壳聚糖介导人胰岛素基因在糖尿病鼠体内外表达的研究

沈亚非；郭青云；徐焱成；郭敏；孙家忠；谢海鹰

关键词：人胰岛素基因, 糖尿病, 基因治疗, 壳聚糖

摘要：目的研究壳聚糖介导人胰岛素基因在糖尿病鼠体内外转染及表达.方法采用壳聚糖体外转染鼠成纤维细胞,对转染后72h的细胞应用免疫组织化学方法检测胰岛素的表达.27只糖尿病大鼠随机分为3组(pCMV.INS组、pCMV组、生理盐水组),体内转染通过尾静脉注射糖尿病大鼠,检测空腹血糖和胰岛素.结果pCMV转染细胞无胰岛素表达,pCMV.INS转染大约10%的细胞有胰岛素表达;pCMV.INS转染大鼠血浆胰岛素显著高于生理盐水对照组(P<0.01)和pCMV对照组(P<0.01).结论人胰岛素基因可通过壳聚糖直接转染至糖尿病大鼠体内发挥治疗作用及壳聚糖可能是一种很有前途的基因载体.

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神经肌肉松弛剂应用进展

自从格里菲思和约翰逊1942年首次使用神经肌肉阻滞剂,从而革新了陈旧的麻醉方法,开启了外科手术的新时代以来,肌松药因其能够降低不理想手术条件的发生率的优点,得到了麻醉医师的认可和欢迎.对神经肌肉阻滞剂研究的进步,使我们对其作用及增强效应的机制有了进一步的理解和认识,病人的安全也得到进一步的保障.

作者：刊期： 2005年第02期
骑跨横窦硬膜外血肿的诊治(附36例报告)

颅后窝枕极的骑跨性(跨横窦)硬膜外血肿如不能早期诊治,病死率较高.2001年2月～2004年2月我科收治了36例骑跨横窦硬膜外血肿,现报告如下.

作者：黄焕斌；陈谦学；夏伟；何贵山；彭付学；王汉平；蔡曙洲刊期： 2005年第02期
高血压病人围术期的治疗与麻醉

近年来,外科手术病人中高血压病人有增多趋势,据报道,其发生率高达20%.围术期高血压治疗与合理麻醉可降低心肌氧耗和减轻心脏负担,预防心肌缺血、心力衰竭和脑血管意外等并发症,使病人安全渡过手术期.

作者：王焱林刊期： 2005年第02期
塞来昔布诱导人骨肉瘤细胞株SAOS-2凋亡的实验研究

目的研究塞来昔布(celecoxib)对人骨肉瘤细胞株SAOS-2生长和凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法采用四唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖,以确定塞来昔布对SAOS-2的有效剂量;应用高效液相色谱(HPLC)检测前列腺素E2(PGE2)含量;光镜形态学观察;流式细胞仪测定细胞周期.结果塞来昔布抑制SAOS-2的增殖,效应呈剂量依赖性;塞来昔布能够诱导SAOS-2细胞凋亡,当浓度为100μmol/L时,凋亡率增加了44.3%,但是塞来昔布的这种抑制SAOS-2生长和诱导凋亡作用不能被PGE2所拮抗.结论塞来昔布对于人类骨肉瘤可能是一种有效的化学治疗和化学预防药物,塞来昔布并非通过前列腺素E2(PGE2)途径抑制SAOS-2生长和诱导凋亡.

作者：余毅；蔡林；廖智超刊期： 2005年第02期
壳聚糖介导人胰岛素基因在糖尿病鼠体内外表达的研究

目的研究壳聚糖介导人胰岛素基因在糖尿病鼠体内外转染及表达.方法采用壳聚糖体外转染鼠成纤维细胞,对转染后72h的细胞应用免疫组织化学方法检测胰岛素的表达.27只糖尿病大鼠随机分为3组(pCMV.INS组、pCMV组、生理盐水组),体内转染通过尾静脉注射糖尿病大鼠,检测空腹血糖和胰岛素.结果pCMV转染细胞无胰岛素表达,pCMV.INS转染大约10%的细胞有胰岛素表达;pCMV.INS转染大鼠血浆胰岛素显著高于生理盐水对照组(P<0.01)和pCMV对照组(P<0.01).结论人胰岛素基因可通过壳聚糖直接转染至糖尿病大鼠体内发挥治疗作用及壳聚糖可能是一种很有前途的基因载体.

