学术投稿

抗囊虫单抗的制备及其应用研究

殷竹君;张耀娟;章子豪;刘静;史志明;侯敏

关键词:猪囊虫, 尿素溶性抗原, 水溶性抗原, 单克隆抗体, ELISA
摘要:目的制备分泌特异性抗猪囊虫单抗的杂交瘤细胞株,建立以特异性单抗检测囊虫病患者循环抗原(CAg)的特异敏感的ELISA方法. 方法制备水溶性抗原(Ag-w)和尿素溶性抗原(Ag-u),将实验用BALB/c小鼠分为Ag-u和Ag-w组,分别以Ag-u和Ag-w免疫,取两组免疫鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,ELISA法进行筛选,所获特异性阳性克隆加以扩大培养,并分别与包虫、血吸虫、华支睾吸虫、肺吸虫、姜片虫和丝虫抗原进行交叉反应性测定. 结果获得稳定分泌特异性抗囊虫单抗的杂交瘤细胞5株,其中1株N1B10来自于Ag-w组,另4株U2A6、U2B3、UB5H6和UE10H5来自于Ag-u组.对N1B10、U2A6和U2B3初步鉴定结果表明,其抗体类型分别为IgG2b、κ,IgG1、κ,IgG2b、κ;腹水的效价分别为1.024×106、1.6×104和3.2×104;免疫组化显示N1B10定位于囊虫囊壁的基底膜,U2A6和U2B3定位于囊虫的头节.杂交瘤细胞经连续培养,液氮反复冻存复苏后仍能稳定分泌单抗.取3株单抗和兔抗囊虫血清建立了检测囊虫病患者CAg的ELISA方法,测定48份临床确诊囊虫病病人血清,阳性率达95.8%. 结论成功制备了抗囊虫单克隆抗体,所建立的ELISA方法敏感性高,特异性强,可用于囊虫病患者CAg的检测.
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  • 抗囊虫单抗的制备及其应用研究

    目的制备分泌特异性抗猪囊虫单抗的杂交瘤细胞株,建立以特异性单抗检测囊虫病患者循环抗原(CAg)的特异敏感的ELISA方法. 方法制备水溶性抗原(Ag-w)和尿素溶性抗原(Ag-u),将实验用BALB/c小鼠分为Ag-u和Ag-w组,分别以Ag-u和Ag-w免疫,取两组免疫鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,ELISA法进行筛选,所获特异性阳性克隆加以扩大培养,并分别与包虫、血吸虫、华支睾吸虫、肺吸虫、姜片虫和丝虫抗原进行交叉反应性测定. 结果获得稳定分泌特异性抗囊虫单抗的杂交瘤细胞5株,其中1株N1B10来自于Ag-w组,另4株U2A6、U2B3、UB5H6和UE10H5来自于Ag-u组.对N1B10、U2A6和U2B3初步鉴定结果表明,其抗体类型分别为IgG2b、κ,IgG1、κ,IgG2b、κ;腹水的效价分别为1.024×106、1.6×104和3.2×104;免疫组化显示N1B10定位于囊虫囊壁的基底膜,U2A6和U2B3定位于囊虫的头节.杂交瘤细胞经连续培养,液氮反复冻存复苏后仍能稳定分泌单抗.取3株单抗和兔抗囊虫血清建立了检测囊虫病患者CAg的ELISA方法,测定48份临床确诊囊虫病病人血清,阳性率达95.8%. 结论成功制备了抗囊虫单克隆抗体,所建立的ELISA方法敏感性高,特异性强,可用于囊虫病患者CAg的检测.

    作者:殷竹君;张耀娟;章子豪;刘静;史志明;侯敏 刊期: 2003年第02期

  • 临沂市人体重要寄生虫感染现状调查报告

    为了解目前临沂市寄生虫感染情况,评价10年来人体重要寄生虫病防治工作成效,按照全国统一标准和方法,于2002年4~6月对沂水、莒南、郯城、兰山、沂南等县区的12 000余人进行了重要寄生虫感染现状调查,现报告如下.

