学术投稿

大肠癌噬菌体抗体库的构建及抗CEA抗体的筛选

南清振;高蕾;张振书;杨希山;肖冰;姜泊

关键词:大肠肿瘤, 噬菌体抗体库, Fab抗体, 癌胚抗原
摘要:目的 构建及初步鉴定大肠癌噬菌体抗体Fab呈现库,筛选人CEA单克隆抗体,并进行序列分析.方法 分离大肠癌患者外周血淋巴细胞,提取淋巴细胞总RNA,逆转录成cDNA.用PCR扩增人全套抗体基因片段,克隆于pComb3载体,再经电穿孔转化大肠杆菌XL1-Blue菌株,形成噬菌体抗体库.以固相化CEA抗原淘筛抗体库,ELISA鉴定噬菌体抗体.其中一个阳性克隆进行测序.结果 逆转录PCR分别扩增出约680bp大小的κ、λ和Fd基因.PCR产物和载体经纯化、双酶切后进行连接转化,成功地构建了人源性Fab抗体基因库,库容量达2.1×107,Fab基因重组率为50%.以单抗捕获的CEA抗原淘洗4轮,出现特异性富集,阳性克隆经直接ELISA和交叉反应ELISA实验证实具有良好的抗CEA抗原特异性.DNA测序表明该抗体重链属IgG亚类并含有一条IgL亚类的轻链.结论 成功构建了大肠癌患者自然致敏抗体Fab段噬菌体呈现库,从中获得可与CEA抗原结合的噬菌体抗体,由此为大肠癌早期诊断及基因治疗提供了一种新的思路和方法.
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    作者:任翠玲;刘开江;刘青;侯书梅 刊期: 2008年第01期

  • 麻醉机漏装钠石灰致高碳酸血症2例

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    作者:李乐春;程冰湖;戴琳君;董学军 刊期: 2008年第01期

  • 手术无法切除肺癌术中转用氩氦刀治疗15例分析

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  • 头针联合体针治疗卒中偏瘫60例

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    复发性口腔溃疡是常见的口腔黏膜疾病,好发与唇内侧、舌尖、舌缘、舌腹、颊部、软腭弓等部位.我们采用硫糖铝糊剂治疗150例RUO,取得良好效果现报告如下.

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    作者:梁琳琅;张杰;祝之明 刊期: 2008年第01期

  • 战士口腔急诊516例分析

    为探讨部队战士口腔疾病急诊特点,以便为士兵口腔急诊疾病的防治提供依据,促进部队口腔医疗保障工作,现将本院516例战士口腔急诊病例分析报告如下.

    作者:李文荟 刊期: 2008年第01期

  • 原发性高血压病人血浆中HCY、ADM和CGRP浓度测定的意义

    目的 通过测定原发性高血压病人血浆同型半胱氨酸(homocysteine HCY)、肾上腺髓质素(adrenomedullin ADM)、降钙素基因相关肽(CGRP)活性物质的水平,探讨血管活性物质与原发性高血压的关系,为原发性高血压的预防和治疗提供理论依据.方法 随机选取未经治疗的原发性高血压病人42例作为研究组,按高血压分级标准分为3个亚组,,对照组选择20例同期健康体检的正常人.采受试者空腹静脉血,用荧光法定量检测HCY,用放射免疫法检测ADM和CGRP.结果 (1)研究组血浆HCY、ADM浓度明显高于对照组,而CGRP水平明显下降,有显著统计学差异(P均<0.01).(2) 研究组三个亚组1级组、2级组和3级组HCY、ADM水平随着血压升高而升高,组间差别有统计学意义(P<0.01).(3) 研究组血浆HCY与ADM浓度呈正相关(r=0.941, P<0.01), 与CGRP呈负相关(r=-0.480, P<0.01).结论 研究组血浆HCY、ADM水平明显升高,且血压越高,浓度越高,而CGRP水平随着血压的升高却明显降低; 研究组HCY、CGRP水平变化,提示它们参与了高血压的发生与发展;ADM继发性升高,可阻止高血压进一步发展,对机体具有保护作用.

    作者:赵燕平;王中英 刊期: 2008年第01期

  • 中等程度限制蛋白质对2型糖尿病肾病肾功能的影响

    目的 探讨中等程度限制蛋质对2型糖尿病肾病肾功能进展抑制的价值.方法 对41例符合2型糖尿病肾病诊断标准,且能坚持12个月以上接受低蛋白饮食治疗的患者,根据Moroni推荐的公式计算得出每天实际蛋白质的摄入量,保证蛋白摄入量和处方指示量的差异限定在±10%以内,在低蛋白饮食期平均日蛋白摄入量为0.74 g/kg.根据血清肌酐(Scr)检测值将41例分为三组:A组6例,Scr<114.92 μmol/L,B组19例,176.8>Scr≥114.92 μmol/L,C组16例,Scr≥176.8 μmol/L.结果 Scr在114.92 μmol/L 以上的B组和C组,肾功能减退速度有有意义的降低(P>0.01);Scr<114.92 μmol/L 的A组,肾功能减退速度有降低倾向,总体上肾功能的进展被抑制(P>0.01).对血糖、胆固醇及血浆白蛋白没有影响.结论 在Scr114.92 μmol/L 左右开始实施每天0.8 g/kg 蛋白质这样中等程度限制蛋白质对伴有肾功能损害的临床期2型糖尿病肾病是可采用的饮食治疗方案.

    作者:韩家强;王金萍;宋伟娜;陈喜云 刊期: 2008年第01期

  • 结核性胸膜炎并发重度水痘1例

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    作者:张伟平;郑伟;张红;李杨;刘钰;王淑琴 刊期: 2008年第01期

  • 斯达舒胶囊治疗胃溃疡27例疗效观察

    我所应用吉林修正药业生产的斯达舒胶囊治疗胃溃疡27例,取得满意疗效,现总结如下.

    作者:张曼清 刊期: 2008年第01期

  • 应用头孢哌酮钠后饮酒致双硫仑样反应误诊1例

    病人,男,43岁,因患慢性阑尾炎急性发作给予头孢哌酮钠2.0 g/d 和左氧氟沙星0.4 g/d,同时静滴治疗,共7 d.第4天输液完毕6 h 饮三鞭酒(约50 ml)15 min 后,突然出现面部和手足掌部潮红、灼热感,伴心悸、头晕等,20 min 后出现头痛、胸闷、恶心、四肢无力.

    作者:洪波;付晓 刊期: 2008年第01期

  • 食管中段癌胃黏膜下转移1例

    病人,男,62岁,维族.进行性吞咽困难40d .查体:一般情况良好,全身浅表淋巴结未触及,胸骨中下1/3叩击痛,心肺腹未见异常.

    作者:刘睿;汪胜来 刊期: 2008年第01期

  • 大肠癌噬菌体抗体库的构建及抗CEA抗体的筛选

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    作者:南清振;高蕾;张振书;杨希山;肖冰;姜泊 刊期: 2008年第01期

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主管:解放军沈阳军区联勤卫生部

主办:沈阳军区总医院 解放军210医院 沈阳军区大连疗养院