作者：沈亚非；郭青云；徐焱成；郭敏；孙家忠；谢海鹰刊期： 2005年第02期
放线菌酮连续灌注对大鼠脑缺血后DNA片段形成的影响

目的揭示蛋白合成抑制剂对脑缺血的不同时期脑细胞凋亡的保护作用.方法将wistar大鼠制成MCA缺血-再灌注模型,分成放线菌酮(CHX)组、假手术组和生理盐水(对照)组.放线菌酮组从缺血前15min开始连续测脑室放线菌酮灌注(1mg/kg·d-1),于缺血60min后再灌注l、3、7、14d处死动物,取脑冠状切面,用TUNEL染色,DNA电泳观察细胞凋亡现象.对照组则用复方氯化钠溶液连续灌注.结果CHX组在l、3d时间分别发现(158±16)、(86±10)个阳性细胞.Tunel阳性细胞与对照组无明显差异.第7、14dCHX组TUNEL阳性细胞显著低于对照组(P＜0.05),CHX组在缺血l、3、7d发现DNA梯带,第14d未发现DNA梯带形成;对照组4次均出现DNA梯带.结论脑梗塞过程一直伴随DNA片段形成.在早期,蛋白生成抑制剂似乎不能阻止DNA片段的形成,而在晚期则能有效地阻止TUNEL阳性细胞的出现.缺血早期DNA片段形成可能不依赖蛋白质合成,而1周以后,蛋白质合成才成为DNA片段形成的前提.

作者：肖劲松；李晓宁；黄怀钧刊期： 2005年第02期
围手术期过敏反应及类过敏样反应

过敏反应(anaphylactic reaction)和类过敏样反应(anaphylactoid reaction)是麻醉期间发生率较低,而一旦发生却对病人的生命有严重威胁的并发症.其发生过程有一定的必然性和偶然性,主要原因是:①病人在麻醉前存在对药物、辅佐剂及手术用品的致敏现象;②在较短的时间内,被应用了大量的麻醉药物、辅佐剂、血浆代用品,病人可能对其中一种或几种物质敏感.因此,对麻醉期间可能发生的过敏反应和类过敏样反应应予以充分重视,大限度地减少发生,保障病人的生命安全.

作者：田玉科刊期： 2005年第02期
腹腔镜手术心跳骤停与CO2气栓

70年代开始应用腹腔镜进行妇科诊断性手术以来,因其具有创伤小、恢复快、术后疼痛轻、住院时间短、费用相对较低等优点,逐渐扩展到普通外科、肝胆外科、胸外科等领域,并成为当前世界医学发展的三大主要标志(微创手术、大器官移植、基因治疗)之一.但随着腹腔镜手术的广泛应用,逐渐增多的相关并发症尚未引起人们足够的重视,术中心跳骤停就是其中之一.提高认识和处理腹腔镜手术中发生心跳骤停的能力十分必要.

作者：陶国才刊期： 2005年第02期
封闭式负压引流治疗下肢大面积软组织缺损的临床观察

目的探讨封闭式负压引流技术(VSD)治疗大面积下肢皮肤软组织缺损的疗效.方法应用封闭式负压引流(维持负压在50kPa～60kPa之间)5～7d治疗皮肤撕脱伤和骨筋膜室综合征切开减压术后下肢巨大软组织缺损创面41例.结果VSD5～7d,伤口均无感染,创面缩小,肉芽新鲜,给予二期缝合或植皮治疗后创口愈合.结论封闭式负压引流治疗下肢大面积皮肤软组织缺损效果好.

