张林；李瑾；张小敏；肖军
目的:构建并表达靶向IgA肾病分泌糖基化缺陷IgA1分子B细胞(Gd-B)的人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1重组蛋白病毒样颗粒(VLPs)基因载体.方法:PCR定点突变技术构建HPV16 L1-PH嵌合基因片段并与pPIC9K载体连接获得重组表达质粒;将上述质粒通过电转化形式转入毕赤酵母GS115,并在甲醇诱导下表达HPV16 L1-PH嵌合蛋白;对Ni柱纯化后获得的目的蛋白分别进行SDS-PAGE和LC-MS/MS鉴定;加入解组装及组装缓冲液对目的蛋白进行包装,透射电镜观察病毒样颗粒的结构及形态.结果:纯化后的重组蛋白经SDS-PAGE和LC-MS/MS鉴定确定所检测胶点中的蛋白质为与目的蛋白预测值相同.透射电镜分析粒径分布和结构与预测值相同.病毒样颗粒在组装及解组装缓冲液作用下通过电镜可观察到发生组装及解组装.结论:本研究成功获得了靶向IgA肾病患者异常Gd-B细胞的嵌合HPV16 L1-PH嵌合蛋白,为IgA肾病下一步实验研究与靶向性治疗奠定了基础.
作者：陈朝威；颜奇；张勤；付强；王惠明；丁国华 刊期： 2017年第02期
目的:研究宫颈癌癌前病变及其癌组织中转化生长因子Ⅱ型受体(TGFBR2)的表达及临床意义.方法:取13例慢性宫颈炎、102例宫颈上皮内瘤变和167例宫颈癌组织,构建成四块组织芯片;采用链霉卵白素-过氧化物酶连结(SP)免疫组化方法,检测四块组织芯片中TGFBR2蛋白的表达,并分析其与宫颈癌临床病理特征和预后的关系.结果:成功对11例慢性宫颈炎、97例宫颈上皮内瘤变和164例宫颈癌组织中TGFBR2蛋白的表达进行检测.在慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤变、宫颈癌组织中,TGFBR2蛋白的阳性表达率分别为45.5％00(5/11)、20.6％(20/97)、3.0％(5/164),差异均有统计学意义(P＜0.05).TGFBR2的表达与肿瘤的FIGO分期、浸润深度及淋巴结转移密切相关,即分期越晚、浸润深度越深、伴随淋巴结转移者,TGFBR2蛋白表达水平越低(P＜0.05).随访的164例宫颈癌患者中,TGFBR2阳性和阴性患者的5年生存率分别为72.4％和69.2％,两者差异有统计学意义(P＜0.05).多因素分析显示,TGFBR2表达情况和淋巴结转移情况为影响宫颈癌预后的独立因素.结论:TGF-BR2表达下降与宫颈癌发生发展过程密切相关,可作为肿瘤治疗的靶点及预后的预测指标.
作者：张红艳；杨慧；周福祥；周云峰 刊期： 2017年第02期
目的:应用Aβ25-35寡聚体诱导大鼠神经胶质瘤母瘤细胞C6制备细胞损伤模型,研究17β-雌二醇(E2)对模型细胞的保护作用.方法:采用MTT法检测细胞活力,流式细胞技术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法(WesternBlot)检测C6雌激素受体表达,研究E2对模型细胞的保护作用.结果:Aβ25-35寡聚体损伤C6后,细胞活性明显降低,凋亡率升高.E2预处理后,模型细胞存活率明显改善,凋亡率显著性降低,而且雌激素受体抑制剂ICI182,780、G15和信号通路抑制剂LY294002、H89均能阻断其神经保护作用.结论:E2可拮抗Aβ25-35寡聚体诱导C6损伤,具有神经保护作用,且这种保护作用与雌激素受体及PKA、PI3K信号通路相关.
