郭旭君；王健
目的：探讨脓毒性休克患者急性静脉血栓栓塞（VTE）的危险因素及预后。方法选取116例脓毒性休克患者为研究对象，统计VTE的发病情况，采用单因素和Logistic多因素分析法分析脓毒性休克患者发生VTE的危险因素，比较不同VTE发生情况患者的APACHEⅡ评分和预后情况，并采用Spearman秩相关分析法分析脓毒性休克患者VTE发生率与其APACHEⅡ评分和预后的关系。结果 VTE的发生率为37．07％（43／116），且与无VTE患者比较，发生VTE患者的年龄较大、住院和机械通气时间较长、气管插管率提高，差异有统计学意义（P＜0．05）。进一步Logistic多因素分析法分析结果显示，住院时间、机械通气时间及气管插管率均为脓毒性休克患者VTE的独立危险因素。 VTE患者治疗前后的APACHEⅡ评分及28 d病死率均高于无VTE患者（P＜0．05）。 Spearman秩相关分析结果显示，脓毒性休克患者VTE的发生及APACHEⅡ评分与28 d病死率均呈正相关（r＝0．748、0．856， P＜0．05）。结论脓毒性休克患者VTE的发病率较高，且住院时间、机械通气时间及气管插管率均为其独立危险因素，脓毒性休克患者发生VTE及病情均与预后相关。
作者：袁鸿乾 刊期： 2016年第07期
目的：分析团体无偿献血人群发生不良反应的相关影响因素，为制定针对性的预防措施及提升献血服务的质量提供科学依据。方法以2015年东莞市参加团体无偿献血的15898名志愿者中发生不良反应的228位献血者为研究对象，回顾性分析不同诱因、年龄、性别、职业、献血频次、季节气候等因素与不良反应发生率的相关性。结果无偿献血中发生献血不良反应的主要原因为精神紧张（占62．28％）；年轻献血者（18～25岁年龄段）、高校学生、首次献血者的不良反应发生率明显比其他献血者高；夏、冬季节献血反应率较春、秋季节高；献血反应主要发生在采血过程中。结论献血不良反应与献血者年龄、职业、献血经历及所处的气候环境等多种因素密切相关。我们应加强献血相关知识的宣传与普及，建立年轻、固定的无偿献血队伍，提升献血服务质量。
作者：钟炽辉；王玲玲；张玉曌；何子毅；黄志森；贝孟辉；郭鹏豪；曾涛 刊期： 2016年第07期
目的：探讨肺灌注显像优化肺癌放疗计划对患者肺功能的保护作用，为提高临床依从性提供依据。方法选取2014年10月－2015年11月承德医学院附属医院诊治的肺癌患者60例，根据随机数字方法分为实验组和对照组，每组30例。对照组采用单纯CT图像的放疗计划治疗，实验组采用SPECT引导的放疗计划治疗，比较两种不同的放疗技术对患者肺功能的保护作用。结果两组患者全肺剂量体积参数（WV10、WV20、WV30、WV40）均显著低于对照组（P＜0．05），治疗后实验组第1秒用力呼气容积（FEV1）、大呼气流量（PEF）、用力肺活量（FVC）、FEV1／FVC均显著高于对照组（P＜0．05）。实验组并发症发生率显著低于对照组（46．7％vs．80．0％），差异有统计学意义（P＜0．05）。结论肺癌患者采用SPECT引导的放疗计划治疗效果理想，能提高临床疗效，大限度的保护机体肺功能，值得推广应用。
作者：连相尧；胡潺潺 刊期： 2016年第07期
目的：探讨瞬时受体电位C1（TRPC1）对人肾癌细胞A498细胞增殖和迁移的影响。方法利用荧光定量PCR检测人肾癌细胞A498、786-O和GRC-1中TRPC1的表达水平。设计并合成靶向TRPC1的特异性shRNA，通过脂质体转染法转染TRPC1表达高的人肾癌细胞A498以构建稳定低表达TRPC1细胞株，通过免疫印迹法和荧光定量PCR来验证shRNA的干扰效率；通过MTT比色法检测干扰后细胞的增殖能力；通过Transwell小室测细胞迁移情况；免疫印迹法检测PI3K和AKT的表达水平。结果在3株肾癌细胞中A498的TRPC1表达量高；特异性靶向TRPC1的shRNA能够有效下调A498细胞中TRPC1的表达；特异性shRNA干扰组细胞较其他两组细胞增殖显著减慢（F＝42．31，P＜0．01）；A498／shRNA组的迁移细胞数显著低于A498组和A498／Con组（F＝24．52，P＜0．01）；A498／shRNA组细胞的PI3K和AKT蛋白的表达较A498组和A498／Con组显著下调。结论采用RNA干扰技术能够有效沉默A498细胞的TRPC1基因，并致使其细胞增殖能力下降以及细胞迁移能力减弱，其中可能的机制为通过调节细胞因子PI3K来调控人肾癌细胞的增殖和迁移。提示TRPC1在肾癌的发生发展中起着较为重要作用，TRPC1可能成为治疗肾癌的新靶点。
