学术投稿

乙型脑炎病毒E结构域蛋白表达、纯化与胶体金的制备

陈沙彬;梅建华;雷永良;刘敏

关键词:乙型脑炎病毒, E蛋白, 胶体金
摘要:目的 分离乙脑病毒临床株,制备高纯度E蛋白抗原,制作用于乙脑病毒抗体检测的胶体金快速检测试纸条.方法 PCR扩增乙脑病毒E蛋白基因、使用原核表达系统进行融合表达、Ni-柱亲和纯化,透析复性后多点皮下免疫动物获得兔抗乙脑病毒E蛋白的多克隆抗体,免疫印迹法检测该抗体与重组蛋白结合的特异性.对抗体处理后,制备快速检测乙脑病毒的胶体金试剂. 结果 成功克隆出乙脑病毒E蛋白基因并表达该蛋白,纯化后免疫印迹显示在蛋白分子量53 kDa左右显出1条目的条带(乙脑病毒E蛋白);酶联免疫法检测多克隆抗血清的效价达到1:12 800,与阴性血清不发生特异性反应. 结论 成功对乙脑病毒E蛋白基因进行了克隆表达,制备的胶体金试剂能检测出乙脑患者血清中的抗体,操作简便快速,具有临床推广意义.
实用预防医学杂志相关文献
  • 深圳市某区2013年水痘疫苗接种儿童抗体水平横断面研究

    目的 观察儿童水痘疫苗1剂次接种后的免疫持久性及其可能的影响因素,为水痘疫苗加强免疫方案提供参考依据. 方法 采用横断面流行病学,对年龄2~7岁水痘疫苗初次免疫间隔1~5年的健康儿童566名采集静脉血,使用膜免疫荧光法(FAMA)测定水痘IgG水平.同时收集疫苗生产厂家及初免年龄等资料,用卡方检验分析率的差异,方差分析、t检验用于分析抗体滴度变化,多重线性回归用于分析抗体滴度变化的影响因素. 结果 水痘疫苗初免间隔1、3、5年后抗体阳性率(93.7%、87.6%、89.9%)差异无统计学意义(x2 =4.50,P=0.11),抗体滴度随时间衰减,不同间隔年限抗体水平差异有统计学意义(F=12.606,P<0.001),间隔1年组的抗体水平(GMT:1:11.5)显著高于间隔3年(1:7.14,P<0.001)、5年组(1:8.36,P=0.006).间隔3年、5年组间抗体水平差异无统计学意义(P=0.387).水痘疫苗初免年龄各间隔年限组间差异有统计学意义(x2=276.069,P<0.001),间隔1年组初免年龄小,间隔5年组大.国产疫苗和进口疫苗接种者的抗体阳性率相当,分别为91.%和89.5%,差异无统计学意义(x2=0.322,P=0.570).初免年龄、性别、疫苗种类对抗体滴度的影响差异均无统计学意义(P>0.05). 结论 国产疫苗和进口疫苗接种后免疫持久性效果相当,虽然初免5年后,抗体阳性率仍能维持较高水平,但抗体滴度随时间延长有所衰减,接种3~5年后抗体维持较低水平,建议在初次免疫后3年考虑加强免疫.

    作者:马茂;刘卫民;杨洁;林喜乐;付丹凤;何莲娇 刊期: 2015年第12期

  • 深圳市儿童安全座椅使用情况调查

    目的 了解深圳市儿童安全座椅使用情况,以及家长对儿童乘车安全和安全座椅使用的知识知晓和认知情况.方法 采用简单随机抽样方法,对200名拥有私家车家庭的0~3岁儿童父母进行问卷调查. 结果 儿童安全座椅使用率为21.0%,67.3%的调查对象使用频率较高,儿童安全座椅知识条目总体知晓率为40.25%,70.5%的父母认同儿童坐后排的安全座椅比较安全,70%的父母认为我国需要制定儿童安全座椅相关法律;如果选购安全座椅,父母关注的是质量,其次是价格. 结论 儿童安全座椅使用率低,父母对儿童乘车安全和安全座椅的知识缺乏了解,认知程度不够高.