作者：邓丽娟；黄健 刊期： 2017年第02期
目的:探究低密度脂蛋白(LDL)与脂质筏之间的关系.方法:运用荧光漂白恢复技术(FRAP),对LDL刺激的细胞和未经LDL刺激的细胞进行观测;采用密度梯度离心的方法分离脂质筏,对各层中胆固醇含量进行测定,通过Western Blot对脂质筏标志性蛋白flotillin-1,caveolin-1进行分析;β-环糊精孵育后,扫描电子显微镜观测细胞形态.结果:经LDL刺激的Raw264.7细胞表现出荧光漂白恢复时间延长;脂质筏区的胆固醇含量增多,脂质筏区标志性蛋白flotillin-1,caveolin-1增加;β-环糊精孵育后细胞形态发生改变,细胞胆固醇含量降低.结论:LDL能诱导细胞膜上脂质筏的聚集.
作者：赵瑾超；宋健；常旦琪；熊宇迪；邱骁；武军驻 刊期： 2017年第02期
目的:对比分析周围静脉与深静脉置管两种溶栓方法对急性下肢深静脉血栓患者的临床效果.方法:将我院自2012年1月至2013年12月收治并确诊为急性下肢深静脉血栓患者共计170例,按照随机数表法将其分为两组,A组(69例)与B组(101例),A组采用周围静脉溶栓法,B组采用深静脉置管溶栓法.记录两组患者的静脉通畅率、Porter评分、下肢消肿以及并发症的情况,进行比较分析.结果:两组患者静脉通畅率分别为33.33％和57.43％,相比较有统计学差异(P＜o.05);两组患者下肢消肿情况比较、治疗前后Porter评分比较均无统计学差异(P＞0.05);A、B两组患者并发症发生比率分别为17.39％和19.80％,二者比较无统计学差异(P＞0.05).结论:周围静脉与深静脉置管两种溶栓方法治疗急性下肢深静脉血栓均能取得较好效果,二者的并发症发病率也大致相同,但深静脉置管有更好的静脉通畅率,更值得临床推广.
作者：金良凤；陈敏 刊期： 2017年第02期
目的:探讨保留髌下脂肪垫的膝关节镜高位前侧入路在膝关节镜手术中应用的临床疗效.方法:回顾性分析2014年10月至2015年10月我院膝关节镜手术60例.其中32例采取膝关节镜高位前侧入路保留髌下脂肪垫;28例采取常规入路,术中刨削部分髌下脂肪垫.记录患者手术时间、关节腔引流量,并于术后6个月进行膝前疼痛VAS评分及膝关节功能Lysholm评分.结果:膝关节镜常规入路切除髌下脂肪垫组与膝关节镜高位前侧入路保留髌下脂肪垫组临床治疗优良率分别为92.9％和93.8％,组间比较差异无统计学意义(P＞0.05);但两组间手术时间、关节腔引流量、术后6个月VAS评分、Lysholm评分比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:膝关节镜手术中,保留髌下脂肪垫对比切除髌下脂肪垫术后疗效优势明显.膝关节镜高位前侧入路在保留髌下脂肪垫的同时保证手术视野的充分暴露,利于手术操作,缩短手术时间,减轻患者术后膝前疼痛,有利于快速康复.
作者：谢威；李皓桓；张小龙；唐金明；施家奇；向绍奇 刊期： 2017年第02期
目的:探讨可溶性环氧化酶水解酶抑制剂-1471(sEHI-1471)预防2型糖尿病小鼠胰岛β细胞凋亡的作用及其机制.方法:2型糖尿病KKAy小鼠随机分为2组:sEHI-1471组(18只)及对照组(18只),分别饮用含8mg/L的sEHI-1471或等体积生理盐水的饮用水,将同周龄的雄性C57BL/6J小鼠设为正常组,饮水不受干预.比较各组小鼠空腹血糖(FBG)和空腹胰岛素水平(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).TUNEL检测胰岛β细胞凋亡.Western Blot检测胰腺组织Bcl-2,Bcl-xL,Bim,Bax和Bid表达水平.结果:干预3周后,与正常组相比,对照组FBG、FINS和HOMA-IR指数均显著升高(P＜0.05);与对照组相比,sEHI-1471组小鼠FBG、FINS和HOMA-IR指数均显著降低(P＜0.05);比较各组凋亡变化的结果,对照组较正常组胰岛β细胞凋亡数显著增加(P＜0.05),sEHI-1471组较对照组凋亡细胞数明显下降(P＜0.05).比较各组小鼠胰腺抗凋亡蛋白Bcl-2,Bcl-xL和促凋亡蛋白Bax,Bim,Bid表达水平,对照组相对于正常组Bcl-2,Bcl-xL表达明显降低,Bax,Bim和Bid表达明显升高,而相对于对照组,sEHI-1471组Pax,Bim和Bid表达明显降低,Bcl-2和Bcl-xL表达明显升高(P＜0.05).结论:sEHI-1471能降低血糖,增加糖尿病小鼠对胰岛素的敏感性,减少KKAy小鼠胰岛β细胞凋亡,其机制可能与降低促凋亡蛋白Bax,Bim,Bid表达和增加抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-xL表达有关.
