学术投稿

不同消化条件对小鼠胰岛分离纯化效果的影响

钟嘉明;张佳林;李晓航;张成钧;程颖;刘永锋

关键词:胰岛细胞, 分离, 纯化, 小鼠
摘要:目的探讨提高小鼠胰岛分离纯化后数量和质量的适宜消化条件。方法通过胆总管逆行灌注胶原酶P溶液进行小鼠胰腺消化,分离胰岛,采用不连续密度梯度Ficoll离心法纯化胰岛,观察胶原酶浓度和消化时间对胰岛分离结果的影响。结果胶原酶浓度和消化时间对小鼠胰岛分离效果有重要影响。在胶原酶P浓度为1.0mg/ml、37℃消化25min条件下,胰岛分离效果佳。结论胶原酶浓度和消化时间影响小鼠胰岛分离结果,优化消化条件可提高胰岛分离数量和质量。
中国医科大学学报杂志相关文献
  • 促红细胞生成素对离体幼兔缺血再灌注心肌中P13K-Akt信号通路的影响

    目的研究促红细胞生成素对幼免心肌缺血再灌注损伤的保护作用与P13K.AKT信号转导途径的关系。方法30只日本大耳白幼兔随机分为对照组与EPO预处理组,每组15只。提前24h,EPO预处理组经腹腔注射EPO(5000U/kg),对照组经腹腔注射同体积生理盐水。建立Langendroff幼兔离体心脏灌注模型,应用免疫组化法观察缺血再复灌120min心肌组织P13K、AKT及easpase9表达情况,TUNNEL法检测细胞凋亡。结果EPO组缺血再灌注后的心肌P13K及AKT表达较对照组明显增多;caspase9表达较对照组明显减少,两组差异存在统计学意义(P〈0.01);EPO组凋亡细胞较对照组明显较少,两组差异存在统计学意义(P〈0.01)。结论促红细胞生成素通过P13K—AKT信号转导途径的抗凋亡作用而减轻幼兔心肌缺血再灌注损伤。

    作者:王文生;马洪亮;高洋 刊期: 2010年第09期

  • 实时三维超声心动图预测心脏再同步化治疗长期疗效的临床研究

    目的探讨实时三维超声(RT3DE)评价左室收缩同步性,预测心脏再同步化治疗(CRT)长期疗效的价值。方法接受CRT治疗的心衰患者26例,在术前3 d及术后1年采用RT3DE检测左室16个心肌节段达收缩末小容积时间的差值(Tmsv16-Dif)和标准差(Tmsv 16-SD)作为同步性参数,同时测量左室收缩末容积(LVESV)和射血分数(LVEF)。将术后1年LVESV减小率ΔLVESV≥15%定义为CRT长期治疗有效。结果 17例(65.4%)患者为CRT长期治疗有效组(R组)。术前R组Tmsv16-Dif和Tmsv 16-SD长于无效组(NR组),其余参数无差异。术后与NR组比较,R组的LVESV减小,LVEF增大,Tmsv 16-Dif和Tmsv 16-SD缩短。Tmsv 16-SD是预测ΔLVESV≥15%的独立因素,Tmsv 16-SD〉3.5%预测CRT长期疗效的敏感性和特异性分别为80%和77%。结论 CRT长期疗效可改善左室收缩同步性和收缩功能。RT3DE能准确评价左室收缩同步性和收缩功能,预测CRT长期疗效。

    作者:任卫东;肖杨杰;马眷燕;刘爽;李秀云 刊期: 2010年第09期

  • 巨脑回畸形致癫痫持续状态1例报告

    巨脑回畸形属于神经元移行异常类疾病,临床上很少见,且仅见于儿童,现无有效的治疗方法。本文报道了1例广泛脑回受累的巨脑回畸形并发癫痫持续状态的青春期患者,极为罕见。

    作者:李铁刚;王娜娜;赵敏 刊期: 2010年第09期

  • 雪旺细胞促进大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的效应研究

    目的建立一个较好的诱导骨髓间充质干细胞(MSC)分化为神经元样细胞的新方法。方法应用Brdu脉冲标记MSC,使其与雪旺细胞共培养,令大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞。观察细胞形态学变化,并在分化后的MSC细胞中,应用免疫细胞化学检测NSE、Brdu的表达,蛋白印迹技术检测NeuN的表达。分析诱导分化后MSC的分化率。结果与雪旺细胞共同培养的MSC表达NSE和NeuN,其分化为神经元样细胞的分化率为(80.51±5.65)%。结论 MSC与雪旺细胞共培养可以分化MSC为神经元样细胞。

