刘玥；帅春；李杰生；尹虹；宋艳斌；马文丽
目的：探讨慢性粒细胞白血病细胞中影响miR-196b表达水平的表观遗传学因素。方法分别采用DNA甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷（5-Aza-2’-dc）、组蛋白去乙酰化酶抑制剂4-苯基丁酸（ PBA）和两者联合处理K562细胞，采用实时定量PCR（Real-time PCR）检测miR-196b的表达水平变化。结果 PBA的半数抑制浓度为1．58mmol/L。和正常人骨髓细胞miR-196b的表达水平相比，Aza组、PBA组和阴性对照组miR-196b的表达水平显著降低且基本一致，Aza＋PBA组miR-196b的表达水平和正常人表达水平基本一致。结论单独使用5-Aza-2’-dc或PBA不能使K562细胞中miR-196b的表达恢复正常，两者联合使用共同处理K562细胞，可使miR-196b的表达恢复正常，表明K562细胞中miR-196b的表达水平和基因组甲基化及组蛋白乙酰化均有关系。
作者：刘玥；帅春；李杰生；尹虹；宋艳斌；马文丽 刊期： 2014年第04期
目的：分析鉴定与肝细胞癌（ HCC）发生发展相关的差异表达的N-连接糖蛋白。方法应用刀豆蛋白凝集素（ConA）、晶状体凝集素（LCH）和雪花凝集素（GNA）组成的亲合层析柱富集10对HCC和癌旁非癌组织中N-连接糖蛋白、二维电泳（2DE）比较分析差异表达的蛋白质点、串联质谱鉴定差异表达蛋白，Western blotting 验证人羧酸酯酶1（hCE1）、触珠蛋白（HP）及组织蛋白酶D（CD）的差异表达；体外侵袭实验检测CD表达沉默后对HCC的侵袭力影响。结果质谱、生物信息学等技术鉴定了28个与HCC相关的差异表达蛋白（ HCC中高表达和低表达的蛋白均为14个），Western blotting验证hCE1、HP在HCC中明显低表达，组织蛋白酶D前体（ pCD）在HCC中高表达；而ConA亲和层析柱富集的ConA-CD在HCC中显著高表达。 CD-siRNA介导的CD表达沉默能够显著降低肝癌细胞系SNU449、SNU473的体外侵袭能力。结论 HP、hCE1蛋白表达变化和CD N-糖链变异可能参与了HCC发生发展过程。
作者：马瑾；齐义军；刘瑞敏；王明；张天；朱晗；马远方 刊期： 2014年第04期
由细胞培养技术领域的世界著名专家、英国格拉斯哥Eeatson 癌症研究室肿瘤学与应用药理学中心荣誉资深研究员R．I．Freshney所著的《动物细胞培养-基本技术和特殊应用指南》（第6版）近期已翻译出版。
作者：《解剖学报》编辑部 刊期： 2014年第04期
目的：探讨大鼠下颌下腺组织中是否表达卵泡刺激素（FSH）及其受体（FSHR），为进一步研究FSH对下颌下腺的功能调节提供理论依据。方法正常SD大鼠20只，体质量（200±20）g，腹腔麻醉后切取下颌下腺，采用原位杂交方法对FSH及FSHR进行细胞定位，探讨大鼠下颌下腺是否存在FSH及其受体mRNA，从下颌下腺组织中分别提取总RNA，运用RT-PCR获得FSH及其受体基因的cDNA核心序列，并对其序列进行分析。结果大鼠下颌下腺浆液性腺泡及颗粒曲管上皮细胞含有 FSH和FSHR mRNA杂交信号，信号物质分布于胞质内，胞核呈阴性反应。从大鼠下颌下腺组织中扩增的FSH及FSHR基因的特异性条带分别为193bp和413bp。结论大鼠下颌下腺浆液性腺泡及颗粒曲管上皮细胞能合成卵泡刺激素及其受体，进一步说明下颌下腺是FSH作用的靶器官。
作者：于辉；刘桂云 刊期： 2014年第04期
目的：探讨神经纤维丝蛋白（ NF）、突触素（ SYN）在人胚胎脊髓发育阶段的分布规律及其表达意义。方法应用免疫组织化学法检测第2、3、4个月龄段，共16例人胚胎脊髓中NF、SYN的表达、分布状况。结果第2个月胚龄时，NF仅在人胚脊髓的前正中裂和后正中隔两侧的边缘层呈弱阳性表达。第3～4月龄时，NF在脊髓的前正中裂、后正中隔及皮质区域均呈阳性或强阳性表达，在室管膜层外侧的部分灰质内可见NF表达阳性的神经纤维。第2～4个月龄段，人胚胎脊髓内均可见SYN阳性表达，随着胎龄的增大，脊髓内SYN阳性表达强度值呈先升高再降低，阳性数量值呈逐月升高。结论 NF和SYN参与调控人胚胎脊髓组织的生长发育。
