吴锋;姜玉骥;奚伟萍;洪青标
目的构建粉尘螨Ⅱ类抗原cDNA基因的重组表达质粒,并在大肠埃希菌中表达. 方法采用亚克隆技术,用SacⅠ和NotⅠ从重组质粒pMD-18T- Der f 2上切下Der f 2 cDNA片段,插入表达载体pET-32a(+)质粒,转化大肠埃希菌BL21,在含氨苄青霉素的LB平板上筛选阳性重组子,并经双酶切及PCR扩增鉴定.重组质粒pET-32a(+)-Der f 2转化大肠埃希菌,IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE电泳和薄层凝胶扫描定量分析. 结果对重组质粒进行酶切和PCR鉴定,获得455 bp大小的目的基因片段,与预期结果相符,证明已成功构建携带Der f 2基因的重组原核表达质粒pET-32a(+)-Der f 2.核酸序列测定及同源性分析证实,所构建的原核表达质粒pET-32a(+)-Der f 2中所含的Der f 2 cDNA片段与GenBank中的Der f 2序列同源性达到100%.Der f 2 cDNA在大肠埃希菌诱导表达后获得分子质量单位为34 ku的蛋白,蛋白含量占菌体蛋白含量的16%. 结论成功构建了粉尘螨Ⅱ类抗原cDNA基因的重组表达质粒pET-32a(+)-Der f 2,并在大肠埃希菌中获得高效表达,为获得重组纯化Der f 2变应原并用于尘螨变应性疾病的诊治奠定基础.
作者:李朝品;杨庆贵 刊期: 2004年第06期
目的观察贵州省牛带绦虫亚洲亚种囊尾蚴在猪体内的发育情况. 方法用牛带绦虫亚洲亚种孕节直接灌喂当地圈养的14 d龄健康乳猪8头,并以健康乳猪4头作对照.于感染后40、50、60和75 d分别剖检,观察猪体内囊尾蚴的分布、大小、形态及成熟情况. 结果从感染后40 d起,在6头猪的肝脏表面和实质内共检获421个囊尾蚴,多分布在肝实质内,其大小为1.34~2.78 mm×1.22~2.31 mm.其余部位未找到囊尾蚴.感染后40 d和50 d,囊尾蚴经胆汁孵育,头节翻出率分别为78.3%和93.4%.感染后50 d开始发现钙化的囊尾蚴.囊尾蚴活体观察可见头节上4个吸盘和活动的顶突.压片染色镜检,头节有4个吸盘和顶突,顶突周围发现不完整的两圈点状结构. 结论根据囊尾蚴的分布、大小、发育时间及形态特征,进一步认定贵州省都匀市的带绦虫为牛带绦虫亚洲亚种.家猪是其可能的中间宿主.
作者:莫兴泽;包怀恩;戎聚全;吴桂萍;牟荣 刊期: 2004年第06期
目的了解分析江苏省中部地区人体重要寄生虫病流行现状,为今后防治方案的制定提供依据. 方法按照<全国人体重要寄生虫病现状调查实施细则>方法和要求,在苏中4县(市)11个中签点调查. 结果人群总感染率为6.87%,男、女感染率分别为6.02%和7.67%,两者差异有显著性(P<0.05).共查见9种寄生虫,其中线虫6种、吸虫2种、绦虫1种.感染1、2种虫者分别占感染人数的93.25%和6.75%.蛲虫、钩虫、鞭虫和蛔虫的感染率分别为7.18% 、4.16%、1.65%和0.41%.<15岁及>50岁年龄组感染率明显高于其他各年龄组. 结论江苏省苏中地区人体重要寄生虫感染率较10年前有大幅度下降,主要与大面积防治以及社会经济、文化、卫生等水平的提高密切相关.但低年龄组和中、老年龄组,蛲虫和钩虫是该地区今后防治的重点人群和重点虫种.
作者:孙凤华;钱益新;曹汉钧;徐祥珍;陈锦英;沈明学 刊期: 2004年第06期
湾甸乡地处云南昌宁县西部,东经99°23′12″~99°24′51″,北纬24°26′00″~24°33′45″.辖5个行政村、48个村民小组,总人口12 316人,以傣族为主.总面积314 km2,属亚热带气候,年平均气温22.3℃,年均降雨量1 100 mm,低海拔608 m,适宜当地媒介按蚊孳生及疟疾传播,是昌宁县主要疟区之一.1970年7月,湾甸乡疟疾暴发流行,疟史率高达60.00%.1971年再度全面暴发流行,疟史率达58.91%.通过多年的积极防治,疟疾发病率降至1以下,1993年达到卫生部基本消灭疟疾标准,连续11年未出现内源性病例.