    作者:智晓东;吕刚 刊期: 2010年第09期

  • 儿童烟雾病合并皮质盲1例

    烟雾病属于脑血管病,是发生皮质盲的原因。烟雾病合并皮质盲临床少见,早期诊断和早期治疗可明显改善预后疗效,提高患者生活质量。

    作者:刘希娟;周晓薇 刊期: 2010年第09期

  • 阿魏酸钠对慢性肾功能不全患者造影剂肾脏损伤的预防作用及机制

    目的观察阿魏酸钠(SF)对慢性肾功能不全患者造影剂肾损伤有无预防作用并初步探讨其机制。方法将86例慢性肾功能不全患者[血清肌酐(Scr)范围132358μmol/L]分为对照组及阿魏酸钠治疗组(简称治疗组)。在充分水化的基础上,分别于造影前3 h及造影后3 d每天给予生理盐水100 ml或SF 0.3 g溶于等量生理盐水静脉滴注,观察造影前及造影后第3天两组Scr、血浆脂质过氧化物丙二醛(MDA)及24 h尿液一氧化氮(NO)含量。结果对照组造影剂肾病(CIN)发生率明显高于治疗组;对照组Scr明显上升,同时伴有血浆MDA水平升高,尿NO降低;治疗组造影后Scr及血浆MDA水平低于对照组(P〈0.05),尿NO排出高于对照组(P〈0.05)。结论阿魏酸钠缓解造影剂诱发的肾损伤可能与其抑制内皮素,增加肾合成NO和抗氧化有关。

    作者:孙广萍;于锐;李德天 刊期: 2010年第09期

  • 冠状动脉旁路移植术后急性肾功能不全行CVVHDF患者的护理特点

    对12例冠状动脉旁路移植术后肾功能不全行连续性静脉-静脉血液透析滤过患者的术后心电监护、肾功能监测及感染的预防等方面进行总结。

    作者:杨蕊;赫鑫;董晓娜 刊期: 2010年第09期

  • 新生大鼠心房肌细胞的培养与鉴定

    目的探讨新生SD大鼠心房肌细胞分离培养的条件和方法。方法采用低浓度的胰酶和Ⅱ型胶原酶联合消化,并采取2次差速贴壁法纯化心房肌细胞。免疫荧光法检测心房肌细胞的纯度,并在显微镜下观察细胞搏动。结果72h后体外培养的新生鼠心房肌细胞生长密度可达瓶底70%,并出现细胞簇的同步搏动,免疫荧光法检测心肌细胞的纯度达90%。结论酶消化法培养的大鼠心房肌细胞纯度和活力均高,为进一步研究心动过缓奠定了基础。

    作者:府晓丹;于波;李阳;孟亮;姜振环;杨滢 刊期: 2010年第09期

  • 血管紧张素Ⅱ受体抑制剂对雌激素诱导的Ishikawa细胞的增殖及凋亡的影响

    目的探讨沙拉新(saralasin)对雌激素诱导的ishikawa细胞的增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法以不同浓度的药物和时间处理体外培养的ishikawa细胞,采用四甲基亚唑蓝(MTT)法检测ishikawa细胞的生长抑制情况、流式细胞仪碘化丙锭(PI)染色分析细胞周期分布,流式细胞仪及AnnexinⅤ-TITC试剂盒检测saralasin对ishikawa细胞凋亡的影响。结果 saralasin可明显抑制雌激素诱导的ishikawa细胞增殖,使细胞周期停滞在G1/G0期,S期相对减少,凋亡增多。结论 saralasin可以抑制雌激素诱导ishikawa细胞的增殖作用,可能有助于子宫内膜癌的治疗。