作者：张泳；刘学红 刊期： 2014年第04期
《解剖学报》创刊于1953年，是由中国科学技术协会主管，中国解剖学会主办，北京大学医学部承办的基础医学综合性学术期刊。
作者： 刊期： 2014年第04期
目的：探讨染料木黄酮（ GEN）对全脑缺血（ GCI）大鼠海马CA1区神经元的神经保护作用及其可能的机制。方法建立大鼠4动脉结扎全脑缺血模型，实验动物随机分为假手术组（ sham）、缺血再灌注组（ I/R）、GEN处理组、ICI 182，780组和溶剂对照组。采用Fluoro-Jade B和神经元特异性核蛋白（ NeuN）染色观察海马CA1区神经元存活情况，TUNEL技术观察海马CA1区神经元的凋亡。 Morris水迷宫观察大鼠的空间学习和记忆功能。结果 GEN发挥神经保护作用的佳剂量为1．0 mg/kg；与sham组相比，I/R组和溶剂对照组海马CA1区TUNEL阳性神经元数量显著增多（ P＜0．01），而1．0 mg/kg GEN可显著降低缺血后TUNEL阳性神经元数量（ P＜0．01）；与I/R组相比，GEN能明显改善缺血后大鼠的空间学习和记忆能力。缺血前侧脑室给予ICI 182，780可显著降低GEN的神经保护作用（P＜0．01）。结论低剂量（1．0mg/kg） GEN可显著降低缺血后大鼠海马CA1区神经元损伤，改善认知功能，其分子机制可能与雌激素受体活性密切相关。
作者：马文东；涂静宜；朱莹；张茜；唐慧；王瑞敏 刊期： 2014年第04期
目的：探讨哺乳动物雷帕霉素靶分子复合物（ mTORC）在糖尿病肾病（ DN）小鼠肾组织中的分布、表达。方法14只C57BL/6小鼠随机分成对照组和DN组，每组各7只。 DN组小鼠予以链脲菌素腹腔注射建立小鼠DN模型，采用生化技术检测小鼠血、尿肌酐以及白蛋白水平，组织学染色检测肾脏病理变化，免疫荧光以及免疫印迹技术检测肾组织中mTOR、mTOR 第2448位丝氨酸磷酸化修饰后mTOR （ p-mTOR ）、mTORC1（ Raptor ）、mTORC2（Rictor）以及mTOR信号通路下游的效应蛋白磷酸化 S6K1（p-S6K1）的分布和表达。结果 DN组小鼠血糖、尿白蛋白/肌酐比值明显增加（P＜0．01），肾小球明显增大（P＜0．05）。 mTOR、Raptor以及Rictor在正常以及DN小鼠肾皮质和髓质中均有表达，主要表达在肾小球系膜区、毛细血管袢、皮质近曲小管以及外髓和内髓集合管上皮细胞中。其中正常小鼠内髓肾组织中未见p-S6K1表达，正常以及DN小鼠肾小球中未见p-mTOR表达。免疫印迹检测表明，DN小鼠肾组织中mTOR、p-mTOR、Raptor、Rictor以及p-S6K1均明显上升（P＜0．05）。结论 mTORC广泛分布于小鼠肾组织且参与DN的发生发展，但mTOR第2448位丝氨酸磷酸化并不直接参与高血糖介导的肾小球损伤。
作者：赵鸿；冀倩倩；李永霞；段秋红；姚丽君 刊期： 2014年第04期
目的探讨神经生长因子（ NGF）促进海马胆碱能神经再生与同源盒基因Lhx8之间的关系。方法SD大鼠72只，在制备切割右侧穹隆海马伞模型和NGF侧脑室注射的基础上，分为对照组、切割组、NGF组、切割联合NGF组；Real-time PCR和Western blotting分别检测各组动物海马中Lhx8蛋白的表达变化；免疫荧光技术检测各组动物海马齿状回颗粒下层中胆碱乙酰转移酶（ ChAT ）/Lhx8双标细胞数。结果切割组和NGF组中Lhx8蛋白的表达量较对照组增高，切割联合NGF组增高更为明显，且Lhx8基因表达也增高；NGF组和切割联合NGF组中海马齿状回颗粒下层（ SGZ）中的ChAT/Lhx8双标细胞数也较对照组和切割组明显增多。结论侧脑室注射NGF促进海马胆碱能神经再生与Lhx8的高表达有关。