作者:李贵华 刊期: 2004年第06期
肺吸虫病为人畜共患寄生虫病,感染肺吸虫与不良饮食习惯有关.重庆市为肺吸虫病流行区,感染者多为山区青少年.现将重庆市1991~2002年诊治的137例肺吸虫病病例资料报告如下.
作者:赖杰;蒋诗国;宋平;宴伟;吴成果;李继艮 刊期: 2004年第06期
目的本研究在证实猪带绦虫六钩蚴抗原具有很高的免疫保护性的基础上,探讨六钩蚴抗独特型抗体作为六钩蚴抗原替代物对猪体的保护作用,为研制猪体囊虫疫苗提供理论基础. 方法用六钩蚴粗制抗原免疫家兔,制备兔抗六钩蚴抗体(Ab1),再用Ab1免疫昆明小白鼠,制备抗独特型抗体(Ab2),免疫猪体,以3节猪带绦虫孕卵节片攻击感染,90 d后剖杀,观察感染情况. 结果 5头试验猪只有1头在膈肌发现1个囊虫,而2头阳性对照猪均被感染,各检查部位囊虫数平均为4.5个/100 g和3.2个/100 g. 结论抗猪带绦虫六钩蚴独特性抗体Ab2对猪体有较强的免疫保护作用.
作者:王洪法;张红花;李怀菊;赵长磊;陈锡欣;岳继娥;杨淑芳 刊期: 2004年第06期
目的探讨达到消除丝虫病地区继续监测的措施及效果. 方法选择湖南省边远、贫困地区、防治监测中可能存在薄弱环节的地区和外来流动人口聚集区搜索残存传染源,对原微丝蚴血症者追踪观察并进行蚊媒监测.采用常规厚血膜双片法检查微丝蚴;个体解剖方法检查蚊媒感染幼丝虫情况. 结果复查经治疗转阴20~26年后的原微丝蚴血症者611例和防治监测工作中存在薄弱环节地区血检13 171人以及流动人口3 631人,均未检出微丝蚴血症者;解剖致倦库蚊3 050只,未检出幼丝虫感染蚊. 结论湖南省消除丝虫病后的成果巩固,但全国和全球尚未消灭丝虫病,监测措施仍不能终止,其方法需要改进.
作者:段绩辉 刊期: 2004年第06期
流动人口疟疾管理是控制疟疾的重要措施.通过监测及时发现、治疗输入性疟疾病例,防止其引起传播[1].现将2002~2003年全区流动人口疟疾监测结果报告如下.
作者:李锦辉;黎学铭;覃业新;林珍 刊期: 2004年第06期
孔雀绿是一种弱碱性胞核染料,也是一种很好的指示剂.纪伟华等[1]用孔雀绿染色法制作的带绦虫妊娠节片标本,子宫与周围组织清楚.旋毛虫标本常通过卡红或苏木精染色制作永久标本[2],作者首次用孔雀绿染色法制作旋毛虫标本.
作者:王琼;纪伟华 刊期: 2004年第06期
目的观察硼镁石粉的持效杀螺作用及其灭螺活性. 方法在直径12 cm并铺垫约1 cm厚江滩泥土的玻璃培养皿内,每皿放置钉螺30只,设80.0、120.0、160.0和200.0 g/㎡4个剂量组,每个剂量组再分A、B两组.采用直接撒粉法,室温下定时观察钉螺死亡情况. 结果 A、B两组钉螺在撒粉后3~15 d的死亡率分别为30.0%~86.7%和36.7%~100.0%.两组不同剂量间3 d和7 d的钉螺死亡率差异无显著性(χ 23 d=1.7143,χ 27d=2.3821,P均>0.05),而15 d的钉螺死亡率差异则非常显著(χ 215d=16.5848,P< 0.001).远期杀螺效果,A组钉螺在撒粉后30~180 d的死亡率为60.0%~86.7%,B组为86.7%~100.0%,两组间差异非常显著(χ 230d=22.0915、χ 260d=14.7512、χ 290d=20.7485、χ 2120d=24.8454、χ 2150d=24.2202和χ 2180d=23.3989,P均﹤0.001). 结论硼镁石粉杀螺作用缓慢、药效稳定、持久,在干燥环境下的杀螺效果要高于潮湿环境,因此在现场灭螺时须注意环境的选择.
