张艳;陈怡;黄蕾;时皎皎
目的 建立人附睾蛋白4(HE4)杂交瘤细胞株,并对其分泌的HE4单克隆抗体进行鉴定和初步应用,为HE4的功能研究和人源化抗体的制备奠定基础.方法 使用pcDNA3.0-HE4重组质粒免疫BALB/C小鼠,采用PEG融合技术建立杂交瘤细胞株,制备单克隆抗体.通过免疫荧光法、有限稀释法及金标斑点法测定单克隆抗体的交叉反应性及免疫球蛋白的类型和亚类.结果 获得2株可稳定分泌HE4单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1C5和1C8,均为IgMK类.2株单抗能够与表达HE4蛋白的卵巢癌细胞发生反应,而不与Sp2/0细胞、CHO细胞等发生交叉反应.杂交瘤细胞株1C5培养上清效价为1∶160,腹水效价为1∶1 280,而杂交瘤细胞株1C8培养上清效价为1∶128,腹水效价为1∶1 024.结论 成功地制备出两株抗HE4单克隆抗体,均具有良好的特异性,为进一步建立免疫分析方法,进行HE4相关研究奠定了良好的基础.
作者:张娟;唐林国;叶倩;张文茜;徐霖 刊期: 2014年第08期
目的 调查晚期血吸虫病住院患者焦虑、抑郁与生活质量状况,并探讨焦虑、抑郁发生的影响因素.方法 应用焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)和世界卫生组织生存质量测定量表简表(WHOQOL-BREF)对206例晚期血吸虫病患者焦虑、抑郁情绪和生活质量情况进行问卷调查.采用SPSS17.0建立数据库,进行统计描述并采用逐步回归法分析影响患者焦虑、抑郁发生的因素.结果 206例晚期血吸虫病患者焦虑发生率为70.4%、抑郁发生率为69.4%、焦虑合并抑郁发生率为58.3%.晚期血吸虫病患者焦虑、抑郁得分显著高于国内常模(P<0.005),生活质量各领域得分低于常模(P<0.05),焦虑、抑郁与生活质量各维度呈负相关(P<0.005).多元逐步回归分析显示,晚期血吸虫病分型、文化程度是影响焦虑情绪的主要因素.文化程度、住院次数、晚期血吸虫病手术史是影响抑郁情绪的主要因素,其中文化程度高、有晚期血吸虫病手术史为焦虑、抑郁情绪的保护因素.结论 晚期血吸虫病住院患者普遍存在焦虑、抑郁负性情绪,且生活质量低,受多方面因素的影响,临床应予以重视,并及时采取有效的干预措施.
作者:潘洁;周瑞红;刘科丰;肖水源;邵志伟;来如意;余慧琼;罗志红 刊期: 2014年第08期
目的 构建含有抗原加工递呈分子基因HSP70C的HTNV嵌合基因GnS0.7、GcS0.7重组腺病毒.方法 通过PCR扩增获得HSP70C基因,分别克隆入本室已构建的重组腺病毒转移载体pShuttle-pCAG-GnS0.7及pShuttle-pCAG-GcS0.7中,进而构建新的重组腺病毒转移载体pShuttle-pCAG-GnS0.7-HSP70C及pShuttle-pCAG-GcS0.7-HSP70C.进一步通过双酶切将转移载体中的目的嵌合基因再分别克隆入腺病毒载体,得到重组腺病毒载体rAd-pCAG-GnS0.7-HSP70C、rAd-pCAG-GcS0.7-HSP70C,使用PacⅠ线性化后转染HEK293细胞,包装后获得重组腺病毒,感染HEK293细胞后用免疫荧光法检测表达产物.结果 经过酶切、PCR扩增和测序结果显示,各重组腺病毒转移载体及重组腺病毒载体构建正确.免疫荧光实验检测到各重组腺病毒中目的蛋白的表达.结论 成功制备了含抗原递呈分子HSP70C基因的汉滩病毒嵌合基因GnS0.7、GcS0.7重组腺病毒,为进一步研究构建的汉滩病毒重组腺病毒的免疫学特性奠定了实验基础.