作者：阮健；蔡红兵；罗兰；宋姗姗；肖雅娟；张军一 刊期： 2016年第07期
目的：探讨替莫唑胺维持化疗对小细胞肺癌脑转移的预防作用。方法采用前瞻、对照研究，将初治放化疗后达到完全缓解或部分缓解的小细胞肺癌患者50例分为治疗组（n＝30）和对照组（n＝20）。治疗组在放化疗结束后使用替莫唑胺维持化疗，对照组行预防性全脑照射（PCI）。统计分析两组患者脑转移阳性率，总生存期及1年生存率。分别记录两种治疗方案发生的不良反应。结果替莫唑胺化疗组与PCI组脑转移阳性率差异无统计学意义（16．7％vs．15．0％，P＞0．05）。替莫唑胺化疗组患者中位生存时间为31个月，1年生存率为86．3％；PCI组患者中位生存时间为24个月，1年生存率为79．1％；二者生存情况差异无统计学意义（P＞0．05）。替莫唑胺化疗组不良反应主要是血液学反应及胃肠道反应，均为轻、中度。PCI组急性反应主要为头晕恶心，部分患者发生远期神经系统不良反应。结论替莫唑胺维持化疗对降低小细胞肺癌脑转移率的疗效不差于传统PCI治疗，且不良反应为轻、中度，安全可行。
作者：陈晨；王浩渊 刊期： 2016年第07期
目的：探讨基于条形码磁珠技术的液相芯片检测地贫基因的准确性、稳定性、实验操作优势和临床应用前景。方法收集150份已知不同地贫基因型和地贫阴性血液标本，采用基于条形码磁珠技术的液相芯片进行地贫基因检测；另外采用液相芯片和现有临床地贫基因检测试剂盒两种方法同时检测1015份血液标本，并比较两种方法检测结果。结果150份血液标本的液相芯片检测结果和已知基因型完全一致。1015份临床标本检测结果为地贫阴性520例，地贫阳性495例。495例地贫阳性标本中α地贫236例，占总阳性标本的47．7％；β地贫223例，占总阳性标本的45．1％；α地贫复合β地贫标本36例，占总阳性标本的7．3％。液相芯片和现有临床基因检测试剂盒两种方法检测的结果完全一致。结论基于条形码磁珠技术的液相芯片进行地贫基因检测具有高通量、准确、稳定、检测时间短和操作简捷等优点，有广泛的临床应用前景，适用于大样本量的实验室检测。
作者：骆明勇；胡听听；王继成；袁腾龙；张艳霞；王奕霞；梁驹卿 刊期： 2016年第07期
目的：建立基于环介导等温扩增（LAMP）技术进行快速鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的方法。方法采集自鼻拭子样品的MRSA菌株，针对MRSA耐药因子mecA所在基因组岛SCCmec，挑选具有高保守性的边界末端开放阅读框，设计特异性引物，进行LAMP快速检测，优化和确定LAMP反应体系和条件。结果以PCR法作为对照， LAMP检测MRSA的灵敏度为8×103 CFU／ml，PCR的灵敏度为8×105 CFU／ml。同时，LAMP快速检测法的检出率与特异性分别达92．7％与100．0％。结论 LAMP是可应用于MRSA检测的灵敏和特异性方法。
作者：郑华婴；冯洁仪；林群 刊期： 2016年第07期
目的：探讨不同潮气量机械通气对重症肺炎患儿肺泡动脉氧分压差的影响。方法将邢台市第三医院收治的100例全麻下行气管插管治疗的重症肺炎患儿随机分为研究组和对照组，每组50例。对照组给予小潮气量（6～8 ml／kg）机械通气，研究组给予大潮气量（10～12 ml／kg）机械通气，比较两组治疗效果、血气指标变化、并发症发生率及病死率。结果研究组患儿治疗总有效率为82．00％，显著高于对照组的58．00％（P＜0．05）。治疗前两组患儿动脉血氧分压（PaO2）、动脉血二氧化碳分压（PaCO2）、肺泡动脉氧分压差（A-aDO2）、pH、HCO3－、碱剩余（BE）水平差异无统计学意义（P＞0．05），治疗后除对照组HCO3－无明显变化外，其余均显著改善（P＜0．05），研究组优于对照组（P＜0．05）。研究组机械通气时间、临床治疗总时间、肺功能恢复正常时间较对照组显著缩短（P＜0．05）。研究组并发症发生率、死亡率分别为14．00％、8．00％，显著低于对照组36．00％、26．00％（P＜0．05）。结论大潮气量机械通气可以有效降低重症肺炎患儿肺泡动脉氧分压差，提高治疗总有效率，缩短治疗时间，降低并发症发生率和死亡率。
