学术投稿

三叶草斑潜蝇DNA条形码鉴定和ELISA检测的方法学比较

郭伟;赵伟春;徐阳;金艳婷;祝丽欣

关键词:三叶草斑潜蝇, DNA条形码, ELISA, ITS1序列, COI序列
摘要:[目的]探讨以COI和ITS1序列为条形码和间接ELISA方法鉴定三叶草斑潜蝇的可行性.[方法]①提取实验室饲养的三叶草斑潜蝇基因组DNA,扩增了三叶草斑潜蝇细胞色素C氧化酶亚基I(COI)和内转录第一间隔区(ITS1)序列,经测序、拼接后,与Genbank中三叶草斑潜蝇、美洲斑潜蝇、南美斑潜蝇及豌豆彩潜蝇的COI及ITS1序列进行比对,并进行遗传分析.②基于本实验室建立的ELISA检测方法,分别检测了三叶草斑潜蝇单克隆抗体与南美斑潜蝇及豌豆彩潜蝇的幼虫、蛹和成虫的交叉反应情况.[结果](COI和ITS1序列均可以将三叶草斑潜蝇同其它3种近缘种区分开.对于COI序列,三叶草斑潜蝇与南美斑潜蝇相似度为68%,亲缘关系近;对于ITS1序列,三叶草斑潜蝇与美洲斑潜蝇相似度为88.5%,亲缘关系近.②间接ELISA检测只有三叶草斑潜蝇呈阳性反应,与南美斑潜蝇及豌豆彩潜蝇幼虫、蛹和成虫均不发生交叉反应.[结论]以COI或ITS1序列为条形码的DNA鉴定法和以单克隆抗体为基础的ELISA检测均可区分三叶草斑潜蝇与其它3种近缘种.其中COI序列作为条形码鉴定可信度优于ITS1序列,ELISA方法操作简单,成本低,更适于田间大量样品的鉴定.
浙江中医药大学学报杂志相关文献
  • 血糖波动对2型糖尿病大鼠认知功能及海马Bax/Bcl-2的影响

    [目的]探讨血糖波动对糖尿病大鼠认知功能和海马Bax/Bcl-2的影响.[方法]取45只雄性大鼠禁食不禁水16h,用链脲佐菌素30 mg·kg-1加高脂饲料诱导2型糖尿病大鼠模型,挑选出糖尿病大鼠30只,分成糖尿病模型组(Diabetes Model,M)、持续高血糖糖尿病组(High Glucose Diabetes Sustain Model,MS)、血糖波动糖尿病组(Glucose Fluctuate Diabetes Model,MF),另取10只正常大鼠做正常对照组(Normal,N).血糖波动糖尿病组错时腹腔注射葡萄糖0.38 g·kg-1和皮下注射胰岛素1U制备糖尿病血糖波动模型.血糖波动6周后,进行水迷宫定位航行实验和空间探索实验,同时检测海马组织中Bax、Bcl-2的表达.[结果]M组、MS组、MF组比N组逃避潜伏期明显增长(P<0.05),空间探索实验结果显示60s内穿越平台所在位置的次数明显下降,在平台所在象限内的游泳距离明显减少(P<0.05).MF组和M组、MS组相比.逃避潜伏期进一步增长(P<0.05),空间探索实验结果显示60s内穿越平台所在位置次数也明显下降,在平台所在象限游泳距离也减少(P<0.05).MF组、M纽、MS组Bcl-2的表达较N组显著下降,Bax显著升高(P<0.05).MF组Bcl-2的表达较M组、MS组进一步下降,Bax进一步升高(P<0 05).[结论]血糖波动能加重损伤糖尿病大鼠的学习记忆功能,并促进海马组织的凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2的表达,诱导海马神经元的凋亡.