    作者:向莹君;曾念彬;周海滨;魏淑娟;谢延;赵蓉 刊期: 2015年第12期

  • 深圳市社区居民对糖尿病知识的知晓情况调查

    目的 了解深圳市社区居民对糖尿病知识的知晓情况并探讨其影响因素. 方法 采用整群抽样的方法,于2012年5月-2012年12月对深圳市社区4 260名社区居民进行糖尿病知识的问卷调查,并对影响糖尿病知识知晓率的相关因素进行分析. 结果 糖尿病病因知晓率为51.20%,糖尿病诊断标准知晓率为43.14%,糖尿病典型症状知晓率为49.76%,糖尿病危险因素知晓率为49.76%,糖尿病并发症知晓率为53.33%,对糖尿病能否治愈知晓率为38.68%;经单因素和多因素logistic分析,年龄对糖尿病病因、能否治愈知晓率有影响;文化程度对病因、诊断标准、危险因素、并发症、能否治愈的知晓率有影响;糖尿病既往史与病因、诊断标准、典型症状、并发症的知晓率有关;糖尿病家族史对糖尿病危险因素及能否治愈的知晓率有影响,差异均有统计学意义(均P<0.05);社区居民的糖尿病相关知识主要来源有电视广播(54.17%)、社区健康宣传(29.52%)、专业书籍(37.94)、医务人员(80.86%). 结论 深圳市社区居民对糖尿病知识认知不足,不利于开展糖尿病防治工作,应加强居民的糖尿病健康教育,提高糖尿病相关知识的认知率.

    作者:陈传绮;钟晓红;鄢燕琼 刊期: 2015年第12期

  • Nrf2对锰致GSH合成障碍的调控作用

    锰(manganese,Mn)是一种常见的环境和职业污染物,其主要的毒作用部位是脑.锰神经毒性的主要病变部位位于黑质、纹状体、苍白球和尾状核等,主要表现为锥体外系神经受损.其主要机制之一是由于体内氧化-抗氧化系统的失衡,产生大量的ROS(reactive oxygen species,ROS)引起氧化损伤.谷胱甘肽(glutathione,GSH)是体内重要的抗氧化物质,锰中毒时可以导致GSH合成障碍.核转录因子NF-E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2 related factor 2,Nrf2)是一类具有抗氧化特征的转录因子,具有提高内源性GSH水平的作用.本文拟从锰暴露途径和神经毒性、锰与氧化应激、锰中毒对GSH的影响、Nrf2信号通路对锰致GSH合成障碍的调控四个方面作以综述.

    作者:宋奇繁;邓宇 刊期: 2015年第12期

  • 桃源县首起布鲁氏菌疫情的现场调查与实验室检测

    目的 对桃源县首起布鲁氏菌病(下简称布病)疫情进行现场流行病学调查处理和相关的实验室检测,为布病的防控提供科学依据. 方法 发现桃源县首例病例后,开展现场流行病学调查处理,对重点监测人群和羊只进行血清学检测. 结果 首例患儿家中母羊患有布病,患儿经常接触小羊羔而导致感染的可能性较大.从73名重点监测人群中检测出9名血清抗体阳性感染者,阳性率为12.3%;从378只山羊检出布病抗体阳性37份,阳性率9.8%. 结论 桃源县存在动物布病,给人群健康带来威胁,应采取综合防治措施,遏制布病在人畜间流行.

    作者:张小芬;陈烨;庄敏芳;左飞虎;谢敏 刊期: 2015年第12期

  • 2型糖尿病患者轻度认知功能障碍的特点及危险因素调查

    目的 对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者轻度认知功能障碍(mild cognitive impairment,MCI)的特点及危险因素进行分析. 方法 根据蒙特利尔量表(MoCA)评分将自2012年8月-2015年2月本院96例T2DM患者分为合并MCI者40例(观察组)和认知功能正常者56例(对照组),比较两组患者MoCA量表各项功能得分差异,并分析T2DM合并MCI的危险因素,性别、年龄、是否合并高血压、病程、吸烟史、受教育程度、体质量指数(BMI)及超敏C反应蛋白(hs-CRP)、糖化血红蛋白(HbAlc)水平. 结果 观察组在定向力、延迟回忆、视觉空间执行能力、语言功能、注意力等明显低于对照组(P<0.05);单因素分析显示,两组年龄、吸烟史、受教育程度、病程、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、糖化血红蛋白(HhAlc)水平等因素差异有统计学意义(P<0.05).多因素回归分析显示,年龄、病程、受教育程度、hs-CRP和HbAlc水平是T2DM合并MCI的独立危险因素. 结论 T2DM合并MCI患者的认知功能多项受损,T2DM患者MCI的发生与年龄、病程、受教育程度、hs-CRP和HbAlc水平密切相关.