作者:张亮;程林峰;于澜;刘梓谕;李璞媛;徐志凯;张芳琳 刊期: 2014年第08期
目的 建立一种快速、简便的检测弓形虫感染的环介导等温扩增方法(LAMP).方法 根据弓形虫RH株SAGI基因序列合成2对特异性LAMP引物,优化扩增体系与参数.通过与常规PCR方法的比较,评估优化后的LAMP反应的特异性和灵敏性.利用建立的LAMP初步检测人工感染弓形虫4d后白兔与大鼠的肌肉组织.结果 LAMP法检测弓形虫基因组DNA的灵敏度是传统PCR方法的100倍.LAMP法检测与其他常见寄生原虫、寄生虫无非特异性阳性结果.LAMP法检测人工接种动物的肌肉组织,阳性率达到100%,对照组为0,差异有统计学意义(P<0.01).结论 LAMP法检测弓形虫感染快速简便、敏感性高、设备要求低,具有较好的应用前景.
作者:赖植发;黄慧萍;顾金保;司徒潮满;陈润莉;钟剑明;陈晓光;曾胜波 刊期: 2014年第08期
目的 克隆和表达有酶活性的华支睾吸虫硫氧还蛋白过氧化物酶(CsTPx),并进行组织定位研究,为进一步研究其功能奠定基础.方法 利用生物信息学方法从华支睾吸虫基因组文库中识别硫氧还蛋白过氧化物酶(TPx)基因,并对蛋白的结构特征和相关生物学和免疫学功能进行预测.从华支睾吸虫成虫cDNA中扩增目的基因,克隆到原核表达载体pET-30a(+)中,进行蛋白纯化,免疫印迹鉴定、组织定位及其酶活性的检测.结果 华支睾吸虫TPx基因全长2 175 bp,有一大一小的两个内含子,其编码区序列长度为636 bp,编码212个氨基酸;该蛋白第1~17位氨基酸为其信号肽序列,第51~74位氨基酸为跨膜区,属于经典的2-Cys过氧化物还原酶.重组蛋白可被感染了华支睾吸虫的大鼠血清识别,免疫组化结果表明该蛋白定位于成虫的皮层、肠支、卵黄腺、虫卵和囊蚴的体壁中.酶活性检测结果表明,在一定范围内,CsTPx还原H2O2呈剂量和时间依赖性.抗体对酶活性有影响,在合适的抗体水平可以促进酶活性.结论 CsTPx可在大肠杆菌中进行功能性表达,其产物具有良好的免疫学和生物学活性.
作者:李婷;杨梅;陈金桃;宋天章;余新炳;陈红武;胡旭初 刊期: 2014年第08期
目的 研究细胞周期蛋白USP37作为重要的细胞周期调控因子在肿瘤中的表达情况及其临床意义.方法 应用Western blot方法确定USP37在非小细胞肺癌新鲜组织标本中的表达情况,采用免疫组化检测217例非小细胞肺癌蜡块标本USP37的表达并评分.用ROC的方法确定USP37表达的cut-off point;检测USP37表达的情况与病人临床特征之间的相关性.结果 USP37在非小细胞肺癌组织中比其对应的癌旁组织明显高表达.USP37的高表达与非小细胞肺癌的淋巴结分期和Ki67相关.单因素和多因素分析都表明USP37可以作为非小细胞肺癌总生存及无病生存的独立预后因子.结论 USP37在非小细胞肺癌组织中高表达,而且过表达USP37可以作为非小细胞肺癌总生存时间和无疾病进展生存时间的独立预后因子.
