学术投稿

亚精胺对日本血吸虫成虫培养细胞SDH的影响

易同寅;董惠芬;蒋明森;明珍平;钟沁萍

关键词:血吸虫, 日本, 培养细胞, 亚精胺, 琥珀酸脱氢酶(SDH)
摘要:目的以琥珀酸脱氢酶(SDH)为指标,探讨亚精胺(Spermidine,Spd)对日本血吸虫成虫培养细胞生长代谢的影响. 方法将24 d龄的日本血吸虫成虫用冷消化法制成细胞悬液,联合法将细胞接种于小盖玻片上培养.培养至第4 d,一部分细胞用含Spd终浓度分别为0(对照)、25、50、75、80、90、100、150、200 μmol/L的无血清培养基处理24 h,另一部分细胞用终浓度为75 μmol/L的Spd分别处理0(对照)、12、24、36、48、60、72 h.然后用PBS清洗3次,再换用常规培养基继续培养.至第8 d,对处理过的培养细胞进行SDH细胞化学染色,Olympus-BH2显微镜下观察、拍照,并将结果输入HPIAS-2000图像分析仪进行图像分析. 结果用Spd作用24 h,日本血吸虫培养细胞的SDH活性随Spd浓度的升高逐渐增强,75 μmol/L时达到高,>75 μmol/L,SDH活性逐渐减弱.当Spd作用浓度为75 μmol/L时,日本血吸虫培养细胞的SDH活性随着Spd作用时间的延长逐渐增强,48 h时达到高,然后逐渐减弱.统计学分析显示,Spd处理后的实验组培养细胞,其SDH活性与对照组细胞比较差异具有显著性(P<0.05);用终浓度为75 μmol/L的Spd处理培养细胞48 h,培养细胞的SDH活性显著强于其余各组(P<0.01). 结论 Spd可显著增强日本血吸虫培养细胞的生长代谢活性;用终浓度为75 μmol/L的Spd处理48 h,培养细胞的SDH活性强.
中国病原生物学杂志相关文献
  • 储藏干果中腐食酪螨孳生情况调查

    目的调查储藏干果中腐食酪螨孳生和季节消长情况,为保护储藏干果品质和预防人体螨病提供科学依据.方法采用光照集螨法和水膜镜检法分离30种共300份储藏干果样本以及定点收集的花生仁60份,XTB-C型体视显微镜下鉴定螨种.建立观察点,观察农村家居储藏干果中的腐食酪螨季节消长情况. 结果 22种、169份样本有腐食酪螨孳生,孳生率为56.3%(169/300);农村家居中储藏的干果腐食酪螨孳生率高于城市家居(χ2=9.88, P<0.05),但与超市仓库储藏干果腐食酪螨孳生率比较差异无显著性(χ2=2.2, P>0.05).腐食酪螨孳生密度从2月份开始增高, 7月份达到高峰,之后逐渐下降. 结论储藏干果腐食酪螨污染严重,应加强储藏干果的保护及有关职业人群人体螨病的预防.

    作者:李朝品;王慧勇;贺骥;江佳佳 刊期: 2005年第05期

  • 脑室与蛛网膜下腔囊虫感染1例报告

    患者,男57岁,已婚,农民,东北人,1991年到江汉油田从事个体猪肉销售工作.1988年10月起每年有2~3次癫痫病发作,每次发作15~30 min后能自愈,未治疗.

    作者:山守章 刊期: 2005年第05期

  • 博兴县残疾小学生弓形虫感染情况调查

    为了解残疾儿童弓形虫感染情况,对本县弱智、聋哑儿童以及城乡部分正常儿童进行了调查.1 对象与方法1.1 对象调查对象为博兴县弱智学校、聋哑学校学生,以相同年龄的城乡小学生为对照.每人抽静脉血2 ml,分离血清后置-20 ℃冰箱保存.

    作者:李国强;杜天月;王兆芹 刊期: 2005年第05期

  • 恙虫病4例治疗与护理体会

    2003年江汉油田首次发现有恙虫病流行,本院收治4例,现报告如下.1 临床资料1.1 一般资料 4例患者中男2例,女2例,年龄18~60岁,均有下乡钓鱼史.2004年10月发病1例,11月发病3例.