作者:吴锋;姜玉骥;奚伟萍;洪青标 刊期: 2004年第06期
目的预测洞庭湖区退田还湖试点退田还湖前后血吸虫病疫情的变化趋势,为血吸虫病防治策略的制定提供依据. 方法应用时间序列中指数平滑法、移动平均法、自相关分析及自回归综合移动平均法(ARIMA)对洞庭湖区退田还湖试点血吸虫病疫情建模、分析,并比较4种方法的预测效果. 结果集成垸试点和濠口试点ARIMA模型粪检阳性率误差平方和小,分别为100.16和22.54.其ARIMA预测模型分别为t=1.2877Yt-1+0.4246Yt-2-0.7123 Yt-3-0.4305et-1+0.9981et-2-0.0544和t=0.6487Yt-1+0.3513Yt-2+0.8671et-1+0.0223;退田还湖后的患病率预测值高于退田还湖前. 结论退田还湖后血吸虫病粪检阳性率预测值有升高的趋势,应加强当地的血吸虫病防治工作.
作者:赛晓勇;闫永平;张治英;蔡凯平;李岳生;周晓农;徐德忠 刊期: 2004年第06期
目的观察人芽囊原虫在3种培养基中的生长繁殖情况,以探讨佳的培养方法. 方法从大学生粪便中分离人芽囊原虫,转种至3种不同培养基,定时观察人芽囊原虫的生长繁殖情况,根据原虫密度评价培养效果. 结果培养96 h后,Locke's鸡蛋血清(LES)双相培养基中的人芽囊原虫密度高,改良Jones单相液体培养基次之, Locke's琼脂血清(LAS)双相培养基原虫密度低,差异有显著性(P<0.05);观察3种培养基中的原虫密度高峰持续时间分别为360 h、96 h和72 h,长存活时间分别为552 h、336 h和168 h. 结论 Locke's鸡蛋血清双相培养基较适用于人芽囊原虫体外增殖培养.
作者:苏水莲;严宜明;陈桂凤;廖华;张瑞其;胡雅琼 刊期: 2004年第06期
目的构建弓形虫表面抗原SAG2的DNA疫苗载体,并在Vero细胞中表达. 方法设计1对引物,从弓形虫RH株速殖子基因组DNA中扩增SAG2全长编码基因,构建pVAX1-SAG2真核表达重组质粒.以限制性内切酶KpnⅠ和 EcoRⅠ进行双酶切、PCR鉴定,纯化后进行测序鉴定.脂质体介导法瞬时转染Vero细胞,同时以pVAX1为对照,48 h后收集细胞, Western-blot鉴定. 结果从弓形虫RH株DNA中扩增出了577 bp的SAG2基因,构建了真核表达载体pVAX1-SAG2,在质脂体介导下转染Vero细胞,质粒DNA成功的转染到细胞中.通过Westen-blot分析,细胞裂解液样品有1条可被弓形虫免疫血清所识别的约17 ku大小的条带,与预计大小一致. 结论真核表达载体pVAX1-SAG2在Vero细胞中有一定表达,且有一定的活性.
作者:龙彩虹;吴少庭;翁亚彪;高世同;张仁利;林绮萍;谢德华;卜春玲;雷明军;黄达娜 刊期: 2004年第06期
武进区是以中华按蚊为单一媒介的间日疟流行区,1991年疟疾发病率高达27.49%,经数十年综合防治,1987年疟疾发病率降至0.066‰,1992年基本消灭疟疾,当年发病率为0.009‰,之后进入监测阶段.
作者:高佳方;陈灿中;高志祥;吴留美;薛永健;陆伊丽;许莉 刊期: 2004年第06期
云南省是我国主要的疟疾流行区,近10年来的疟疾发病数一直位居全国首位,发病率居全国第二.为探讨云南省疟疾流行的空间和时间分布规律,作者利用地理信息系统制图对云南省1991~2001年以县为单位的疟疾发病进行分析,为云南省今后的疟疾防制工作提供参考.