    作者:徐志伟;寿旗扬;李守业;蔡月琴;刘琼;徐文聃;洪春兰;王辉 刊期: 2013年第01期

  • 张仲景辨治“下利”证浅析

    “下利”一证是临床上常见的证候之一,或为原发性出现,或为继发性出现.临床中医师应该辨别其病机本质的不同.在把握基本病机的大前提下,再针对“下利”各证型,辨清寒热、虚实和缓急,使临床用方切合于病情.为了加强对中医经典著作关于“下利”条文学习与理解的系统性,有必要对相关的方证进行分门别类,仔细考察各个相似证候之间病机和方药属性的细微差别.兹收集张仲景《伤寒论》与《金匮要略》关于“下利”的条文,进行分析与总结.

    作者:陈烨文;陈一江 刊期: 2013年第01期

  • 期刊文献在研究生科研创新思维形成中的重要性

    [目的]立足期刊文献,旨在探究促进研究生创新思维形成的根基和条件.[方法]比对期刊与其他信息源优势.[结果]梳理出了期刊文献在研究生创新思维形成中发挥的不可小视的重要作用.[结论]提出了如何合理利用期刊文献,从根本上提升研究生创新能力.

    作者:沈杰;蒋玲芳 刊期: 2013年第01期

  • 复方鱼腥草颗粒在小儿急性支气管肺炎治疗中的临床观察

    [目的]探究复方鱼腥草颗粒在小儿急性支气管肺炎(acute bronchial pneumonia,ABP)治疗中的临床观察.[方法]选择2010平1月至2012年1月期间在我所诊治并确诊为ABP的患儿中,以年龄、性别、症状、病程等一般情况比较,差异无统计学意义,具有可比性(P>0.05)为分组基本前提,选58例为治疗组,60例为对照组,两组患儿均予常规抗炎、止咳、化痰治疗并注意饮食、睡眠及卫生相关事项;治疗组在对照组上加服复方鱼腥草颗粒,对照组给予口服利巴韦林颗粒.观察对比两组患儿的临床疗效及药物不良反应.[结果]两组在经过7d的给药治疗后,治疗组的总有效率为96.55%,明显高于对照组的73.33%,差异有统计学意义(P<0.05).治疗组共有5例患儿发生药物不良反应,占8.62%;对照组共有19例发生药物不良反应,占31.67%,两组患儿对比差异有统计学意义(P.<0.05).[结论]复方鱼腥草颗粒治疗ABP临床效果确切,抗菌、抗病毒作用效果显著,副作用较小,给药后其体征、症状消失快,且味甜,无明显鱼腥味,便于小儿喂服,减少了患儿的痛苦;此外还具有清热解毒、凉血利咽的作用,可为临床ABP优选药物.

    作者:周鑫娟 刊期: 2013年第01期

  • 连建伟教授治疗无脉症验案一则

    [目的]总结连建伟教授平脉辨证治疗无脉症的临床经验.[方法]通过验案分析,阐述连建伟教授平脉辨证、灵活处方、时刻顾护脾胃的用药思想,治疗无脉症的临床经验.[结果]本案连建伟教授平脉辨证,根据其脉证与病机,善用经方炙甘草汤,随证候加减变化,以治疗无脉症,疗效甚佳.[结论]连建伟教授四诊合参,擅长脉诊,用方精炼,疗效显著,对后学于无脉症的认识,具有临床实践的指导意义.

    作者:陈钧华 刊期: 2013年第01期

  • 毫针进针法与临床关系之浅见

    [目的]加强医者对毫针进针法在临床中的重视,从而提高针刺疗效和减少进针疼痛.[方法]参阅近年来一些文献结合个人临床体会加以探讨,认为良好的指力和熟练的手法做基础,经过实践形成自己的一套进针方法.[结果]良好的指力和熟练的手法既降低痛感,又达到了佳治疗效果.[结论]毫针进针法与临床关系密切,要重视细节与基本功的练习,以减少进针痛感,增强临床疗效.

