魏翠娥；陕声国；张端莲；叶玲
目的:评价葡聚糖磁性纳米颗粒作为基因载体在体外转染中的可行性.方法:用紫外分光光度计及琼脂糖凝胶电泳法分析检测葡聚糖磁性纳米颗粒结合DNA的能力,再将葡聚糖磁性纳米颗粒作为基因载体连接绿色荧光蛋白pEGFP-C1质粒报告基因在体外转染人膀胱肿瘤细胞BIU87和人树突状细胞,并在转染后72 h采用MTT比色法测定这种载体对细胞增殖和功能的影响以了解其细胞毒性.结果:在葡聚糖磁性纳米颗粒表面修饰多聚赖氨酸后,以静电引力作用结合DNA,其DNA结合率可达到75.6%,修饰多聚赖氨酸的葡聚糖磁性纳米颗粒可作为基因载体将报告基因转染至各类型细胞内并成功表达,在荧光显微镜下可观察到绿色荧光细胞.与相同条件下脂质体为对照,转染后的细胞增殖活性及功能略优于对照组,有效地证明了葡聚糖磁性纳米颗粒的细胞毒性稍低于脂质体的细胞毒性.结论:葡聚糖磁性纳米颗粒可作为有效的基因载体之一.
作者：庄乾元；孙璇；周四维；管维；叶章群 刊期： 2007年第03期
目的:研究上皮型钙黏附素(E-cadherin)在乳腺癌中的表达及其与临床生物学特性的关系.方法:通过免疫组织化学方法回顾性检测我院78例乳腺癌标本中E-cadherin的表达,分析其与肿瘤临床病理特征间的关系及其与VEGF表达的相关性.结果:E-cadherin在乳腺癌的表达率为52.6%,明显低于癌旁正常乳腺组织的表达,其表达丢失与乳腺癌分化程度、分期及转移密切相关,且和VEGF的高表达呈负相关.结论:E-cadherin在乳腺癌组织呈低表达,其表达丢失与肿瘤分化程度、临床分期及转移有关,E-cadherin的低表达与VEGF表达增强负相关,检测E-cadherin可作为临床评价乳腺癌生物学特性的辅助指标.
作者：敖金娥 刊期： 2007年第03期
目的:测定念珠菌性阴道炎阴道分泌物中白细胞介素-10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)的表达水平,探讨不同类型细胞因子的表达水平与念珠菌性阴道炎发病的关系.方法:ELISA法检测初发组和复发组念珠菌性阴道炎的妇女阴道分泌物中IL-10、IFN-γ的表达水平,以健康体检妇女为对照组.结果:初发和复发念珠菌性阴道炎的阴道分泌物中IL-10的表达水平均显著高于健康对照组,复发组较初发组的表达水平也有显著性差异(P＜0.05);初发和复发念珠菌性阴道炎的阴道分泌物中IFN -γ的表达水平无显著性差异(P＞0.05),但均高于健康对照组(P＜0.05). 结论:Th1型和Th2型细胞因子的表达异常可能与念珠菌性阴道炎发病和复发有关.
作者：邸石；刘先洲；余福安；杨英 刊期： 2007年第03期
目的:探讨柚皮素(naringenin)对人慢性髓系白血病K562细胞株生长的影响及其作用机制.方法:MTT法检测柚皮素在不同浓度、不同时间对K562细胞的影响;倒置显微镜下,Wight-Giemsa染色(W-G染色),免疫荧光染色和透射电镜下观察细胞形态变化、凋亡发生情况以及超微结构的变化;并用流式细胞仪分析细胞周期分布,用免疫组织化学的方法检测细胞增殖核抗原(PCNA)的表达.结果:柚皮素对K562细胞增殖有明显抑制作用,作用24,48和72 h后的半数抑制浓度(IC50)分别为455,225和175 μmol/L;柚皮素处理组细胞在普通光镜和电镜下均见观察到显著的增殖抑制和典型的细胞凋亡形态学改变;流式细胞仪分析证实柚皮素能使K562细胞聚积在G0/G1期,S期细胞减少;在处理组PCNA的表达显著低于对照组.结论:柚皮素对K562细胞具有明显的增殖抑制作用,这一作用可能是通过细胞周期阻滞和诱导凋亡两种机制实现的.