    作者:俞碧君;张潇;金娇杨 刊期: 2015年第12期

  • 深圳市大鹏新区实施乙肝疫苗免疫策略后乙肝血清流行病学变化

    目的 分析深圳市大鹏新区实施乙肝疫苗免疫策略后乙肝血清流行病变化. 方法 采取整群随机抽样调查方法,在深圳市大鹏新区抽取1~20岁年龄段的人群1 000例,分析实施乙肝疫苗免疫策略前后乙肝血清病学变化. 结果 实施乙肝疫苗免疫策略后,1 ~20岁人群HBsAg阳性率为1.21%,不同年龄段比较差异无统计学意义(P>0.05);Anti-HBs阳性率为72.17%,不同年龄段比较差异有统计学意义(P<0.01),Anti-HBc阳性率为2.33%,不同年龄段比较差异有统计学意义(P<0.01);男、女HBsAg、Anti-HBs、Anti-HBc阳性率分别为1.04%、70.10%、2.49%及1.40%、74.16%、2.17%,不同性别之间比较差异无统计学意义(P>0.05);实施后HBsAg、Anti-HBc阳性率明显低于实施前(1.21%vs.5.71%、2.33% vs.12.68%),Anti-HBs阳性率明显高于实施前(72.17%vs.21.96%). 结论 深圳市大鹏新区1~20岁人群实施乙肝疫苗免疫策略后乙肝血清流行病变化有助于建立较高的免疫屏障.

    作者:张健波;骆文博;黄顺英;黄卫民;陈凤娟 刊期: 2015年第12期

  • 虾青素胶囊对高脂血症人群降血脂功能研究

    目的 探讨虾青素胶囊对高脂血症人群辅助降血脂作用. 方法 将110例高脂血症者按血脂水平随机分为受试组和对照组,受试组连续服用虾青素胶囊45 d,对照组服用相同外观的安慰剂.服用前后测定血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平和安全性指标. 结果 试食后受试组TC水平明显下降,下降率为13.04%,自身前后比较及与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);TG水平明显下降,下降率为16.75%,自身前后比较及与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);HDL-C水平无明显变化.各项安全性指标试验前后均无明显改变.结论 虾青素胶囊对高脂血症人群具有辅助降血脂作用.

    作者:陈东方;王海玉;张聪恪;李立;张焱 刊期: 2015年第12期

  • 一例可疑中东呼吸道综合征病例的调查处置

    严重临床异常病例/事件监测系统是一项旨在于提高突发公共卫生事件早期预警和处置能力的应用性研究,该系统自2014年1月起在上海市长宁区正式上线进行试运行,哨点医院设在上海市同仁医院(以下称T医院).试运行期间,长宁区处置了一例可疑中东呼吸道综合征(MERS)病例,现将处置过程及与严重临床异常病例/事件监测系统关系报告如下.