    作者:刘迪生 刊期: 2013年第01期

  • 川崎病患儿热退后应用黄芪注射液的疗效分析

    [目的]评价黄芪注射液辅助治疗热退后川崎病(Kawasaki disease,KD)患儿的临床疗效.[方法]将82例经治疗热退后的KD患儿随机分成两组.对照组40例,应用阿司匹林(Asprin,ASA)3mg/(kg·d),治疗组42例,在对照组基础上加用黄芪注射液,14d为1疗程,共1疗程.[结果]治疗组治疗后C反应蛋白(CRP)、血小板(PLT)、血沉(ESR)较对照组下降明显(P<0.05),冠状动脉病变(Coronary artery lesions,CAL)发生率明显降低(P<0.05);两组临床总疗效比较,治疗组优于对照组(P<0.05).[结论]黄芪注射液配合治疗热退后的KD患儿,可缩短病程,提高临床疗效,降低CAL的发生率并且有较好的安全性.

    作者:王红丽 刊期: 2013年第01期

  • 马钱子生物碱组分对类风湿性关节炎滑膜细胞增殖作用的比较研究

    [目的]比较观察马钱子总生物碱不同组分对类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜细胞增殖的影响.[方法]体外培养人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA),加入不同浓度的马钱子总生物碱、马钱子碱和士的宁,采用溴脱氧尿苷(bromodeoxyuridine,BRDU)比色法观察马钱子不同生物碱组分对细胞增殖的影响.[结果]不同浓度的马钱子总生物碱对HFLS-RA细胞增殖表现出良好的抑制作用.同浓度水平组比较,仅在浓度水平为0.22mg·mL-1时,马钱子碱组对细胞增殖的抑制率明显低于士的宁组(P<0.05),其余各浓度水平时均高于士的宁组.以马钱子总生物碱对细胞增殖的抑制率减去士的宁的抑制率,间接反应非士的宁生物碱对该细胞增殖的抑制率,在士的宁和马钱子碱浓度水平均为0.22mg·mL-1或0.11mg·mL-1时,明显低于士的宁组(P<0.01,P<0.05)与马钱子碱组(P<0.01,P<0.01),其余浓度水平时,均高于士的宁组的抑制率(P<0.01),低于马钱子碱纽的抑制率但无显著性差异.[结论]马钱子总生物碱、士的宁、马钱子碱对类风湿性关节炎滑膜细胞的增殖均有良好的抑制作用;随着浓度的降低,马钱子碱对滑膜细胞增殖的抑制作用优于士的宁;在马钱子总生物碱中存在的非马钱子碱、非士的宁的生物碱组分未表现出对HFLS-RA细胞增殖的抑制作用.

    作者:方芳;陈海波;马凤森;张静若;池细绿;方剑乔 刊期: 2013年第01期

  • 中药序贯灌肠治疗急性痛风性关节炎临床观察

    [目的]观察序贯灌肠治疗急性痛风性关节炎的临床疗效.[方法]采用随机对照的方法,将60例患者分为中药序贯灌肠治疗组与西药对照组,观察两组治疗前后中医证候、临床疗效及各项相关指标的变化.[结果]治疗组在中医证候、临床总体疗效、血尿酸(Blood uric acid,BUA)、血沉(Erythrocyte sedimentation rate,ESR)、C反应蛋白(C reaction protein,CRP)、血白细胞(White blood cell,WBC)、肝肾功能等方面优于对照组.[结论]中药序贯灌肠治疗急性痛风性关节炎疗效满意,是治疗本病的有效方法之一.

    作者:李晓霞;赵威 刊期: 2013年第01期

  • 疏肝活血法对室性心律失常大鼠血清超氧物歧化酶、丙二醛影响的实验研究

    [目的]研究疏肝活血法对室性心律失常大鼠血清超氧物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的干预作用.[方法]实验分为空白组、模型组、西药组、柴胡疏肝散高、中、低剂量组,照实验分组先对Wistar大鼠灌胃8d,之后运用止血钳夹尾尖法和关禁闭法建立大鼠肝郁气滞证模型,再尾静脉注射CaCl2溶液引发大鼠急性心律失常,腹主动脉取血,硫代巴比妥酸法(TBA)测定MDA含量,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性.[结果]与模型组相比,中药高、中、低剂量组大鼠血清SOD活性显著升高(P<0.01);中药高、中剂量组MDA含量明显降低(P<0.05);中药各剂量组间SOD活性、MDA含量差异不明显(P>0.05).[结论]疏肝活血法对室性心律失常大鼠血清SOD、MDA有干预作用.