    作者:苏卿;杨清 刊期: 2010年第09期

  • 不同内固定物对拇外翻矫形效果的分析

    探讨不同术式及内固定物对不同症状的拇外翻患者矫形效果。

    作者:黄涛;冯殿鹏;杨茂伟 刊期: 2010年第09期

  • 硅胶管包裹大鼠颈动脉对血管收缩功能的影响

    目的观察硅胶管包裹所致的血管外膜损伤对大鼠颈动脉收缩功能的影响。方法用硅胶管经血管外膜包裹大鼠颈动脉,分别于术后3d、1周、2周测量大鼠双侧颈动脉血流量,观察血管对局部应用5一羟色胺(5-HT)的反应,光镜下观察血管形态学变化。结果与对照侧比较,硅胶管包裹大鼠颈动脉的早期阶段,包管侧颈动脉呈血管慢性收缩的组织学改变,表现为血管腔缩小[包管3d缩小(12.15±2.29)%(P=0.003);包管1周缩小(45.17±3.84)%(P〈0.001)]。内弹力板弯曲、中膜增厚[包管3d增厚(23.04+5.96)%(P=0.009);包管1周增厚(61.65±10.32)%(P〈0.001)],伴颈动脉血流量降低及血管对5-HT的收缩反应增强。硅胶管包裹2周,包管侧颈动脉管壁重塑,表现为中膜增厚[增厚(31.52±4.56)%(P=0.012)]及弥漫性血管内膜增生[新生内膜面积平均(0.19±0.05)mm^2],伴血管腔面积缩小[减少(37.17±4.57)%(P〈0.001)]及颈动脉血流量降低,血管对5-HT的收缩反应恢复至对照侧水平。结论血管外膜损伤能引起血管收缩功能增强及新生内膜形成,血管收缩功能的改变出现在内膜增生性病变之前。

    作者:谢莲娜;曾定尹;张海山;孙丹萌;庞雪峰;关启刚 刊期: 2010年第09期

  • POEMS综合征5例临床分析

    POEMS综合征临床症状复杂,容易误诊。本文总结5例POEMS综合征患者的临床表现,实验室检查资料及治疗经过等,进行回顾性分析,旨在提高对该病的认识。

    作者:张鸣鸣;张伯恒;姜敏 刊期: 2010年第09期

  • 辽宁地区斑秃患者与HLA-A、HLA—B等位基因相关性研究

    目的探讨HLA-A、HLA-B等位基因与斑秃的相关性。方法采用LABTypeTM SSO技术检测44例斑秃患者和200例正常对照的HLA-A、HLA-B等位基因频率。结果 HLA-A*11(χ2=6.08,P〈0.05)、HLA-B*13(χ2=29.80,P〈0.01)、HLA-B*40(χ2=8.04,P〈0.01)、HLA-B*46(χ2=5.86,P〈0.05)和HLA-B*51(χ2=8.82,P〈0.01)的等位基因频率显著增高。结论 HLA-A*11、HLA-B*13、HLA-B*40、HLA-B*46和HLA-B*51可能是斑秃的易感基因。

    作者:姜海燕;翟宁;李剑平;陈阳;秦玉孝;张悦;程岩峰;杨帆;韩秀萍 刊期: 2010年第09期

  • 幽门螺杆菌感染胃癌组织中环氧合酶2的表达及其对胃癌侵袭和转移能力的影响

    目的分析环氧合酶2(COX-2)对幽门螺杆菌(H.pylori)感染的胃癌侵袭、转移能力的影响。方法采用改良的Giemsa法检测60例胃癌标本中H.pylori的感染情况,免疫组化法检测胃癌标本中COX-2的表达情况。分析H.pylori感染和胃癌临床病理特征的相关性。结果胃癌组织中H.pylori感染率为60.0%(36/60)。H.pylori感染与胃癌病理分期及淋巴结转移相关(χ2=28.040,P=0.000;χ2=25.482,P=0.000),而与患者年龄、性别及组织分化程度不相关。H.pylori感染与COX-2表达有相关性(χ2=24.326,P〈0.01)。结论 H.pylori感染能增加胃癌的侵袭、转移能力,其机制可能与COX-2的表达增加有关。

    作者:曹东旭;迟晶 刊期: 2010年第09期

  • T3期胃下部癌D2术式选择性自主神经保留可行性探讨

    回顾性分析邢台市人民医院肿瘤外科2007年6月至2009年9月间行胃中下部癌根治术(D2术式)的临床病例资料,探讨T3期胃中下部癌胃周及非胃周淋巴结转移规律及与自主神经保留术的关系。结果显示,T3期胃下部癌总淋巴结转移率为81.25%,胃周淋巴结转移率为78.50%,非胃周淋巴结转移率34.30%;1、2型淋巴结内转移灶绝大多数未浸及淋巴结被膜。因此认为对于T3期胃下部癌,1、2型淋巴结行常规清扫可达到根治性切除,是保留自主神经手术的适应证。

    作者:翟同善 刊期: 2010年第09期

  • 70岁以上食管贲门癌患者围手术期的心肺监护

    回顾分析82例70岁以上食管贲门癌患者的术后恢复效果,探讨患者围手术期的心肺监护。积极治疗术前心肺合并症,评估心肺风险,加强术后管理,包括心肺监护、呼吸道管理、控制输液速度及合理有效的止痛,是预防70岁以上食管贲门癌患者围手术期发生心肺并发症的重要护理措施。

    作者:王淑霞 刊期: 2010年第09期

  • 腺病毒载体,有潜力的心血管疾病治疗载体?

