学术投稿

斯氏按蚊PPO1基因克隆及其与约氏疟原虫卵囊黑化关系的研究

杨松;黄复生;段建华

关键词:按蚊, 斯氏, 疟原虫, 约氏, 前酚氧化酶, 黑化, RT-PCR, 原位核酸分子杂交
摘要:目的克隆和分析斯氏按蚊前酚氧化酶基因与约氏疟原虫卵囊黑化关系. 方法 根据其他昆虫前酚氧化酶基因的保守氨基酸序列设计简并引物,以斯氏按蚊全蚊RNA为模板,进行RT-PCR扩增,PCR产物纯化,克隆入pUCm-T载体,测定插入片段序列,对序列进行BLAST检索和鉴定.根据序列设计相应基因的特异引物,然后分别从血淋巴细胞或中肠扩增目的基因,并进行不同食源条件下前酚氧化酶基因的半定量、原位核酸分子杂交定位及与约氏疟原虫卵囊黑化关系的分析. 结果 获得了1种斯氏按蚊血淋巴前酚氧化酶基因cDNA部分序列,即AsPPO1(600 bp),分别与冈比亚按蚊PPO1和大劣按蚊PPO2基因很相似,其编码的氨基酸序列均包含PO保守的铜结合位点CuA(HHWHWHLVYP)序列.在中肠和血淋巴内也获得相同的目的基因片段,半定量分析显示约氏疟原虫感染或诱导卵囊黑化呈现之前的表达明显增强,原位核酸分子杂交技术也进一步证实血淋巴有AsPPO1 mRNA表达. 结论 AsPPO1很可能与疟原虫感染或约氏疟原虫卵囊黑化相关.
中国病原生物学杂志相关文献
  • 云南省主要感染季节不同阶段人群血吸虫感染情况观察

    目的了解云南省血吸虫病重疫区主要感染季节的不同阶段居民血吸虫感染、再感染情况,为制定更具针对性的防治措施提供依据. 方法根据农事活动和季节变化将主要感染季节分为前期、中期和后期3个阶段.选择高原峡谷型血吸虫病流行区洱源县的4个自然村作为观察点,将6~60岁居民随机分为Ⅰ、Ⅱ两组,Ⅰ组人群观察主要感染季节前期和后期血吸虫感染、再感染情况;Ⅱ组人群观察主要感染季节中期血吸虫感染、再感染情况.在各阶段开始前10 d用吡喹酮治疗,观察期结束后30 d查病.同时选择30名学生作为记录员,记录各自家庭成员每天接触疫水的时间. 结果在主要感染季节前期、中期和后期居民血吸虫感染率分别为32.17%、12.42%、7.10%,平均每人每天接触疫水时间分别为(82±26) min、(30±14) min和(14±6) min. 结论云南省重疫区主要感染季节的前期(栽插期)血吸虫感染率高,主要与感染性钉螺密度高和居民接触疫水时间长有关.

    作者:杨慧;李远林;戴文新;张剑平;李芹翠;赵义娟;段玉春;刘榆华 刊期: 2005年第05期

  • 博兴县残疾小学生弓形虫感染情况调查

    为了解残疾儿童弓形虫感染情况,对本县弱智、聋哑儿童以及城乡部分正常儿童进行了调查.1 对象与方法1.1 对象调查对象为博兴县弱智学校、聋哑学校学生,以相同年龄的城乡小学生为对照.每人抽静脉血2 ml,分离血清后置-20 ℃冰箱保存.

    作者:李国强;杜天月;王兆芹 刊期: 2005年第05期

  • 青海省东部地区猪带绦虫病和囊虫病流行现状调查

    目的了解和掌握青海省东部地区猪带绦虫病和囊虫病的流行现状. 方法应用改良加藤厚涂片法镜检带绦虫卵,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中囊虫病抗体. 结果共粪检5 943人,查出猪带绦虫感染者5例,感染率为0.08%;血清检测1 162人份,囊虫感染者19例,感染率为1.64%. 结论青海省东部地区猪带绦虫病和囊虫病仍有一定程度的流行,各地仍需高度重视,积极普及健康教育,大力加强该病的预防控制工作.

    作者:吴献洪;何多龙;刘巴睿;张静宵;刘培运;刘海青;马霄;蔡辉霞;赵延梅;曾诚;刘玉芳;胡兰省;王虎 刊期: 2005年第05期

  • 关于寄生虫学教学改革的一些认识

    寄生虫病仍是目前严重威胁人类健康的疾病之一.人体寄生虫学是医学院校的一门必修课程.近年来, 由于学科结构的调整,一些院校将人体寄生虫学由考试课改为考查课,加之大多数院校仍沿用过去以寄生虫生物学为重点的传统教学模式,使该学科的教与学都有些不如人意,这既不利于高素质应用型医学人才的培养,也不利于学科的发展.改变传统的教学模式,代之以讲清主题概念,突出应用为教学宗旨,注重教与学的互动,注重专业知识、临床应用和辐射社会等几方面的紧密结合,已是当务之急的教改内容.作者在近几年的教学中结合本校的情况做了一些尝试,现就此谈谈一些体会,以供参考.