    作者:庞艳青;龚一萍 刊期: 2013年第01期

  • CT灌注成像在原发性肝癌化疗疗效评价中的应用价值

    [目的]探讨多层螺旋CT灌注成像(CT perfusion imaging,CTPI)在原发桂肝癌(primary hepatic carcinoma,PHC)化疗疗效评价中的应用价值.[方法]对33例PHC患者于联合化疗前1~3d和化疗第2疗程后1~3d分别行血清甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)检测和CT灌注扫描,经肝脏CT灌注软件获得时间密度曲线(time-density curve,TDC),从而得到肝动脉灌注量(hepatic artery perfusion,HAP)、门静脉灌注量(Portalvenous perfusion,PVP)、肝动脉灌注指数(Hepatic arterial perfusion index,HAPI)和总肝灌注量(total liver perfusion,TLP)及毛细血管通透性(permeability surface,PS)及相关的彩色灌注图,比较化疗前肿瘤组织及周围正常肝组织的血流灌注,观察化疗前后肿瘤组织的血流灌注变化;分别分析化疗前后HAP、PVP、HAPI、TLP及PS差值与AFP差值的相关性.应用统计软件包对化疗前肿瘤组织与周围正常肝组织的血流灌注采用独立样本t检验;对化疗前后肿瘤组织的血流灌注变化采用配对样本£检验进行显著性分析;对化疗前后HAP、PVP、HAPI、TLP和PS的差值分别与AFP的差值进行相关性分析.[结果]原发性肝癌患者33例,化疗前肿瘤组织较周围正常肝组织,HAP、HAPI和TLP升高差异有统计学意义(P<0.05),PS和PVP改变差异无统计学意义(P>0.05);化疗第2疗程治疗后,肿瘤HAP、HAPI和TLP下降差异有统计学意义(P<0.05),PS和PVP改变差异无统计学意义(P>0.05); HAP、HAPI、TLP与AFP呈正相关(P<0.05),而与PVP和PS与AFP相关性差异无统计学意义(P>0.05).[结论]CTPI能准确地反映原发性肝癌化疗前后的血流动力学改变,可用于临床治疗反应的监测和治疗方案的选择.

    作者:金平;林敏;姜黄维;钱琦 刊期: 2013年第01期

  • 开腹阑尾切除术和腹腔镜阑尾切除术择用的临床价值研究

    [目的]探讨开腹阑尾切除术(open appendectomy,OA)和腹腔镜阑尾切除术(laparoscopicappendectomy,LA)两种不同手术方案的显效性.[方法]取湖州中心医院和我院2007年2月至2012年6月行阑尾切除术患者162例为本研究病例并将患者分为治疗组81例(行LA),对照组81例(行OA),以上分组以患者年龄、性别、病情比例均分为前提条件,无统计学差异(P>0.05),具有可比性.[结果]治疗组患者术后恢复下床行动能力较对照组明显快(P<0.01):疼痛评分、住院时间,治疗组较对照组有优势(P<0.05);术后距排气时间,治疗组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);手术所用时间、感染率、住院费用方面,对照组较治疗组有优势(P<0.05);术后并发症率治疗组0%(0/81)低于对照组1.23%(1/81),差异有统计学意义(P<0.05);中转治疗组2例,对照组1例.[结论]OA、LA两种手术方案在治疗阑尾炎患者有不同优势.

    作者:浦长青 刊期: 2013年第01期

  • 盆炎净颗粒治疗慢性盆腔炎82例疗效及副反应观察

    [目的]观察盆炎净颗粒冲剂临床治疗慢性盆腔炎(Chronic pelvic inflammatory disease,CPID)中的疗效及副反应.[方法]依标准选取在我院2010年5月至2012年7月门诊并被诊断为CPID160病例,随机法并以两组具有可比性为前提,分为对照组78例(口服左氧氟沙星胶囊及甲硝唑片),治疗组82例(在服用对照组药物基础上加服盆炎净颗粒,均1疗程后观察体征、症状改善情况、总有效率及副反应.[结果]对下腹坠痛腰骶酸痛、白带增多、子宫活动受眼压痛、输卵管条索状压痛4组主要体征、症状的总有效率分别为92.31%、87.93%、91.93%、81.25%,均优于对照组,前3组有统计学意义(P<0.05);治疗组总有效率为97.56%,优于对照组89.74%,有统计学意义(P<0.05);两组副反应比较,治疗组优势显著,统计学差异有显著性(P<0.01).[结论]盆炎净颗粒冲剂治疗CHD临床疗效明确,副反应小,值得临床应用.