作者：李浩明；朱培培；金国华；施金洪；邹琳清；田美玲；衣昕；秦建兵 刊期： 2014年第04期
目的：探讨晚期糖基化终产物受体（ RAGE）在小鼠慢性阿霉素心脏毒性模型中的表达及其与化疗药相关心脏毒性的可能内在联系。方法通过多次腹腔注射阿霉素，建立小鼠慢性阿霉素心脏毒性模型，同时设立正常对照组（每组6只）。模型建立后采用超声心动图和组织病理学方法评价小鼠心脏功能及心肌损伤程度；通过免疫印迹及免疫组织化学检测小鼠心肌组织中RAGE表达变化。结果超声心动图检查显示，慢性阿霉素心脏毒性小鼠左室射血分数明显降低；病理学观察显示心肌组织中细胞损伤明显，同时伴有心室肥厚及心肌重构，提示小鼠慢性阿霉素心脏毒性模型建立成功。细胞和分子生物学观察发现，损伤心肌中RAGE表达显著升高。结论RAGE在慢性小鼠阿霉素心脏毒性模型中表达升高，提示其可能参与阿霉素相关心脏毒性的发生发展。
作者：施盛锋；朱劲舟；张瑞岩 刊期： 2014年第04期
目的：探讨灵芝孢子油及灵芝提取物孢子油对人源高恶性乳腺癌血管生成调节因子的作用。方法不同剂量的灵芝孢子油、灵芝提取物孢子油分别刺激体外培养的人源高恶性乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞及MDA-MB-231细胞制作的荷廇小鼠， Western blotting 检测表皮生长因子受体（ EGFR ）的蛋白表达变化， Real-time PCR检测肿瘤血管生成相关因子EGFR、血管内皮生长因子（ VEGF）、基质金属蛋白酶（ MMPs）、血小板反应素-1（TSP-1）、血小板衍生因子（PDGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）转录水平的基因表达变化。结果灵芝孢子油、灵芝提取物孢子油均可在体内和体外抑制人源高恶性乳腺癌细胞MDA-MB-231的EGFR蛋白表达，且有剂量依赖性；均可在体内和体外抑制VEGF RNA表达，增强血管生成抑制因子TSP-1 RNA表达；灵芝提取物孢子油比灵芝孢子油的作用更为显著。结论灵芝孢子油、灵芝提取物孢子油均有抑制肿瘤血管生成因子表达和促进血管生成抑制因子表达的作用，其中灵芝提取物孢子油比灵芝孢子油的作用更为显著。
作者：张京；牛苗苗；杨丽；范莉莎；吴莉；战军；张宏权 刊期： 2014年第04期
目的：探讨糖尿病机械性痛（DMA）模型大鼠中P2X3受体（P2X3R）的时空表达变化。方法腹腔注射链脲菌素（ STZ）建立大鼠DMA模型。采用von Frey细丝法测定DMA大鼠机械性痛阈，在不同时间点取腰髓4～5（ L4～5）节段的脊髓背角（ SDH）和背根神经节（ DRG）以及足底皮肤，通过免疫荧光观察P2X3R阳性产物的表达变化。进一步Western blotting检测SDH和DRG中P2X3R蛋白的变化。结果与对照组（ CON组）相比，注射STZ 7d后大鼠机械性痛阈显著降低，在14d时达到低并持续至28d（ P＜0．05）。免疫荧光和Western blotting结果均显示L4～5节段DRG中P2X3R表达在14d和21d时显著增多，与CON组相比差异有统计学意义（P＜0．05），28d时恢复至CON组水平；而在SDH及皮肤中，P2X3R表达上调出现在21d和28d（P＜0．05）。结论在STZ诱导的DMA大鼠机械性痛的不同时程中，DRG、SDH和皮肤中P2X3R的表达均呈现与痛敏变化几乎平行的变化趋势，但后两者比前者的变化在时间上略晚。这些结果说明P2X3R可能在DMA机械性痛敏的维持阶段起重要作用。
作者：崔媛媛；吴黄辉；王兰；史娟；李云庆 刊期： 2014年第04期