作者：张洁；万静；王海蓉；廖宇峰；熊世熙；汪道文 刊期： 2017年第02期
老年性肌萎缩是一种随年龄而出现的,以骨骼肌质量减少、肌力下降、功能减低等为特点的慢性综合征,严重影响临床疾病的治疗及预后.活动减少和营养缺乏是其发病的重要因素,也是防治肌萎缩的重要举措.国内关于运动结合营养的综合研究甚少,本文就老年性肌萎缩的发生、发展进行分析,剖析运动和营养与老年性肌萎缩的关系,为运动结合营养改善老年性肌萎缩的研究提供参考.
作者：张汇敏；石爱桥；秦子来；孟思进；翟茜茜 刊期： 2017年第02期
目的:评价超声结合导引丝动脉穿刺法在困难桡动脉穿刺置管中应用的可行性,并探讨其安全性及价值.方法:选择需行有创动脉监测306例手术患者,随机分成:A组:采用传统触摸脉搏搏动盲法,使用普通动脉穿刺针采取直接穿透法行桡动脉穿刺置管;B组:采用传统触摸脉搏搏动盲法,使用带导丝的动脉穿刺导管组行桡动脉穿刺置管;C组:直接采用B超引导的普通动脉穿刺针行桡动脉穿刺置管;D组(n=36):为上述三组患者穿刺失败后,采用B超结合导丝引导下的桡动脉穿刺置管.分别记录各组患者的首次穿刺成功率、总体成功率、穿刺次数、穿刺时间.记录桡动脉血肿等并发症的发生情况.结果:A组15例穿刺置管失败,B组14例穿刺置管失败,C组7例穿刺置管失败,D组35例穿刺置管成功;C组首次穿刺成功率高于A组、B组,而穿刺时间明显少于A组和B组,且总成功率显著高于A组(P＜0.05),而穿刺次数明显少于A组(P＜0.05);D组首次穿刺成功率、总穿刺总功率分别高达77.8％及97.2％.结论:超声辅助技术可以提高桡动脉置管成功率,短轴平面外+长轴平面内超声技术联合导引丝动脉穿刺置管法成功率更高,亦是直接桡动脉穿刺失败后的有效补救方法之一.
作者：王在平；夏中元；孟庆涛；雷少青；唐玲华；侯家宝；陈榕；冷燕 刊期： 2017年第02期
目的:总结前颅窝底巨大脑膜瘤的手术入路和切除方式,并分析特殊类型脑膜瘤的手术治疗方法.方法:回顾性分析2012至2014年间我科收治的21例前颅窝底巨大脑膜瘤病例的临床资料、手术经过及预后情况.结果:所有病例经影像学检查,并行显微手术治疗,肿瘤全切除(SimpsonⅠ、Ⅱ级切除)18例,近全切除3例,无死亡病例;除1例颅神经功能术前完全丧失外,术后神经功能改善者17例,无改善者2例,加重者1例.术后随访复查头颅MRI,肿瘤全切除组病例未见复发,近全切除有2例复发.结论:前颅窝底巨大脑膜瘤手术切除难度大,根据肿瘤部位选择正确手术入路,采用精细的显微外科技术,可取得良好的手术效果.