作者：李瑞芳；左学兰；周颖；何莉；陈飞 刊期： 2007年第03期
目的:观察板蓝根多糖注射鼠伤寒沙门菌感染的小鼠后,对小鼠抵抗鼠伤寒杆菌能力的影响.方法:水煮法提取板蓝根多糖,配成悬液,腹腔注射感染鼠伤寒的小鼠,观察小鼠的生存时间,脾脏的重量指数,脏器菌落计数,检测小鼠血清中抗体IgG水平,用ELISA法测定小鼠脾脏释放的细胞因子.结果:注射板蓝根多糖的小鼠,生存时间延长,脾脏的重量指数,菌落计数均比对照组明显降低,血清中抗体IgG水平升高,脾脏细胞分泌细胞因子IFN-γ水平上升.结论:板蓝根多糖能够通过增强抗体的产生,调节细胞因子的释放,增强宿主的体液免疫和细胞免疫功能,保护宿主抵抗胞内菌的感染.
作者：夏新中；肖静；石国芳；李万红 刊期： 2007年第03期
目的:了解湖北省部分地区中老年人睡眠质量及影响因素,确定可以进行健康干预的重点环节.方法:采用分层整群随机抽样方法,抽取湖北省12县(市)、区2 928位年龄≥35岁的居民进行调查.结果:实际调查2 811人,回收有效调查问卷2 710份,应答率为96.4%.人群睡眠时间＜6 h的比例为24.0%,6-8 h为46.6%,》8 h为29.4%.人群中有55.4%的人午睡.公务员睡眠状况好.57.9%的人经常出现入睡困难.＜6 h睡眠时间人群中72.5%有入睡困难,＞8 h睡眠时间人群中47.5%有入睡困难.女性、睡眠时间＜6 h、体力活动为睡眠质量差的相关影响因素.结论:被调查地区人群睡眠状况不容乐观,应在人群中开展睡眠保健知识的宣传,指导人群养成好的睡眠习惯,从而提高人群睡眠质量.
作者：张薇；张庆军；陈湘宜；左丹；李阳；郭毅；陈建军；刘晴 刊期： 2007年第03期
目的:探讨乳腺癌易感基因2(BRCA2)在散发性乳腺癌组织中的表达及意义,了解BRCA2蛋白的表达与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及原癌基因C-erbB-2之间的相关性.方法:采用免疫组化法(SABC)对32例乳腺癌患者癌组织、癌旁组织及正常乳腺组织中BRCA2、C-erbB-2、ER、PR蛋白的表达进行检测并结合年龄、病理组织学分级、腋淋巴结转移情况进行相关性分析.结果:BRCA2 在乳腺癌组织中表达的阳性率为56%,而在癌旁及正常乳腺组织中无阳性表达(P＜0.05).BRCA2蛋白的表达在乳腺癌不同组织学分级中有差异(r=0.372 8, P＜0.05);与腋下淋巴结转移之间比较差异有显著性(r=0.362 2,P＜0.05),但与发病年龄、ER、PR、C-erbB-2表达之间未见相关性. 结论:BRCA2蛋白的表达与组织学分级高、腋淋巴结转移相关.BRCA2蛋白的检测有可能成为评估乳腺癌生物学行为和预后的新指标.
作者：陈东祥；李军川；王茁；陈廷煊；张立军；盛波；张吕胜；伍欣星 刊期： 2007年第03期
目的:探讨不同活化表型的巨噬细胞对淋巴管内皮细胞(LEC)增殖、迁移和管样结构形成的影响.方法:分别以mrIFN-γ、mrIL-4处理小鼠RAW264.7细胞,建立经典活化的巨噬细胞(caMphi)和替代性活化的巨噬细胞(aaMphi)模型.采用transwell系统,将活化的巨噬细胞和LEC共培养.通过绘制细胞生长曲线、细胞迁移实验和基质胶实验,分别观察它们对LEC增殖、迁移和管样结构形成的影响.结果:与aaMphi共培养的LEC增殖速度较快,迁移能力和管样结构形成能力均明显强于其它对照组.结论:aaMphi能够促进LEC增殖、迁移和管样结构形成.