作者：李小亮；郝现伟；郭义军；张丽 刊期： 2016年第07期
目的：探讨维生素D受体基因多态性和非小细胞肺癌遗传易感性的临床关系。方法选取河北大学附属医院于2013年1月至2015年7月收治的同时符合纳入和排除标准的新发非小细胞肺癌患者50例作为研究组，另选取同期行正常体检的同年龄段健康志愿者50名作为对照组。比较两组维生素D受体基因多态性分布及构成比情况，探究其和非小细胞肺癌遗传易感性的临床关系。结果单因素分析发现，吸烟史≥3年、致癌化学物质接触史、维生素D受体Bsm1位点B基因型、维生素D受体Fok1位点F基因型、维生素D受体Apa1位点A基因型等均是影响非小细胞肺癌遗传易感性的危险因素（P＜0．05），而性别和年龄两组差异均无统计学意义（P＞0．05）；多因素分析表明，影响非小细胞肺癌遗传易感性多因素按照危险程度由高到低排列为：维生素D受体Fok1位点F基因型（OR＝2．298）、致癌化学物质接触史（OR＝1．974）、吸烟史≥3年（OR＝1．786），而维生素D受体Bsm1位点B基因型和维生素D受体Apa1位点A基因型均为非小细胞肺癌遗传易感性的保护因素（β＜0，P＜0．05）。结论维生素D受体Bsm1位点B基因型、Fok1位点F基因型和Apa1位点A基因型均和非小细胞肺癌遗传易感性存在一定临床关系，其中Fok1位点F基因型是其独立危险因素，而Bsm1位点B基因型和Apa1位点A基因型均是其保护因素。
作者：毕雪冰；贾友超；刘微微；刘丽红；臧爱民 刊期： 2016年第07期
目的：探讨颅神经损伤程度分级与鼻咽癌患者预后的关系。方法收集2005年1月至2009年12月广州医科大学附属肿瘤医院初治伴颅神经损伤鼻咽癌患者165例，分析颅神经损伤程度与鼻咽癌远期生存的关系及其对T分期的影响。结果165例颅神经损伤患者中，单支颅神经受损患者68例，多支颅神经同时受损患者97例，68例单支颅神经损伤患者中以外展神经损伤为常见，发生率为47．1％（32／68）。生存率的计算采用Kaplan-Meier法，单支颅神经损伤患者5年总生存率为69．8％，多支颅神经损伤患者5年总生存率为54．3％，通过log-rank法进行生存率的显著性检验，两组差异有统计学意义（P＝0．033）。结论鼻咽癌患者颅神经损伤数目与预后显著相关。在鼻咽癌T分期中对颅神经损伤进行适当的程度分级有进一步研究的必要。
作者：黄文瑾；周同冲；席红利；余宏伟；王敏；林晓丹 刊期： 2016年第07期
目的：探讨协同刺激因子B7-H3、B7-H4在临床不同分期的胃癌组织中的表达及其临床意义。方法选取2013－2015年湖北省江汉大学附属医院157例胃癌组织，分别应用RT-PCR检测胃癌组织、胃癌细胞株BGC-823中B7-H4和B7-H3 mRNA 的表达，Western Blot检测B7-H4和B7-H3蛋白的表达。胃癌患者不同临床特征与B7-H3、B7-H4表达水平的相关性采用χ2检验，不同临床特征患者死亡率的比较采用 Kaplan-Meier 法及Log-rank检验。结果 B7-H4、B7-H3在胃癌组织中的mRNA表达水平相对于癌旁组织呈现高表达。 B7-H4在临床分期越高的组织中呈现高表达，而B7-H3在临床分期越高的组织中呈现低表达趋势。恶性程度越高的胃癌组织中，B7-H4的mRNA水平及蛋白水平越高，B7-H3的表达水平越低。高表达B7-H4且低表达B7-H3与胃癌患者预后显著相关（P＜0．05）。结论协同刺激分子B7-H4和B7-H3在胃癌中的表达水平与临床病理因素及预后密切相关，对该两分子的检测在胃癌诊断和预后判断中具有潜在的临床应用价值。
作者：贾业贵；许浪 刊期： 2016年第07期
