,荧光显微镜下观察细胞表达绿色荧光蛋白情况,并用RT-PCR和Western blot方法鉴定sp-haFGF在EPC中的表达.结果 获得含有sp-haFGF的重组腺相关病毒,将其感染EPC后,约20%~30%的细胞出现绿色荧光.用RT-PCR法从被感染细胞中扩增出一条长约560 bp的基因条带,通过Western blot检测到被感染细胞中haFGF蛋白的表达.结论 编码sp-haFGF的重组腺相关病毒能够有效地感染EPC,并在EPC中表达haFGF,为进一步研究转基因的内皮祖细胞移植促血管新生奠定基础.
作者:陈书艳;颜雪芸;王飞;周卿;荣烨之 刊期: 2006年第10期
目的 观察软骨细胞在兔小肠黏膜下层(SIS)上的生长特性,为使SIS作为软骨组织工程化的载体打下基础.方法 用物理和化学方法处理兔小肠黏膜下层,将不同浓度的兔软骨细胞与SIS进行体外共培养,分别进行组织学、相差显微镜和扫描电镜观察.结果 经物理和化学处理的SIS纯度高、孔隙多,胶原纤维未受损;软骨细胞在SIS材料上生长、黏附、增殖,并能长入材料的孔隙内,分泌大量的细胞外基质成分.结论 SIS细胞相容性良好,不影响软骨细胞的形态,对细胞生长和功能表达无抑制作用,是一种较理想的软骨细胞载体.
作者:张龙芳;崔鹏程;赵大庆;刘志;陈文弦 刊期: 2006年第10期
目的 研究宫颈癌组织中 survivin、BCL-X的表达及其相关性.方法 用免疫组化SP法检测survivin、BCL-X在10例正常宫颈组织及51例宫颈癌组织中的表达.结果 Survivin在正常宫颈组织中不表达,在宫颈癌组织中表达阳性率为64.71%,Survivin表达阳性率与宫颈癌病理分级与临床分期呈正相关.Survivin表达阳性率与宫颈癌组织中 BCL-X表达正相关.结论 Survivin异常表达引起的凋亡抑制在宫颈癌发生、发展中起一定作用,其过表达提示宫颈癌预后不良.宫颈癌组织中survivin的表达与BCL-X的表达呈正相关.
作者:王华丽;赵敬杰;孟静;徐晖 刊期: 2006年第10期
目的 探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者血清脂联素与肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度及其临床意义.方法 用放射免疫法测定50例GDM 孕妇和36例正常孕妇(NGT)的血清脂联素浓度,ELISA法检测血清TNF-α浓度,电化学发光法测胰岛素浓度,葡萄糖氧化酶法测血糖浓度.结果 ①GDM孕妇血清 TNF-α(4.6±1.5)μg/L水平明显高于NGT(3.3±1.6)μg/L,且GDM组TNF-α与血糖、胰岛素浓度呈正相关关系(P<0.01).②GDM孕妇血清脂联素浓度(10.3±2.4)mg/L明显低于NGT孕妇(15.6±3.2)mg/L,GDM组脂联素浓度与血糖、胰岛素浓度呈负相关关系(P<0.01).结论 GDM患者血清低脂联素浓度与高TNF-α浓度不仅反映了母体体脂状况和胰岛素的抵抗状态,更反映了糖代谢受损的严重程度,是代谢综合征的重要预测因子.
作者:刘增娟;李艳;裴凤敏;丁金云;张峰 刊期: 2006年第10期
目的 探讨尾加压素Ⅱ(U-Ⅱ)在慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠中的变化.方法 SD雄性大鼠随机分为慢支组、COPD 组、戒烟组和对照组.用放免法测定血浆、支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织匀浆中U-Ⅱ含量,测定肺功能并观察气道病理改变.结果 各组血浆U-Ⅱ含量无明显变化;BALF中U-Ⅱ含量显著高于各组血浆含量的1.7、2.2、4.7和4.9倍(均P<0.01).慢支组、COPD组、戒烟组BALF中U-Ⅱ含量分别较对照组升高50%、225%和225%(均P<0.01).肺组织匀浆U-Ⅱ含量亦显著高于对照组(均P<0.05).BALF中U-Ⅱ含量与BALF中性粒细胞数呈正相关(P<0.01);与气道炎细胞浸润、气道壁平滑肌增生、气道纤维结缔组织增生病理评分均呈正相关(均P<0.01);与呼气峰流速成负相关(P<0.01).结论 U-Ⅱ可能参与COPD气道重塑的发病.
作者:路明;姚婉贞;陈亚红;盖小燕;常春;唐朝枢 刊期: 2006年第10期
抵抗素(resistin)是近年发现的由脂肪组织特异分泌的一种多肽类激素,它可以导致胰岛素抵抗,与2型糖尿病关系相当密切.近有文献报道,肝脏也是抵抗素重要的靶器官,抵抗素可以明显损害肝胰岛素的敏感性,促进肝糖输出,升高血糖[1].但是抵抗素参与肝胰岛素抵抗的发生发展机制尚不明了.本文通过观察抵抗素对肝细胞糖酵解关键酶-葡萄糖激酶活性及mRNA表达水平的影响,初步探讨抵抗素在胰岛素抵抗形成中的作用及机制.
作者:李超林;龚明;肖谦 刊期: 2006年第10期
目的 通过分析2例尿毒症维持性血液透析(HD)患者冠状动脉搭桥术(CABG)围手术期资料,探讨维持性血液透析患者行CABG的安全性.方法 回顾性分析2例尿毒症维持性血液透析患者行冠状动脉搭桥术的临床资料.结果 手术前一天均给予无肝素透析,术后均行持续床旁血液滤过透析(CHDF).1例患者经完善的围手术期处理,手术成功,患者存活,生活质量明显改善;1例患者术后第3天于血液透析后死于心包填塞.结论 维持性血液透析患者经过积极、周密的术前准备,术中及术后处理,可以接受冠状动脉搭桥术,可达到改善症状、提高生活质量、延长生命的目的.CHDF是慢性肾功能衰竭患者围手术期有效维持水、电解质平衡的透析方式.
作者:马玲玲;孙阳;苗齐;任华;李学旺 刊期: 2006年第10期
1988年以来的肿瘤登记资料显示,长年坚持开展人群防治的食管癌高发现场如林县和磁县,其发病率已开始下降,但下降的主要是60岁以上年龄组,40~60岁下降很少,40岁以下基本没变,提示环境或遗传致癌因素仍然存在,一级预防效果不明显,发病率的下降可能主要归功于筛查及早诊早治.食管癌的特点是门诊病例病期太晚,早癌比例不足5%,然而多数高发现场有效的人群筛查还未普遍展开.鉴于此,中国癌症研究基金会近来在全国发起建立食管癌早诊早治示范基地,旨在推广提高现场早期发现率的大范围内镜筛查行动.为全面提高现场筛查的效能,根据我们多年来的现场经验和研究成果,本文提出如下一些新的研究线索.
作者:王士杰 刊期: 2006年第10期