    作者:王敏;王光西;詹伯林 刊期: 2005年第05期

  • 苏州地区集贸市场淡水鱼虾华支睾吸虫囊蚴感染情况调查

    淡水鱼虾类是华支睾吸虫的第二中间宿主,人食入含华支睾吸虫活囊蚴的淡水鱼虾后可被感染,引起华支睾吸虫病[1].苏州地区鱼类资源极其丰富,拥有鱼类107种(不包括引进鱼种),其中大多是淡水鱼类,在分类学上属鲤科的就有54种.为了解苏州地区集贸市场淡水鱼虾华支睾吸虫囊蚴感染情况,作者等于2004年9~12月,对苏州市彩香、南环两大集贸市场销售的淡水鱼虾进行了调查.

    作者:袁红霞;高姗;何一平;王鹏;苏志红 刊期: 2005年第05期

  • 伊维菌素治疗人体寄生虫病的研究进展

    阿维菌素(Avermectins)是广谱高效抗寄生虫药,是由链霉菌发酵产生的一组大环内酯类物质,含有8种组分,其中以B1a活性强.伊维菌素是阿维菌素选择性加氢衍生物,含80%以上的B1a和低于20%的B1b,比阿维菌素更稳定、更安全,且对某些寄生虫的杀虫效果更好[1~3].现就伊维菌素在治疗人类寄生虫病中的研究进展作一概述.

    作者:刘启真;陈瑞杰;郑晓云;潘长旺 刊期: 2005年第05期

  • 东阿县小学生肠道寄生虫感染情况调查

    2002年10月,作者等对东阿县第一实验小学和陈集中心小学在校学生进行了肠道寄生虫感染情况调查,结果报告如下.

    作者:孙玉山;王新水 刊期: 2005年第05期

  • 云南省恶性疟原虫对氯喹抗性的变化

    目的了解云南恶性疟原虫对氯喹抗性的变化. 方法从1981年起,在滇西、滇南、滇东南监测点选择符合条件的恶性疟病人,取静脉血,采用WHO推荐的体外微量法测定恶性疟原虫对氯喹的敏感性,并将相隔8~10年的测定结果进行比较. 结果滇西恶性疟原虫对氯喹抗性率从1982年的100%下降到2003年的83.3%,ID50 从240.0 nmol/L降到123.0 nmol/L,MIC从1 171.6 nmol/L降至325.9 nmol/L,分别下降13.0%、48.8%和72.2%.滇南恶性疟原虫对氯喹抗性率从1981年的97.4%降到2004年的69.0%,ID50从170.0 nmol/L降至58.6 nmol/L,MIC从1 108.0 nmol/L降至312.6 nmol/L,分别下降29.1%、65.5%和71.8%;滇东南抗性率从1993年的78.9%下降至2003年的53.3%,ID50从136.0 nmol/L降至75.5 nmol/L,MIC从452.0 nmol/L 降至238.3 nmol/L,分别下降32.4%、44.5%和47.3%. 结论云南恶性疟原虫对氯喹仍具有抗性,但抗性程度明显下降;中越边境恶性疟的抗性程度低于中老、中缅边境地区.目前仍不宜用氯喹治疗当地恶性疟.

    作者:杨恒林;杨品芳;李兴亮;高白荷;张志勇;杨亚明 刊期: 2005年第05期

  • 不同理化因素对人芽囊原虫体外存活的影响

    目的观察不同理化因素对人芽囊原虫体外生存和发育的影响. 方法将人芽囊原虫感染者新鲜粪便定量分成若干份,分装于有盖小平皿中,设自然因素及常用消毒剂试验组,用直接涂片法镜检,以原虫数量和细胞活度为指标,观察自然因素(温度、湿度、紫外线、渗透压)和化学消毒剂(HCl、酒精、碘酒、新洁而灭)组人芽囊原虫的生长发育情况,记录实验结果并照像. 结果低温、高温、干燥及消毒剂均可致人芽囊原虫数量减少,细胞活度降低,而紫外线照射和低渗对原虫数量和细胞活度无明显影响. 结论低温、高温、干燥和常用消毒剂对体外人芽囊原虫有抑制或杀灭作用.