作者：章必成；王俊；赵勇；高建飞；郭燕；陈正堂 刊期： 2007年第03期
目的:建立一种新的移植睾丸缺血再灌注损伤(IRI)的模型,为研究临床睾丸移植奠定实验基础.方法:20只健康成年雄性日本大白兔,采用分别夹闭一侧睾丸动脉上下方腹主动脉后,然后套管针穿刺夹闭间的腹主动脉行一侧睾丸HC-A灌注液灌注,至一侧睾丸变为苍白色后阻断该侧睾丸动脉血流.然后将该睾丸原位低温保存4 h后开放睾丸动脉,成功地建立兔自体原位移植睾丸的缺血再灌注的模型.结果:灌注前睾丸颜色为正常鲜红色,灌注后灌注侧睾丸变为苍白色.开放睾丸动脉血流后可见睾丸变为鲜红色.模型成功率为90％,睾丸热缺血时间为(5.0±1.5)min,冷缺血时间为240.0 min,腹主动脉阻断时间(12.5±2.5)min. 结论:建立了稳定、可行的自体原位移植睾丸缺血再灌注损伤的模型,为研究睾丸移植的缺血再灌注损伤提供了可靠的研究平台.
作者：杜贤进；张茨；余小祥；熊云鹤；廖文彪；申复进；王玲珑 刊期： 2007年第03期
目的:研究腋臭患者腋窝顶泌汗腺的形态学结构,探讨顶泌汗腺的分泌周期和影响腋臭发病的因素.方法:用光学显微镜、透射电子显微镜观察20例腋臭患者腋窝顶泌汗腺显微、超微结构,并分析性别、年龄、季节等发病因素与气味强度之间的关系.结果:光学显微镜下12例腋臭患者顶泌汗腺呈现分泌高峰期,8例呈现分泌低谷期;透射电镜下12例腋臭患者顶泌汗腺细胞整体形态显示典型的分泌上皮细胞特征,8例顶泌汗腺细胞未显示典型上皮细胞特征;气味强度可能因年龄、季节的不同而有所不同.结论:腋臭患者顶泌汗腺有一定的分泌周期,该特征对腋臭的临床治疗有一定的价值.
作者：魏翠娥；陕声国；张端莲；叶玲 刊期： 2007年第03期
目的:研究胃癌中环氧合酶2 (COX-2) 的表达情况和生物学意义,以及与核因子κB (NF-κB)的相关性.方法:选择胃癌及癌旁正常组织41例,对COX-2、NF-κB进行RT-PCR及Western blot检测.结果:41例胃癌标本中有28例COX-2 阳性,26例NF-κB阳性,COX-2和NF-κB表达呈正相关.COX-2 和NF-κB基因表达与年龄、性别、大小、组织学类型无关,但与浸润深度、临床分期和肿瘤的淋巴结转移具有显著的相关性(P＜0.05).结论:COX-2过表达在肿瘤侵袭过程中发挥着重要作用,而NF-κB可能通过调节COX-2的表达在胃癌细胞增殖过程中起重要作用.
作者：刘华；陈纪伟 刊期： 2007年第03期
目的:研究高脂饮食诱导的胰岛素抵抗(IR)对大鼠脂肪内脏脂肪素(visfatin)表达水平的影响. 方法:将24只雄性SD大鼠随机分为正常对照组和高脂饮食组.适应性饲养后,测定空腹血糖(FBG)和空腹血清胰岛素(FINS),分别喂以正常饲料和高脂饲料.12周后,检测两组大鼠体重、FBG和FINS,用HOMA模型评价胰岛素抵抗指数,处死,分离附睾、肠系膜、折返腹膜脂肪以及肾脏脂肪垫,称重,计为内脏脂肪重量.利用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)分别检测两组大鼠内脏脂肪中visfatin表达的差异,并分析HOMA-IR值、内脏脂肪量分别与visfatin/β-actin光密度比值之间的相关关系.结果:高脂饮食成功诱导了胰岛素抵抗,高脂喂养组大鼠的内脏脂肪明显增多,其FBG轻度升高(P＞0.05)、FINS明显升高、HOMA-IR明显升高(P＜0.05).高脂饮食组大鼠的内脏脂肪中visfatin表达显著高于对照组(P＜0.05).HOMA-IR值、内脏脂肪量分别与visfatin/β-actin光密度比值呈正相关(均为P《0.01).结论:高脂饮食诱导的胰岛素抵抗大鼠内脏脂肪组织中visfatin mRNA表达明显增加,且其表达与HOMA-IR和内脏脂肪量之间呈正相关,提示visfatin在胰岛素抵抗的发生和发展过程中起有一定的作用.