作者：李斐；陈谦学；陈治标；叶应湖；蔡强；王龙；邓钢；刘骏辉 刊期： 2017年第02期
目的:分析了234例冠心病患者临床特点及危险因素,为临床冠心病的防治积累经验.方法:选取2011-2012年间在我院行冠脉造影的324例研究对象,根据冠脉造影结果将研究对象分为冠心病组(n=234)及非冠心病组(n=90).详细询问高血压病、糖尿病、家族早发心脏病、吸烟及高脂血症等病史.并进行血常规、肝肾功能、尿酸、血脂等生化检查,采用Gensini积分评估患者冠脉病变情况.结果:冠心病组包含更多吸烟、家族早发冠心病、高血压及糖尿病等病史的患者;冠心病组WBC、L％、N％、NLR、PLR、ALT、AST、TG、HDL-C、apoA1、BUN、Cr、UA均显著高于非冠心病组,差异有统计学意义.结论:高血压、糖尿病、高AST、高NLR及高尿酸血症是冠心病患者的独立危险因素;AST、脂蛋白a、HDL-C、NLR是冠心病病变严重程度的危险因素.
作者：苟棋玲；干学东；王忠莉 刊期： 2017年第02期
目的:本实验拟采用转化生长因子(TGF)β1刺激原代大鼠乳鼠心脏成纤维细胞诱导其分化激活,探讨参松养心粉剂在心脏成纤维细胞激活中的作用.方法:体外分离培养大鼠乳鼠心脏成纤维细胞,采用TGFβ1诱导心脏成纤维细胞的激活,同时给予不同浓度的参松养心粉剂处理后,检测各组成纤维细胞增殖、激活程度;采用免疫印迹法探讨其机制.结果:参松养心单独处理成纤维细胞不影响细胞活性;不同浓度的参松养心抑制TGFβ1诱导的心脏成纤维细胞的增殖;50,100 μg/ml的参松养心明显抑制细胞的转化激活,抑制促胶原因子的转录水平.免疫印迹结果显示参松养心抑制蛋白激酶B(Akt)、mTOR、GSK3β以及eIF4e的磷酸化.结论:参松养心能够保护TGFβ1诱导的心脏成纤维细胞的增殖、分化以及激活,其主要通过抑制Akt通路发挥抗纤维化的作用.
作者：沈涤非；吴青青；邓伟；倪健；唐其柱 刊期： 2017年第02期
目的:寻找改善慢性肾脏病患者及血液透析患者血管钙化的原因,从而有效延缓血管钙化,保护透析患者生命通道.方法:以人血管平滑肌细胞(hVSMC)作为研究对象,观察用不同浓度哇巴因(0,1,10,100,1,10μmol/L)刺激hVSMC不同时间后细胞的生长凋亡情况,并采用MTT法检测细胞存活能力;以蒲黄灌胃小鼠所获得血清作为药物干预,将细胞分为:对照组、哇巴因刺激组、哇巴因+蒲黄干预组;选取适合的哇巴因浓度和时间点,采用免疫印迹法检测钠钾ATP酶(NKA)a1亚基及骨桥蛋白的表达;采用Von kossa法检测钙结晶的形成及阳性细胞百分比;统计学方法采用两样本t检验,多组间两两比较用方差分析(one-way ANOVA)中SNK检验.结果:哇巴因可以诱导血管平滑肌细胞发生钙化;NKAα1亚基参与血管平滑肌钙化形成;蒲黄通过抑制NKAα1亚基活化阻止血管平滑肌钙化.结论:哇巴因参与血管钙化机制中,蒲黄通过抑制钠钾NKAα1亚基,阻断了哇巴因/NKAα1/骨桥蛋白信号通路,从而抑制了血管平滑肌钙化的进展.
作者：娄美玉；刘昌璇；吴佳；陈文莉；丁国华 刊期： 2017年第02期
目的:探讨快速康复外科理念在子宫肌瘤围手术期应用的价值.方法:107例子宫肌瘤术患者随机分为实验组和对照组,在围手术期实验组(n=54)应用快速康复外科理念,对照组(n=53)采用传统治疗方案,比较两组患者的术后肠道排气时间、下床活动时间、住院时间,以及手术前、后血清C反应蛋白(CRP)的差异.结果:实验组较对照组术后排气时间、下床活动时间、住院时间明显缩短,CRP浓度明显降低(P＜0.05).结论:对于子宫肌瘤患者在围手术期中应用快速康复外科理念,能降低手术风险、缩短住院时间、减少手术并发症、减轻机体应激和炎症反应,加速患者康复.