    作者:何晓定;胡越;许浩;李颍;庄建林;杨欢;吴寰宇;陶芳芳;蔡恩茂 刊期: 2015年第12期

  • 梅亭社区就诊者签约家庭医生的意愿及其影响因素分析

    目的 了解梅亭社区健康服务中心就诊者签约家庭医生的意愿及其影响因素,为提高签约率提供参考依据.方法 采用自制的调查问卷,对2014年5月1-31日到梅亭社康中心就诊的1 000名就诊者发放调查问卷进行现场调查. 结果 梅亭社区健康服务中心就诊者签约家庭医生的意愿为53.87%,其中愿意签约但心存顾虑者317人,占33.16%.女性签约意愿高于男性(P<0.05);年龄越大签约意愿越高,30岁以下就诊者签约率仅43.94%,65岁以上签约率达95.56%;医保患者签约意愿高于自费患者,城镇居民医疗保险、劳务工医疗保险、自费患者签约率分别为84.23%、21.77%和10.91%.预防接种及健康体检者签约意愿低于全科诊疗及中医药保健就诊者.影响签约的主要原因为担心签约后只能在社区健康服务中心或者家庭医生处就医,其次为不清楚签约家庭医生可获得哪些好处,第三为担心签约时登记个人信息较全,担心个人信息泄漏. 结论 影响签约的主要因素为就诊者对社区家庭医生责任制的不了解,提高家庭医生签约率的重点为提高居民特别是中青年人群对家庭医生制度的了解和信任.

    作者:王明芳;姚胜 刊期: 2015年第12期

  • 深圳市艾滋病病例报告灰色预测

    目的 预测深圳市2014-2016年艾滋病病例报告数,为防治工作提供参考依据. 方法 利用深圳市2002-2013年艾滋病新报告疫情资料,建立灰色系统GM(1,1)模型,预测2014-2016年报告病例数. 结果 依据2002-2013年艾滋病报告疫情数据,建立的灰色预测模型为:x(t) =3.3482exp[0.1187(t-1)]-3.1028,预测精度为优秀(C=0.2720,P=1). 结论 灰色预测结果可靠,深圳市艾滋病报告疫情趋于严峻,应加大预防控制力度,遏制流行势头.

    作者:谭京广;杨峥嵘;陈琳;刘少础;罗亦娟;谢炜 刊期: 2015年第12期

  • 淋巴细胞计数预测HIV/AIDS患者的CD4+细胞数

    目的 研究HIV/AIDS患者外周血血常规检测指标与CD4++、CD8+淋巴细胞的相关性,寻求简易、廉价、高效、稳定的艾滋病病程的监测指标. 方法 采用回归分析等方法对282份HIV/AIDS患者血样白细胞(WBC)、淋巴细胞计数(W-SOC)、中性粒细胞计数(W-LCC)、红细胞(RBC)、血红蛋白浓度(HGB)、血小板(PLT)和CD4+、CD8+淋巴细胞数的相关性进行研究.结果 HIV/AIDS患者中血常规指标异常率较高,主要检测指标均在参考值范围内的仅占32.98%.HIV/AIDS患者血中WBC、W-SCc、W-LCC、RBC、HGB、PLT指标与CD4+淋巴细胞的相关关系均有统计学意义,相关系数分别为0.359、0.499、0.138、0.172、0.121、0.150.用W-SCCC(x)估算CD4+淋巴细胞计数(y)的方程为y=101.32x+ 122.02. 结论 HIV/AIDS患者淋巴细胞计数指标与CD4+淋巴细胞相关性较强,可以将其作为反映HIV/AIDS患者机体免疫状况及疾病发展阶段的一个重要指标.

    作者:薛黎坚;王文明;陈权;姚庆完;田昌伟;王华 刊期: 2015年第12期

  • 乙型脑炎病毒E结构域蛋白表达、纯化与胶体金的制备

    目的 分离乙脑病毒临床株,制备高纯度E蛋白抗原,制作用于乙脑病毒抗体检测的胶体金快速检测试纸条.方法 PCR扩增乙脑病毒E蛋白基因、使用原核表达系统进行融合表达、Ni-柱亲和纯化,透析复性后多点皮下免疫动物获得兔抗乙脑病毒E蛋白的多克隆抗体,免疫印迹法检测该抗体与重组蛋白结合的特异性.对抗体处理后,制备快速检测乙脑病毒的胶体金试剂. 结果 成功克隆出乙脑病毒E蛋白基因并表达该蛋白,纯化后免疫印迹显示在蛋白分子量53 kDa左右显出1条目的条带(乙脑病毒E蛋白);酶联免疫法检测多克隆抗血清的效价达到1:12 800,与阴性血清不发生特异性反应. 结论 成功对乙脑病毒E蛋白基因进行了克隆表达,制备的胶体金试剂能检测出乙脑患者血清中的抗体,操作简便快速,具有临床推广意义.