    作者:田春林;刘登宇;卢作超 刊期: 2005年第05期

  • 广西人体华支睾吸虫感染现状调查分析

    目的了解广西人群华支睾吸虫病流行现状和态势. 方法按流行程度和水系流域进行分层整群随机抽样.用改良加藤厚涂片法粪检虫卵并计数. 结果调查了9个县(市)27个点13 990人,华支睾吸虫平均感染率为9.76%,平均EPG为1 083,有6个县(市)查出感染者,其中3个县感染率超过20%.男性平均感染率和EPG分别为13.09%和1 320;女性分别为5.89%和658,差异均有显著性.各年龄组人群均有感染,以成人感染为重.蒙古族居民感染率高,为16.67%;汉族感染率为11.56%,高于壮族的8.17%;壮族感染者EPG高,为1 470.职业分布以医生、教师、农民和行政干部感染为重. 结论 1989年以来广西华支睾吸虫感染率显著上升,疫情快速蔓延,已经成为一个严重的公共卫生问题,应积极开展综合性防治工作.

    作者:张鸿满;黎学铭;蓝春庚;谭裕光;李树林;林睿;阮廷清;黄福明 刊期: 2005年第05期

  • 脑室与蛛网膜下腔囊虫感染1例报告

    患者,男57岁,已婚,农民,东北人,1991年到江汉油田从事个体猪肉销售工作.1988年10月起每年有2~3次癫痫病发作,每次发作15~30 min后能自愈,未治疗.

    作者:山守章 刊期: 2005年第05期

  • 在校大学生蠕形螨感染情况调查

    人体蠕形螨是永久性寄生螨,感染后以无症状带虫者居多,严重时可致面部皮肤痒感、毛囊炎、皮损和酒渣鼻.人体感染情况已有较多报道,但报道的感染率、感染度和面部分布情况差距较大[1~3],给临床诊断和流行病学统计分析带来困难.分析原因,主要与调查者采用的检查方法、取样部位、取样面积等不统一有关.为提高蠕形螨的诊断率,增强数据的可比性,为今后的流行病学调查和规范诊断方法提供准确可行的资料,作者在总结多年蠕形螨检查经验的基础上,对采样方法进行了优化,并用于在校学生蠕形螨感染调查.

    作者:王少海;施爱群;庞红;徐露 刊期: 2005年第05期

  • 青蒿琥酯治疗小鼠继发性棘球蚴病的效果观察

    目的评价中药青蒿琥酯(Art)和阿苯达唑(Alb)及两药联用治疗小鼠继发性棘球蚴病的疗效. 方法将人工感染细粒棘球蚴囊液及包囊组织的小鼠随机分为5组,治疗组分别给予青蒿琥酯(Art)25 mg/kg·d、50 mg/kg·d、阿苯达唑(Alb)50 mg/kg·d、Art 25 mg/kg·d+Alb 25 mg/kg·d,连续治疗90 d.模型对照组不作治疗.另设空白对照组.治疗效果以棘球蚴湿重、囊重抑制率、脾脏指数、组织病理变化及超微结构改变为评价指标. 结果各用药组小鼠包囊生长明显被抑制,抑制率分别为52.96%,64.34%,65.31%,77.08%,联合用药组效果优于单独用药组.与模型对照组比较,各治疗组小鼠脾脏指数、血清IL-4及IgE水平均降低(P均<0.05). 结论青蒿琥酯对小鼠棘球蚴的生长及由此引起的超敏反应有一定的抑制作用,联合阿苯达唑治疗效果更好.

    作者:蒲秀英;傅宣英;王琪;景涛 刊期: 2005年第05期

  • 仪征市江滩综合治理控制血吸虫病流行的效果观察

    仪征市地处长江北岸,沿江6个乡(镇)为血吸虫病流行区,历史有螺面积1 680.39万m2,流行区总人口11.80万余人,历史查出血吸虫病患者21 209人.经过多年的积极防治,于1974年基本消灭血吸虫病.但1980年后,由于长江大水,灭螺工程大都被冲毁,江滩有螺面积不断增加,至1993年已达170多万m2,急性感染时有发生,血吸虫病疫情回升[1],如继续采取以灭螺为主的防治对策,将会直接影响长江的蓄洪、防洪和生态平衡[2].因此,为了寻找适合现阶段江滩地区防治血吸虫病的对策和措施,控制血吸虫病的流行,从1993年起,按分类指导原则,因地制宜,先后对4个有螺江滩实施了综合治理并取得了良好的经济和社会效益.现报告如下.