    作者:陈建春 刊期: 2005年第05期

  • 亚精胺对日本血吸虫成虫培养细胞SDH的影响

    目的以琥珀酸脱氢酶(SDH)为指标,探讨亚精胺(Spermidine,Spd)对日本血吸虫成虫培养细胞生长代谢的影响. 方法将24 d龄的日本血吸虫成虫用冷消化法制成细胞悬液,联合法将细胞接种于小盖玻片上培养.培养至第4 d,一部分细胞用含Spd终浓度分别为0(对照)、25、50、75、80、90、100、150、200 μmol/L的无血清培养基处理24 h,另一部分细胞用终浓度为75 μmol/L的Spd分别处理0(对照)、12、24、36、48、60、72 h.然后用PBS清洗3次,再换用常规培养基继续培养.至第8 d,对处理过的培养细胞进行SDH细胞化学染色,Olympus-BH2显微镜下观察、拍照,并将结果输入HPIAS-2000图像分析仪进行图像分析. 结果用Spd作用24 h,日本血吸虫培养细胞的SDH活性随Spd浓度的升高逐渐增强,75 μmol/L时达到高,>75 μmol/L,SDH活性逐渐减弱.当Spd作用浓度为75 μmol/L时,日本血吸虫培养细胞的SDH活性随着Spd作用时间的延长逐渐增强,48 h时达到高,然后逐渐减弱.统计学分析显示,Spd处理后的实验组培养细胞,其SDH活性与对照组细胞比较差异具有显著性(P<0.05);用终浓度为75 μmol/L的Spd处理培养细胞48 h,培养细胞的SDH活性显著强于其余各组(P<0.01). 结论 Spd可显著增强日本血吸虫培养细胞的生长代谢活性;用终浓度为75 μmol/L的Spd处理48 h,培养细胞的SDH活性强.

    作者:易同寅;董惠芬;蒋明森;明珍平;钟沁萍 刊期: 2005年第05期

  • 信阳市肠道线虫感染现状与分析

    1989~1990年全国首次人体寄生虫分布调查结果显示,信阳市人体肠道寄生虫感染情况较为严重,以罗山、淮滨两县为例,蛔虫、钩虫和鞭虫感染率分别为42.6%、26.5%、29.9%和35.4%、29.4%、27.7%[1].之后相继在学校和农村开展了肠道寄生虫病防治.为了解信阳市人体寄生虫病流行现状和态势,评估防治效果,按照河南省人体重要寄生虫病现状调查方案的统一安排,于2002 年10 月开展了人体寄生虫感染情况调查.现将肠道线虫感染现状分析如下.

    作者:沈大勇;杨金;杨改英;邓艳 刊期: 2005年第05期

  • 云贵两省三地带绦虫的分子鉴定--核糖体DNA第一内转录间隔区(ITS1)限制性酶切片段长度多态性(RFLP)分析

    目的用PCR-RFLP方法对rDNA-ITS1片段进行分析,以进一步明确云贵地区是否存在牛带绦虫亚洲亚种,并建立一种快速鉴定方法. 方法 取贵州都匀株(DY)、贵州从江株(CJ)、云南大理株(DL)带绦虫及台湾株(TW)成虫标本,剪取孕节,抽提DNA,PCR扩增rDNA- ITS1片段,分别用4种限制性内切酶MspI、CfoI、AluI、RsaI对扩增片段作酶切分析. 结果 PCR产物经AluI、RsaI酶切后, TW、DL、DY和CJ株RFLP图谱一致;经MspI、CfoI酶切后,TW、DL和DY株RFLP图谱一致,CJ株显著不同. 结论 1)DL和DY株与TW株同属牛带绦虫亚洲亚种;而CJ株是传统牛带绦虫;2)rDNA-ITS1的PCR-RFLP分析方法简便,可以用于带绦虫的分类学研究.