    作者:陈沙彬;梅建华;雷永良;刘敏 刊期: 2015年第12期

  • 天津市儿童流感样病例变化趋势与呼吸道病毒病原的灰色关联分析

    目的 探讨天津市儿童流感样病例(ILI)呼吸道病毒病原体构成,分析ILI变化趋势以及引起ILI动态变化主要的病原. 方法 每周统计天津市儿童医院的流感样病例数据,并采集部分流感样病例的呼吸道标本采用多重RT-PCR方法检测腺病毒(ADV)、副流感病毒(PIV)、流感病毒(Flu)、鼻病毒(RhinoV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、人偏肺病毒(HMPV)、冠状病毒(CoV)、肠道病毒(HEV)以及博卡病毒(HBoV).分别对流感季与非流感季每周检出的病毒病原数与ILI数据做灰色关联分析. 结果 呼吸道病毒的阳性检出率为56.49%,其中Flu占比高39.15%,流感季的周ILI%变化与Flu的关联度大(γ=0.871);非流感季与周ILI%关联度大的是全部病毒阳性数(γ=0.884).结论 天津市儿童流感样病例中多种病毒均有检出,流感病毒仍是引起流感季ILI%变化的主要病毒病原.

    作者:董晓春;李琳;徐文体 刊期: 2015年第12期

  • 2型糖尿病合并阻塞性睡眠呼吸暂停综合征相关危险因素分析

    目的 对2型糖尿病合并阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)患病的相关危险因素进行研究. 方法 选择2型糖尿病患者240例,对研究对象的性别、年龄、病程等基本资料进行调查,使用多导睡眠监测仪调查患者睡眠呼吸情况,并对血糖、血脂、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹C肽、成纤维细胞生长因子21(FGF21)等水平进行检测,以分析OSAS患病严重程度及相关危险因素. 结果 240例2型糖尿病患者合并OSAS组132例(其中重度45例,中度42例,轻度35例),非OSAS组108例.合并OSAS的糖尿病患者冠心病、高血压的患病率均高于未合并OSAS的糖尿病患者,差异均有统计学意义(均P<0.05);合并OSAS患者BMI、腰围、WHR、HbA1c、FPG、AHI指标均明显高于未合并OSAS组(均P<0.05),而FGF21、空腹C肽指标明显低于未合并OSAS组(均P<0.05).对OSAS患病相关因素的多元logistic回归分析表明,HbA1c、FPG是糖尿病患者合并OSAS的独立危险因素(P<0.05),BMI、WHR、合并高血压、合并冠心病等因素并非是OSAS患病的独立危险因素(均P>0.05).OSAS患病严重程度AHI指标的多元逐步线性回归分析表明,HbA1c、BMI、WHR、FPG、合并高血压、年龄、糖尿病病程都与AHI独立正相关,HbA1c是AHI主要的独立危险因素. 结论 2型糖尿病患者OSAS患病率较高,血糖控制差的糖尿病患者OSAS患病风险较高,且肥胖、病程长、年龄大、合并高血压等OSAS患病较为严重.

    作者:朱红霞;高静;王敏哲 刊期: 2015年第12期

  • 上海市浦东新区普通人群轻度认知障碍知识的知晓率现状调查

    目的 了解上海市浦东新区居民轻度认知功能障碍知识知晓率现状,为开展社区健康宣教提供科学依据. 方法 全区定点随机调查普通人群,共调查问卷5 534份. 结果 基本知晓率19.8%,部分知晓率48.0%,较少知晓率32.21%,且知晓率与性别、年龄、文化程度有关,差异均有统计学意义(P<0.01).轻度认知障碍知识总分相关因素多重线性回归分析女性知晓程度高于男性(β=0.92,P<0.01),且与年龄有关,年龄越大居民认知障碍知识总得分越高(β=0.55,P<0.01),但与学历无关. 结论 浦东新区居民对轻度认知功能障碍知识知晓较低,需要大范围普及轻度认知功能障碍知识.