    作者:刘庆文;孙宗军;张纪霖;张永建;傅永春 刊期: 2003年第02期

  • 辽宁省大伙房输水工程对肺吸虫病区影响的研究

    目的大伙房输水工程为辽宁大型水利项目,跨流域引水.为防止肺吸虫病疫区扩大,对工程涉及区进行肺吸虫病状况调查,以便提出控制措施. 方法对输水工程涉及的水源区和受水区的人群感染情况,中间宿主、保虫宿主情况,中间宿主孳生地情况进行调查研究. 结果水源区无现患病人,人群皮试阳性率1.9%,多数河流未发现肺吸虫第一、第二中间宿主,保虫宿主犬无感染,河流生境适合中间宿主孳生.受水区为非流行区. 结论水源区人间肺吸虫病流行趋于终止,保虫宿主无感染,说明疫源地在弱化.个别河流中有肺吸虫第一、第二中间宿主存在,中间宿主孳生地存在.为防止肺吸虫病疫源地扩大,设防防螺是引水工程的必要措施.

    作者:许景田;李丹;刘敏;韩悦 刊期: 2003年第02期

  • 浙江台州市1996~2001年疟疾监测结果分析

    台州市地处浙中沿海,辖9个县(市、区),属中华按蚊为唯一传疟媒介的地区.经积极防治,于1989年达基本消灭疟疾标准,1990年以来按<浙江省基本消灭疟疾后的管理与监测试行意见>开展疟疾监测,现将1996~2001年各县监测结果汇总报告如下.

    作者:张作忠 刊期: 2003年第02期

  • 阴道毛滴虫合并解脲支原体感染的调查及治疗

    作者自1999年3月~2002年4月对420例阴道炎患者进行阴道毛滴虫(Trichomonas vaginalis,Tv)及解脲支原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)检测,并对二者混合感染者进行治疗观察,结果报告如下.

    作者:王秋梅;徐志喜;张军;赵粤萍;白慧玲;李秀敏 刊期: 2003年第02期

  • 溴氰菊酯悬浮剂浸泡蚊帐控制疟疾的效果观察

    信阳属不恒定疟区,主要传播媒介为中华按蚊和嗜人按蚊.通过综合性防治,1985年后,疟疾发病大幅度下降,发病率控制在1左右.但1995年以来,信阳的氵师河区和平桥区疟疾发病又大幅度回升,且出现以村、组为单位的疟疾暴发流行.1999年氵师河区发病率为65.08/10万;平桥区发病率为81.77/10万;两区1999年疫情报告病例占信阳市的96.91%.为控制疟疾疫情,2000年作者等采用溴氰菊酯悬浮剂浸泡蚊帐的措施,使疟疾发病率明显下降,结果报告如下.

    作者:白强;杨中英;袁凤茹;代学军;刘建丽 刊期: 2003年第02期

  • 重庆市涪陵区消除丝虫病后慢性淋巴丝虫病患者调查

    涪陵区辖39个乡(镇),5个街道办事处,1个经济开发区和1个私营经济示范区,全区面积为2 964 km2,全区总人口为113万余人,其中城镇人口26万,占总人口的23.00%.该区属于班氏丝虫病低度流行区,1957年在开展三峡水库疟疾调查时首次发现丝虫病患者.后经过反复的普查普治,查出微丝幼血症者3 967人,其中慢性淋巴丝虫病患者17人(已死亡8人).

    作者:黎永成;喻珊;杨启志 刊期: 2003年第02期

  • 囊虫病的免疫诊断现状与展望

    囊虫病是一种呈世界分布的人兽共患寄生虫病,对人类健康危害极大,尤其是脑囊虫病,如不及时治疗或治疗不当往往使人致残甚至危及生命.囊虫病的免疫学诊断可以弥补病原学、流行病学、影像学诊断的不足,在诊断和鉴别诊断中具有重要地位.近年来囊虫病的免疫学诊断发展很快,现将主要诊断方法和目前囊虫病诊断的工作重点及存在的主要问题综述如下.

    作者:王丽娜;葛凌云 刊期: 2003年第02期

  • 宁夏南部山区包虫病患者的调查分析

    目的了解宁夏南部山区包虫病患者的分布情况及与性别、民族和职业间的关系. 方法汇集南部山区7家县医院住院确诊为包虫病患者的病案进行回顾性调查. 结果包虫病患者分布于固原县12个乡镇、海原县22个乡镇、同心县21个乡镇、西吉县22个乡镇、彭阳县13个乡镇,隆德县和泾源县各1个乡有个案病例;1996~2001年7家县医院收治包虫病患者941例,发病构成比女性(63.66%)明显高于男性(36.34%),回族(70.03%)高于汉族(29.97%);不同职业人群包虫病患者中农民为高发人群,占75.03%,其次为学生(17.53%),干部和工人较低,各占3.72%;棘球蚴寄生以肝脏为多发部位,占78.85%,其次为肺脏(11.37%)和多脏器同时寄生者(6.59%);棘球蚴感染发病年龄主要是11~40岁的中青年,占总病例数的80.76%,50岁以上者逐渐减少. 结论包虫病在宁夏南部山区5县90个乡镇普遍流行,农民为高发人群.男女、回族与汉族之间发病构成比存在一定的差异.