作者：阿玛德；余国荣；陶圣祥；余黎；王显勋；彭飞刊期： 2005年第02期
肝肾联合移植术18例麻醉处理

目的探讨肝肾联合移植术中患者血流动力学、动脉血气、电解质、血糖和乳酸的变化.方法18例行非转流肝肾联合移植病人,采用气管内插管静吸复合麻醉.监测血流动力学、动脉血气及电解质、血糖和乳酸的变化.并依此对血流动力学和代谢紊乱进行纠正.结果肝移植期间循环系统变化明显,表现为腔静脉阻断期间中心静脉压、血压下降,心率增快,门静脉开放后低血压明显,15例病人需静脉分次推注去氧肾上腺素.动脉血酸碱度(pH)和剩余碱(BE)于无肝期有所下降.血钾均值虽然无明显变化,但肝血管开放后血钾个体间波动在3.4～6.5mmol/L.血钙也于无肝期和肝血管开放初降低,随后有所恢复.血糖于肝血管开放后显著升高.动脉血乳酸则于无肝期后升高.肾移植期间各项指标变化不明显.结论在肝肾联合移植术中,肝移植时阻断和开放门静脉和腔静脉对循环功能和内环境稳定影响较大,应加强监测并及时纠正.

作者：李士通；汪正平；王莹恬；徐国辉；庄心良刊期： 2005年第02期
p22phox基因多态性与2型糖尿病肾病的相关性研究

目的探讨p22phox基因第4外显子242C/T多态性与2型糖尿病肾病的关系.方法将随机选取的2型糖尿病患者137例分为单纯糖尿病组(62例)和糖尿病肾病(DN)组(75例),并设对照组(68例).采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测三组患者的p22phox基因型,比较各组的基因型和等位基因频率.结果在所有研究对象中未发现TT基因型;对照组和DN-组的CT基因型及T等位基因频率明显高于DN+组,差异有显著性(P<0.05);DN-组CT基因型及T等位基因频率与对照组无显著性差异(P>0.05).结论p22phox基因242C/T多态性对2型糖尿病肾病具有保护作用.

作者：严兆丹；薛金娥；徐焱成；郭敏刊期： 2005年第02期
当归多糖诱导K562白血病细胞凋亡及相关凋亡基因的实验研究

目的从细胞凋亡角度探讨当归的成分当归多糖(ASP)抑制白血病细胞增殖的机制.方法体外培养白血病细胞株K562,培养时添加25μg/ml、250μg/ml、2500μg/mlASP,分别于第2、4、6d取细胞,用台盼蓝拒染法进行活细胞计数,观察细胞形态改变,免疫组织化学检测bc1-2、c-myc基因的表达.结果2500μg/ml的ASP对白血病细胞株K562有显著抑制作用,且呈剂量效应关系;ASP诱导细胞后bc1-2、c-myc均明显降低(P＜0.05).结论ASP对白血病细胞株K562细胞增殖具有显著抑制作用,bc1-2、c-myc表达降低可能是ASP诱导白血病细胞凋亡重要途径之一.

作者：曾炜炜；邹典定刊期： 2005年第02期
股骨头缺血性坏死的治疗

股骨头缺血性坏死(avascular necrosis of the femoral head,ANFH)是因不同的病因破坏了股骨头的血液供应,造成股骨头与软骨坏死的一种常见疾病.国内外对该病进行了大量的探索,其治疗仍未很好地解决.我科对股骨头缺血性坏死20例进行治疗,现介绍如下.

作者：熊键；朱素莲；刘玲俐刊期： 2005年第02期
黄芪注射液辅助治疗儿童肾病综合征疗效分析

小儿肾病综合征(NS)是一组多种原因引起的临床症候群,以浮肿、大量蛋白尿、血浆白蛋白降低、血脂升高为特征.肾上腺皮质激素是治疗NS的主要药物,但在激素治疗过程中蛋白尿易反复出现.近年来,有学者报道,黄芪可以提高NS患者血浆白蛋白水平,降低血脂,减轻蛋白尿.我们应用黄芪注射配合强的松治疗小儿NS取得明显疗效现总结报告如下.