作者:陈树鹏;吴少云;李耀英 刊期: 2014年第08期
目的 观察黄芩苷联合顺铂是否能诱导HepG2.0细胞凋亡及探讨其对凋亡相关蛋白表达的影响.方法 采用体外细胞培养方法,分别用黄芩苷、顺铂及黄芩苷联合顺铂干预HepG2.0细胞.用CCK-8法检测细胞活性;光学显微镜观察HepG2.0细胞凋亡的形态学改变;流式细胞仪检测HepG2.0细胞凋亡率;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、c-myc表达的影响.结果 光学显微镜下可观察到药物组细胞凋亡的形态改变;各药物组细胞早期凋亡率显著升高;各药物组细胞Bcl-2蛋白表达水平下降,Bax、c-myc和Caspase-3表达升高.结论 黄芩苷、顺铂及黄芩苷联合顺铂均能诱导HepG2.0细胞凋亡,其机制可能通过调控Bcl-2、Bax、Caspase-3、c-myc蛋白的表达有关.
作者:林艳芬;刘荣静;林梅双;朱锦宏;吴晓蔓 刊期: 2014年第08期
目的 研究妊娠早期妇女碘营养及甲状腺功能,为指导孕期妇女补碘提供依据.方法 选取2013年6月至2014年1月在南方医科大学附属小榄医院产科门诊行常规产前检查的1 851例妊娠早期妇女作为研究对象,收集尿液和采集空腹静脉血,采用砷铈催化分光光度法测定尿标本中碘含量,利用化学发光法测定促甲状腺激素(TSH)、游离甲状腺素(FT4)和过氧化物酶抗体(TPOAb).结果 1 851例妊娠早期孕妇尿碘中位数为129μg/L,其中60.72%的孕妇处于碘缺乏状态,28.09%的孕妇处于碘适量,2.32%的孕妇碘过量.本组孕妇甲状腺异常总患病率为29.39%,其中低甲状腺素血症、甲减、亚临床甲减、甲亢、亚临床甲亢、甲状腺TPOAb阳性的患病率分别为24.37%、0.70%、0.81%、0.92%、2.59%、11.02%.尿碘水平异常与碘足量水平的甲状腺功能异常总患病率分别为30.73%和25.96%,差异有统计学意义(x2=4.095,P=0.043),而二者的甲状腺功能异常个体患病率差异无统计学意义(P>0.05).尿碘水平异常与尿碘足量水平孕妇的TPOAb阳性率分别为10.74%和11.73%,差异无统计学意义(P>0.05).结论 妊娠早期妇女60%以上存在碘摄入不足,尿碘水平异常孕妇的甲状腺功能异常的总患病率明显高于碘足量水平孕妇.
作者:林清兰;徐灼均 刊期: 2014年第08期
目的 探讨丙型肝炎病毒(HCV)慢性感染和自发清除后外周血CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞的变化及其表型分析.方法 采用流式细胞技术检测HCV慢性感染者、HCV自发清除者及健康对照者各30例外周血Treg细胞的频率及其分化状态,统计学分析HCV慢性感染组分别与健康对照组、自发清除组间的差异.结果 HCV慢性感染组与健康对照组、自发清除组相比,CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞频率比CD4+ CD25+ Treg细胞频率差异更明显.CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞更多呈现为中心记忆型,HCV慢性感染组明显少于健康对照组和自发清除组(P=0.044,t=-2.163;P=0.002,t=-3.517).效应Treg细胞表型则呈现HCV慢性感染组明显高于其他两组(P<0.001,t=7.538; P<0.001,t=9.696).其他表型在三组间频率无明显差异.结论 CD4+ CD25+Foxp3+ Treg细胞抑制免疫反应的强弱与HCV的自然转归相关,这种关联有可能与Foxp3+ Treg细胞由中心记忆型向效应型转化程度有关.