    作者:欧萍;郑安桔 刊期: 2013年第01期

  • 分期辨治小儿反复呼吸道感染临床疗效观察

    [目的]分期辨治小儿反复呼吸道感染的临床疗效观察.[方法]将60例反复呼吸道感染患儿随机分为中医分期辨证治疗组和芙露饮口服对照组各30例,比较两组治疗前后反复呼吸道感染的发作次数、持续时间及发作时的程度、症状和体征,并对治疗组患儿T细胞亚群及血清免疫球蛋白进行治疗前后比较.[结果]临床疗效、中医证候疗效治疗组优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后治疗组的CD3+、CD,绝对值升高,CD8+绝对值下降,CD4+/CD8+值升高,与治疗前相比差异有统计学意义(P<0.05); IgA、IgG、IgM均升高,与治疗前相比IgA、IgG差异有统计学意义(P<0.05).[结论]分期辨治小儿反复呼吸道感染,临床疗效和中医证候疗效优于西药治疗对照组,并能有效改善患儿的T细胞亚群及血清免疫球蛋白,提高机体免疫功能.

    作者:陈华;李岚 刊期: 2013年第01期

  • 从吴连胜《黄帝内经》英译看中医医古文翻译

    [目的]通过分析吴连胜对《黄帝内经》的英译,总结医古文语言特点及其翻译技巧.[方法]阅读近年采关于中医医古文翻译的相关文献及著作,系统整理各家学术观点,以吴连胜《黄帝内经》英译本为例,总结医古文语言特点及其翻译技巧.[结果]1.对中医术语,吴连胜多采用意译或音译加注解;2.翻译医古文语句须正确理解其白话文涵义;3英译医古文,注重语句之间的显性衔接以形成语篇整体.[结论]医古文语言不同于现代科技语言,富合文化奥义.其英译须根据语言特点分析适应的翻译方法.

    作者:唐路;李磊;李虹 刊期: 2013年第01期

  • 复方蒲黄颗粒对脑缺血再灌注大鼠GAP-43表达的影响及动态变化规律

    [目的]通过观察大脑缺血再灌注大鼠模型治疗前、后神经生长相关蛋白(growth associated protein 43,GAP-43)的表达和动态变化规律,探讨复方蒲黄颗粒对脑缺血再灌注后神经保护作用机制.[方法]用复方蒲黄颗粒大、中、小剂量组分别干预局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,于缺血再灌注1、3、7、14、21d这5个时间点断头取脑组织,免疫组化检测GAP-43的含量.[结果]模型组GAP-43的表达在再灌注1d就显著升高,7d达到高峰,14d开始下降,但均高于假手术组(P<0.05),21d的GAP-43表达逐渐下降(P>0.05).复方蒲黄颗粒大、中剂量干预组中大鼠脑组织的GAP-43表达在缺血再灌注后1d、3d、7d、14d明显升高(p<0.05),再灌注21d时GAP-43的表达升高不明显(P>0.05).[结论]复方蒲黄颗粒的神经保护作用机制可能与上调GAP-43表达有关.大脑缺血再灌注可使GAP-43表达增加,7d可能为治疗的关键时间窗.

    作者:王莉;夏韵 刊期: 2013年第01期

  • 杨惠民教授益气滋阴固表敛汗法治疗自汗经验浅谈

    [目的]总结杨惠民教授治疗自汗的学术观点和临床经验.[方法]分别从临床表现、病因病机、辩证施治方面论述杨惠民教授治疗自汗的学术观点和临床经验,同时总结杨惠民教授因症用药及嘱患者顺应阴阳安排作息等独特之处.[结果]本病发病病因偏重于肺卫薄弱,病机突出于阴阳失调、腠理不固,以”肺卫不固”多见,根据以上病因病机,杨惠民教授总结出益气滋阴固表敛汗的治则.[结论]杨惠民教授益气滋阴固表敛汗法在自汗的临床治疗效果显著,具有推广应用价值.