目的：探讨兰州汉族等26个人群Y-STR基因座遗传关系。方法研究得到500名无关兰州汉族个体的Y-STR基因座基因频率，同时收集其他25个人群相同Y-STR基因座基因频率，应用亲缘系数比较分析这26个人群间的遗传距离并绘制系统树。结果汉族人群中以北京汉族、山西汉族、内蒙古汉族和与兰州汉族的遗传关系接近；少数民族人群中以内蒙古蒙古族与兰州汉族的遗传关系接近；马来西亚马来人和马来西亚印度人与其他人群遗传关系远而单独列支。结论利用Y-STR基因座的等位基因频率研究不同人群之间的遗传距离，结果与其他分子人类学结论接近或吻合，表明不同人群之间的遗传关系与地域、起源和进化的关系密切。
作者：杨鑫；孙红兵；骆继怀；哈飞；张子龙 刊期： 2014年第04期
目的：观察雌性山羊颈胸神经节内神经元是否具备接受孕激素作用的条件。方法采用免疫组织化学SP法观察孕激素受体（ PR）在成年雌性山羊颈胸神经节的表达。结果雌性山羊颈胸神经节内神经元胞体均呈孕激素受体免疫反应阳性；卫星细胞、施万细胞、神经突起和神经纤维中也有较弱的着色。神经元的细胞膜和细胞质呈棕褐色为强阳性，而神经元的细胞核着色出现异质性：85．10％的神经元细胞核为强阳性，其中31．91％的核仁呈清亮的空泡，为阴性；而14．90％的神经元细胞核呈空泡状不着色，其中7．45％的核仁为强阳性。卫星细胞、施万细胞和神经纤维均呈淡黄色，为弱阳性。图像分析表明，神经元胞体PR的相对表达量与其他非神经成分相比差异性极显著（ P＜0．01）。结论在颈胸神经节内神经元是孕激素作用的主要靶细胞之一，提示孕激素有可能通过影响雌性山羊颈胸神经节内神经元的活动参与心脏功能的神经调节，而颈胸神经节上的PR可能作为一个网络节点协调孕激素对心脏功能的内分泌调节和自主神经对心脏活动的神经调节。
作者：郭晓；李强；陈文东；徐永平；金秀芳；王志豪；董伟；范洁 刊期： 2014年第04期
目的：通过观察小鼠脊髓发育过程中神经元的增殖、分化与凋亡，探讨小鼠脊髓的发育过程及其调控机制。方法取妊娠第18天（E18）至生后第90天（P90）小鼠173只，用5’-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）技术标记增殖的神经干细胞，免疫荧光法（DCX，NeuN和Caspase8）标记脊髓中的新生神经元，成熟神经元和凋亡细胞。结果在胚胎与出生早期，BrdU阳性细胞均匀分布于小鼠脊髓各部位。随着小鼠日龄的增加，脊髓神经干细胞可以分化为神经胶质细胞与神经元。其后，位于神经管侧脑室的新生神经元向中间层（未来的灰质）迁移，逐渐分化为成熟神经元。后，神经元向脊髓中央聚集，灰质呈现典型的“H”型。随着神经元的分化，一些凋亡神经细胞出现在新生神经元与成熟神经元中。荧光双标显示，大部分的凋亡神经细胞都是新生神经元，说明神经元凋亡常常发生在新生神经元中。统计学分析表明，DCX、NeuN、Caspase-8标记的阳性细胞数均随小鼠日龄的增加而减少，说明神经元的分化和凋亡在脊髓的发育过程中逐渐减少。结论在脊髓的发育过程中存在着神经元的增殖、分化与凋亡。三者相互协同，共同调节脊髓的形成与发育。
作者：邓娟；郑红；李雪；薛帅；李莉莉；聂梦月；吴萍；邓锦波 刊期： 2014年第04期
目的：探讨活细胞计数试剂盒（CCK-8）在检测5-氮杂-2’-脱氧胞苷（5-Aza-2’-dc）对慢性粒细胞白血病细胞的增殖抑制作用中的应用。方法采用CCK-8检测不同浓度5-Aza-2’-dc对K562细胞的增殖抑制作用，并检测其半数抑制浓度对K562细胞的细胞周期和凋亡的影响。结果5-Aza-2’-dc 的半数抑制浓度为15．55 nmol/L，采用该浓度处理K562细胞后，G2期发生阻滞，增殖抑制，并出现凋亡峰。结论不同浓度的5-Aza-2’-dc对K562细胞增殖的抑制作用不同，且呈浓度依赖关系。 CCK-8检测法可运用于甲基化转移酶抑制剂对人慢性粒细胞白血病细胞增殖的影响。
作者：刘玥；帅春；李杰生；尹虹；宋艳斌；马文丽 刊期： 2014年第04期