    作者:张朝云;包怀恩;杨明;郎书源 刊期: 2005年第05期

  • 广西人体华支睾吸虫感染现状调查分析

    目的了解广西人群华支睾吸虫病流行现状和态势. 方法按流行程度和水系流域进行分层整群随机抽样.用改良加藤厚涂片法粪检虫卵并计数. 结果调查了9个县(市)27个点13 990人,华支睾吸虫平均感染率为9.76%,平均EPG为1 083,有6个县(市)查出感染者,其中3个县感染率超过20%.男性平均感染率和EPG分别为13.09%和1 320;女性分别为5.89%和658,差异均有显著性.各年龄组人群均有感染,以成人感染为重.蒙古族居民感染率高,为16.67%;汉族感染率为11.56%,高于壮族的8.17%;壮族感染者EPG高,为1 470.职业分布以医生、教师、农民和行政干部感染为重. 结论 1989年以来广西华支睾吸虫感染率显著上升,疫情快速蔓延,已经成为一个严重的公共卫生问题,应积极开展综合性防治工作.

    作者:张鸿满;黎学铭;蓝春庚;谭裕光;李树林;林睿;阮廷清;黄福明 刊期: 2005年第05期

  • 弓形虫SAG1可溶性融合蛋白在大肠埃希菌中的表达及纯化

    目的在大肠埃希菌中高效表达及纯化弓形虫SAG1抗原,为研制新型弓形虫病基因工程诊断试剂盒奠定基础. 方法将重组pGEX-SAG1表达载体转化大肠埃希菌BL21-Codon Plus(DE3)-RP菌株,在异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导下表达融合蛋白,并通过SDS-PAGE凝胶电泳分析表达产物的表达形式.通过降低培养温度和升高LB培养基的pH,诱导融合蛋白在上清中表达,表达产物以硫酸铵沉淀、GST亲和层析和Sephadex G-150凝胶过滤层析进行纯化.Western blot检测纯化融合蛋白的免疫反应性. 结果 37 ℃条件下,SAG1以融合蛋白(SAG1-GST)的形式在大肠埃希菌中高效表达,表达蛋白以包涵体形式存在.在27 ℃和升高LB培养基pH条件下,融合蛋白在上清中得到表达,经纯化后其SAG1可溶性蛋白纯度可达90%以上.Western blot分析纯化蛋白能被弓形虫感染者血清所识别.结论 SAG1可溶性蛋白在大肠埃希菌中得到了表达,经纯化后能被弓形虫感染者血清所识别,可用于制备弓形虫感染诊断试剂盒.

    作者:朱翔;龚唯;张惠琴;陆惠民;黃伟达 刊期: 2005年第05期

  • 青蒿琥酯治疗小鼠继发性棘球蚴病的效果观察

    目的评价中药青蒿琥酯(Art)和阿苯达唑(Alb)及两药联用治疗小鼠继发性棘球蚴病的疗效. 方法将人工感染细粒棘球蚴囊液及包囊组织的小鼠随机分为5组,治疗组分别给予青蒿琥酯(Art)25 mg/kg·d、50 mg/kg·d、阿苯达唑(Alb)50 mg/kg·d、Art 25 mg/kg·d+Alb 25 mg/kg·d,连续治疗90 d.模型对照组不作治疗.另设空白对照组.治疗效果以棘球蚴湿重、囊重抑制率、脾脏指数、组织病理变化及超微结构改变为评价指标. 结果各用药组小鼠包囊生长明显被抑制,抑制率分别为52.96%,64.34%,65.31%,77.08%,联合用药组效果优于单独用药组.与模型对照组比较,各治疗组小鼠脾脏指数、血清IL-4及IgE水平均降低(P均<0.05). 结论青蒿琥酯对小鼠棘球蚴的生长及由此引起的超敏反应有一定的抑制作用,联合阿苯达唑治疗效果更好.