作者：朱弘宇；陈建玲 刊期： 2017年第02期
目的:比较Stanford A型主动脉夹层手术中不同脑灌注流量的临床效果.方法:回顾性分析2011年1月至2014年12月在我院行深低温停循环手术的Stanford A型主动脉夹层患者的临床资料,根据术中双侧顺行脑灌注所采取的流量不同,分为A、B两组.A组72例,其脑灌注流量为8-10 ml/(kg·min);B组38例,其脑灌注流量为5-6 ml/(kg·min).比较两组患者一般资料、术中情况及术后并发症发生率等情况.结果:A组与B组比较,两组在手术方式、体外循环时间、脑灌注时间、心肌阻断时间等方面均无差异.而B组短暂脑神经功能障碍发生率、拔管时间、ICU滞留时间、住院时间较A组明显减少.结论:Stanford A型主动脉夹层手术中,在深低温停循环、双侧顺行脑灌注的基础上,选择较低的脑灌注流量[5-6 ml/(kg·min)]能降低神经功能障碍的发生率,缩短机械通气、ICU停留时间及住院时间,并能降低总体住院费用.
作者：胡小平；王志维；夏军；胡锐；邓宏平；吴智勇；徐鹏 刊期： 2017年第02期
目的:探讨咪唑斯汀治疗特应性皮炎的疗效及可能机制.方法:收集2013年4月至2014年10月在我院门诊收治并确诊为特应性皮炎的患者168例,按入院的顺序随机分为2个组别,对照组81例,观察组87例.结果:观察组治疗1周、2周和3周后痊愈的例数分别为5、42和75例,较对照组多,观察组治疗2周的总有效例数较对照组多,两个组别未出现明显的不良反应.治疗前,两个组别血清IgE、IL-5、TNF-α和IFN-γ与嗜酸粒细胞(EOS)计数无显著差异(P＞0.05),治疗2周和4周两个组别的血清IgE、IL-5、TNF-α和IFN-γ与EOS计数显著降低(P＜0.05),与对照组比,治疗2周观察组的血清IgE、IL-5、TNF-α和IFN-γ与EOS计数降低显著(P＜o.05),治疗4周,观察组的IgE较对照组低,两个组别血清IL-5、TNF-α和IFN-γ与EOS计数无显著差异(P＞0.05).结论:咪唑斯汀治疗特应性皮炎安全有效,可能通过降低血清IL-5、TNF-α和IFN-γ与降低外周血EOS计数而发挥作用.
作者：詹庆霞；谢艳秋；王晋 刊期： 2017年第02期
目的:探讨腔内给予比沙可啶对大鼠体外结肠运动模式的影响.方法:将19只雄性大鼠全结肠随机分为比沙可啶组和生理盐水组.在恒温浴槽内分别经结肠近端及远端腔内给予比沙可啶(bisacodyl)或生理盐水(0.9％ NaCl),时空图记录分析离体结肠运动模式变化.结果:①比沙可啶近端灌注可引发簇集性长距离收缩(LDCs)(连续3-8个),频率为3/15min;②比沙可啶远端灌注可引发规律LDCs,偶可见簇集性LDCs;③0.9％NaC1灌注可引发节律性LDCs转换成缓慢推进的节律性运动,无簇集LDCs发生;④比沙可啶及0.9％ NaC1灌注均使LDCs频率减低,但头端收缩运动增加.结论:比沙可啶腔内灌注可引发簇集性LDCs和独立的LDCs产生促进结肠传输;依运动模式特征推测神经源性机制起主要作用.