作者：周笑漪；徐焱成 刊期： 2007年第03期
目的:检测寻常型银屑病患者血清白细胞介素-18(IL-18)和干扰素诱导蛋白-10(IP-10),探讨其在银屑病发生、发展过程中的作用.方法:采用竞争酶联免疫吸附(ELISA)法对30例寻常型银屑病患者(其中进行期16例,静止期14例)血清中的IL-18和IP-10水平进行检测.结果:正常对照组血清IL-18和IP-10水平分别为(158.38±13.64) ng/L和(148.73±11.44) ng/L;银屑病患者静止期组血清IL-18和IP-10水平分别为(350.07±19.74)ng/L和(345.62±8.75) ng/L,而进行期组血清IL-18和IP-10水平分别为(444.69±14.74)ng/L和(355.47±6.95) ng/L.进行期组及静止期组的IL-18和IP-10血清水平均较正常对照组明显升高(均为P《0.05).结论:IL-18和IP-10可能与银屑病发生、发展有关.
作者：骆云霄；盛晚香 刊期： 2007年第03期
目的:观察Smad7在TGF-β致近端小管上皮细胞转分化中的变化,泛素系统对该过程中Smad信号的调节及对TGF-β所致的小管上皮细胞转分化的作用.方法:体外培养的人近端小管上皮细胞(HK-2),随机分为对照组、TGF-β1(5 μg/L)组和TGF-β1(5 μg/L)+MG-132(5 mmol/L)组.Western blot检测细胞中Smad2/3磷酸化水平的改变和Smad7蛋白水平的改变;半定量RT-PCR方法观察细胞中Smad7 mRNA表达的改变. 结果:Western blot的结果显示:① MG-132+TGF-β1组中,Smad2/3磷酸化蛋白的表达减少90%(P＜0.01).② TGF-β1作用于细胞后,Smad7蛋白表达进行性减少,30 min较0 min降低20%(P＜0.05),24 h时几乎无表达(P＜0.01);MG-132+TGF-β1组中Smad7蛋白表达与对照组无明显差异,与TGF-β1组相比,Smad7蛋白水平上调.③半定量RT-PCR显示:TGF-β1(5 μg/L)作用于细胞后,与Smad7蛋白表达不同, Smad7 mRNA迅速升高,24 h其表达增高近1倍(与0 min比较,P＜0.01);MG-132+ TGF-β1组中Smad7 mRNA的表达与对照组无明显差异.结论:TGF-β可诱导Smad7 mRNA表达上调,但Smad7蛋白的表达显著减少,其机制与泛素系统活化导致Smad7蛋白的降解增加有关.
作者：贾宁；王汉；林琳；张桦 刊期： 2007年第03期
目的:通过针刺对脑缺血后星形胶质细胞增殖进行干预,以探讨其对胶质增生的影响.方法:建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)再灌注模型,应用免疫组化和免疫印迹方法检测2 d和7 d后损伤侧海马细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶4(CDK4)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.观察针刺对胶质增生的影响.结果:MCAO后2 d,损伤侧海马CDK4蛋白表达明显增强(P＜0.01),MCAO后7 d,损伤侧海马GFAP蛋白的表达明显增强(P＜0.01),给予针刺后,可抑制CDK4蛋白和GFAP蛋白表达(P＜0.01).结论:针刺可抑制胶质增生,从而有可能为神经再生和功能重建提供更有利的生存环境.其机制可能与其调控细胞周期有关.
作者：甘云波；黄光英；张明敏 刊期： 2007年第03期
目的:研究S期激酶相关蛋白2(Skp2)与P27kip1在子宫内膜癌中的表达水平与临床病理特征的关系,探讨其在子宫内膜癌发生、发展过程中的作用.方法:采用免疫组化SP法检测42例子宫内膜癌组织和12例正常子宫内膜组织中Skp2和P27kip1的表达.结果:42例子宫内膜癌组织中Skp2的阳性表达率为30.95%(13/42),显著高于正常内膜组织0.00%(0/12)(P＜0.01);P27kip1的阳性表达率为54.76%(23/42),低于正常内膜组织91.67%(11/12)(P＜0.05);统计分析还显示:Skp2和P27kip1的表达与肿瘤的分化程度、FIGO分期、淋巴结转移有关(P＜0.05),与患者年龄无关(P＞0.05),且Skp2和P27kip1在子宫内膜癌中的表达存在负相关(rs =-0.38,P＜0.01).结论:Skp2和P27kip1在子宫内膜癌的发生、发展中有一定协同作用,对其研究可为子宫内膜癌的基因治疗和预后评估提供有益线索.