作者:毕艳;季惠颖 刊期: 2004年第06期
目的了解SIEA 26-28 ku抗原分子的结构和功能以及生物学特性. 方法采用梯度聚丙烯酰胺凝胶制备电泳和高效液相色谱方法,分离纯化SIEA26-28 ku分子,并对其进行紫外吸收光谱分析鉴定. 结果通过紫外吸收光谱分析表明,SIEA26-28 ku抗原组分的紫外吸收光谱共有6个特征性蛋白吸收峰,分别在258、260、264.5、268、269.5和272 nm,部分吸收峰符合苯丙氨酸的吸收光谱. 结论高效液相色谱技术结合紫外吸收光谱分析,可为日本血吸虫SIEA 26-28 ku抗原组分结构和功能的进一步研究以及生物学特性分析提供重要信息.
作者:吕志跃;刘立鹏;汪世平;徐绍锐;李文凯;何卓;彭先楚;邓世林 刊期: 2004年第06期
目的总结和分析九江市消除淋巴丝虫病的经验、措施和效果. 方法采用回顾性调查方法,对九江市丝虫病的流行分布情况、丝虫病防治试点研究和控制丝虫病的策略、措施及其效果进行总结和分析. 结果 1972年前九江市有11个县区165个乡、镇流行丝虫病,人群微丝蚴率为14.85%(165 237/1 112 540),传播媒介为中华按蚊和致倦库蚊.在流行病学调查的基础上,开展了微丝蚴染色方法的研究、海群生不同治疗方案治疗丝虫病的疗效及反复查治防治丝虫病的效果等丝虫病防治试点研究,确立了消灭传染源为主导的策略,采取了反复查治结合重点人群服药的措施.至1988年省级基本消除丝虫病达标考核,人群平均微丝蚴率为0.16%.随后采取分层整群监测,1989~1999年病原学监测34个乡、镇50个村,平均微丝蚴率0.29%(140/47 321),2000年后病原学和蚊媒监测均未发现人体丝虫感染.2001年经省审评组审评,达到卫生部消除丝虫病标准. 结论采取以消灭传染源为主的防治措施以及基本消除丝虫病后的流行病学监测和全民服药、药盐防治,可实现消除丝虫病的目标.
作者:朱仲江;吴光中;胡芸;何峰宁;燕凯;吴福应;童启华;张金伟 刊期: 2004年第06期
目的初步了解云南省吸虱昆虫的基本种类及分布状况. 方法在对云南省9个县(市)进行抽样调查的基础上,归纳、总结了从小型哺乳动物(小兽)体表所采集到的吸虱昆虫种类.小兽用鼠笼加食饵诱捕,从小兽宿主体表所采集的吸虱经过常规逐级脱水、透明、干燥处理、制成玻片标本后于显微镜下鉴定. 结果在9个县(市)共捕获到2 745只小兽,经分类鉴定隶属5目(啮齿目、食虫目、攀鼩目、兔形目和食肉目)、10科、25属、41种.从各种小兽宿主体表共采集到吸虱昆虫18 165只,经分类鉴定隶属4科、6属、22种,其种类明显少于宿主种类.大多数小兽宿主体表都有固定的吸虱种类寄生(但种类数很少,1~4种). 结论小兽体表吸虱昆虫种类较少,多数小兽体表都有固定的吸虱种类寄生.
作者:郭宪国;钱体军;郭利军;王晶;董文鸽;张励;马志敏;李伟 刊期: 2004年第06期
猪囊虫病为人兽共患寄生虫病,掌握当地猪体囊尾蚴感染情况对制定人体猪带绦虫病、囊虫病防治措施有重要意义,现将襄樊市1976~2003年生猪屠宰后的囊虫感染检查结果报告如下.
作者:许正敏;侯向进;曹正寅 刊期: 2004年第06期
目的利用果蝇mariner转座子作为载体构建土垢分枝杆菌随机变异基因文库以筛选影响脂肪酸代谢的基因. 方法将果蝇转座子mos1的末端反向重复序列置于卡那霉素抗性基因两侧,并将此种基因插入到M272B载体,用此载体转化土垢分枝杆菌,用Southern blot验证外源基因的插入.将变异的基因克隆在不同碳源的培养基上培养,筛选只在软脂酸上生长的菌落. 结果初筛了468个菌落,有5个不能在软脂酸上生长,其中2个在ICL基因上发生变异,3个在PCKA基因上发生变异.ICL为乙醛酸旁路所必须,PCKA编码糖异生的关键酶. 结论研究证明该转座子载体用于基因变异有效,变异筛选分枝杆菌中与脂肪酸代谢的基因可行.
作者:刘克义;于进芝 刊期: 2004年第06期