目的：了解广州番禺地区2型糖尿病（T2DM）和糖尿病前期（PM）人群流行趋势，探讨与其相关的危险因素，为制定糖尿病综合干预对策提供依据。方法采用分层整群抽样的方法，调查广州市番禺区4200人，调查方法包括实验室检查、体格检查和问卷调查。结果 PM和T2DM患者检出率分别为19．90％（836／4200）和9．81％（412／4200）。多因素Logistic回归分析显示，T2DM和PM患病率的主要影响因素为年龄（60～74岁：OR＝3．805，95％CI：1．965～7．368），身体质量指数（＞30 kg／m2，OR＝2．053，95％CI：1．421～2．966），职业为农（渔）民或离退休、家务及待业（OR＝1．778，95％CI：1．209～2．615），有既往心脑血管疾病、血脂异常或外周血管病变史（OR＝1．620，95％CI：1．182～2．209），居住在乡村（OR＝1．513，95％CI：1．118～2．047），锻炼频率≥1次／周（OR＝1．378，95％CI：1．022～1．860）者。结论 T2DM和PM患病率较高，应广泛开展糖尿病相关危险行为综合干预，以降低T2DM和PM的发病率。
作者：杨燕君；张晖；李进；秦小洁 刊期： 2016年第07期
目的：观察扶正化瘀胶囊联合核苷（酸）类似物（NAs）治疗NAs单药治疗后获得完全病毒学应答，但肝纤维化指标仍改善不佳的代偿期乙肝肝硬化患者的1年疗效。方法将已接受NAs初始治疗至少2年，获得完全病毒学应答6个月以上，但肝纤维化指标仍改善不佳的代偿期乙肝肝硬化患者100例随机分为试验组和对照组，每组50例。试验组给予NAs治疗，同时联合扶正化瘀胶囊治疗，对照组则继续单用NAs治疗，疗程均为48周。观察治疗前后肝功能、HBV-DNA定量、透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、Ⅳ型胶原（ⅣC）、层黏蛋白（LN）、肝脾B超的变化，部分患者行肝穿检查。结果基线时两组以上观察指标差异均无统计学意义（P＞0．05），两组治疗24周时各项观察指标比较差异无统计学意义（P＞0．05）。治疗48周时，两组肝功能、HBV-DNA定量结果均无明显差异（P＞0．05），试验组HA、PCⅢ、ⅣC、LN、门静脉内径和脾厚度均较治疗前明显下降（P＜0．05），且各项观察指标均优于对照组（P＜0．05）。试验组22例患者治疗前及治疗后48周接受肝脏穿刺活检，其中63．6％肝纤维化分期有改善，对照组21例接受肝穿刺活检，14．3％有改善，两组比较差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 NAs抗病毒治疗后，HBV即使获得完全病毒学应答，仍然有部分代偿期乙肝肝硬化患者肝纤维化无法改善，在此基础上，联合扶正化瘀胶囊，可以使肝纤维化指标得到明显的改善。
作者：甄沛林；丁佩佩；陈晓华；孙克伟 刊期： 2016年第07期
目的：了解Toll样受体TLR5、TLR7、TLR8和 TLR9在人类免疫缺陷病毒／艾滋病（HIV／AIDS）患者中性粒细胞的表达情况，探讨其在HIV感染相关的中性粒细胞功能障碍中的影响。方法应用流式细胞仪检测健康人、慢性HIV感染者和AIDS患者各15例的外周血中性粒细胞TLR5、TLR7、TLR8和TLR9的表达，表达强度用平均荧光强度（MFI）表示。结果与健康对照组比较，慢性HIV感染者中性粒细胞TLR5[（731．33±161．80）MFI vs．（869．67±154．04）MFI， P＝0．026]、TLR7[（437．67±63．43）MFI vs．（493．80±66．03，P＝0．016）MFI]和TLR8[（527．47±44．84）MFI vs．（679．20±72．77）MFI， P＝0．006]表达水平降低，差异均有统计学意义；而TLR9[（437．40±53．50）MFI vs．（439．87±38．08）MFI]表达水平差异无统计学意义（P＞0．05）。与健康对照组比较，AIDS患者中性粒细胞TLR5[（717．00±172．22）MFI vs．