作者：张小峰；刘少扬 刊期： 2007年第03期
目的:探讨羊膜移植对小鼠角膜1型单纯疱疹病毒 (HSV-1) 感染后发生角膜基质炎(HSK)的角膜中明胶酶(Gelatinases)的活性表达变化的影响,探讨羊膜移植对HSK的治疗作用及其机制.方法:将50只BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组,每组各25只,105pfu/L HSV-1病毒(SM44株)感染小鼠角膜,制作HSK小鼠模型.对实验组小鼠右眼角膜行羊膜移植术,对照组角膜不行羊膜移植术.在羊膜移植术后第0, 2, 7, 14, 21天处死动物取角膜.应用明胶酶谱(Gelatin Zymography)方法和计算机图像分析系统检测小鼠角膜明胶酶的酶活性表达的变化.结果:角膜感染HSV-1后,明胶酶谱显示:实验组小鼠角膜中酶原形式的pro-MMP-9(92 kU)在AMT后第2,14, 21天表达增强.活性形式的MMP-9(82 kU)在AMT后各时间点均有表达,但在第2,14及21天表达增强.pro-MMP-2(72 kU)条带在AMT后各时间点均有表达.而MMP-2活性条带(62 kU)则出现在AMT后第14天和21天.对照组小鼠角膜中明胶酶的表达变化情况跟实验组类似,但是,MMP-2活性各时间点均较实验组为强(P＜0.05).而MMP-9的活性在羊膜移植后第2天(P＜0.01),第14及21天(均为P＜0.05)均较实验组为强.结论:羊膜移植对HSV-1感染小鼠角膜后引起的坏死性角膜基质炎形成的角膜上皮缺损和角膜基质溃疡有明显的修复作用,这种作用的机制可能是通过抑制明胶酶的活性表达而实现的.
作者：朱金玉；杨燕宁；邢怡桥；朱晶 刊期： 2007年第03期
支架术后再狭窄是机体对损伤的一种过度愈合反应,新生内膜增殖是其主要发生机制.其预防包括术中预防、药物涂层支架、药物治疗、基因治疗.支架术后再狭窄可行经皮冠状动脉成形术、消斑治疗、血管内放射治疗和再次安放支架等治疗.
作者：刘丽；黄从新 刊期： 2007年第03期
目的:研究RNA干扰法对人近端肾小管上皮细胞(HKC)中Toll样受体4(TLR4)表达的抑制作用.方法:将针对TLR4分子设计的采用体外转录生物合成的特异性短发卡RNA(shRNA)双链分子用脂质体转染的方法导入体外培养的HKC;应用免疫荧光染色在共聚焦显微镜下观察TLR4的分布及表达强弱;半定量RT-PCR和免疫蛋白印迹检测TLR4及内参照β-actin在mRNA水平和蛋白水平的表达量.结果:干扰组TLR4的荧光强度显著低于对照组,其mRNA和蛋白的表达量分别下降了67%和62%.同时观察到TLR4主要分布于HKC细胞的胞膜及胞质区.结论:采用生物体外转录的方法成功合成针对TLR4的shRNA双链分子,并有效地转入HKC细胞中使TLR4的表达下调.
作者：聂祥智；朱忠华；邓安国；杨晓 刊期： 2007年第03期
目的:研究沙眼衣原体(Ct)感染后大鼠着床期间子宫内膜形态学改变及肌动蛋白的变化.方法:大鼠雌雄合笼建立早孕模型,取正常妊娠组和Ct感染后妊娠组大鼠子宫,采用扫描电镜(SEM)观察子宫内膜超微结构改变及荧光免疫组化检测肌动蛋白的表达. 结果:SEM示对照组子宫腔可见有微绒毛的分泌细胞;实验组腔上皮细胞表面有的可见破损,微绒毛少见;免疫组化结果显示荧光强度主要定位于腔上皮细胞胞质/胞膜,妊娠第4,5,6天沿胞质顶部分布较密集,而底部较弥散;妊娠第7天顶部强度有所增加;感染组的荧光强度均弱于相应正常组,在妊娠第5天存在显著性差异(P＜0.05).结论:沙眼衣原体感染后可能通过破坏子宫腔上皮分泌细胞,进而影响其内成分肌动蛋白,从而干扰早期妊娠.
作者：李平；黎炜英；孟运莲；乔建坤 刊期： 2007年第03期
武汉大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：武汉大学