作者:熊华平;陈秋宇;王敏;廖峭;黄杰庭;黄珂;许茹;戎霞;付涌水 刊期: 2014年第08期
目的 统计分析辽西地区某三甲医院重症监护室(ICU)患者血培养标本的病原菌分布特点及耐药性,为临床合理用药提供依据.方法 回顾性分析2008年1月至2012年12月某三甲医院ICU 974例标本的血培养及药敏试验结果.血培养采用BD-BACTEC9120全自动血培养仪及专用血培养瓶,药敏试验采用Microscan-walkaway 96全自动细菌鉴定仪.结果 974份血培养标本中分离出病原菌167株,阳性率为17.1%.药敏结果显示,革兰阳性菌对万古霉素敏感,革兰阴性菌对复方新诺明和头孢他定较敏感.结论 ICU患者血培养分离的病原菌种类多,耐药性差异大.对血培养分离病原菌和耐药性进行早期监测可为临床合理用药提供参考.
作者:牛继娜 刊期: 2014年第08期
目的 比较电化学发光法和酶联免疫法在定量检测乙肝表面抗体(HBsAb)中的应用.方法 用E411化学发光分析仪及原装试剂,对180例患者血清用电化学发光法(ECLIA)和酶联免疫法(ELISA)检测HBsAb.结果 HBsAb浓度达到100 IU/L以上时ELISA法阳性结果与ECLIA法定量结果基本相符,阳性率达95.8%以上.HBsAb浓度为10.1~100.0 IU/L时ELISA的阳性率为21.2%.结论 低度感染时ELISA法检测HBsAb的灵敏度较低,特异性高.中、高度感染时两种方法检测的敏感性相近.
作者:王方;景尉;石婷婷 刊期: 2014年第08期
目的 采用德尔菲专家咨询法,确立人感染H7N9禽流感监测预警指标体系,为下一步防控工作提供参考依据.方法 通过Delphi专家访谈法、小组讨论等方法对人感染H7N9禽流感监测预警指标体系进行筛选,终确立人感染H7N9禽流感监测预警指标体系.结果 本研究共进行两轮德尔菲问卷调查,第1轮专家咨询共发放问卷36份,有效回收33份,专家积极性系数为91.67%.第2轮共发放问卷33份,专家积极性系数为87.88%.专家对一级指标的判断依据基本在0.7以上,熟悉程度全部在0.7以上,权威程度较高.经过两轮咨询,肯德尔和谐系数的显著水平均小于0.05,提示专家对指标意见协调程度尚可.终建立39个三级指标的人感染H7N9禽流感监测预警指标体系.结论 人感染H7N9禽流感监测预警指标体系,可以作为人感染H7N9禽流感监测预警的基本指标,评分靠前的指标需要在今后的防控工作中进一步强化和调整.
作者:王金龙;黄静;巫小佳;凌文华 刊期: 2014年第08期
目的 了解2011-2013年广州市番禺区麻疹流行病学特征,为制定防控麻疹策略提供理论依据.方法 对2011-2013年的麻疹疫情监测资料进行流行病学描述和分析.结果 2011-2013年广州市番禺区共报告麻疹122例,麻疹发病率逐年上升,分别为0.07/10万、1.82/10万和5.34/10万.5-8月为麻疹发病高峰期,占总病例数的54.1%.发病率呈北部高发的态势,大石街、洛浦街、钟村街和南村镇发病率较高.5岁以下散居儿童是发病主体,占病例总数的59.02%.所有麻疹病例中无麻疹疫苗免疫史或免疫史不详的110例,占病例总数的90.16%.结论 番禺区麻疹发病年龄构成以5岁以下儿童为主,应提高常规免疫接种率和及时接种率,降低麻疹发病率.