目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子（ bFGF）对动脉粥样硬化（ AS）模型大鼠脑基底动脉血管内皮功能与结构的影响。方法将48只雄性Wistar大鼠随机平均分成正常对照组、AS组与bFGF治疗组。除正常对照组外，在喂食开始时一次性腹腔注射维生素D3（6×105 IU/kg）加高脂配方饲料喂养，6周后bFGF治疗组采用腹腔注射bFGF（9．5μg/kg，2次/d）治疗，连续2周后处死。观察不同组离体基底动脉对不同浓度乙酰胆碱（ Ach）的舒张反应率；光镜观察血管形态结构的变化；ELISA与比色法分别测定血管壁一氧化氮（ NO）与血清血管内皮生长因子（ VEGF）含量变化；MTT法测体外培养内皮细胞的增殖活性；鬼笔环肽染色观察培养平滑肌细胞骨架微丝的变化。结果高脂饲料饲养6周后早期动脉粥样硬化形成；与AS组相比，经bFGF治疗2周后基底动脉对不同浓度Ach舒张反应百分率、动脉管壁NO与血清VEGF含量明显升高（P＜0．05）；血管内皮细胞增殖活性也显著增强（P＜0．05）；平滑肌细胞骨架微丝损伤明显改善。结论 AS对基底动脉血管内皮造成了损伤，而bFGF参与了损伤动脉血管结构与内皮功能的调节，这些变化提示bFGF对脑血管具有明显的保护作用。
作者：朱俊德；余彦；戈果 刊期： 2014年第04期
目的：探讨大鼠腹壁浅动脉穿支皮瓣的解剖学特点，为该皮瓣切取提供解剖学依据。方法 SD大鼠27只，7只行大体解剖，描述该皮瓣的解剖学特点；20只经颈总动脉行明胶-氧化铅灌注，并通过图片处理技术测量相关数据。结果腹壁浅动脉由股动脉发出后在穿浅筋膜处发出第1个分支，随即分为内外侧支，分别与胸外侧动脉和胸背动脉吻合。其外径在股动脉发出处为（0．46±0．02） mm，在穿经浅筋膜处为（0．46±0．02） mm，其营养面积为（18．37±3．67） cm2，其与胸背动脉的吻合区距离腋下水平线和腹中线分别为（5．34±0．86） cm 和（4．38±0．38）cm；与胸外侧动脉的吻合区距离腋下水平线和腹中线分别为（6．28±0．69）cm和（2．04±0．33）cm。结论大鼠腹壁浅动脉解剖位置和外径恒定，是游离皮瓣移植、皮瓣动脉增压、血流动力学研究等的理想模型。
作者：方冬；林海双；余丰；章思芳；丁茂超；崔怀瑞；唐茂林；徐达传 刊期： 2014年第04期
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作者： 刊期： 2014年第04期
目的：通过离体灌注化学去垢剂的方法制备大鼠胰腺去细胞天然生物支架，并对支架的完整性、生物相容性进行检验。方法健康成年SD大鼠30只，分别经胆管与血管两条途径灌注十二烷基硫酸钠和曲亚通X-100等药品洗脱，获取胰腺去细胞生物支架。通过HE染色、扫描电子显微镜和透射电子显微镜等观察细胞残留于去细胞支架的生物学特性，分光光度计法鉴定残留去垢剂量，酶联免疫吸附剂测定法测定残留支架蛋白含量及生长因子，并用腹壁与皮下包埋实验检验其炎症反应，MTT法测定支架细胞毒性，内皮细胞共培养测定支架生物相容性。结果 HE染色、扫描电子显微镜和透射电子显微镜观察均表明去细胞支架无细胞残留，细胞外支架连续性完好，脉管支架保存完整；药物残留小于规定标准；细胞外支架生长因子及支架蛋白存留量等指标上血管组均优于胆管组；腹壁与皮下包埋实验显示，去细胞支架炎性反应较对照组明显减轻；MTT法显示无细胞毒性；内皮细胞共培养有黏附趋势。结论使用两种灌注法制备胰腺去细胞生物支架，均可将细胞去除彻底，支架生物相容性好。但就血管组细胞外支架保留完整性，生长因子保留更多，则血管灌注途径优于胆管灌注途径。
作者：邵营宽；严夏霖；饶志恒；黄高建；李嘉威；黄俊杰；梅劲；林刻智 刊期： 2014年第04期
解剖学报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国解剖学会