    作者:赵瑞;杨玉荣;赵嘉庆;李燕兵;张炜;常越;董俭达;靳国华;马新伟 刊期: 2003年第02期

  • 驱虫康防治农村居民肠道线虫感染的效果观察

    为探索驱虫康防治人群肠道线虫感染的效果,于1998~2000年作者在苏州市东山地区进行了实验观察.

    作者:顾建国 刊期: 2003年第02期

  • 面部皮肤病患者蠕形螨感染情况调查

    目的了解面部皮肤病患者蠕形螨感染情况. 方法采用挤粘结合法对大连市373名面部皮肤病患者进行蠕形螨感染调查. 结果总感染率为89.81%,男女感染率和感染度间差异无显著性(P>0.05);男女皮肤病患者均以蠕形螨重度感染多见;毛囊蠕形螨为优势螨种;蠕形螨面部寄生部位排序为鼻、额、下颌、颊部;不同职业间蠕形螨感染差异有显著性(P<0.01),以学生感染率低,为64.10%,工人、服务行业从业人员感染率高,分别为98.53%和97.18%. 结论面部常见皮肤病与蠕形螨感染关系密切.

    作者:陶雅军;温冬青;马素琴;于洁 刊期: 2003年第02期

  • 靖西县控制疟疾流行的对策与效果

    靖西县位于广西西南部,地处东经105°56′~106°48′,北纬22°51′~23°34′.东接天等、大新县,南与越南高平省毗邻,西连那坡县,北界百色市、云南省富宁县,东北靠德保县.地势西北高东南低,属岩溶峰丛洼地和峰林谷地貌,平均海拔793.1 m,年平均降雨量1 658.8 mm,平均气温19.1℃.全县辖24个乡镇,290个行政村,2 287个自然屯,居住着壮、汉、苗、回、满、侗等民族,2000年末全县总人口574 195人,总面积3 331 km2,中越国境线长152.5 km,农村居民物质文化生活水平低,属老、少、边、山、穷国家级贫困县.为间日疟、恶性疟、三日疟混合流行的高、中度疟区,中华按蚊为主要的传疟媒介.

    作者:王福春;隆森 刊期: 2003年第02期

  • 吴氏白蛉与斯氏白蛉形态特征的比较研究

    目的鉴别吴氏白蛉(Phlebotomus wui)和斯氏白蛉(Phlebotomus smirnovi)的主要形态特征,有助于区分该两种白蛉. 方法用两种白蛉原描述的形态进行比较研究,以图、表对比的方法说明两种白蛉在形态特征上的不同. 结果表明吴氏白蛉与斯氏白蛉均属于劳蛉亚属的种类,是两个不同的独立种. 结论吴氏白蛉与斯氏白蛉是两个形态特征完全不同的蛉种,存在着严格的地理隔离.吴氏白蛉是我国西北荒漠地区典型的野生野栖种类,是新疆、内蒙古黑热病自然疫源地的传播媒介.微小司蛉新疆亚种(S. minutus sinkiangensis)在描述上不需要更改的情况下,根据种名优先法勿需更名.

    作者:熊光华;金长发 刊期: 2003年第02期

  • 浙江省永嘉县并殖吸虫DNA序列分析、形态及核型研究

    目的对浙江省永嘉县并殖吸虫的虫种及核型进行分析研究,探讨并殖吸虫的核型与临床类型的关系. 方法并殖吸虫虫种分析采用DNA测序技术,结合形态观察.对感染猫58 d获取的幼虫的线粒体细胞色素C氧化酶亚单位(CO1)部分基因及核糖体DNA第二间区(ITS2)的基因序例进行测定.分离成虫的睾丸作染色体的核型分析.测量囊蚴、虫卵与来自不同疫区的囊蚴感染动物后不同虫龄虫体的大小,并观察其形态. 结果 CO1与ITS2的基因序例与从GenBank检索到的卫氏并殖吸虫序例进行比较,结合对生活史不同阶段的虫体的形态观察,认定浙江省永嘉县的并殖吸虫为卫氏并殖吸虫;染色体数目分析:75%以上为22条,即2n=22,并在绝大部分成虫的睾丸中观察到精子的存在;囊蚴大小平均为331.8~338.3 μm,虫卵平均长度和宽度分别为76.2 μm和45.6 μm,不同虫龄成虫大小(5.6~11.2) mm×(3.0~6.2) mm,属二倍体型. 结论永嘉县现分布的并殖吸虫为卫氏二倍体型.卫氏二倍体并殖吸虫能导致当地人肺部损害.