作者：吴红波刊期： 2005年第02期
线粒体DNA5178A/C多态性与2型糖尿病人血脂水平的关系

目的研究线粒体DNA5178A/C多态性在2型糖尿病人与正常人中的分布情况,以及线粒体DNA5178A/C多态性与2型糖尿病人血脂水平的相关性.方法采用聚合酶链反应(PCR)和限制性片段长度多态性(RELP)分析法对2型糖尿组(174例)及正常对照组(207例)进行基因分析,同时测定2型糖尿病组患者的血脂水平.结果线粒体DNA5178A基因型在2型糖尿病组及正常对照组中的比例分别为35%(61/174)、32%(66/207),5178C基因型的比例分别为65%(113/174)、68%(141/207);2型糖尿病组中5178A基因型与5178C基因型血清HDL-C、LDL-C、TG、apoA、apoB、Lp(a)水平无显著性差异,5178A基因型血清胆固醇水平低于5178C基因型,两型之间有显著性差异(P<0.05).结论5178A/C多态性与2型糖尿病的发病未见相关性,但5178A基因型在2型糖尿病人中可能有抗动脉粥样硬化作用.

作者：古今刚；周新；李霞；李东；刘松梅；胡飘萍刊期： 2005年第02期
内镜直视下球囊扩张治疗十二指肠球部溃疡瘢痕性狭窄

球部瘢痕性狭窄所致幽门梗阻是十二指肠溃疡常见并发症,其临床症状表现为呕吐、腹胀、腹痛及胃潴留.过去对十二指肠溃疡瘢痕性狭窄常采用外科手术治疗,但有创伤大、费用高及术后并发症多[1]的不足.我们采用内镜直视下球囊扩张治疗十二指肠球部溃疡瘢痕性狭窄26例,取得满意的疗效,报告如下,

作者：朱文成；刘兴玉；陈可；华开罗刊期： 2005年第02期
降纤酶佐治慢性阻塞性肺疾病疗效观察

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种以不可逆性气流受限为特征的常见病、多发病,病情呈进行性发展,病死率高.近年,其治疗研究有一定进展,但疗效并不十分满意.由于在发病环节中存在着血液流变学的异常,研究其血流变改变和掌握其变化规律,对于提高疾病的认识无疑是有益的.本研究尝试利用降纤酶抗凝辅助疗法,探讨其临床治疗价值.现报告如下.

作者：鲍造清；胡章良；田礼义；刘斌；陈维钧；黄承胜刊期： 2005年第02期
阿托伐他汀治疗高脂血症40例

血脂异常是动脉粥样硬化和冠心病、高血压重要的危险因素.通过积极的调脂治疗,降低血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和甘油三脂(TG),可改善血管内皮功能,稳定粥样硬化斑块,延缓动脉硬化进程.我们用阿托伐他汀治疗高脂血症病人取得满意的疗效,现报告如下.

作者：杨建国刊期： 2005年第02期
Bcl-2在乳腺癌组织中的表达及其与预后的关系

目的探讨Bcl-2在乳腺癌组织中的表达及其与预后的关系.方法收集2002～2004年乳腺癌根治术标本90例,采用免疫组化法检测乳腺癌中Bcl-2,C-erbB-2和ER、PR的表达,并分析Bcl-2与预后因子C-erbB-2、ER、PR及淋巴结转移的关系.结果Bcl-2阳性率为60%(54/90),其表达与预后正性因子ER、PR呈正相关,而与预后负性因子C-erbB-2、腋窝淋巴结转移呈负相关,其差异有显著性(P<0.05).结论Bcl-2高表达是乳腺癌预后的正性相关因子之一.

作者：吴智勇；范扬航；许嘉宁刊期： 2005年第02期
泌尿系感染病原菌的检测及其耐药分析

在病原菌引起的感染性疾病中,泌尿系感染占20%～30%.由于抗生素的频繁使用,增大了感染性疾病控制难度.因此,我们对869例泌尿系感染病原菌的分布和药物敏感试验结果进行了统计分析,为临床上合理应用抗生素提供一定的依据.

作者：庞津敏；王艺刊期： 2005年第02期