作者:苏宁;邢启明 刊期: 2014年第08期
目的 探讨凯纷复合舒芬太尼在腹腔镜全宫切除术后镇痛的应用效果.方法 将150例腹腔镜全宫切除术患者随机分为两组,每组75例,采用静脉自控镇痛,A组:凯纷复合舒芬太尼100 mg+ 0.04μg/(kg·h);B组:凯纷复合喷他佐辛100 mg+ 0.04 mg/(kg·h);所用药物为等浓度且用生理盐水稀释至100 ml.观察和记录术后第1、2、4、8、16及24小时的静息疼痛及动态疼痛的VAS评分、Ramesay镇静评分、PCA泵的按压次数(D0)及实际有效次数(D1)、改良Bromage分级及恶心、呕吐等不良反应的发生情况.结果 两组患者均有良好的静态疼痛镇痛效果,两组患者24h内各时点的动态疼痛评分,在第8、16及24小时差异具有统计学意义,A组在2~4 h,4~8 h,8~16 h时间段的PCA泵的按压次数及实际有效次数均明显少于B组,差异具有统计学意义(P<0.05);两组的Ramesay评分、改良Bromage分级及恶心、呕吐、皮肤瘙痒、嗜睡等不良情况的发生率差异无统计学意义(P>0.05).结论 凯纷复合舒芬太尼、凯纷复合喷他佐辛均可减轻腹腔镜全子宫切除术后疼痛及不良反应的发生,但凯纷复合舒芬太尼在同等浓度下在动态疼痛的镇痛效果更佳.
作者:胡洪涛;刘丹姝;戴载深 刊期: 2014年第08期
目的 探讨心肌酶和超敏C反应蛋白(hs-CRP)在手足口病患儿血清中的变化规律及其诊疗价值.方法 应用日立7600全自动生化分析仪检测50例手足口病患儿的血清心肌酶和hs-CRP,并与30名健康体检儿童作对照.结果 手足口病患儿乳酸脱氢酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、α-羟丁酸脱氢酶和hs-CRP在血清中的含量分别为(350.98±82.52)U/L、(177.36±130.29)U/L、(40.74±9.91)U/L、(281.14±68.05)U/L和(23.74±22.65)mg/L,异常率分别为52.0%、14.0%、56.0%、24.0%和76.0%,均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 及时检测手足口病患儿血清心肌酶和hs-CRP能尽早发现其心肌损伤情况,指导临床诊疗.
作者:曾兰兰;顾晓琼;刘非;陈小娟;黄玉开;梁肖云;龙海锋;李娟 刊期: 2014年第08期
目的 探讨一种基于免疫层析法和荧光PCR DNA定性检测技术的肺结核多重诊断模式.方法 以208例疑似结核患者为研究对象,采用免疫层析法检测其血清特异性抗结核抗体,同时采用荧光PCR方法检测其痰液中结核分枝杆菌DNA,并将两种方法的检测结果进行比较.结果 免疫层析法检测结果显示,16份血清标本呈阳性,阳性率为7.7%;荧光PCR方法检测结果显示,14份痰液标本呈阳性,阳性率为6.7%.两种检测方法协同诊断率为100.0%.结论 结核分枝杆菌免疫层析法和荧光PCR法相结合的实验室诊断模式有助于肺结核的快速诊断和传染风险性评估.
作者:王佃鹏;董瑞玲;武学成;朱玉兰;张艳芳;李智民;惠长野;杨祥丽 刊期: 2014年第08期
目的 分析新疆疏附县黑热病监测结果,为制定黑热病防控策略提供参考.方法 对2005-2012年疏附县黑热病网络报告发病资料和主动监测结果进行描述性流行病学分析.结果 2005-2012年疏附县共报告黑热病84例,年平均发病率为3.27/10万.发病地区集中在东部3乡,高发月份为2-7月.发病人群集中在<15岁儿童,职业以学生和农民为主.8年共普查33 375名学生和农民,确诊并治疗黑热病病例32例.结论 疏附县黑热病疾病负担较重,建议持续采取综合防控措施.