作者：黄敏；陈继红；栗宏斐；杨自仙；谭诗云；罗和生；Jan D Huizinga 刊期： 2017年第02期
目的:探讨抑郁引起大鼠结肠动力学改变导致肠易激综合征(IBS)后细胞膜上L-型钙电流(ICa-L)变化.方法:SPF级成年雄性SD大鼠分为正常对照组(对照组,n=15)和抑郁症模型组(抑郁组,n=15).抑郁模型制备方法是采用孤养加慢性温和不可预知性应激刺激方式进行,28 d后通过旷场试验(OFT)和液体消耗试验(FCT)确定抑郁模型成功.根据临床表现、生成的粪便性状和数量确定IBS发生率.酶解法分离单个结肠平滑肌细胞,全细胞膜片钳技术记录结肠平滑肌细胞膜上Ia-L及其电流-电压(I-Ⅴ)曲线变化.结果:与对照组比较,抑郁组大鼠出现体重增长减慢,OFT和FCT值显著降低(P均＜0.01),提示抑郁大鼠模型建立成功;抑郁组大鼠出现严重体质减弱,排便颗粒数及其含水量明显增高(P均＜0.01),与OFT和FCT值比较呈显著的负相关(r值均＞-0.89,P均＜0.01),胃肠道症状的发生率显著增高(P＜o.01),说明抑郁引起大鼠出现严重的IBS病症.在电压钳制方式下,与对照组比较,抑郁组大鼠结肠平滑肌细胞膜上Ia-L峰值显著增大,其Ⅰ-Ⅴ曲线明显下移到底部和向左偏移.当钳制电位为+10 mV时,抑郁组大鼠结肠平滑肌细胞Ia-L由对照组的(--21.31±4.79)pA增加为(33.52±4.45)pA(P＜0.01).与抑郁大鼠的排便颗粒数及其含水量进行比较,具有显著正相关(r均＞0.91,P均＜0.01).结论:抑郁能引起大鼠胃肠道出现明显的IBS病症,其发生机制可能是抑郁诱发了大鼠结肠平滑肌细胞膜上ICa-L增加出现电重构,造成结肠性动作电位失常促使肠动力学改变形成.
作者：柴红；王凤秀；杨峥；吴成云；周成志；陈明铠；谭诗云；王晓萍；王高华 刊期： 2017年第02期
目的:探讨孕妇孕前体重指数(BMI)、孕期体重增重现状与妊娠结局的关系,为孕期体重管理提供科学依据.方法:选择2013年5月至2015年2月我院产科住院分娩的初产妇457例作为研究对象.收集研究对象的一般资料,按照标准进行孕前体重指数分组,孕期增重分组,比较不同组别妊娠结局的差异.结果:457名孕妇孕前超重与肥胖有177人(38.73％),孕期增重过多120人(26.26％);平均年龄(26.99±5.89)岁,平均孕周为(39.27±1.43)周,不同孕前体重指数分组的孕妇年龄、孕周差异无统计学意义,P＞0.05;肥胖组的妊娠期高血压综合征发生率(15.79％)、巨大儿发生率(14.04％)高,体重过低组的低出生体重儿发生率(8.33％)高,不同孕前BMI孕妇妊娠期高血压综合征、巨大儿、低出生体重儿发生率差异具有统计学意义,P＜0.05;增重过多组妊娠期高血压综合征发生率(16.28％)、巨大儿发生率(10.85％)、剖宫产发生率(20.16％)高,增重不足组低出生体重儿发生率高(6.20％),不同孕期增重孕妇妊娠期高血压综合征、巨大儿、低出生体重儿、剖宫产发生率差异具有统计学意义,P＜0.05.结论:孕前及孕期体重与妊娠结局密切相关,控制孕前体重、孕期体重增重在合理的范围内,对减少不良妊娠有着重要的意义.
作者：谢婷 刊期： 2017年第02期
目的:探讨金属硫蛋白3(MT3)基因启动子区甲基化及基因表达与自闭症的关系及其意义.方法:采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对33例自闭症患者和39例对照组儿童的外周血白细胞中MT3基因启动子区域子42个CpG位点甲基化进行定量检测,并采用实时荧光定量PCR技术(RT-PCR)检测其MT3 mRNA的水平.结果:自闭症患者中15个CpG位点甲基化程度与对照组相比较差异有统计学意义(P均＜0.05),与对照组儿童相比,MT3 mRNA表达水平在自闭症患者中增加(P＜0.01).MT3基因部分CpG位点(CPG39.40.41.42.43)甲基化改变与其mRNA相对表达量呈负相关(r=-0.308,P＜0.05).结论:自闭症儿童MT3基因部分CpG位点低甲基化改变可能会引起该基因mRNA改变,这为自闭症的病因学研究提供了新的思路.
作者：余丹；曹涛；焦雪倩；黄伏生 刊期： 2017年第02期
武汉大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：武汉大学