（869．67±154．04）MFI， P＝0．024]、TLR7[（440．87±80．07）MFI vs．（493．80±66．03）MFI，P＝0．044]和TLR8[（504．87±58．87）MFI vs．（679．20±72．77）MFI，P＝0．001]表达水平降低，差异均有统计学意义；而TLR9[（430．93±50．98）MFI vs．（439．87±38．08）MFI]表达水平差异无统计学意义（P＞0．05）。慢性HIV感染者与AIDS患者比较，中性粒细胞TLR5、TLR7、TLR8和TLR9表达水平差异均无统计学意义（P＞0．05）。结论 HIV／AIDS患者外周血中性粒细胞TLR5、TLR7、TLR8表达水平降低，这可能是引起HIV／AIDS患者中性粒细胞功能障碍的一种重要机制。
作者：赵令斋；蔡卫平；张复春 刊期： 2016年第07期
目的：分析2010－2014年梅州市疑似预防接种异常反应（AEFI）的发生特征，评价AEFI监测系统运转情况和疫苗的安全性。方法通过中国免疫规划信息管理系统收集AEFI个案数据，对相关指标进行描述性流行病学分析。结果全市累计报告AEFI个案334例，其中异常反应73例，涉及疫苗25种，报告发生率为3．50／10万（334／9532405），百白破（白破）疫苗异常反应发生率高，占31．14％（104／334）。小于1岁接种疫苗后发生的AEFI占31．44％（105／334）。反应发生在接种后24 h内占87．43％（292／334）。一般反应占75．15％（251／334），其次为异常反应占21．86％（73／334）。临床诊断发热／红肿多，占64．37％（215／334），其次为过敏性皮疹占13．77％（46／334）。结论梅州市AEFI监测敏感性较高、运转正常，使用的疫苗安全，预防接种服务质量良好，但异常反应报告率较全省AEFI报告率低，需进一步提高敏感度。建议加强对临床医生的相关知识培训，政府应进一步完善AEFI补偿机制。
作者：肖胜传 刊期： 2016年第07期
目的：了解金湖县在实施《江苏省血吸虫病防治规划纲要（2010－2015）》以来血吸虫病防治健康教育工作开展情况，评估健康教育效果。方法采用问卷法对5个血吸虫病流行镇中小学生和家庭主妇血吸虫病防治知晓和正确健康行为形成情况进行调查评估。查阅历年血吸虫病健康教育资料，了解健康教育活动及干预情况。结果金湖县有健全的血防健教网络，每年有计划、有过程、有总结、有考核、有评价。2010－2015年金湖县累计制作和发放宣传材料56174件，投入经费223000元，开展健康教育活动349次，全县受血防教育人数840000人次。中小学生血吸虫病防治知识总体知晓率为98．95％、行为正确率为98．18％；居民血吸虫病防治知识总体知晓率为98．55％、行为正确率为98．04％。中小学生、居民的职业、性别间在防治知识总体知晓率和行为正确率差异均无统计学意义（P＞0．05）。结论金湖县血吸虫病健康教育覆盖面广、形式多样，中小学生和居民血防知识和正确行为处于较高水平。仍需加大血防健教力度，提高目标人群的血吸虫病防护意识。
作者：孙道宽；李倩 刊期： 2016年第07期
目的：探讨激素替代疗法和常规疗法对绝经后期妇女相关症状改善效果的差异。方法随机数字表法将134例绝经后期的更年期综合征患者分成研究组（A组）和对照组（B组），每组67例。A组予以激素替代疗法，B组予以常规治疗方案。比对两组患者治疗前后一氧化氮及血脂水平变化情况，记录其抑郁评分、骨密度及激素水平变化差异，分析用药不良反应发生情况。结果治疗后，两组患者骨密度、一氧化氮、高密度脂蛋白胆固醇、雌二醇水平均较治疗前显著提升，且总胆固醇、甘油三酯、黄体生成素、卵泡刺激素水平及汉密尔顿抑郁量表评分较治疗前显著降低，差异均有统计学意义（P＜0．05）；其中A组各指标变化幅度均大于B组（P＜0．05）。两组患者用药后不良反应发生率比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论激素替代疗法对改善绝经后期妇女骨密度状态，调节其激素水平等具有积极意义。