    作者:蒲秀英;傅宣英;王琪;景涛 刊期: 2005年第05期

  • 斯氏按蚊PPO1基因克隆及其与约氏疟原虫卵囊黑化关系的研究

    目的克隆和分析斯氏按蚊前酚氧化酶基因与约氏疟原虫卵囊黑化关系. 方法 根据其他昆虫前酚氧化酶基因的保守氨基酸序列设计简并引物,以斯氏按蚊全蚊RNA为模板,进行RT-PCR扩增,PCR产物纯化,克隆入pUCm-T载体,测定插入片段序列,对序列进行BLAST检索和鉴定.根据序列设计相应基因的特异引物,然后分别从血淋巴细胞或中肠扩增目的基因,并进行不同食源条件下前酚氧化酶基因的半定量、原位核酸分子杂交定位及与约氏疟原虫卵囊黑化关系的分析. 结果 获得了1种斯氏按蚊血淋巴前酚氧化酶基因cDNA部分序列,即AsPPO1(600 bp),分别与冈比亚按蚊PPO1和大劣按蚊PPO2基因很相似,其编码的氨基酸序列均包含PO保守的铜结合位点CuA(HHWHWHLVYP)序列.在中肠和血淋巴内也获得相同的目的基因片段,半定量分析显示约氏疟原虫感染或诱导卵囊黑化呈现之前的表达明显增强,原位核酸分子杂交技术也进一步证实血淋巴有AsPPO1 mRNA表达. 结论 AsPPO1很可能与疟原虫感染或约氏疟原虫卵囊黑化相关.

    作者:杨松;黄复生;段建华 刊期: 2005年第05期

  • 云南省恶性疟原虫对氯喹抗性的变化

    目的了解云南恶性疟原虫对氯喹抗性的变化. 方法从1981年起,在滇西、滇南、滇东南监测点选择符合条件的恶性疟病人,取静脉血,采用WHO推荐的体外微量法测定恶性疟原虫对氯喹的敏感性,并将相隔8~10年的测定结果进行比较. 结果滇西恶性疟原虫对氯喹抗性率从1982年的100%下降到2003年的83.3%,ID50 从240.0 nmol/L降到123.0 nmol/L,MIC从1 171.6 nmol/L降至325.9 nmol/L,分别下降13.0%、48.8%和72.2%.滇南恶性疟原虫对氯喹抗性率从1981年的97.4%降到2004年的69.0%,ID50从170.0 nmol/L降至58.6 nmol/L,MIC从1 108.0 nmol/L降至312.6 nmol/L,分别下降29.1%、65.5%和71.8%;滇东南抗性率从1993年的78.9%下降至2003年的53.3%,ID50从136.0 nmol/L降至75.5 nmol/L,MIC从452.0 nmol/L 降至238.3 nmol/L,分别下降32.4%、44.5%和47.3%. 结论云南恶性疟原虫对氯喹仍具有抗性,但抗性程度明显下降;中越边境恶性疟的抗性程度低于中老、中缅边境地区.目前仍不宜用氯喹治疗当地恶性疟.

    作者:杨恒林;杨品芳;李兴亮;高白荷;张志勇;杨亚明 刊期: 2005年第05期

  • 伊维菌素治疗人体寄生虫病的研究进展

    阿维菌素(Avermectins)是广谱高效抗寄生虫药,是由链霉菌发酵产生的一组大环内酯类物质,含有8种组分,其中以B1a活性强.伊维菌素是阿维菌素选择性加氢衍生物,含80%以上的B1a和低于20%的B1b,比阿维菌素更稳定、更安全,且对某些寄生虫的杀虫效果更好[1~3].现就伊维菌素在治疗人类寄生虫病中的研究进展作一概述.

    作者:刘启真;陈瑞杰;郑晓云;潘长旺 刊期: 2005年第05期

  • 济南市市中区人体肠道线虫感染监测分析

    为有效控制和消除人体肠道寄生虫病,济南市市中区1996年后开展了3次较大范围的人体肠道线虫感染监测工作,实施了集体服药驱虫与健康教育相结合的防治措施.2002年调查常见人体肠道寄生虫总感染率降至21.76%,表明防治效果显著.现将监测情况分析报告如下.

    作者:尼秋娟;杨林 刊期: 2005年第05期

  • 苏州地区集贸市场淡水鱼虾华支睾吸虫囊蚴感染情况调查

    淡水鱼虾类是华支睾吸虫的第二中间宿主,人食入含华支睾吸虫活囊蚴的淡水鱼虾后可被感染,引起华支睾吸虫病[1].苏州地区鱼类资源极其丰富,拥有鱼类107种(不包括引进鱼种),其中大多是淡水鱼类,在分类学上属鲤科的就有54种.为了解苏州地区集贸市场淡水鱼虾华支睾吸虫囊蚴感染情况,作者等于2004年9~12月,对苏州市彩香、南环两大集贸市场销售的淡水鱼虾进行了调查.