    作者:郭祎;张明;郁东海;傅伟忠;张雨新;秦虹云;瞿淑敏;孙一颖 刊期: 2015年第12期

  • 基于季节趋势模型对宜昌市手足口病的预测研究

    目的 探讨移动平均法的季节趋势模型在手足口病预测的应用. 方法 基于宜昌市2010-2014年逐月手足口病发病率建立移动平均法的季节趋势模型,并将拟合值与实际值进行拟合评价. 结果 2010-2014年手足口病的实际值与拟合值相对误差为5.310%,模型拟合较好.应用季节趋势模型可对2015年手足口病的发病率进行预测. 结论 基于移动平均法的季节趋势模型,能较好的模拟手足口病发病在时间序列的变化趋势,但因其计算简单,仅适用短期预测.

    作者:刘继恒;白春林;徐勇;余凤萍;张皓;贺圆圆 刊期: 2015年第12期

  • 广西百色市初治肺结核治愈后复发危险因素初探

    目的 探讨各种可能的危险因素在初治肺结核病人首次抗痨治愈后的复发中所起的作用,为达到进一步降低肺结核病复发率提供理论依据. 方法 对广西百色市2011-2012年期间按照国家规划的标准方案治愈但于1~2年内复发就诊的345例进行回顾性调查,选择14个可能影响初治肺结核首次抗痨化疗临床治愈后复发的观察指标,运用COX比例风险模型进行风险评估分析. 结果 高年龄组、吸烟、停药时残留有空洞、合并糖尿病及HIV感染、耐药结核病出现等与肺结核复发有正相关,在规定的疗程结束之后增加自费疗程或接受免疫治疗与否与肺结核病复发呈负相关;病人性别、婚姻状况、始治时痰菌量、始治时病变范围与肺结核病复发无直接关系;营养状况与是否接受规则治疗两项因素尚需要进一步观察分析;对单病例复发预测指数方程为:W=3.4202+1.2346X2+1.3214X4-2.0077X9+0.5524X10+0.3212X11+0.3766X12-1.8707X13+0.6037X14.解释变异度量V2值为47.82%,显示所建模型的预测能力好. 结论 COX比例风险模型在初治肺结核首次抗痨治疗临床治愈后复发危险因素研究中是一种有效的工具,用所建COX模型对初治肺结核病人首次抗痨治愈后的复发进行预测效果好,COX模型值得进一步研究推广.

    作者:高建华 刊期: 2015年第12期

  • 长沙市社区妇女保健知识需求调查

    目的 了解长沙市社区妇女的保健知识需求,提高健康教育效果. 方法 采取随机分层抽样的方法,对长沙市4个社区486名妇女进行问卷调查. 结果 青春期女生认为有必要进行性教育(占91.85%)并希望得到心理卫生知识人数比例大(占71.85%);育龄期妇女对产前、产时和产后保健相关知识需求人数比例均达80%以上;围绝经期妇女需要围绝经期卫生知识(占60.19%)和得到妇女病普查普治(56.48%);老年妇女希望能就近就医(占78.46%)并得到健康咨询(占55.38%).各期社区妇女都希望听到医务人员的讲座和得到专业人员的交流,获得专业的健康知识手册. 结论 医疗保健机构要协作社区卫生服务中心,针对处在不同时期妇女保健知识需求差异,通过各种途径提供相应妇女保健知识,以提高社区健康教育效果.

    作者:罗煜 刊期: 2015年第12期

  • 诊疗信息化医疗机构中严重临床异常病例/事件监测工作方法的探讨

    目的 探索如何在诊疗信息化医疗机构中推动严重临床异常病例/事件监测工作. 方法 试点期间,通过临床医生主动报告结合医院/疾控中心传染病管理人员主动搜索的联合报告方式,实施严重临床异常病例/事件监测工作.结果 上海市长宁区监测点采用半结构式HIS系统,通过联合报告方式,正式运行7个月内,共上报49例监测病例,其中临床医生主动报告4例,管理人员主动搜索报告45例,症候群包括38例重症肺炎监测病例,10例发热伴皮疹监测病例,1例脑炎监测病例.所有病例终均未被判定为严重临床异常病例/事件. 结论 严重临床异常病例/事件监测系统是现有监测体系的有益补充,但在采用半结构式HIS系统的医疗机构中的应用仍需改进.

    作者:胡越;蔡恩茂;杨欢;张耀新;吴寰宇;陶芳芳;庄建林 刊期: 2015年第12期

实用预防医学杂志

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主管:中华人民共和国卫生部

主办:中华预防医学会 湖南省预防医学会