    作者:田斌;张正球;陈前;李定新;唐明亮 刊期: 2005年第05期

  • 弓形虫SAG1可溶性融合蛋白在大肠埃希菌中的表达及纯化

    目的在大肠埃希菌中高效表达及纯化弓形虫SAG1抗原,为研制新型弓形虫病基因工程诊断试剂盒奠定基础. 方法将重组pGEX-SAG1表达载体转化大肠埃希菌BL21-Codon Plus(DE3)-RP菌株,在异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导下表达融合蛋白,并通过SDS-PAGE凝胶电泳分析表达产物的表达形式.通过降低培养温度和升高LB培养基的pH,诱导融合蛋白在上清中表达,表达产物以硫酸铵沉淀、GST亲和层析和Sephadex G-150凝胶过滤层析进行纯化.Western blot检测纯化融合蛋白的免疫反应性. 结果 37 ℃条件下,SAG1以融合蛋白(SAG1-GST)的形式在大肠埃希菌中高效表达,表达蛋白以包涵体形式存在.在27 ℃和升高LB培养基pH条件下,融合蛋白在上清中得到表达,经纯化后其SAG1可溶性蛋白纯度可达90%以上.Western blot分析纯化蛋白能被弓形虫感染者血清所识别.结论 SAG1可溶性蛋白在大肠埃希菌中得到了表达,经纯化后能被弓形虫感染者血清所识别,可用于制备弓形虫感染诊断试剂盒.

    作者:朱翔;龚唯;张惠琴;陆惠民;黃伟达 刊期: 2005年第05期

  • 呼吸道支原体感染患者痰液中检出鞭毛虫和纤毛虫7例报告

    支原体引起的肺炎及肺外感染近几年来报道较多,在临床上日益受到关注,而呼吸道支原体感染患者的痰液中查到鞭毛虫、纤毛虫尚未见有报道.现将我院近年来发现的7例报告如下.

    作者:黎伟雄;黎洁贞 刊期: 2005年第05期

  • 亚精胺对日本血吸虫成虫培养细胞SDH的影响

    目的以琥珀酸脱氢酶(SDH)为指标,探讨亚精胺(Spermidine,Spd)对日本血吸虫成虫培养细胞生长代谢的影响. 方法将24 d龄的日本血吸虫成虫用冷消化法制成细胞悬液,联合法将细胞接种于小盖玻片上培养.培养至第4 d,一部分细胞用含Spd终浓度分别为0(对照)、25、50、75、80、90、100、150、200 μmol/L的无血清培养基处理24 h,另一部分细胞用终浓度为75 μmol/L的Spd分别处理0(对照)、12、24、36、48、60、72 h.然后用PBS清洗3次,再换用常规培养基继续培养.至第8 d,对处理过的培养细胞进行SDH细胞化学染色,Olympus-BH2显微镜下观察、拍照,并将结果输入HPIAS-2000图像分析仪进行图像分析. 结果用Spd作用24 h,日本血吸虫培养细胞的SDH活性随Spd浓度的升高逐渐增强,75 μmol/L时达到高,>75 μmol/L,SDH活性逐渐减弱.当Spd作用浓度为75 μmol/L时,日本血吸虫培养细胞的SDH活性随着Spd作用时间的延长逐渐增强,48 h时达到高,然后逐渐减弱.统计学分析显示,Spd处理后的实验组培养细胞,其SDH活性与对照组细胞比较差异具有显著性(P<0.05);用终浓度为75 μmol/L的Spd处理培养细胞48 h,培养细胞的SDH活性显著强于其余各组(P<0.01). 结论 Spd可显著增强日本血吸虫培养细胞的生长代谢活性;用终浓度为75 μmol/L的Spd处理48 h,培养细胞的SDH活性强.

    作者:易同寅;董惠芬;蒋明森;明珍平;钟沁萍 刊期: 2005年第05期

  • 钩虫丝状蚴溃疡1例报告

    患者,男,36岁,未婚,农民.因醉酒后摔伤头部于2005年8月5日入本院治疗,住院号:134238.CT头颅检查:右枕叶硬脑膜外小血肿,左枕部头皮血肿.

    作者:蒋俊芳 刊期: 2005年第05期

  • 信阳市肠道线虫感染现状与分析

    1989~1990年全国首次人体寄生虫分布调查结果显示,信阳市人体肠道寄生虫感染情况较为严重,以罗山、淮滨两县为例,蛔虫、钩虫和鞭虫感染率分别为42.6%、26.5%、29.9%和35.4%、29.4%、27.7%[1].之后相继在学校和农村开展了肠道寄生虫病防治.为了解信阳市人体寄生虫病流行现状和态势,评估防治效果,按照河南省人体重要寄生虫病现状调查方案的统一安排,于2002 年10 月开展了人体寄生虫感染情况调查.现将肠道线虫感染现状分析如下.

    作者:沈大勇;杨金;杨改英;邓艳 刊期: 2005年第05期

  • 恙虫病4例治疗与护理体会

    2003年江汉油田首次发现有恙虫病流行,本院收治4例,现报告如下.1 临床资料1.1 一般资料 4例患者中男2例,女2例,年龄18~60岁,均有下乡钓鱼史.2004年10月发病1例,11月发病3例.

    作者:陈建春 刊期: 2005年第05期

中国病原生物学杂志

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主管:中国寄生虫病防治杂志

主办:中华人民共和国卫生部