    作者:袁红霞;高姗;何一平;王鹏;苏志红 刊期: 2005年第05期

  • 杭州市疑似血吸虫病疫报制度探讨与输入病例分析

    杭州市有11个县(市、区),82个乡镇,902个行政村曾流行血吸虫病,流行区人口114.81万.历史累计血吸虫病人156 185例(其中晚期病人3 637例),病牛10 248万头,钉螺面积7 642.9万m2,是浙江省血吸虫病流行较严重的地市之一.经过几十年的积极防治,全市于1994年达到血吸虫病传播阻断标准, 1995年转入巩固监测阶段,全市疫情稳定.但是随着市场经济的发展,来自疫区务工人员大量涌入,输入性传染源时有发现.部分县区仍有钉螺,且有螺面积呈逐年扩大趋势.

    作者:徐卫民;杨洋;金行一;王衡 刊期: 2005年第05期

  • 济南市疟疾防治与监测

    济南市位于北纬36°02′~37°33′,东经116°11~ 117°33′.属非稳定性单纯间日疟低度流行区,中华按蚊是唯一传播媒介.自1951年有疟疾疫情记载以来,20世纪60、70年代曾发生2次大的暴发流行,发病率高达112.47(‰).经采取以消灭传染源为主的综合性防治措施,发病率逐年下降,1988年达到基本消灭标准.为了巩固已取得的防治成果,持续开展了疟疾监测,及时发现和治疗传染源,疟疾疫情稳定.

    作者:张昌庆;谢忠元;孙启燕;张明玉;韩笃菊 刊期: 2005年第05期

  • 郧阳医学院大学入学新生蠕形螨感染调查

    蠕形螨是一类永久性寄生螨,寄生于人和哺乳动物的毛囊和皮脂腺内.寄生人体的有毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨,其感染是酒渣鼻、毛囊炎、痤疮、脂溢性皮炎和眼睑缘炎等的病因或原因之一[1].为了解大学入学新生蠕形螨感染状况,近2年对本院入学新生进行了蠕形螨感染调查.

    作者:朱名胜;耿家荣 刊期: 2005年第05期

  • 云南恶性疟原虫氯喹抗药性基因76位点突变研究

    目的研究云南恶性疟原虫氯喹抗药性基因(pfcrt)76位点突变的情况,以及与抗药性表现型的关系. 方法应用PCR和限制性酶切片段长度分析方法,检测现症病人干滤纸血样的恶性疟原虫pfcrt基因点突变. 结果 云南省恶性疟原虫pfcrt基因76位点的突变型很高,占85.0%(51/60);野生型和混合型较少,分别占8.3%(5/60)和6.7%(4/60).体内法测定的氯喹抗性和敏感样本均有pfcrt76突变型;体外法测定的17份氯喹抗性样本中,有13份带有pfcrt76突变型. 结论 云南省恶性疟原虫pfcrt基因氨基酸编码76位点突变频度很高.体内和体外法测定的氯喹抗性表现与pfcrt76突变型有较高的一致性.

    作者:杨亚明;IS. Adagu;张再兴;周升;刘慧;David Warhurst 刊期: 2005年第05期

  • 大学生蠕形螨感染情况分析

    蠕形螨又称毛囊虫,为一种永久性小型寄生螨,主要寄生部位为颜面部的皮质腺和毛囊,与痤疮、酒糟鼻等皮肤损害有一定关系[1].虽然蠕形螨感染较普遍,多为带虫感染[2],且极少引起不适[3],故常被忽视.为了解在校大学生蠕形螨的感染情况,作者于2004年3~5月对首都医科大学268名大学生进行了调查.

    作者:刘亦苏;杨雅平;谢聃;刘邵华;赵倩;缪慧慧;陈姝君;诸欣平 刊期: 2005年第05期

中国病原生物学杂志

中国病原生物学杂志

主管:中国寄生虫病防治杂志

主办:中华人民共和国卫生部