作者:吴德平;王玉忠;魏艳;阿布都艾尼;薛振香;卡伊尔 刊期: 2014年第08期
目的 了解医院感染嗜麦芽窄食单胞菌的分布特征及耐药情况,为临床合理用药提供依据.方法 选择2012年1月至2013年12月深圳市盐田区人民医院收治的患者临床标本分离出的289株嗜麦芽窄食单胞菌,根据临床和实验室标准化研究所(CLSI)推荐的K-B法进行药敏试验.结果 289株嗜麦芽窄食单胞菌中,痰液标本分离出236株,比例高,占81.6%;病区中,以呼吸内科检出高,标本分布以痰及肺泡灌洗液为主,占35.2%.嗜麦芽窄食单胞菌除对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率比较稳定外,对头孢他啶、复方新诺明、左氧氟沙星和甲氧苄啶/磺胺甲嗯唑的耐药率都明显升高(P<0.01),复方新诺明、甲氧苄啶/磺胺甲嗯唑和左氧氟沙星对其均有较好的抑菌作用.结论 嗜麦芽窄食单胞菌已经成为医院感染的主要致病菌之一,应加强细菌耐药监测,指导临床合理使用抗菌药物.
作者:蔡兰兰;谭萍;祝玲玲;黄晶;郭惠玲 刊期: 2014年第08期
目的 调查广州地区成年女性血清免疫球蛋白水平和抗EB病毒VCA/EBNA1IgA和IgG抗体的年龄分布及其相互关系.方法 收集广州市309例常规体检的健康女性血清样本,分别采用比浊法和ELISA检测血清免疫球蛋白水平、抗EB病毒VCA/EBNA1IgA和IgG抗体水平.结果 广州地区成年女性抗EB病毒VCA-IgA、抗VCA-IgG及抗EBNA1-IgA、抗EBNA1-IgG的阳性率分别为14.6%、92.2%、3.2%、99.7%.抗VCA-IgA阳性率与年龄呈正相关(r=0.163,P=0.004);抗EBNA1-IgG OD值与年龄呈负相关(r=-0.178,P=0.020).各抗体水平间的相关性分析显示,抗EBNA1-IgA与血清总IgG水平之间呈负相关(r=-0.154,P=0.008);抗VCA-IgA与抗EBNA1-IgA、抗EBNA1-IgA与抗EBNA1-IgG、血清总IgA与抗VCA-IgA、总IgG与抗VCA-IgG、总IgA与总IgG、总IgM与总IgG水平之间均存在正相关(r分别为0.113、0.241、0.228、0.228、0.433和0.362,P<0.05).结论 广州地区成年女性99.7%存在EB病毒既往感染.随着年龄增长,抗VCA-IgA阳性率逐渐增高,而抗EBNA1-IgG OD值则逐渐下降.抗EB病毒抗体水平间存在一定的相关性,有助于鼻咽癌等疾病筛检时联合指标的选择.
作者:席静;张薇;任泽舫 刊期: 2014年第08期
目的 分析衡水地区无偿献血者的梅毒感染情况,采取有效措施,确保血液安全.方法 对衡水地区2010-2013年无偿献血者血液采用ELISA方法对梅毒螺旋体抗体(抗-TP)进行筛查.抗-TP阳性检测结果分别按照性别、年龄、年份、职业统计分析.结果 2010-2013年梅毒阳性感染者有370人份,女性的梅毒阳性率(0.42%)明显高于男性(0.26%),差异有统计学意义(x2=14.99,P<0.05).梅毒感染增长趋势明显,2013年高达到0.45%,不同年份间梅毒感染差异有统计学意义(x2=46.93,P<0.05).自由职业、工人、农民是梅毒感染的主要群体.梅毒感染主要集中在31~40岁.结论 梅毒感染呈快速增长趋势,应加强梅毒相关知识的宣传,扩大低危献血人群,把梅毒的金标试剂列为血站采血前初筛常规检测项目,减少血液报废,保证血液质量.
作者:房金娟;高文强 刊期: 2014年第08期