    作者:冯一;杨惠民 刊期: 2013年第01期

  • 败酱有效部位PHEBA抗肿瘤作用的研究

    [目的]系统评价有效部位PHEBA的体内、外抗肿瘤作用.[方法]体外培养人源性肿瘤细胞株,利用MTT法、生长抑制曲线、细胞形态学观察,研究PHEBA的体外抗肿瘤作用;利用小鼠移植性肿瘤模型研究PHEBA体内抗肿瘤作用.[结果]PHEBA体外对多个人源性肿瘤细胞株具有抑制作用,体内对小鼠移植性H22肝癌具有抑制作用.[结论]PHEBA体内、外均具有一定的抗肿瘤作用.

    作者:钱匆匆;杨波;王一奇;陈汝滨;张如松 刊期: 2013年第01期

  • 椎间盘退变实验动物模型的研究发展与分析

    [目的]椎间盘退变疾病的发病机理目前尚不明确,寻找一种理想的椎间盘退变的动物模型是研究该病的基础和关键.[方法]本文回顾并分析了近几年有关椎间盘退变疾病动物模型的国内外相关文献,就几种主要的椎间盘退变动物模型的建模方法及各自的优缺点作一综述.[结果]目前的文献报道及实验研究结果显示鼠和兔是现阶段较为理想的模型动物;造模方法可以分为四大类,退变的动物模型在发病原因和致病机理等方面还需进一步的研究.[结论]动物椎间盘退变模型和人类椎间盘退变之间的相关性和可比性还需要进一步研究发展,在选择和构建动物模型的问题上要根据实验的要求以及对临床实际的指导意义等方面考虑,科学谨慎的设计和构建动物模型.

    作者:赵鹏;吴承亮;肖鲁伟;赵岩;蔡运火 刊期: 2013年第01期

  • 三叶草斑潜蝇DNA条形码鉴定和ELISA检测的方法学比较

    [目的]探讨以COI和ITS1序列为条形码和间接ELISA方法鉴定三叶草斑潜蝇的可行性.[方法]①提取实验室饲养的三叶草斑潜蝇基因组DNA,扩增了三叶草斑潜蝇细胞色素C氧化酶亚基I(COI)和内转录第一间隔区(ITS1)序列,经测序、拼接后,与Genbank中三叶草斑潜蝇、美洲斑潜蝇、南美斑潜蝇及豌豆彩潜蝇的COI及ITS1序列进行比对,并进行遗传分析.②基于本实验室建立的ELISA检测方法,分别检测了三叶草斑潜蝇单克隆抗体与南美斑潜蝇及豌豆彩潜蝇的幼虫、蛹和成虫的交叉反应情况.[结果](COI和ITS1序列均可以将三叶草斑潜蝇同其它3种近缘种区分开.对于COI序列,三叶草斑潜蝇与南美斑潜蝇相似度为68%,亲缘关系近;对于ITS1序列,三叶草斑潜蝇与美洲斑潜蝇相似度为88.5%,亲缘关系近.②间接ELISA检测只有三叶草斑潜蝇呈阳性反应,与南美斑潜蝇及豌豆彩潜蝇幼虫、蛹和成虫均不发生交叉反应.[结论]以COI或ITS1序列为条形码的DNA鉴定法和以单克隆抗体为基础的ELISA检测均可区分三叶草斑潜蝇与其它3种近缘种.其中COI序列作为条形码鉴定可信度优于ITS1序列,ELISA方法操作简单,成本低,更适于田间大量样品的鉴定.

    作者:郭伟;赵伟春;徐阳;金艳婷;祝丽欣 刊期: 2013年第01期

浙江中医药大学学报杂志

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主管:浙江中医药大学

主办:浙江中医药大学