    作者:洪加林;陈名刚;常正山;邵向云;刘明达;陈韶红 刊期: 2003年第02期

  • 温州市基本消除丝虫病后的监测

    温州市位于浙江省东南部,北纬27°03′~28°36′,东经119°37′~121°18′.全市总面积11 784 km2.原有11个县(市、区)流行丝虫病,流行区人口4 398 910人,占全市总人口数的69.26%,各县(市、区)平均感染率为0.22%~11.75%.永嘉县为班氏丝虫病流行区,文成、泰顺两县为马来丝虫病流行区,洞头县是以班氏丝虫为主的混合感染区,乐清等7个县(市、区)是以马来丝虫为主的混合感染区.中华按蚊和致倦库蚊分别是马来丝虫和班氏丝虫的主要传播媒介.经过防治,人群微丝蚴感染率从1956年的5.56%降至1987年的0.

    作者:张孝和;占云登;何玲芬;邵永强 刊期: 2003年第02期

  • 洛阳市不同人群阴道毛滴虫感染情况调查

    阴道毛滴虫(Trichomonas vaginalis Donne)是一种常见的泌尿生殖道原虫,男女均可感染,引起泌尿生殖道炎症,通过直接或间接性接触实现宿主转换而传播.有文献报道阴道毛滴虫在城镇妇女中感染率为4.44%[1],在不孕症及性罪错妇女中感染率更高[2,3].为了解洛阳市不同人群阴道毛滴虫感染情况,于2001年7月~ 2002年11月对7 738名妇科病普查妇女,563名患不孕症妇女和配偶及500名性病妇女患者进行了调查.

    作者:罗新萍 刊期: 2003年第02期

  • 中国动物学会寄生虫学专业委员会召开第五届会员代表大会暨第九次寄生虫学学术讨论会的预备通知

    作者: 刊期: 2003年第02期

  • 江西省湖沼型地区血吸虫病防治信息网络研究

    目的为血防部门研制科学、实用的血吸虫病防治信息网络系统. 方法首先根据需要设计信息网络,然后开展现场调查和收集资料,并征求专家和专业人员的意见和建议,进一步修改和完善网络系统. 结果建立了8个资料数据库,产生了12种统计报表. 结论该信息网络可准确、及时地反映血吸虫病疫情动态和防治效果.

    作者:郭家钢;胡广汉;李东;林瀚;张矩;吴晓华;王延安;郑江 刊期: 2003年第02期

  • 宁波市防治丝虫病工作回顾

    宁波市是以马来丝虫病流行为主的马来丝虫和班氏丝虫中、低度混合流行区,中华按蚊和致乏库蚊为其传播媒介.1950年人群微丝蚴阳性率为8.95%(161/1799),1951年调查应征青年微丝蚴阳性率为30%(90/300),全市于1950~1986年共查出微丝蚴阳性者161 308人,体征阳性病人为81 023人.

    作者:朱利利 刊期: 2003年第02期

  • 卫氏并殖吸虫成虫重组抗原的表达与鉴定

    目的表达已转化入大肠杆菌的卫氏并殖吸虫成虫抗原(PwAg)基因,并评价其应用于免疫学诊断的价值. 方法用IPTG诱导表达已亚克隆入表达载体pRESETB的卫氏并殖吸虫成虫抗原基因,以SDS-PAGE和Western blot分析鉴定表达产物. 结果 SDS-PAGE电泳可见32 ku处有1条明显的蛋白质带,该带只被卫氏并殖吸虫成虫免疫兔、感染犬和病人血清识别. 结论成功构建重组克隆PwAg,其表达产物具有卫氏并殖吸虫成虫期特异性,推测可用于并殖吸虫病的免疫学诊断.

    作者:刘剑南;凌家俭;侯敏;章子豪;张耀娟 刊期: 2003年第02期

中国病原生物学杂志

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主管:中国寄生虫病防治杂志

主办:中华人民共和国卫生部