    心血管疾病在当今社会仍有很高的死亡率,基因治疗的可行性在不断探索。腺病毒载体可高效实现心血管内基因转移,但其组织特异性和免疫原性限制了其应用。近年来腺病毒载体不断发展,涌现的第三代腺病毒载体成为极有潜力的理想基因治疗转导载体。,本文综述腺病毒载体的性质、优点及发展过程,在心血管疾病中的具体应用,总结目前应用中的障碍和改进策略。

    作者:郝嘉;游凯;肖颖彬 刊期: 2010年第09期

  • 不同消化条件对小鼠胰岛分离纯化效果的影响

    目的探讨提高小鼠胰岛分离纯化后数量和质量的适宜消化条件。方法通过胆总管逆行灌注胶原酶P溶液进行小鼠胰腺消化,分离胰岛,采用不连续密度梯度Ficoll离心法纯化胰岛,观察胶原酶浓度和消化时间对胰岛分离结果的影响。结果胶原酶浓度和消化时间对小鼠胰岛分离效果有重要影响。在胶原酶P浓度为1.0mg/ml、37℃消化25min条件下,胰岛分离效果佳。结论胶原酶浓度和消化时间影响小鼠胰岛分离结果,优化消化条件可提高胰岛分离数量和质量。

    作者:钟嘉明;张佳林;李晓航;张成钧;程颖;刘永锋 刊期: 2010年第09期

  • IGF-1在人非小细胞肺癌细胞增殖中的作用

    目的探讨胰岛素样生长因子1(IGF-1)对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖的影响及可能的分子机制。方法 MTT比色法检测0.1,1,10,100 ng/ml IGF-1对非小细胞肺癌系腺癌A549、鳞癌LK2、大细胞肺癌H460细胞增殖的影响,流式细胞术(FCM)、Western blot分析IGF-1处理前后各肺癌细胞的细胞周期变化,S期激酶相关蛋白2(SKP2)和CDC20同源蛋白1(CDH1)的表达变化。结果在非小细胞肺癌系A549、LK2、H460中,不同浓度的IGF-1均显示有促进细胞增殖的作用(P〈0.05),其中1 ng/ml IGF-1作用后细胞增殖率达到峰值;与DMSO组相比,处理组S期细胞增加(P〈0.01),SKP2蛋白表达增加(P〈0.05),但CDH1蛋白表达却无明显变化(P〉0.05)。结论非小细胞肺癌细胞中IGF-1可能是通过SKP2蛋白表达的增强,负性调控p27作用,加速细胞周期的进程。

    作者:孙秀华;胡海洋;张洪开;解智慧;于爱鸣 刊期: 2010年第09期

  • 辛伐他汀对肺纤维化大鼠肺内结缔组织生长因子表达的影响

    目的观察辛伐他汀对博来霉素引起的肺纤维化大鼠肺内结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法大鼠气管内一次性滴注博来霉素复制肺纤维化模型,以等容积生理盐水滴注作为对照。分别在气管内滴注博来霉素当天和7d后给大鼠辛伐他汀(20mg/kg)灌胃处理,以等容积的生理盐水灌胃作为对照。分别于7d、14d、28d处死动物,采用HE染色、Masson染色的方法观察肺组织病理变化,通过测定肺组织羟脯氨酸含量观察肺纤维化严重程度,免疫组化和光密度分析观察肺组织CTGF的表达。结果气管内滴注博来霉素后,大鼠肺组织逐渐出现纤维化的病理改变,肺组织CTGF表达明显高于对照组;无论是博来霉素气管内滴注后即刻开始辛伐他汀治疗还是7d后延迟治疗,在模型建立28d后,辛伐他汀的治疗均有效地改善了大鼠肺纤维化的严重程度,而且CTGF在肺组织的表达与对照组相比明显减弱。结论无论是辛伐他汀的即刻治疗,还是7d后延迟治疗,均能有效抑制博来霉素诱导的肺纤维化大鼠肺组织CTGF的高表达,辛伐他汀抑制肺纤维化的作用可能是通过下调CTGF的表达实现的。

    作者:冯彦华;肖莉;万宏光;杜妍;何颖 刊期: 2010年第09期

中国医科大学学报杂志

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