作者：秦云；唐希才 刊期： 2016年第07期
目的：明确趋化因子受体CXCR4在非小细胞肺癌（NSCLC）组织的表达及其与TNM分期和纵隔淋巴结转移的关系，探索CXCR4作为肺癌患者预后指标的可行性。方法收集医院标本库中的肺癌标本（NSCLC组）61例，全部病人术前均未经过化疗或放疗，登记病人性别、年龄、组织学类型、TNM分期、是否淋巴结转移等临床资料，采用免疫组织化学（IHC）技术检测CXCR4的表达阳性率。对照组63例为正常肺组织（取自距肿瘤边缘5 cm以上处，经病理检查确证为不含有肿瘤细胞的正常肺组织）。结果 NSCLC组中CXCR4阳性表达率为52．5％（32／61），对照组中CXCR4阳性表达率为17．5％（11／63），差异有统计学意义（χ2＝16．759，P＜0．001）。 CXCR4表达与肺癌TNM分期、纵隔淋巴结转移明显相关（P＜0．05），而与肿瘤组织学类型、性别、年龄无关（P＞0．05）。结论 CXCR4在NSCLC组织中高表达，与淋巴结转移、TNM分期紧密相关，在NSCLC生长、侵袭和转移中有着十分重要的作用。
作者：龚新华；杨通；刘文丹；廖昆玲；何伟 刊期： 2016年第07期
目的：探讨原发性高血压患者踝臂指数（ABI）、肱踝脉搏波传导速度（baPWV）和心脏结构、功能之间的相互联系，并分析其相关性。方法选取兰州军区兰州总医院2013年1月至2014年12月间收治的120例原发性高血压患者作为研究对象，测定患者ABI和baPWV，依据其不同值情况分为ABI降低（A组）和ABI正常（B组），baPWV增加（C组）和baPWV正常（D组），测定各组左心房前后径（LAD）、左心室舒张末期内径（LVDd）、左心室收缩末期内径（LVSd）、室间隔厚度（IVST）、左心室射血分数（LVEF）和A峰与E峰流速比值（E／A），并分析其相关性。结果 B组IVST低于A组，而LVEF、E／A均高于A组，差异有统计学意义（P＜0．05）。 D组LAD、IVST均明显低于C组，而LVEF和E／A均明显高于C组，差异有统计学意义（P＜0．05）。 ABI与LVEF、E／A呈正相关性（r＝0．715、0．428，P＜0．05），而与IVST呈负相关性（r＝－0．318，P＜0．05）。 baPWV与LAD、IVST均呈正相关性（r＝0．453、0．729，P＜0．05），而与LVEF呈负相关性（r＝－0．414，P＜0．05）。结论原发性高血压患者ABI和baPWV均与心脏结构、功能改变有着密切联系，且呈相关性，可帮助医师对该病进行诊断与干预。
作者：焦丕奇 刊期： 2016年第07期
目的：构建遗传减毒伯氏疟原虫ANKA株（Plasmodium berghei ANKA，P．b ANKA），并用此减毒疟原虫株免疫C57BL／6J小鼠观察免疫保护效果。方法分别扩增UIS3基因编码序列两端的非编码区5′UTR和3′UTR及用于筛选的抗性标记hDHFR，然后利用融合PCR原理，扩增全长同源重组片段（5′UTR＋hDHFR＋3′UTR），后常规PCR扩增获得大量线性化同源重组片段并纯化。体外培养富集伯氏疟原虫ANKA株的成熟裂殖体，将线性化同源重组片段通过电转的方式导入裂殖体中并接种到小鼠体内，再对转化后的疟原虫进行筛选和鉴定，后用构建成功的减毒伯氏疟原虫ANKA株免疫小鼠并攻击，观察减毒株的免疫保护效力。结果成功扩增3个独立片段5′UTR、hDHFR和3′UTR ，长度分别为798、1628和759 bp ，后经融合 PCR 反应形成全长重组片段5′UTR＋hDHFR＋3′UTR ，长度为3185 bp。转化至裂殖体后经筛选鉴定获得遗传减毒伯氏疟原虫ANKA株，将此遗传减毒株免疫小鼠后攻击，小鼠红内期原虫率为0％，脑型疟发生率为0％，存活率为100％，可使其完全抵御野生型疟原虫感染。结论成功构建遗传减毒伯氏疟原虫ANKA株，此减毒株对小鼠的免疫保护率为100％，此模型的建立可为研究红前期疫苗免疫保护机制奠定基础。
作者：丁艳；谭章平；卢潇；徐文岳；付雍 刊期： 2016年第07期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
